Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Изучение свойств и функции Ca2+-атвивируемого канала митохондрий

Диссертация: Изучение свойств и функции Ca2+-атвивируемого канала митохондрий
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Несмотря на то, что параметры функционирования митохондриальных систем транспорта кальция детально охарактеризованы, молекулярный механизм их работы до конца не выяснен. В настоящее время во многих лабораториях ведутся интенсивные исследования по выяснению структурной организации этих систем. В нашей лаборатории был выделен комплекс, состоящий из гликопротеида с молекулярной массой 40 кДа… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. Роль митохондрий в регуляции уровня клеточного кальция
    • 1. 2.Митохондриальные системы транспорта кальция
      • 1. 3. МитохондриальнаяСа2±акшвируемаянеселекшвнаяпора
        • 1. 3. 1. Факторы, влияющие на открытие поры
        • 1. 3. 2. Молекулярные механизмы функционирования поры
        • 1. 3. 3. Физиологическая роль поры
      • 1. 4. Фазовые переходы липидных мембран
      • 1. 5. Осцилляции концентрации внутриклеточного кальция в электюневозбудимых клетках
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Метод выделения митохондрий из печени крыс
    • 2. 2. Определение митохондриального белка
    • 2. 3. Метод этанольной экстракции
    • 2. 4. Экстракция липидов по методу Фолча
    • 2. 5. Очистка гидрофобного экстракта на колонке с кремниевой кислотой
    • 2. 6. Методика проведения аналитической и препаративной тонкослойной хроматографии
    • 2. 7. Методика изучения Са2± связывающих свойств вещества
    • 2. 8. Изучение ион- транспортирующих свойств
    • 2. 9. Получение митохондрий в различных функциональных состояниях
    • 2. Ю.Методы изучения химической структуры вещества
      • 2. 11. Анализ активности маркерных ферментов
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Выделение и очистка Са2±связываюгцего, ион- транспортирующего вещества из внутренней мембраны митохондрий
    • 3. 2. Изучение химической структуры вещества
    • 3. 3. Изучение Са^-связывающих свойств вещества
    • 3. 4. Изучение ион-транспортирующих свойств вещества
    • 3. 5. Выяснение возможной функциональной роли изучаемого вещества в митохондриях
    • 3. 6. Эффект колебаний проводимости БЛМ, модифицированной суммарным гидрофобным экстрактом

Изучение свойств и функции Ca2+-атвивируемого канала митохондрий (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Ионы кальция, как известно, участвуют в регуляции жизненно важных процессов, происходящих в клетке. Уровень кальция в цитоплазме контролируется работой Са2±транспортирующих систем, локализованных в плазматической мембране и в мембранах клеточных органелл. Митохондрии, например, способны аккумулировать избыточный кальций цитоплазмы, что, в свою очередь, активирует Са2± чувствительные ферменты их матрикса.

В митохондриях существует, по крайней мере, четыре системы транспорта кальция. Поглощение кальция энергизованными митохондриями происходит электрофоретически через, так называемый, кальциевый унипортер, работа которого ингибируется рутениевым красным. Выход кальция из митохондрий осуществляется, в зависимости от ткани, двумя различными антипортерами. Ма+/Са2+ антипортер присутствует в мозге, сердце и других возбудимых тканях и, в меньшей с тепени, в печени, тогда как Н+/Са2+ обменник обнаружен в печени, легких, почках и гладких мышцах. В последнее время большое внимание уделяется изучению митохондриальной Са2±зависимой неселективной поры, которая ингибируется циклоспорином А. Полагают, что она может участвовать в быстром выбросе кальция из митохондрий, а также белков, инициирующих апоптоз. Открытие поры связано, как правило, с увеличением концентрации кальция в митохондриях и защелачиванием их матрикса.

Несмотря на то, что параметры функционирования митохондриальных систем транспорта кальция детально охарактеризованы, молекулярный механизм их работы до конца не выяснен. В настоящее время во многих лабораториях ведутся интенсивные исследования по выяснению структурной организации этих систем. В нашей лаборатории был выделен комплекс, состоящий из гликопротеида с молекулярной массой 40 кДа и пептида с молекулярной массой 2 кДа, который обладал способностью увеличивать проводимость бислойной липидной мембраны по механизму, чувствительному к рутениевому красному. (Mironova et al. 1982, 1994). Тот факт, что антитела к этому комплексу ингибировали в митохондриях чувствительный к рутениевому красному транспорт кальция, указывает на его принадлежность к системе Са2±унипортера. (Mironova et al. 1994) Другая Са2±транспортирующая система, функционирующая в митохондриях как Ыа+/Са2±обменник, была выделена в лаборатории Гарлида в виде белка с молекулярной массой около 110 кДа (Garlid et al. 1992).

Особый интерес представляет выяснение природы и молекулярных механизмов функционирования митохондриальной Са2±индуцируемой неселективной поры. Актуальность данной проблемы связана с тем, что пора может играть ключевую роль в целом ряде физиологических и патологических процессов, происходящих в клетке и в митохондриях. Так показано, что пора может принимать участие в процессе гибели клеток, вызванном гипоксией или ишемическим повреждением, (Crompton, 1990) а также в процессе апоптоза (Mercep et al., 1989). Предполагается, что пора может открываться и при физиологических условиях в том случае, если необходим быстрый выброс избытка кальция или других компонентов из матрикса митохондрий (Gunter et al., 1990). Несмотря на то, что существует несколько предположений относительно того, какие структуры ответственны за формирование неселективных каналов проводимости при повышении концентрации кальция в митохондриях, ответ на этот вопрос до сих пор не получен.

Целью настоящей работы было: выделение, очистка и изучение свойств низкомолекулярного гидрофобного каналообразующего компонента внутренней мембраны митохондрий, а также выяснение его возможной роли в формировании в митохондриях Са2±активируемой неселективной поры.

В диссертации были поставлены и решены следующие задачи:

1. Выделить и очистить компонент внутренней мембраны митохондрий, способный образовывать в бислойной липидной мембране (БЛМ) Са2±активируемые каналы проводимости.

2. Провести физико-химический анализ структуры каналообразующего вещества.

3. Изучить ион-транспортирующие свойства вещества путем его реконструкции в бислойную липидную мембрану.

4. Измерить параметры связывания кальция изучаемым веществом.

5. В экспериментах на интактных митохондриях исследовать влияние специфического ингибитора митохондриальной поры циклоспорина, А на активность Са2±связывающего каналообразующего компонента.

Научная новизна работы.

Впервые из внутренней мембраны митохондрий выделен низкомолекулярный гидрофобный компонент, обладающий высоким сродством к кальцию и способный в присутствии ионов кальция формировать в бислойной липидной мембране каналы проводимости. Приведены доказательства его участия в формировании в митохондриях Са2±индуцируемой, циклоспорин, А — чувствительной неселективной поры.

Научно-практическое значение работы.

Полученные данные развивают? представления о механизме митохондриальной Са2±индуцируемой неселективной проницаемости. Результаты могут быть использованы для исследований в области биоэнергетики, а в дальнейшем найти применение в медицинских приложениях при разработке фармакологических препаратов, поскольку в настоящее время показано, что открытие поры происходит при патологиях, например таких как ишемия миокарда и окислительный стресс. Открытие поры играет так же ключевую роль в процессе апоптоза клеток.

выводы.

1. Из внутренней мембраны митохондрий выделен и очищен гидрофобный компонент, обладающий высоким сродством к кальцию и способный формировать в БЛМ Са2±активируемые каналы проводимости.

2. Химический анализ показал, что данное вещество относится к классу липидов и содержит в своем составе алифатическую цепь с карбонильными группами, возможно входящими в карбоксильные и сложноэфирные группы.

3. Реконструкция в БЛМ изучаемого компонента показала, что он формирует неселективные каналы ионной проводимостиприсутствие кальция является необходимым условием для формирования этих каналов.

4. Показано, что каналообразующее вещество при рН=8.2−8.5 обладает высоким сродством к кальцию (Кд = 5 мкМ) и формирует с этим ионом связи по типу координационных, так что 1 молекула кальция связывает 8 молекул изучаемого вещества. На образование координационных связей с кальцием указывают также данные ИК-спектроскопии.

5. Установлено, что Са2±связывающая активность частично очищенной фракции, содержащей исследуемое вещество зависит от состояния митохондрий, из которых она выделена. При открытии в митохондриях Са2±активируемой поры, эта активность в 5−8 раз выше, чем в случае ингибирования поры ее специфическим ингибитором циклоспорином А.

6. На основании полученных данных предложена модель возможного участия изучаемого Са2±связывающего вещества в формировании митохондриальной Са2±активируемой циклоспорин чувствительной поры.

7. Обнаружен феномен регулярных колебаний открытого и закрытого состояний канала в БЛМ, модифицированной гидрофобной фракцией зтанольного экстракта, вероятно, из-за присутствия в ней субъединицы «с» митохондриальнной Н±АТФазы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Представленные в работе экспериментальные данные указывают на существование во внутренней мембране митохондрий гидрофобного Са2±связывающего компонента липидной природы, способного образовывать в БЛМ каналы проводимости для ионов. Образуемые этим компонентом каналы не являются селективными для определенного катиона. Поэтому, несмотря на то, что присутствие кальция является необходимым условием для формирования каналов, функционирование данного компонента не может быть связано с работой митохондриальных систем специфического транспорта кальция, таким, как унипортер или Ыа+ /Са2+ и Н+ /Са2+ обменники. Обнаруженные в работе свойства ГКВ указывают на его возможную принадлежность к системе митохондриальной Са-активируемой поры, чувствительной к циклоспорину А.

Известно, что вероятность открытия этой поры определяется двумя ключевыми факторами, а именно: матриксным рН и концентрацией матриксного кальция (Ре^опШ et а1., 1993). При аккумуляции кальция в митохондриях наблюдается защелачивание матриксного рН, вследствие выхода протонов. Считается, что защелачивание матрикса при этом играет ключевую роль в индукции поры, в то время как закисление ведет к закрытию поры. (На1ез1:гар, 1994).

В работе представлены данные, которые косвенно указывают на возможную принадлежность обнаруженного нами в митохондриях ГКВ к системе митохондриальной поры. Прежде всего он способен формировать в мембране Са2±зависимые неселективные каналы проводимости. Для митохондриальной Са2±активируемой поры известно, что при ее формировании в начале появляется селективная проводимость для катионов, которая в дальнейшем переходит в неселективную проводимость.(Гайнутдинов и др., 1993) Подобное свойство было обнаружено нами и у изучаемого вещества. ГКВ способен связывать кальций с Кд 8'10~б М только при щелочных pH, при которых, как известно, активируется пора и практически не связывает кальций при кислых pH, то есть в условиях ингибирования поры. (Bernardi et al., 1992) Кроме того, как следует из представленных в работе данных Са-связывающая активность фракций, которую, как мы связываем с количеством в них ГКВ, значительно повышается в присутствии кальция, тогда как циклоспорин, А — специфический ингибитор поры снижает их Ca связывающую активность.

До настоящего времени существовало две гипотезы объяснявших возможный молекулярный механизм функционирования митохондриальной поры. Первая была выдвинута Пфейфером (Pfeiffer et al., 1980). В своих работах Пфейфер показал, что развитие неспецифической проницаемости мембраны связано с активацией митохондриальной фосфолипазы А2 кальцием, тогда как присутствие ингибиторов фосфолипазы А2 предупреждало появление проницаемости. На основании данных экспериментов Пфейфером было сделано предположение, что при активации фосфолипазы во внутренней мембране митохондрий увеличивается количество лизофосфолипидов, что приводит к появлению в ней «дефектов», вызывающих неспецифическую проводимость. Однако данная гипотеза позже была отвергнута, поскольку было показано, что циклоспорин, А — специфический ингибитор поры не влияет на активность фосфолипазы А2 (Broekemeier et al, 1989), кроме того магний, который, как известно, является хорошим ингибитором поры, увеличивал активность фосфолипазы А2. (Saris, 1994). Наряду с гипотезой Пфейфера другими учеными было выдвинуто предположение о том, что неспецифическая пора формируется транслокатором адениновых нуклеотидов. (Halestrap, 1994) Однако, несмотря на то, что было показано, что при определенных условиях транслокатор адениновых нуклеотидов может образовывать неселективные каналы проводимости его функционирование в качестве поры в интактных митохондриях вызывает сомнения, поскольку атрактилазид — известный ингибитор транслокатора, ингибирует развитие поры при концентрациях в 50 раз превышающих концентрации необходимые для ингибирования транслоказы. Кроме того данная модель не объясняет эффекта ингибирования поры ингибиторами фосфолипазы А2. Наличие во внутренней мембране митохондрий каналообразующего вещества, обладающего описанными в работе свойствами позволяет нам выдвинуть новую гипотезу, объясняющую молекулярный механизм формирования во внутренней мембране митохондрий кальций активируемой неспецифической проницаемости.

Согласно нашей гипотезе, на основании полученных данных механизм участия Са2±связывающего каналообразующего вещества в формировании митохондриальной поры можно представить следующим образом. При накоплении кальция в МХ количество Са2±связывающего компонента по нашим данным, увеличивается. Это приводит к появлению в мембране мицеллоподобных структур, состоящих из одной молекулы Са2+ связанной с 8 молекулами изучаемого вещества. Связыванию кальция способствует известный факт защелачивания матрикса при входе кальция в митохондрии, поскольку, по нашим данным, защелачивание среды увеличивает способность изучаемого компонента связывать кальций. При появлении мицеллярных структур мембрана становится неоднородной, что, в свою очередь, может приводить к появлению токов утечки. Не исключено, что появление токов утечки может быть связано с возникновением в мембране фазовых переходов в присутствии кальция, так как Антоновым было показано, что кальций влияет на фазовые переходы синтетических липидов. Известно, что при фазовых переходах в мембране могут образовываться неспецифические каналы проводимости, возникновение которых связано с появлением в жидкокристаллическом липидном бислое на начальном этапе перехода кластеров липидов, находящихся в состоянии более плотной упаковки (Антонов и др., 1992).

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран. Москва: «Наука», 1982.
  2. В.Ф., Вассерман А, Н,, Мольнар А.А. Проводимость бислойных липидных мембран из фосфатидной кислоты при фазовом переходе, индуцируемом температурой и рН.// Биофизика. 1982- 27: 822−826.
  3. В.Ф., Кожомкулов Э. Т., Шевченко Е. В. Проницаемость бислойных липидных мембран при фазовом переходе. Роль межмолекулярных кальциевых мостиков. // Биофизика 1986- 31: 252−257.
  4. В.Ф., Смирнова Е. Ю., Шевченко Е. В. Липидные мембраны при фазовых превращениях. Москва: «Наука», 1992.
  5. М.Н. Руководство по изучению биологического окисления полярографическим методом. Москва, «Наука», 1973.
  6. B.C., Козлов М. М. Механизмы слияния мембран// Взаимодействие и слияние мембран. М.: ВИНИТИ, 1984: 62−74.
  7. Г. Д., Утешева Ж. А. Изучение молекулярного механизма транспорта ионов кальция в митохондриях.// Укр. Боихим. Журн. 1989, 61(6): 48−53.
  8. Ю.А., Черномордик JI.B., Пастушенко В. Ф., Абидор И. Г. Электрический пробой бислойных липидных мембран.// Ионные каналы и их модели. М.: ВИНИТИ, 1982: 161−266.
  9. Al-Nasser I., Crompton Af. The reversible Ca2±induced permeabilization of rat liver mitochondria.//Biochem. J. 1986 Oct 1−239(1):19−29.
  10. Andreeva L., Crompton M. An ADP-sensitive cyclosporin-A-binding protein in rat liver mitochondria.//Eur. J. Biochem. 1994 Apr 1−221(1):261−8.
  11. Aquila H., Eiermann W., Babel N., K1 ingenberg M. Isolation of the ADP/ATP translocator from beef heart mitochondria as the bongkrekate-protein complex.//Eur. J. Biochem. 1978 Apr 17−85(2):549−60.
  12. Azzi A., Azzone G.F.Swelling and shrinkage phenomena in liver mitochondria. I. Large amplitude swelling induced by inorganic phosphate and by ATP.//Biochim. Biophys. Acta. 1965 Aug 24−105(2):253−64.
  13. Beatrice M.C., Palmer J.W., Pfeiffer D.R. The relationship between mitochondrial membrane permeability, membrane potential, and the retention of Ca2+ by mitochondria.//J. Biol. Chem. 1980 Sep 25−255(18):8663−71.
  14. Bernardi P., Broekemeier K.M., Pfeiffer D.R. Recent progress on regulation of the mitochondrial permeability transition pore- a cyclosporin-sensitive pore in the inner mitochondrial membrane.//J. Bioenerg. Biomembr. 1994 Oct-26(5):509−17.
  15. Bernardi P., Vassanelli S. r Veronese P., Colonna R., Szabo IZoratti M. Modulation of the mitochondrial permeability transition pore. Effect of protons and divalent cations.//J. Biol. Chem. 1992 Feb 15−267(5):2934−9.
  16. Bjornstad P. Phospholipase activity in rat liver mitochondria studied by the use of endogenous substrates.//J. Lipid. Res. 1966 Sep-7(5):612−20.
  17. Blackmore P.F., Hughes B.P., Shuman E.A., Exton J.H. alpha-Adrenergic activation of phosphorylase in liver cells involves mobilization of intracellular calcium without influx of extracellular calcium.// J Biol Chem. 1982 Jan 10−257(1):190−7.
  18. Blume A., Eibl H. The influence of charge on bilayer membranes. Calorimetric investigations of phosphatidic acid bilayers.// Biochim. Biophys. Acta. 1979 Nov 16−558(1):13−21.
  19. Boheim G. r Hanke W., Eibl H. Lipid phase transition in planar bilayer membrane and its effect on carrier- and poremediated ion transport.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1980 Jun-77(6):3403−7.
  20. Braganza L.F., Blott B.H., Coe T.J., Melville D. Dye permeability at phase transitions in single and binary component phospholipid bilayers.//Biochim. Biophys. Acta. 1983 Jun 10−731(2):137−44.
  21. Broekemeier K.M., Dempsey M.E., Pfeiffer D.R. Cyclosporin A is a potent inhibitor of the inner membrane permeability transition in liver mitochondria.//J. Biol. Chem. 1989 May 15−264(14):7826−30.
  22. Broekemeier K.M., Pfeiffer D.R. Cyclosporin A-sensitive and insensitive mechanisms produce the permeability transition in mitochondria.//Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989 Aug 30−163(1):561−6.
  23. Bursch W., Oberhammer F., Schulte-Hermann R. Cell death by apoptosis and its protective role against disease.//Trends Pharmacol. Sei. 1992 Jun-13(6):245−51.
  24. Clark A. F., Roman I.J. Mg2+ inhibition of Na2±stimulated Ca2+ release from brain mitochondria.// J. Biol. Chem. 1980 Jul 25−255(14):6556−8.
  25. Condrea E. r Avi-Dor Y., Mager J. Mitochondrial swelling and phospholipid splitting induced by snake venoms.//Biochim. Biophys. Acta. 1965 Nov 22−110(2):337−47.
  26. Crompton M., Ellinger H., Costi A. Inhibition by cyclosporin A of a Ca2±dependent pore in heart mitochondria activated by inorganic phosphate and oxidative stress.//Biochem. J. 1988 Oct 1−255(1):357−60.
  27. Cullis P.R., de Kruijff B. Lipid polymorphism and the functional roles of lipids in biological membranes.//Biochim. Biophys. Acta. 1979 Dec 20−559(4):399−420.
  28. Cullis P.R., Verkleij A.J. Modulation of membrane structure by Ca2+ and dibucaine as detected by 31P NMR.//Biochim. Biophys. Acta 1979 Apr 19−552(3):546−51.
  29. Curland R.J. Binding of Ca2+ and Mg2+ to phosphatidylserine vesicles: different effects of 31P NMR shifts and relaxation tinus// Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1979- 88: 927−932.
  30. Currin R.T., Gores G.J.f Thurman R.G., Lemasters J.J. Protection by acidotic pH against anoxic cell killing in perfused rat liver: evidence for a pH paradox.//FASEB J. 1991 Feb-5(2):207−10.
  31. Cuthbertson K.S., Cobbold P.H. Phorbol ester and sperm activate mouse oocytes by inducing sustained oscillations in cell Ca2+.//Nature 1985 Aug 8−14−316(6028):541−2.
  32. Darley-Osmar V.M., Stone D., Smith D., Martin J.F. Mitochondria, oxygen and reperfusion damage.//Ann. Med. 1991−23(5):583−8.
  33. Eibl H., Blume A. The influence of charge on phosphatidic acid bilayer membranes.//Biochim. Biophys. Acta. 197 9 Jun 2−553(3):476−88.
  34. Epps D.E., Palmer J.N. f Schmid H.H., Pfeiffer D.R. Inhibition of permeability-dependent Ca2+ release from mitochondria by N-acylethanolamines, a class of lipids synthesized in ischemic heart tissue.//J. Biol. Chem. 1982 Feb 10−257(3):1383−91.
  35. Farber J.L. Biology of disease: membrane injury and calcium homeostasis in the pathogenesis of coagulative necrosis.// Lab. Invest 1982 Aug-47(2):114−23.
  36. Farber J.L., Chien K.R., Mittnacht S. Jr. Myocardial ischemia: the pathogenesis of irreversible cell injury in ischemia.//Am. J. Pathol. 1981 Feb-102(2):271−81.
  37. Gasnler F., Louisot P., Gateau O. Galactosyltransferase activities in mitochondrial outer membrane: biosynthesis of dolichylmonophosphate-galactose.//Biochim. Biophys. Acta. 1988 Jul 22−961(2):242−52.
  38. Gerschenson L.E., Rotello R.J.Apoptosis: a different type of cell death.//FASEB J. 1992 Apr-6(7):2450−5.
  39. Griffiths E.J.r Halestrap A.P. Protection by Cyclosporin A of ischemia/reperfusion-induced damage in isolated rat hearts.//J. Mol. Cell. Cardiol. 1993 Dec-25(12):1461−9.
  40. Gunter K.K., Gavin C.E., Gunter T.E.//Biophys. J. 1989- 55, 571a.
  41. Gunter I.E., Chace J.H., Puskin J.S., Gunter K.K. Mechanism of sodium independent calcium efflux from rat liver mitochondria.// Biochemistry 1983 Dec 20−22(26):6341−51.
  42. A.Gunter T.E., Pfeiffer D.R. Mechanisms by which mitochondriatransport calcium.//Am. J. Physiol. 1990 May-25.8 (5 Pt 1):C755−86.
  43. Haworth R.A., Hunter D.R. Allosteric inhibition of the Ca2±activated hydrophilic channel of the mitochondrial inner membrane by nucleotides.//J. Membr. Biol. 1980 Jun 15−54(3):231−6.
  44. Haworth R.A., Hunter D.R. The Ca2±induced membrane transition in mitochondria. II. Nature of the Ca2+ trigger site.//Arch. Biochem. Biophys. 1979 Jul-195(2):460−7.
  45. Hayat L.H., Crompton M. Ca2±dependent inhibition by trifluoperazine of the Na±Ca2+ carrier in mitoplasts derived from heart mitochondria.// FEBS Lett 1985 Mar 25−182(2):281−6.
  46. Hayat L.H., Crompton M. Evidence for the existence of regulatory sites for Ca2+ on the Na+/Ca2+ carrier of cardiac mitochondria.// Biochem J 1982 Feb 15−202(2):509−18.
  47. Hayat L.H., Crompton M. The effects of Mg2+ and adenine nucleotides on the sensitivity of the heart mitochondrial Na±Ca2+ carrier to extramitochondrial Ca2+. A study using arsenazo Ill-loaded mitochondria.// Biochem. J. 1987 Jun 15−244(3):533−8.
  48. Herman B., Gores G.J.r Nieminen A.L., Kawanishi T., Harman A., Lemasters J.J. Calcium and pH in anoxic and toxic injury.// Crit. Rev. Toxicol. 1990−21(2):127−48.
  49. Hille B. In: Ionic channels of exitable membranes, 2nd ed. Sinauer Ass., Sunderland, Mass., 1992.
  50. Hockenbery D., Nunez G., Milliman C., Schreiber R.D., Korsmeyer S.J. Bcl-2 is an inner mitochondrial membrane protein that blocks programmed cell death.//Nature 1990 Nov 22−348(6299):334−6.
  51. Hunter D.R., Haworth R.A. The Ca2±induced membrane transition in mitochondria. I. The protective mechanisms.//Arch. Biochem. Biophys. 1979 Jul-195(2):453−9.
  52. Hunter D.R., Haworth R.A.r Southard J.H.Relationship between configuration, function, and permeability in calcium-treated mitochondria.//J. Biol. Chem. 1976 Aug 25−251(16):5069−77.
  53. Hunter F.E.JrFord L.//J. Biol. Chem. 1955- 216: 357−369.
  54. Hutson S.M., Berkich D., Williams G.D., LaNoue K.F., Briggs R. W. 31P NMR visibility and characterization of rat liver mitochondrial matrix adenine nucleotides.//Biochemistry 1989 May 16−28(10):4325−32.
  55. Ito T., Ohnlshi S., Ishinaga M., Kuro M. Sinthesis of new phosphatidylserine spin-label and calcium-induced lateral pfase separation in phosphatidylserine phosphatidylcholine membranes.// Biochemistry 1975- 14: 3064−3065.
  56. Jacob R. Calcium oscillations in electrically non-excitable cells.//Biochim. Biophys. Acta. 1990 May 22−1052(3):427−38 .
  57. Jacob R., Merritt J.E., Hallam T.J., Rink T.J. Repetitive spikes in cytoplasmic calcium evoked by histamine in human endothelial cells.//Nature 1988 Sep 1−335(6185):40−5.
  58. Koop A., Piper H.M. Protection of energy status of hypoxic cardiomyocytes by mild acidosis.//J. Mol. Cell. Cardiol. 1992 Jan-24(1):55−65.
  59. Kosaka H., Matsubara H., Sogoh S., Ogata M., Hamaoka T. r Fujiwara H. An in vitro model for cyclosporin A-induced interference of intrathymic clonal elimination.//J. Exp. Med. 1990 Jul 1−172(1):395−8.
  60. Kottke M., Adams V., Wallimann T., Nalam V.K., Brdiczka D. Location and regulation of octameric mitochondrial creatine kinase in the contact sites.//Biochim. Biophys. Acta. 1991 Jan 30−1061(2):215−25.
  61. Kruskal B.A., Maxfield F.R. Cytosolic free calcium increases before and oscillates during frustrated phagocytosis in macrophages.//J. Cell. Biol. 1987 Dec-105(6 Pt l):2685−93.
  62. Lapidus R.G., Sokolove P.M. The mitochondrial permeability transition. Interactions of spermine, ADP, and inorganic phosphate.//J. Biol. Chem. 1994 Jul 22−269(29):18 931−6 .
  63. Le Quoc K, Le Quoc D. Involvement of the ADP/ATP carrier in calcium-induced perturbations of the mitochondrial inner membrane permeability: importance of the orientation of the nucleotide binding site.//Arch. Biochem. Biophys. 1988 Sep-265(2):249−57.
  64. Lee A.G. Lipid phase transitions and phase diagrams. I. Lipid phase transitions.//Biochim. Biophys. Acta. 1977 Aug 9−472(2):237−81.
  65. Lee A.G.Analysis of the defect structure of gel-phase lipid.// Biochemistry 1977 Mar 8−16(5):835−41.
  66. Lehnindger A.L., E. Carafoli, C.S. Rossi. Energy linked ion movements in mitochondrial systems. //Adv. Enzymol. 196 729: 259- 320.
  67. Lehninger A.L., Vercesi A., Bababunmi E.A.Regulation of Ca2+ release from mitochondria by the oxidation-reduction state of pyridine nucleotides.//Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1978 Apr-75(4):1690−4.
  68. Le-Quoc D., Le-Quoc K. Relationships between the NAD (P) redox state, fatty acid oxidation, and inner membrane permeability in rat liver mitochondria.//Arch. Biochem. Biophys. 1989 Sep-273(2):466−78.
  69. Le-Quoc K., Le-Quoc D. Crucial role of sulfhydryl groups in the mitochondrial inner membrane structure.//J. Biol. Chem. 1985 Jun 25−260(12):7422−8.
  70. Ligeti E., Lukacs G.L. Phosphate transport, membrane potential, and movements of calcium in rat liver mitochondria.// J. Bioenerg. Biomembr. 1984 Apr-16(2):101−13.
  71. McGeoch J.E., Guidotti G. A. 0.1−700 Hz current through a voltage-clamped pore: candidate protein for initiator of neural oscillations.//Brain Res. 1997 Aug 22−766(1−2):188−94.
  72. McCormack J.G., Daniel R.L., Osbaldeston N.J., Rutter G.A., Denton R.M. Mitochondrial Ca2+ transport and the role of matrix Ca2+ in mammalian tissues.//Biochem. Soc. Trans. 1992 Feb-20(1):153−9.
  73. McCormack J.G., Halestrap A.P., Denton R.M. Role of calcium ions in regulation of mammalian intramitochondrial metabolism.// Physiol. Rev. 1990 Apr-70(2):391−425.
  74. Me2a L. Inhibition and activation of calcium transport in mitochondria. Effect of lanthanides and local anesthetic drugs.// Biochemistry 1969 Jun-8(6):2481−6.
  75. Mercep M., Noguchi P.D., Ashwell J.D. The cell cycle block and lysis of an activated T cell hybridoma are distinct processes with different Ca2+ requirements and sensitivity to cyclosporine A.//J. Immunol. 1989 Jun 1−142(11):4085−92.
  76. Murphy AN, Fiskum G. Abnormal Ca2+ transport characteristics of hepatoma mitochondria and endoplasmic reticulum.// Adv. Exp. Med. Biol. 1988−232:139−50.
  77. Nazareth W., Yafel N., Crompton M. Inhibition of anoxia-induced injury in heart myocytes by cyclosporin A.//J. Mol. Cell. Cardiol. 1991 Dec-23(12):1351−4.
  78. Nicholls D.G. The regulation of extramitochondrial free calcium ion concentration by rat liver mitochondria.// Biochem. J. 1978 Nov 15−176(2):463−74.
  79. Nicholls D.G., Brand M.D. The nature of the calcium ion efflux induced in rat liver mitochondria by the oxidation of endogenous nicotinamide nucleotides.//Biochem. J. 1980 Apr 15−188(1):113−8.
  80. Nikaido H., Saier M.H. Jr. Transport proteins in bacteria: common themes in their design.// Science 1992 Nov 6−258(5084):936−42.
  81. Novgorodov S.A., Gudz T.I., Milgrom Y.M., Brierley G.P. The permeability transition in heart mitochondria is regulated synergistically by ADP and cyclosporin A.//J. Biol. Chem. 1992 Aug 15−267(23):16 274−82.
  82. O’Doherty J., Yuomans S.J., Armstrong W., Stark R.J. Calcium regulation during stimulus secretion coupling: Continuous measurament of intracellular calcium activities// Science. 1980, vol. 209. p510- 513.
  83. Orrenius S., McConkey D.J., Bellomo G., Nicotera P. Role of Ca2+ in toxic cell killing.//Trends Pharmacol. Sei. 1989 Jul-10(7):281−5.
  84. Paimer J.W., Pfeiffer D.R. The control of Ca2+ release from heart mitochondria.//J. Biol. Chem. 1981 Jul 10−256(13):6742−50.
  85. Penttila A., Trump B.F. Extracellular acidosis protects Ehrlich ascites tumor cells and rat renal cortex against anoxic injury.//Science 1974 Jul 19−185(147):277−8.
  86. Pereira da Silva L., Bernardes C.F., Vercesi A.E. Inhibition of ruthenium red-induced Ca2+ efflux from liver mitochondria by the antibiotic X-537A.//Biochem. Biophys. Res. Commun. 1984 Oct 15−124(1):80−6.
  87. Petronilli V., Cola C., Massari S. f Colonna R., Bernardi P. Physiological effectors modify voltage sensing by the cyclosporin A-sensitive permeability transition pore of mitochondria.//J. Biol. Chem. 1993 Oct 15−268(29):21 939−45.
  88. Petronilli V., Nicolli A., Costantini P., Colonna R., Bernardi P. Regulation of the permeability transition pore, a voltage-dependent mitochondrial channel inhibited by cyclosporin A.// Biochim. Biophys. Acta. 1994 Aug 30−1187(2):255−9.
  89. Petronilli V., Szabo I., Zoratti M. The inner mitochondrial membrane contains ion-conducting channels similar to those found in bacteria.//FEBS Lett. 1989 Dec 18−259(1):137−43.
  90. Puskin J.S., Gunter T.E., Gunter K.K., Russell P.R. Evidence for more than one Ca2+ transport mechanism in mitochondria.//Biochemistry 1976 AUG 24−15(17):3834−42.
  91. Quinlan P.T., Thomas A.P., Armston A.E., Halestrap A. P. Measurement of the intramitochondrial volume in hepatocytes without cell disruption and its elevation by hormones and valinomycin.//Biochem. J. 1983 Aug 15−214(2):395−404.
  92. J. //Helv. Physiol. Acta 1953 11:142−156.
  93. Rapp P.E., Mees A.I., Sparrow C.T. Frequency encoded biochemical regulation is more accurate than amplitude dependent control.//J. Theor. Biol. 1981 Jun 21−90(4):531−44.
  94. Richter C. In: Molecular mechanisms in bioenergetics. L. Ersner (Ed.), Elsevier science publishers B.V., 1992:349 358.
  95. Rottenberg H., Scarpa A. Calcium uptake and membrane potential in mitochondria.// Biochemistry 1974 Nov 5−13(23):4811−7.
  96. Ryffel B., Donatsch P., Gotz U., Tschopp M. Cyclosporin receptor on mouse lymphocytes.// Immunology 19 801. Dec-41(4):913−9.
  97. Sandri G., Siagri M., Panfili E. Influence of Ca2+ on the isolation from rat brain mitochondria of a fraction enriched of boundary membrane contact sites.//Cell Calcium 1988 Aug-9(4):159−65.
  98. Saris N.E., Bernardi P. Inhibition by Sr2+ of specific mitochondrial Ca2±efflux pathways.// Biochim Biophys Acta 1983 Oct 31−725(1):19−24.
  99. Saris N.E., Sirota T.V., Virtanen I., Niva K., Penttila T., Dolgachova L.P., Mironova G.D. Inhibition of the mitochondrial calcium uniporter by antibodies against a 40-kDa glycoproteinT.// Bioenerg. Biomembr. 1993 Jun-25(3):307−12.
  100. Scarpa A., Azzone G.F.The mechanism of ion translocation in mitochondria. 4. Coupling of K* efflux with Ca2+ uptake.// Eur. J. Biochem. 1970 Feb-12(2):328−35.
  101. Scarpa A., Graziotti P. Mechanisms for intracellular calcium regulation in heart. I. Stopped-flow measurements of Ca2+ uptake by cardiac mitochondria.// J. Gen. Physiol. 1973 Dec-62(6):756−72.
  102. Sen S. r D’lncalci M. Apoptosis. Biochemical events and relevance to caftcer chemotherapy.//FEBS Lett. 1992 Jul 27−307 (1):122−7.
  103. Sol em L.E., Wallace K.B. Selective activation of the sodium-independent, cyclosporin A-sensitive calcium pore of cardiac mitochondria by doxorubicin.//Toxicol. Appl. Pharmacol. 1993 Jul-121(1):50−7.
  104. Szabo I., Bernardl P. r Zoratti M. Modulation of the mitochondrial megachannel by divalent cations and protons.//J. Biol. Chem. 1992 Feb 15−267(5):2940−6.
  105. Takahashi N., Hayano T., Suzuki M. Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase is the cyclosporin A-binding protein cyclophilin.// Nature 1989 Feb 2−337(6206):473−5.
  106. Thieffry M., Chich J.F., Goldschmidt D., Henry J. P. Incorporation in lipid bilayers of a large conductance cationic channelfrom mitochondrial membranes.//EMBO J. 1988 May-7(5):1449−54.
  107. Tikhonova I.M., Andreyev A.Yu., Antonenko Yu.N., Kaulen A.D.f Komrakov A.Yu., Skulachev V.P. Ion permeability induced in artificial membranes by the ATP/ADP antiporter.// FEBS Lett. 1994 Jan 17−337(3):231−4.
  108. Tolleshaug H., Seglen P.O. Autophagic-lysosomal and mitochondrial sequestration of 14C.sucrose. Density gradient distribution of sequestered radioactivity.//Eur. J. Biochem. 1985 Dec 2−153(2):223−9.
  109. Waite M. r Deenen L.L. van. Hydrolysis of phospholipids and glycerides by rat-liver preparations.// Biochim. Biophys. Acta. 1967 Jun 6−137 (3):498−517 .
  110. Waite M., Scherphof G.L., Boshouwers F.M., Deenen L.L. van. Differentiation of phospholipases A in mitochondria and lysosomes of rat liver.//J. Lipid. Res. 1969 Jul-10(4):411−20.
  111. Waite M., Van Deenen L.L., Ruigrok T.J., Elbers P.F. Relation of mitochondrial phospholipase A activity to mitochondrial swelling.//J. Lipid. Res. 1969 Sep-10(5):599−608.
  112. Walker J.E. The rotary mechanism of ATP synthesis.// In: New perspectives in mitochondrial research, Padova, September 18−21, 1997:17−18.
  113. Webster G.R., Alpern R.J. Studies on the acylation of lysolecithin by rat brain.//Biochem. J. 1964 Jan-90(1):35−42.
  114. Woods N.M., Cuthbertson K.S., Cobbold P.H. Agonist-induced oscillations in cytoplasmic free calcium concentration in single rat hepatocytes.//Cell Calcium 1987 Feb-8(1):79−100.
  115. Woods N.M., Cuthbertson K.S., Cobbold P.H. Repetitive transient rises in cytoplasmic free calcium in hormone-stimulated hepatocytes.//Nature 1986 Feb 13−19−319(6054):600−2.
  116. Zoratti M., Szabo I. The mitochondrial permeability transition.//Biochim. Biophys. Acta. 1995 Jul 17−1241(2): 13 976.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!