Т-клеточная супрессия при беременности

Наряду с изучением гуморальных механизмов регуляции при беременности появляются данные, касающиеся выявления значимости Т-супрессорных клеток. Изучение супрессорных клеток организма матери in vitro основывается в настоящее время на использовании двух методических приемов: определении специфических рецепторов и исследовании функциональной активности этих клеток. Большое распространение получил метод определения Fc-рецептора Т-лимфоцитов к IgG (T_Y), наличие которого связывается с супрессивностью, и Fc-рецептора Т-клеток к IgM (T_M), что характеризует хелперные свойства. При характеристике субпопуляций лимфоцитов беременных в литературе были приведены сведения о значительном увеличении субпопуляции Т-клеток, относящихся к супрессорам, способным ингибировать пролиферацию и дифференцировку В-клеток, снижать митогениндуцированную продукцию иммуноглобулинов А, М, G, а также супрессировать проявление первой фазы распознавания и пролиферации в смешанной культуре лимфоцитов. Субпопуляция Т_м-лимфоцитов при беременности достоверно снижается по сравнению с нормой.

Выраженность указанных Fc-рецепторов к IgG и IgM является интересной не только как фенотипических маркеров, но и с точки зрения биологической функциональной активности. Показано, что при культивировании в особой среде происходит исчезновение рецепторов и их восстановление при отмывании с последующим культивированием в обычной среде.

Условия, приводящие к освобождению Fc-рецептора, снижали супрессивную активность клеток, которая обнаруживалась в супернатантах. Установлено, что супрессорные факторы имеют ту же специфичность, что и супрессорные клетки. Фенотипическими маркерами для Т-супрессоров считается также наличие в зависимости от стадии созревания антигенов Lyt 1⁺2⁺3⁴ или Lyt2⁺3. Использование моноклональных антител позволило характеризовать супрессоры как ОКТ8⁺ клетки, причем большая часть ОКТ8⁺клеток обнаружена не в Т_т-субпопуляции, хотя их находят и в Т_гклетках. Видимо, этим можно объяснить, что некоторые исследователи связывают супрессивную активность как с Т, так и с Т_й субпопуляциями. Отсутствует однозначность результатов и в обнаружении HLA-D-антигенов на супрессорных клетках. Наряду с выявлением необходимости в идентичности между супрессорными и отвечающими клетками по HLA-D-локусу имеются сведения о том, что большая часть клеток не несет HLA-D-антигенов. Хотя в этом случае, может быть, нельзя ставить знак равенства между указанными антигенами, несмотря на выявленную взаимосвязь.

Деление супрессоров по эффектам действия на специфические и неспецифические сформировало мнение об их гетерогенности. Есть данные, что специфические супрессоры обладают определенной степенью перекрестной реактивности, которая может быть выявлена в СКЛ. Исследования супрессорных клеток у беременных женщин начаты недавно. Аллоиммунизация беременных дает основание считать правомочным развитие специфических супрессорных клеток. Решение вопроса о специфичности действия материнских супрессорных клеток, выявленных как T_Y и ОКТ8, оказалось сложным: было показано, что в 6-суточных СКЛ (мать-отец, мать-донор) подавление было неспецифическим. Авторы учли возможную пресенсибилизацию лимфоцитов беременной и в связи с этим возникновение более быстрого пролиферативного ответа: действительно, в 3-суточных культурах наблюдалось специфическое подавление ответа материнских клеток на отцовские антигены. У женщин во второй половине беременности и в течение 6 месяцев после родов проявляется неспецифическая функция подавления ответа лимфоцитов (отсутствие формирования цитотоксических лимфоцитов) на антигены мужа и неродственного донора. Имеются данные, что супрессорная активность проявляется с 26-й недели беременности. Неспецифическими индукторами супрессоров оказались некоторые вещества, играющие большую роль в развитии толерантности при беременности. Показано, что физиологические концентрации хориального гонадотропина обладают способностью индуцировать образование супрессорных клеток in vitro, очевидно, это один из иммунорегуляторных механизмов при развитии беременности. Аналогичный эффект был установлен для а-фетопротеина.

Таким образом, представленный материал освещает иммунорегуляторные физиологические механизмы, осуществляющие, несмотря на полноценный ответ иммунной системы материнского организма, развитие толерантности в отношении аллогенных плодовых антигенов отцовского происхождения. Существованию равновесности иммунной активации, с одной стороны, и процессов супрессии, феномена «облегчения» — с другой, придается решающее значение для развития физиологически протекающей беременности.

Индукция иммунного ответа и процессы регуляции возникают и у эмбриона. Развитие и созревание иммунной системы эмбриона происходят в условиях материнского организма, по-видимому, развитие не является односторонним. Установлено взаимное проникновение лимфокинов, тимопоэтина, возможно, в связи с их низким молекулярным весом. Подтверждено реальное существование супрессии клеточных реакций иммунитета (ФУМ-, СКЛ-, ФГА-трансформации) лимфоцитами новорожденного или растворимыми факторами. Данные о супрессивных, гуморальных и клеточных факторах получены в основном при изучении пуповинной крови и практически отсутствуют сведения по их выявлению в период эмбрионального развития.

С достаточно определенной степенью достоверности представлены на сегодняшний день сведения о времени появления основных лимфоидных органов развивающегося эмбриона. Формирование тимуса, начинающееся с 6-й недели, завершается к 16-й неделе беременности, для селезенки и лимфоузлов сроки созревания определены с 6-й по 25-ю неделю и с 8-й по 17-ю неделю соответственно.

Имеются подробные описания сроков заселения стволовыми полипотентными клетками, мигрирующими из желточного мешка и печени в селезенку, костный мозг, кровь, тимус. Важным оказывается проявление функциональных свойств лимфоцитов эмбриона, позволяющих судить о степени зрелости лимфоидных элементов и возможном участии некоторых субпопуляций в регуляторных механизмах поддержания иммунобиологического равновесия в системе мать-плод.

Касаясь количественного определения Т-лимфоцитов методом Е-РОК, нужно отметить, что они идентифицируются в мозге, печени, тимусе, селезенке, крови начиная с 11 недель беременности. Содержание в тимусе активных Т-лимфоцитов с 11-й по 19-ю неделю имеет достаточно большой разброс — от 15 до 65%, однако корреляции между возрастом эмбриона и процентным содержанием активных Е-РОК не удалось отметить. Такой разброс, видимо, можно объяснить тем, что лимфоциты в тимусе, по мнению некоторых авторов, появляются в пределах от 8-й до 15-й недели. Относительное количество тотальных розеток в 15−26 недель колеблется от 50 до 96%, а тестирование HLA и Hu-антигенов на мембранах тимоцитов позволило обнаружить их в 95−100% случаев от 12-й до 20-й недели беременности. Небольшой процент Е-РОК (от 0,5 до 2,5) у 11−19-недельного плода выявили в крови, селезенке, печени и костном мозге. Однако в соответствии с данными других авторов лимфоциты в крови появляются на 7−8-й неделе, и их нормальное соотношение устанавливается на 14-й неделе. С 14-й недели в плодовой крови можно было обнаружить около 10% Т-клеток с маркером, который свидетельствует о конечной стадии созревания тимоцитов. На 23-й неделе 36% мононуклеарных клеток обладали этим маркером. Первые В-лимфоциты у идентифицированные по IgM-, IgGи IgA-детерминантам определяются в печени плода на 9-й неделе, а на 11-й неделе их можно обнаружить в крови, селезенке, костном мозге. К 20-й неделе беременности отмечается наличие всех иммуноглобулинов на поверхности В-лимфоцитов. К 25−26-й неделе все лимфоциты тимуса и селезенки метились либо как Т-, либо как В-клетки. Клетки, содержащие IgM, преобладали в фетальной печени и костном мозге. В последних органах обнаружили более 50% нулевых клеток.

Определенная информация о становлении функции иммунной системы в эмбриональном периоде может быть получена при использовании данных по группам недоношенных детей. Хотя при этом необходимо учитывать не только явное заболевание, сопровождающее недонашиваемость, но и возможность внутриутробного стимулирования плода, которое может не сразу проявиться клинически. Этим, видимо, могут объясняться некоторые отличия в результатах, получаемых при обследовании новорожденных в одни и те же сроки.

Имеются данные, что содержание Т-лимфоцитов (абсолютное и относительное) у здоровых недоношенных детей снижено при рождении, но в первые 2 недели достигает уровня нормальных показателей для доношенных детей. Отмечается снижение Fc-позитивных клеток, увеличение количества клеток, несущих рецептор для Сз-комплемента. Ответ на ФГА-стимуляцию не имеет достоверных отличий от показателей взрослых доноров. К сожалению, пока мало сведений о становлении супрессорных и хелперных клеток в периоде внутриутробного развития плода. Общее количество лимфоцитов в периферическом кровообращении эмбриона при 7−8-недельной беременности составляет 1000/мм³, к 20- 25 неделям оно достигает 10 000/мм³.

Считается, что функциональная компетентность селезеночных лимфоцитов проявляется после 16 недель беременности, а тимуса — между 12-й и 16-й неделями.

Так, концентрация циркулирующего IgG особенно нарастает начиная с II триместра беременности, однако нужно учесть, что только 5−10% иммуноглобулинов производится плодом, остальное количество является пассивно перенесенным от матери. Иммуноглобулины, А и М не проходят от матери через плаценту, а уровень их, вырабатываемый лимфоцитами плода, чрезвычайно низок. У недоношенных детей (30 недель) определяли содержание IgG (с тестированием материнского и плодового аллотипов). Установили, что их уровень у недоношенных детей был высоким (12 090 мкг/л) и не отличался от материнского (12 090 + 720 мкг/л). У обследуемых детей наблюдали выраженные колебания (от 3100 до 13 700 мкг/л). Возрастание степени недонашивания коррелировало со снижением концентрации. Установлена возможность продукции иммуноглобулинов фетальными В-лимфоцитами при стимуляции материнскими клеточными факторами или вирусами Эпштейна-Бара.

Была продемонстрирована цитотоксичность, индуцированная ФГА, лимфоцитов костного мозга, селезенки, крови (но не тимуса) 14−18-недельных плодов человека против эритроцитов цыпленка. Однако этот эффект показан и для лимфоцитов тимуса другими исследователями. Способность иммунной системы плода стимулироваться некоторыми антигенами (бледная спирохета, вирус краснухи и др.) начиная со II-III триместра в настоящее время хорошо известна.

Ответы лимфоцитов тимуса на ФГА-стимуляцию регистрируются только с 10-й недели беременности, спустя 2−3 недели отмечается ФГА-ответ для лимфоцитов селезенки и периферической крови, в эти же сроки клетки печени и костного мозга остаются инертными. Однако есть данные, свидетельствующие о возможности ФГА-стимуляции клеток печени. В последние годы появились исследования, в которых проводилось тестирование ответов лимфоцитов эмбриона на митогенное действие Кон А. Эти исследования немногочисленны: действие митогена проверено на лимфоцитах главных лимфоидных образований и крови. Установлено, что первичные ответы тимоцитов на Кон, А выявляются у 13−14-дневного эмбриона. Клетки печени и костного мозга плохо стимулировались Кон, А в этот же период. Выдвигается концепция, в связи с которой супрессия неонатальных лимфоцитов является одним из главных механизмов, предотвращающих развитие реакций отторжения.

Выявлено, что супрессорная активность, связанная с продукцией низкомолекулярного фактора T_Y лимфоцитами плода, появляется уже на 8-й неделе беременности. Активность опосредуется простагландинами, что доказывается применением индометацина, отменяющего супрессивный эффект. Было продемонстрировано супрессивное действие экзогенного простагландина Ег на материнские лимфоциты. В экспериментальных исследованиях установлено подавление СКЛ антиидиотипическими антителами.

Известное деление супрессоров на специфические и неспецифические позволяет предполагать наличие обоих видов у новорожденного, хотя есть основание считать, что большая часть его супрессорных клеток принадлежит к неспецифическим; у матери отмечается наличие как специфических, так и неспецифических супрессорных клеток. Установлено, что супрессорные клетки пуповинной крови кроме ингибиции СКЛ, главным образом ее пролиферативной фазы, могут вызвать супрессию пролиферации и дифференцировки В-клеток и способность их угнетать митогениндуцированную продукцию всех классов иммуноглобулинов. Особенно интересны исследования, которые установили генерацию супрессорных клеток, способных ингибировать все указанные реакции. Таким образом, данные о развитии иммунной системы эмбриона и плода позволяют считать ее участие в иммунорегуляторных механизмах обоснованным.