Особенности течения неонатального периода у детей с различными аллельными вариантами полиморфизма генов глутатион-s-трансфераз Т1 и М1

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.

Патология перинатального периода является социально значимой проблемой современной педиатрии. Несмотря на несомненные успехи, достигнутые в понимании особенностей патологии перинатального периода, совершенствование инструментальных и медикаментозных возможностей современной реанимации, отдаленные последствия тяжелой перинатальной патологии оставляют широкий диапазон для исследований.

Актуальность изучения полиморфизма генов глутатион-8-трансфераз Ml ii XI у новорожденных обусловлена тем, что кодируемые ими продукты, синтезируемые в лимфоцитах, лейкоцитах и клетках печени, являются одними из важных ферментов II фазы системы детоксикации ксенобиотиков. На уровне фенотипа «нулевые» генотипы этих генов проявляются в отсутствии белковых продуктов — глутатион-8-трансфераз (GST). Вероятно, в этом случае отсутствие соответствующих ферментов в лимфоцитах и лейкоцитах может сопровождаться нарушением их функции, т. е. иммунологической недостаточностью (специфической и неспецифической).

Согласно данным литературы, наличие нулевых аллелей данных генов в гомозиготном состоянии сопровождается высоким риском возникновения злокачественных новообразований эпителиальной, соединительной, кроветворной тканей, аденомами гипофиза, хроническим бронхитом, бронхиальной астмой (Баранов B.C. и соавт., 2000). Обычно данные заболевания возникают на фоне нарушения иммунологического контроля. В перинатальном периоде это может реализоваться в виде пороков развития, недонашивания беременности, осложненного течения родов, неонатальных инфекций, геморрагических расстройств. По данным Л. В. Эрмана, В. И. Калиничевой (1970), глутатионредуктазы обеспечивают стабильный уровень глутатиона в эритроцитах, и при снижении их концентрации возникает риск развития гемолитической анемии. Первые сообщения о нормативах активности глутатионредуктаз в сыворотке крови человека прнадлежат Horn Н. И Bruns F. (1958 г., цит. по Эрман Л. В., 1970).

Данные о частоте встречаемости полиморфных аллелей GSTM1 0/0 и GSTT1 0/0 среди детей, перенесших тяжелую неонатальную патологию, в доступной нам литературе отсутствуют.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Изучить особенности аллельного полиморфизма генов GSTM1, GSTT1, ответственных за синтез глутатион-8-трансфераз Ml и Т1, и их возможный вклад в особенности течения заболеваний у детей с перинатальной патологией.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Определить частоту аллельных вариантов генов GSTM1 и GSTT1 среди здоровых доношенных новорожденных детей.

2. Определить частоту аллельных вариантов генов GSTM1 и GSTT1 у детей, перенесших перинатальную патологию.

3. Определить корреляцию между степенью тяжести гипоксического поражения у новорожденных и аллельными вариантами генов GSTM1 и GSTT1.

4. Определить корреляцию между наличием аллельного полиморфизма генов GSTM1 и GSTT1 и степенью гипербилирубинемии у новорожденных.

5. Оценить роль определения полиморфизма генов GSTT1 и GSTM1 в диагностике и прогнозе течения перинатальной патологии.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

1. Впервые определена частота различных аллельных вариантов генов глутатион-8-трансфераз Ml и Т1 у здоровых доношенных новорожденных, рожденных от матерей без грубой соматической патологии на фоне благополучно протекавшей беременности.

2. Впервые выявлена достоверно повышенная частота «нулевых» генотипов по генам глутатион-8-трансфераз Т1 и Ml у детей, неонатальный период которых протекал с осложнениями и потребовал экстренной госпитализации в отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных.

3. Впервые сопоставлены частоты полиморфных вариантов генов глутатионтрансфераз Ml и Т1 с характером неонатальной патологии.

4. Впервые выявлена ассоциативная связь между наличием нулевого генотипа системы детоксикации генов GSTT1 и GSTM1 и тяжестью гипок-сического поражения у новорожденных.

5. Впервые выявлена корреляция между наличием патологической гипербилирубинемии у новорожденных и нулевым генотипом GSTT1 и GSTM1.

6. Выявлена ассоциация между наличием у недоношенных менее 30 недель гестации развития внутрижелудочковых кровоизлияний, бронхоле-гочной дисплазии, синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания и комбинации функционально ослабленных генотипов генов GSTTIhGSTMI.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

Показана целесообразность определения полиморфных вариантов генов GSTT1 и GSTM1 для выявления детей группы риска по развитию тяжелых гипербилирубинемий, бронхолегочной дисплазии, внутрижелудочковых кровоизлияний. Открываются перспективы для разработки новых методов лечения, прогнозирования последствий перенесенной патологии перинатального периода.

ФОРМА ВНЕДРЕНИЯ.

Результаты работы использованы для преподавания врачам на циклах кафедры педиатрии ФПК и ПП с курсами перинатологии и эндокринологии СПбГПМА.

Основные материалы диссертационной работы могут быть введены в практику работы генетических центров России, как скрининговый метод. Опубликованы работы:

1. Вестник Российской Военно-Медицинской Академии. Приложение, 2005.-№ 1 (13). С 218−219.

Особенности течения неонатального периода у детей с различными вариантами полиморфизма генов глутатионтрансфераз Ml и Т1.

2. Тезисы юбилейной конференции «100-лет клинической больницы СПбГПМА. 80-летию Санкт-Петербургской педиатрический медицинской Академии» — Санкт-Петербург. 2005. С 30−32.

Частота нулевых аллелей GSTM1 и GSTT1 среди здоровых детей.

3. Российская научная конференция. «Педиатрия из XIX в XXI век». Санкт-Петербург, 2005;с 214.

Особенности течения неонатального периода у детей с различными вариантами полиморфизма генов глутатионтрансфераз Ml и Т1.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА В ПРОВЕДЕННОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ Автором составлена программа исследования, программа математиче-ско-статистической обработки. Забор материала для исследования, выделение ДНК и анализ полиморфизма изученных генов проводились в Лаборатории пренатальной диагностики НИИАГ автором лично.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. «Нулевой» генотип генов GSTT1 и GSTM1 и их комбинация достоверно чаще встречаются среди детей, состояние которых в раннем неона-тальном периоде потребовало их экстренного перевода из родильного дома в специализированный стационар.

2. Риск формирования тяжелого гипоксического поражения достоверно выше среди детей с «нулевым» генотипом изучаемых генов.

3. Частота формирования патологической гипербилирубинемии достоверно выше среди детей с «нулевым» генотипом генов GSTT1 и GSTM1.

4. Формирование у недоношенных со сроком гестации менее 30 недель внутрижелудочковых кровоизлияний, бронхолегочной дисплазии, синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания происходит достоверно чаще среди детей с «нулевым» генотипом по GSTT1 и GSTM1.

5. Частота выкидышей в анамнезе достоверно выше у матерей, дети которых имели комбинацию двух функционально ослабленных генотипов генов GSTT1 и GSTM1 (GSTT1 0/0 / GSTM1 0/0).

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

.

Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания объемов и методов исследования, результатов собственных исследований, выводов и практических рекомендаций. Библиографический указатель включает 28 источников отечественной литературы и 114 источников зарубежной литературы. Диссертация иллюстрирована 44 таблицами, 3 рисунками.

ВЫВОДЫ.

1. Частота «нулевых» генотипов генов глутатион —Sтрансфераз Т1 и Ml достоверно выше среди детей, неонатальный период которых протекал с осложнениями и потребовал экстренной госитализации на отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных.

2. Среди детей с «нулевым» генотипом генов GSTT1 и GSTM1 достоверно увеличена частота более тяжелых постгипоксических состояний, синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания.

3. Достоверное увеличение частоты у недоношенных менее 30 недель гес-тации формирования типичных осложнений: внутрижелудочковых кровоизлияний и бронхолегочной дисплазии выявлено среди детей с «нулевым» генотипом по гену GSTT1, что по-видимому является следствием снижения активности процессов детоксикации ксенобиотиков.

4. Среди детей с «нулевым» генотипом по гену GSTT1 частота патологических гипербилирубинемий достоверно выше.

5. Мужской организм более восприимчив к влиянию повреждающих факторов внешней среды при отсутствии одного из ферментов детоксикации GST.

6. Наличие «нулевого» генотипа гена GSTT1 опосредованно приводит к увеличению частоты развития ДВС синдрома вследствие повышенного риска формирования гипоксически — ишемических повреждений, недоношенности и связанных с ней последствий, пневмонии и формирования бронхолегочной дисплазии.

7. Исследование полиморфизма генов GSTT1 и GSTM1 в неонатальном периоде целесообразно для диагностики и прогнозировании течения перинатальной патологии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. При формировании групп риска осложненного течения перинатального периода целесообразно тестирование генов-кандидатов (GSTT1, GSTM1), что дает возможность определить относительный риск развития перинатальной патологии и своевременно применить меры первичной профилактики.

2. Тестирование генетических маркеров в семьях с неблагоприятным акушерским анамнезом у женщин (выкидыши, невынашивание беременности) с целью оптимизации режима последующей беременности и своевременного применения мер первичной профилактики (ограничение контакта с повреждающими факторами внешней среды, рациональная профориентация).