Усовершенствование технологии промышленного производства инактивированной культуральной вакцины против бешенства животных
Полученные экспериментальные материалы по культивированию вируса бешенства, очистке и концентрировании его при производстве вакцин, по стерилизации вируссодержащей суспензии, по инактивации вируса и применению феракрила для стимулирования иммунного ответа у животных при иммунизации, вошли в нормативные документы по производству жидкой и сухой антирабических вакцин, которые рассмотрены, одобрены… Читать ещё >
Содержание
- 1. ВВЕДЕНИЕ
- 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 2. 1. Общая характеристика бешенства
- 2. 2. Вирус бешенства и его свойства
- 2. 3. Вакцинопрофилактика бешенства
- 2. 3. 1. История создания вакцин против бешенства
- 2. 3. 2. Современные вакцины против бешенства, их достоинства и недостатки
- 2. 3. 3. Пути улучшения качества антирабических вакцин
- 2. 3. 4. Определение качества вакцин против бешенства
Усовершенствование технологии промышленного производства инактивированной культуральной вакцины против бешенства животных (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность темы
Бешенство относится к группе наиболее опасных инфекционных заболеваний теплокровных животных и человека, характеризующегося поражением центральной нервной системы. Восприимчивы к бешенству домашние и дикие животные всех видов, а также человек. Болезнь зарегистрирована в различных странах мира. Не отмечалось случаев бешенства в Австралии, Великобритании и Японии. По данным ВОЗ (53) в мире ежегодно регистрируется более 30 тысяч случаев гибели людей. Вспышки болезни не прекращаются среди диких плотоядных, сельскохозяйственных животных, собак и кошек, что и обуславливает заболеваемость бешенством людей. Собаки и лисицы являются основными резервуарами инфекции.
Несмотря на то, что в мире ежегодно вакцинируется более 4 млн. человек против бешенства, гибель от покусов бешенными животными, остается еще высокой (39, 40, 50, 53 и др.).
Вакцинопрофилактика бешенства занимает ведущее место в борьбе с этим заболеванием. Для профилактики бешенства применяются как живые, так и инактивированные вакцины. В последние годы наиболее часто применяют инактивированные вакцины.
При выборе вакцины, предназначенной для массовой иммунизации, особое внимание обращают на безопасность применения и длительность иммунитета у животных после применения вакцины.
Для получения безопасных инактивированных вакцин применяют различные инактиванты и подбирают оптимальные условия инактивации.
В таких условиях вирус должен полностью утрачивать свои инфекционные свойства и максимально сохранять антигенность.
Культивирование вируса бешенства для получения инактивированных вакцин осуществляется в различных системах.
Для этих целей используют первичные культуры клеток, диплоидные клетки человека и часто постоянные линии клеток ВНК-21 и Vero. 6.
Но для получения качественных вакцин вирус нужно было концентрировать в 10−20 раз, а как следствие такой метод трудно было осуществлять в промышленных масштабах, да и стоимость вакцин была высокой (13, 15, 43, 58, 95, 100 и др.). Благодаря успехам биотехнологии, таким как культивирование клеток в суспензии, появилась возможность производить антирабические вакцины в промышленных масштабах при снижении их стоимости (24а, 39, 40, 77, 95, 100 и др.).
С технологической точки зрения при промышленном производстве антирабических вакцин наибольший интерес представляет высокая эффективность выращивания клеток и максимальный выход вируса.
Высокое накопление вируса бешенства обеспечивается при культивировании в суспензионной культуре клеток ВНК-21 (107).
При высоком выходе вируса бешенства отсутствует необходимость в концентрировании антигена.
Кроме того, для получения качественных антирабических вакцин необходимо подбирать штамм вируса, обладающий высокой иммуногенной активностью, отработать метод очистки и концентрирования вируса, использовать инактивант, обеспечивающий устранение инфекционности, с сохранением иммуногенности, а также подбирать адъюванты, усиливающие иммуногенный ответ организма животных на введение вакцины (95, 100 и др.).
В связи с этим в промышленном производстве антирабических вакцин возникает необходимость отрабатывать все эти этапы.
Для инактивации вируса бешенства применяли различные инактиванты обладающие достоинствами и недостатками.
В последние годы для инактивации вирусов стали широко применяться производные этиленимина. Однако, для широкого использования этих инактивантов в промышленном производстве антирабических вакцин необходимо было изучить ряд вопросов.
Указанные выше проблемы являются актуальными и послужили основной предпосылкой для исследований по усовершенствованию технологии изготовления антирабической вакцины. 7.
Цели и задачи исследования. Целью работы было усовершенствование технологии производства вакцины против бешенства из вируса репродуцированного в суспензионной культуре клеток ВНК-21/2. Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:
— усовершенствовать метод промышленного культивирования вируса в суспензионной культуре клеток ВНК-21/2;
— разработать способ подготовки посевного вируса;
— разработать режим инактивации вируса бешенства в больших объемах с помощью димера этиленимина;
— оптимизировать условия концентрирования культурального вируса бешенства;
— определить возможность использования феракрила для стимулирования иммунобиологической активности вакцин против бешенства;
— изучить сохраняемость антигена в процессе храненияизучить сохраняемость антирабических вакцин при различных температурахпроверить иммунобиологические свойства инактивированной культуральной антирабической вакцины, изготовленной из вируса, выращенного в суспензионной культуре клеток ВНК-21/2 в лабораторных и производственных условиях.
Научная новизна. Научная новизна состоит в том, что в результате проведенных исследований:
— усовершенствован метод культивирования вируса в суспензии культур клеток ВНК-21/2 в промышленных условиях;
— разработан способ подготовки посевного вирусного материала, позволяющий культивировать вирус в суспензии в больших объемах;
— предложен и отработан режим инактивации вируса бешенства в больших объемах с помощью димера этиленимина;
— оптимизированы условия очистки и концентрирования культурального вируса бешенства в больших объемах- 8.
— изучена сохраняемость культуральных антирабических вакцин при хранении при различных температурах;
— проверены иммуногенные свойства инактивированной культуральной антирабической вакцины, изготовленной из вируса, выращенного в суспензии клеток ВНК 21/2 в лабораторных и производственных условиях.
— впервые показана стимулирующая роль феракрила в вакцине против бешенства, применение которого увеличивает иммунобиологические свойства антигена в три раза.
Практическая ценность результатов исследований.
Разработаны и утверждены директором института:
— методика подготовки посевного вируса бешенства для культивирования в промышленных масштабах;
— методика применения феракрила в вакцине для стимулирования иммуногенного ответа у животных после иммунизацим;
— методика инактивации культурального вируса бешенства димером этиленимина;
Экспериментальные материалы вошли в нормативно-технические документы по получению жидких и сухих инактивированных культуральных вакцин против бешенства, утвержденных директором института и руководителем Департамента ветеринарии Минсельхозпрода России:
— Временная инструкция по изготовлению и контролю инактивированой, культуральной, жидкой вакцины против бешенства (ВНИИЗЖ);
— Технические условия на вакцину;
— Наставление по применению жидкой вакцины;
— Временная инструкция по изготовлению и контролю инактивированной, культуральной, сухой вакцины против бешенства;
— Технические условия на вакцину;
— Наставление по применению сухой вакцины. 9.
Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на защиту:
— усовершенствование метода культивирования вируса в суспензии клеток ВНК-21;
— способ подготовки посевного вируса для культивирования в суспензии клеток ВНК-21;
— разработка режима инактивации вируса димером этиленимина;
— оптимизация условий очистки и концентрирования культурального вируса бешенства;
— изучение стимулирующей иммуногенной активности феракрила в вакцинах;
— сохраняемость антигена и вакцин против бешенства в процессе хранения;
— изучение иммуногенной активности антирабических вакцин из культурального вируса бешенства. Апробация, результатов работы. Материалы диссертации были доложены на научных конференциях М.ЬчЩй.и на заседаниях Ученого Совета ВНИИЗЖ в 1998 и 1999 годах.
Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано0 научные работы.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, пракгческие предложения и список литературы, который включает 195 источников, в том числе 108 отечественных. Работа иллюстрирована 28 таблицами и дополнена приложениями.
5. ВЫВОДЫ.
1. Усовершенствован метод культивирования вируса бешенства в суспензионной культуре клеток ВНК-21/2, обеспечивающий высокие урожаи вируса, обладающего высокими иммунобиологическими свойствами и пригодным для получения инактивированных культуральных вакцин против бешенства.
2. Проведено сравнительное изучения иммунобиологических свойств вируса бешенства культивируемого в монослойной и суспензионной культурах клеток и показано, что иммунобиологические свойства вируса не изменяются в зависимости от системы культивирования.
3. Разработан метод подготовки посевного вируса бешенства для культивирования в суспензии в больших объемах, позволяющий сократить время культивирования, не применяя стадии монослойного культивирования.
4. Усовершенствован метод инактивации вируса бешенства при помощи О, Ю5% ДЭИ при температуре 37 °C в течение 24 часов. При этом иммуногенная активность антигена остается на исходном уровне.
5. Разработан метод стерилизующей фильтрации вируссодержащей суспензии через фильтры марки Zeta Plus, при которых удаляется микрофлора и потери вируса при этой фильтрации незначительные.
6. Оптимизированы условия концентрирования антигена вируса бешенства при производстве культуральных антирабических вакцин с помощью адсорбции и ультрафильтрации.
7. Разработан метод оценки качества антигена при изготовлении инакгивированных, культуральных вакцин против бешенства, который заключается в определении процента защиты.
8. Установлено, что вакцина против бешенства и антиген сохраняют свои иммунобиологические свойства в процессе хранения при температуре 4−8°С в течение года (срок наблюдения).
9. Показано, что лучшим адъювантом при производстве культуральных инакгивированных вакцин против бешенства является феракрил, который повышает иммуногенность вакцин в 1,5−3,0 раза.
10. Полученная по усовершенствованной технологии культуральная вакцина против бешенства из вируса штамма «ВНИИЗЖ», культивируемого в суспензии клеток ВНК-21/2, при лабораторных и производственных испытаниях оказалась безвредной и высокоиммуногенной.
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
На основании проведенных исследований подготовлены, апробированы и предлагаются для практики следующие методики:
— Методика подготовки посевного вируса бешенства для культивирования в промышленных масштабах;
— Методика применения феракрила в вакцине для стимулирования иммунного ответа у животных после иммунизации;
— Методика инактивации культурального вируса бешенства димером этиленимина;
Полученные экспериментальные материалы по культивированию вируса бешенства, очистке и концентрировании его при производстве вакцин, по стерилизации вируссодержащей суспензии, по инактивации вируса и применению феракрила для стимулирования иммунного ответа у животных при иммунизации, вошли в нормативные документы по производству жидкой и сухой антирабических вакцин, которые рассмотрены, одобрены ученым советом и утверждены директором института, а также Департаментом ветеринарии:
— Нормативно-технические документы по производству, контролю и применнеию инактивированной, культуральной, жидкой вакцины против бешенства;
— Нормативно-технические документы по производству, контролю и применению инактивированной культуральной сухой вакцины против бешенства;
Список литературы
- Авалиани Р.И. Материалы по испытанию живой культуральной антирабической вакцины Института полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР в практике ветеринарии. //Дисс.канд.Тбилиси, 1971.
- Аксенова Т.А., Хапчаев Ю. Х., Миронова Л. Л., Сошенко Ю. В., Селимов М. А., Хазинский В. В. Культивирование вакцинного вируса бешенства в линиях перевиваемых клеток зеленой мартышки. //Вопросы вирусологии. 1991, № 5. -С.432.
- Акулов A.B. Бешенство. //В кн.: Патологическая анатомия сельскохозяйственных животных. М., 1973. С.349−351.
- Акулов К.И., Иванова Л. М., Мистюк И. В., Маркарян А. Г., и др. Природноочаговые болезни и их профилактика в РСФСР. //В кн.: Природноочаговые антропозооносы. Омск. -1976. — С.9−13.
- Амитров В.К. Лисы передатчики бешенства. //Ветеринария. — 1956, № 2. -С. 33−34.
- Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в биологических исследованиях. М.: Медгиз. -1961.
- Бакулов И.А., Таршис М. Г. География болезней животных зарубежных стран. М.: Колос. -1971.-С.200.9а. Балабанов В. А. Чувствительность к вирусу бешенства перевиваемых культур клеток. //Тез.докл.науч.конф.ВНИИВВиМ, Покров, 1990.
- Бароян О.В., Лепин П. Эпидемиологические аспекты современной эпидемиологии. М.: Медицина. -1972. -С.255.
- Барташевич Ю.Э. Супермутагены. М.: 1966. — С.211.103
- Бектемирова М.С. Антирабическая вакцина, приготовленная из вируса, выращенного в культуре ткани эмбрионов японских перепелов. //Acta Virol. -1983. -V.27, N1. P.59−64.
- Богомолова H.H., Борискин Ю. С., Бектемирова М. С., Осидзе Д. Ф. Хроническая инфекция культур клеток вирусом бешенства. //Вопр.вирусол. -1977, № 5. С.561−565.
- Божко Г. К., Гринюк Л. П., Синицын А. Ю. Бешенство диких животных. Киев. -1981. -С. 82.
- Борискин Ю.С. Персистенция вируса бешенства in vitro. //Вопр.вирус. 1980, № 3.-С.261−265.
- Ботвинкин А.Д., Савицкий В. П., Сидоров Г. Н., Юдин В. Г. Значение енотовидной собаки в эпидемиологии бешенства на Дальнем Востоке. //Журн.микробиол. -1981, № 12. С.79−82.
- Ботвинкин А.Д. Особенности эпидемиологии гидрофобии и экологии вируса бешенства в условиях преобладания очагов природного типа. //Дисс. докт. мед. наук. -М.- 1992.-С.57.
- Бучнев К.Н., Росляков A.A., Квасов И. Л. и др. Антирабическая вакцина Алма-Атинского зооветеринарного института. //Ветеринария.-1976,№ 8.-С.45−46.
- Бучнев К.Н., Керимбеков К. К., Смаковская Г. Г., и др. Эффективность инактивированной жидкой антирабической вакцины АЗВИ для разных видов животных. //Проблема вет.иммунологии. 1985. — С. 145−146.
- Ведерников В.А., Седов В. А., Ивановский Э. В. Бешенство животных. М.: Колос. 1964. — С. 112.
- Ведерников В.А. Бешенство. //В кн.: Эпизоотология. Под ред. проф. Р. Ф. Сосова. М., 1969. С. 137−142.
- Ведерников В.А. Бешенство. IIB кн.: Болезни свиней. Изд. З-е, перераб. и допол. М., 1970. С.57−62.
- Ведерников В.А., Седов В. А. Современные особенности эпизоотологии бешенства. //Ветеринария. 1976, № 2. — С.57−61.
- Волкова A.B. Культивирование вируса бешенства штамма Внуково-32 в культуре перевиваемых клеток для производства антирабической вакцины. //Дисс.к.б.н. М. г 1997. С. 117.
- Воробьев A.A., Васильев H.H. Адъюванты. //М.Медицина, 1969. С. 206.
- Вуннер В. Культивирование, очистка и титрование рабдовирусов. //В кн.: Вирусологические методы. М.: Высшая школа, 1988. — С.112−130.
- Гайдамович С.Я., Гращенков Н. И., Соловьев В. Д., Шен P.M., Юрковский A.M. Бешенство. М&bdquo- Медгиз, 1954. — С.272.
- Гаврилов В.И., Семенов Б. Ф., Жданов В. М. Хронические вирусные инфекции и их моделирование. М., 1974.
- Гамалея Н.Ф. Собрание сочинений. М., Изд-во АМН СССР, 1951 .-Т.2.-С.368.
- Грибанова Л.Я. Характеристика природных очагов бешенства в районе Западной Сибири. Дисс.канд.Омск, 1975.
- Грибенча C.B., Ванаг К. А., Баринский И. Ф. Иммунный ответ при экспериментальной хронической рабической инфекции. //Вопр.вирусол. 1981, № 5. — С.601−604.
- Грибенча C.B., Носик H.H., Ершов Ф. И. и др. Эффективность дсРНК как индуктора интерферона при внутримышечном заражении мышей уличным вирусом бешенства. //Вопр.вирусол. -1983, № 2. С.232−235.105
- Грибенча C.B. Изучение иммуногенных свойств липосомальной формы антирабической вакцины. //Вопросы вирусол. -1988. Т. ЗЗ, № 4. — С.431−433.
- Гринин A.C., Титов И. Н. Очистка, концентрирование и фракционирование вирусов животных. М.: «Урожай», 1971. -С.238.
- Зибицкер Д.Е., Ковалев H.A. Бешенство и его профилактика. Минск, «Урожай», 1968. С. 200.
- Иванов B.C. Перспективы совершенствования технологии изготовления культуральных инактивированных антирабических вакцин. //Тезис, докл. Владимир, 1995. -С.203.
- Иванов B.C., Скичко Н. Д. Разработка и внедрение в промышленное производство и ветеринарную практику России антирабической вакцины. //Тез.докп.посвящ. 100-летию Курск.биоф., Курск, 1996. С. 126−128.
- Ивановский Э.В. Специфическая профилактика бешенства животных. //В кн.: Тезисы докладов Межреспубликанского межведомственного совещания по сниженгию заболеваемости бешенством людей и животных. Тбилиси, 1968. -С.6−8.
- Ивановский Э.В. Специфическая профилактика бешенства животных. //Проблемы вет.иммунологии. 1985. — С. 141−143.
- Игнатьева B.C., Никитин Е. Е., Кузнецов П. П. Адаптация фиксированного вируса бешенства к культуре клеток ВНК-21. //Тез.докл.Всесоюзн.межвуз. науч.конф.по вет.вирусол. М., 1973. 4.1. — С.60−61.
- Исаевич Л.В., Блехерман Б. Е., Кузнецова C.B., Передеев Н. И., Кузнецов П.П, Иванов B.C. Морфология вируса бешенства, репродуцированного в культуре клеток ВНК-21/13. //Докл.ВАСХНИЛ, 1978, № 1. С.31−33.
- Канторович P.A. Современное состояние и перспективы развития исследований по природной очаговости бешенства. //Природноочаговые болезни человека. М., 1979. — С.77−78.
- Канторович P.A., Таршис М. Г. Применение математических методов в решении проблемы бешенства (исследование операций). //Современные методы изучения природноочаговых болезней. Л., 1980. С.66−69.
- Клюева Е.В. Иммуно-флюоресцентный метод индикации антигена вируса бешенства, выращиваемого in vivo и in vitro. //Дисс.канд. M., 1967.
- Клюева Е.В., Селимов М. А., Аксенова Т. А. и др. Эффективность антирабических прививок в СССР за 1958−1979 г.г. //В т.: Вирусы и вирусные инфекции человека. М., 1981. -С. 136−137.106
- Ковалев НА, Шашенько A.C., Давыденко В. П. Пероральная вакцинация диких животных против бешенства в природных условиях. //В кн.:Актуальн. вопр.вет.вирусол.Казань, 1980. -С.37.
- Ковалев H.A., Шашенько A.C., Хруцкий А. Е. О путях передачи вируса бешенства в природе. //В кн.: Вопросы природной очаговости болезней. Алма-Ата, 1976, № 8. — С.70−75.
- Комитет экспертов ВОЗ по бешенству. //7 доклад. Женева, ВОЗ. 1984 (СТД 709). — С. 104.
- Комитет экспертов ВОЗ по бешенству. -1986. С. 14.
- Комитет экспертов ВОЗ по бешенству. 118 доклад. Женева, ВОЗ. 1994 (СТД-824) — С. 118.
- Корпусова Т.И., Михалишин В. В., Апексанян Р. Л., Гочмурадов М. Г. Культивирование вируса бешенства в суспензии клеток ВНК-21/2−17. //Тез. докл. Владимир, 1997. С. 174.
- Кравченко А.Т., Латыпова Р. Г., Морогова В. М. и др. Влияние специфических антител на выработку активного иммунитета у привитых антирабической вакциной. //Журн.микробиол., 1980, № 11. С.28−30.
- Кравченко А.Т., Романова Л. Н., Мовсесянц A.A. и др. Принцип специфической профилактики и лечения гидрофобии. IIB кн.: Современные проблемы зоонозных инфекций. М., 1981. С.221−222.
- Крутилина Д.В., Дулина A.B., Морогова В. М., Мадьярова, Ковлясова Е.К., Ганцев P.M. Изучение методов инактивации концентрированной очищенной культуральной антирабической вакцины. //Вопр.вирусол. 1977, № 5. — С.586−587.
- Кузнецова C.B., Передереев Н. И., Кузнецов П. П., Игнатьева B.C. Очистка и концентрирование вируса бешенства полиэтиленгликолем. //Ветеринария, 1974, № 9. С.42−43.
- Кузнецова C.B., и др. Получение очищенного и концентрированного культурапьного вируса бешенства. //Вестник с.-х. науки, 1981, № 6.
- Кузнецова C.B. Свойства гемагглютинина вируса бешенства. //Ветеринария, 1981, № 7.
- Кузнецова C.B., Исаевич Л. В., Кузнецов П. П., Иванов B.C. Получение антирабической вакцины из иммуногенного компонента гемагглютинина вируса бешенства. //Докл.ВАСХНИЛ, 1987. — Т. 10. — С.40−41.107
- Кузнецов П.П., Иванов B.C., Кузнецова C.B. и др. Исследования по разработке промышленной технологии изготовления культуральной антрабической вакцины. //Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности. М., 1979, № 3. -С.3−8.
- Кузнецов П.П., Таршис М. Г. Бешенство животных. М., 1981. С. 56.
- Кузнецов П.П., Таршис М. Г. Бешенство животных. Обзорная информация. М., ВНИИМИ, 1981.
- Кулевич Е.Е., Косяков П. Н. Иммуногенные свойства вируса гриппа А2/гонконг/1/68, инактивированного у-лучами. //Вопр.вирусол. -1974, № 6. -С.696.
- Лурия С., Дарнелл Дж. Общая вирусология М., 1970.
- Массовая иммунизация диких животных против бешенства. //Бюл.: ВОЗ, 1984, 62, № 2, 19.
- Мацюрова P.C., Морогова В. М. Стандартизация медико-биологических препаратов М., 1974. С. 173−175.
- Методы лабораторных исследований по бешенству. Женева, 1975. С. 192 349.
- Морогова В.М., Селимов М. А., Аксенова Т. А., и др. Инактивация культуральной антирабической вакцины УФ-лучами. //Вопр.вирусол. 1973, № 4. — С.422−425.
- Морогова В.М., Дулина A.B., Шафеева P.C., и др. Специфическая активность концентрированной очищенной антирабической вакцины при разных схемах и методах введения. //В кн.: Вопросы прикладной иммунологии. Уфа, 1980. -С.83−84.
- Назаров В.П. Бешенство. IIB кн.: Вирусные болезни животных. М., 1963. -С. 138−152.
- Назаров В.П. Бешенство животных. М., Сельхозгиз, 1961. — С.159.108
- Назаров В.П. Бешенство. //В кн.: Вирусные болезни лошадей. М., 1973. -С.40−47.
- Недосеков В.П., Вишняков И. Ф. Результаты испытаний инактивированной культуральной антирабической вакцины. //Биотехнология, теория и практика, 1988.- 1−2 (5−6).-С. 136.
- Недосеков В.П. Инакгивированная культуральная антирабическая вакцина. //Дисс.канд.наук. Покров, 1998. — С. 150.
- Осидзе Д.Ф. Классификация вирусов (обзор). М., 1979.
- Осидзе Д.Ф., Ивановский Э. В., Фомин Ю. В., и др. Новая этаноловая сухая инакгивированная антирабическая вакцина ВГНКИ. //В кн.: Акт. вопр. вет. вирусол. Казань, 1980. — С. 123−124.
- Передача технологии антирабической вакцины. Бюлл. ВОЗ, 1985, 63, 4.80а. Петров Р. В., Хаитов Р. М. Искусственные антигены и вакцины. //Иммунология. 1986, № 1. — С.5−24.
- Пикуль Н.С., Резник С. Р., Рябошапка А. П. О вируснейтрализующих антителах в крови людей, привитых однократно и повторно антирабической вакциной. //В кн.: Вопросы борьбы с бешенством. М., 1967. — С.258−264.
- Пилле Э.Р., Школьник Р. Я., Романова Л. Н. Новая антирабическая вакцина в практике здравоохранения СССР. //Журнал микробиология, эпидемиология и иммунология. 1989, № 8. -С.49−52.
- Пилле Э.Р. Лиссавирусы. //Вопросы вирусологии. -1996, № 1. С.2−6.
- Полюшкина Г. С., Ивановский Э. В., Чеснокова В. Ф. Антирабические вакцины. //Ветеринария. 1988, № 4. — С.36−38.
- Сазонова Э.Я., и др. Инактивакция вируса бешенства бета-пропиолактоном. //Передовой науч.-производ.опыт в биол.промышл. 1978, № 2.
- Семенова Е.В., Кобринский Г. Д. Краткий обзор деятельности Московской пастеровской станции 1886−1952 гг. //В кн.: Вирусные инфекции. Под ред.
- B.Д.Соловьева, Л. И. Фалькович. М., 1957. — С.259−274.
- Сафаров Р.К., Мирзоева Ш. Заболеваемость гидрофобией в Азербайджанской ССР (1948−1971 г. г.). //Симпоз. по бешенству. 1972: Тез. докл. — М., 1972.1. C.91−92.109
- Селимов М.А. Некоторые итоги научных исследований по бешенству. //В кн.: Бешенство. М., 1962. С.3−12.
- Селимов М.А. Пути ликвидации гидрофобии. М., Медгиз, 1963. — С.294.
- Селимов М.А. Бешенство. //М.: Медиздат. 1978. — С.318.
- Селимов М.А., Аксенова Т. А., Семенова Е. В. Изучение антигенной активности и безвредности культуральной антирабической вакцины в опыте на добровольцах. //Вопр.вирусол. 1967, № 1. -С.36−41.
- Селимов M.A., Ботвинкин А. Д., Татаров А. Г. Идентификация штаммов вируса бешенства с помощью монокпональных антител. //Современные проблемы профилактики и лечения зоонозных заболеваний и лейкозов: Монск, 1982. С. 17−18.
- Сергеев В.А. Размножение вирусов в однослойной культуре. //Вирусные вакцины. Киев. — 1993. — С.47.
- Сергеев В.А. Вирусные вакцины. //Киев, «Урожай». 1993. — С. 105.
- Сюрин В.Н., Самуйленко, А .Я., Соловьев Б. В., Фомина Н. В. Бешенство. //Вирусные болезни животных. -М. -1998. С.300−319.
- Таршис М.Г. Эпизоотологический прогноз и противоэпизоотический план. -М. 1979.
- Таршис М.Г., Ковалев H.A., Кузнецов П. П. Бешенство животных. //Минск. «Ураджай». 1990. — С. 174.
- Хэйбл К. Общие соображения относительно производства вакцин. //Методы лаб.иссл.по бешенству ВОЗ. Женева, 1975. — С. 189−191.
- Черкасский Б.Л. Бешенство. М.: Медицина, 1966. — С.20 110
- Черкасский Б.Л., Кноп, А .Г. Бешенство. //В кн.: Инфекционные болезни в условиях урбанизации. М., 1980. С.37−42.
- Шафеева P.C., Фролова. Культуральная антирабическая вакцина на клетках Vero. //Цитология. -1994. Т.36, № 6. — С.588.
- Шаханина И.Л., Павлов А. В., Марков В. Ю., и др. Экономическая значимость бешенства. //В кн.: Вакцинопрофилактика манингита и бешенства: Материалы советско-французского симпозиума. М., 1979. -С.299−307.
- Шен Р.М. К вопросу о проблеме бешенства. //В кн.: Бешенство. (Этиология, патогенез и профилактика). Под ред. П. Н. Косякова, Р. М. Шен, Л. П. Горшуновой. М.: 1958. С.5−24.
- Шипилов В.И., Дудников С. А. Усовершенствование технологии изготовления антирабической вакцины. //Тез.докл. Владимир, 1995. — С. 149.
- Цетлин Е.М., Романова Л. Н. Модификация метода контроля иммуноген-ной активности антирабических вакцин. //ЖМЭИ. 1993, № 2. — С.84−88.
- Atanasiu P. Rage. In: Encyclopedie medico chirurgical. Paris, 1974. — P. 19−36.
- Atanasiu P., Acha P. La rage chez les vampires. //Ann.speleol., 1975. V.30, N2. — P.379−385.
- Atanasiu P., Yokota Y., Yamet A. Pouvoir inducteur d’interferon du vaccin antirabique de cullture cellulaire chez l’homure. //Ann.microb., 1979. V.130, N2. -P.273−276.
- Atanasiu P. et.al. Electrofocalisation de la glycoprotein du virus rabique. //Ann.microbiol., 1976. B.127, N1.
- Atanasiu P., Perrin P., Delegneau J. Use of an ensyme immunoassay with protein A for rabies antigen and antibody determination. //Develop. in Biol. Standardis., 1980, 46. P.207−215.1.l
- Aronowicz T.L. In.: The growth requirements of vetebrate cells in vitro. N.Y. (ambridze Univ.Press., 1981, 82.
- Aubert M.F.A., Andral L., Blancou T. Controle d activite des vaccins antirabiaues inactives. Etude critique du test des N.T.H. poir un modele experimental dit «Test» peripherique. //J.Biol.Stand. 1981. — V.9, N1. — P.35−43.
- Baer G., Broderson J., Yager P. Determination of the site of oral rabies vaccination. //Amer.J.Epidemiol., 1975. V.101, N7. — P.160−164.
- Baer G. Enteric rabies vaccination in dogs. //Fifth Intern.Congr.Virol., Strasburg, France, 1981. P. 160−12/0/.
- Barth R., Gruschkau H., Milcke L., Taeger O., Weinmann E. Validation of an in vitro assay for the determination of rabies antigen. //Dev.Biol.Stand. 1986. — V.64. -P.87−92.
- Barth B., Diderrich G., Weinmann E. NIH-test a problematic method for testing potence of inactivated rabies vaccine. //Vaccine. -1988. V.6, N4. — P.369−377.
- Bektemirova M.S., Osidze D.F., Pille E.R. et.al. Properties of Rabies Virus (MNII VP-74 Strain) Adapted to Japanese Qnail Embryo Cell Culture. //Archives of Virology. 1979. — V.61, N1−2. — P.61−68.
- Benmansour A., Leblois H., Coulon P., Tuffereau G. et.al. Antigenecity of rabies glycoprotein. //J.Virology. 1991. — V.65, N8. — P.4198−4203.
- Bhattacharya A., Narayan K.G. Dot-enzyme linked immunosorbent assay-rapid alternative test for the measurement of rabies antibody. //Indian J.Comp.Microiol. Immunol.Infect.Diseases. 1995. — V.16, N1−2. — P.61−63.
- Bjilenya G., Hemander B.E.M. Adaption and plaque purification of a rabies virus isolate (V-319) from a vampire bat (Desmodus rotundus). //Cornell.Vet.-1980.-N70 -P.290−302.
- Bijlenga C., Hernandez-Baumgarten E.M. Adaptation, attenuation and plaqoc purification of a rabiesvirus isolate (V.319) from a vampire bat (Desmodus Rotundus). //Tne Cornell Veterinarian. -1980. V.70, N3. — P.290−302.
- Blanco U.J., Aubert M.F. et.al. Reactivation of latent rabies: experiments in foxes. //Ann: Rech.Vet., 1984, N15. P.543.
- Bourhy H., Kissi B. Molecular deversity of the Lyssavirus genus. //Virology. -1993. -V. 194. P.70−81.112
- Cell-culture vaccines. //In: Laboratory techniques in rabies 4-th ed.Geneva. -1996. P.269−350.
- Constantine G. Recent advances in our knowledge of bat rabies.-ln Proceedings of the 12-th International Symposium on rabies. Basel, 1966.-P.251−255.
- Dan F., Stirbu T.E. Date on cell culture prepared rabies vaccine control. //Stad.Res. in Veter. //Med.-Bucharest. -1992. -V.1, N1. P.33−38.
- De Franco M. Polygenic control of antibody production and correlation with vaccine induced resistance to rabies virus in high and low antibody respondermice. //Arch.Virol. -1996. V.141, N8. — P. 1397−1406.
- De Flora S., Badolati G. Thermal Inactivation of Untreated and Gamma-irradiated A2/Aichi/2/68 Influenza Virus. //J.Gen.Virol. 1973. — V.20, N2. — P.261−265.
- Dietzshold B., Gore M., Marchadier D. et.al. Structural and immunological characterization of a linear virus neutralizing epitope of the rabies virus glycoprotein andits possile use in a synthetic vaccine. //J.Virol. -1990. V.64, N8. — P.3804−3809.
- Dietzschold B., Wang H., Rupprecht C.E. et.al. Induction of protective immunity against rabies by immunization with rabies ribonucleoprotein. //Proc.Natl.Acad.Sci. -1987. -V.84. -P.9165−9169.
- Dureux J.B., Canton Ph. Prevention de la rage chez l’homme. //Rev.Med.(Paris), 1975. V.16. — P.705−710.
- Eichwald C., Pitzscke H. Die tollwut bei mensh und tier. //Veb Gustav Ficher verlag. Jena, 1967. S.300.
- Fenje P. Arabies vaccine from hamster kidney tissue cultures: Preparation and evalution in animals. //Can.J.Microbiol. 1960. — V.6, N5. — P.605−609.
- Flamand A., Raux H., Gaudin Y., Ruigrock R.W.H. Mechanism of rabies virus neutralization. //Virology.-1993.-V.194.-P.302−343.
- Fleming P. Thermal Inactivation of Semlik: Forest virus. //J.Gen.Virol. 1971. -V.13, N3. — P.385−391.113
- Frescura T. Inattivazione pel virus di Ayeszky cori le Radiazioni gamma in Diverse condizioni sperimentali. //Atti Delia Societa Italiana Delle scienze Veterinarie. -1968. V.22. — P.839−845.
- Fu Z.F., Dietrschold B., Shumacher C.L., Wunner W.H. et.al. Rabies virus nucleoprotein expressed and purified from insect cells is efficatious as a vaccine. //Proc.Nat.Acad.Sci. USA. 1991. — V.88, N5. — P.2001−2005.
- Gelev V., Belay G., Celer V. Kinetics of rabies virus replication in cell cultures. //Act. Vet.BRNO. 1991. — V.60, N2. — P.161−164.
- Germano P.M.L., Silva E.V., Preto A.A., Corderio C.F. Evaluation of the efficacy of inactivated rabies vaccines against antigenic variation in mice. //Arguiv.Bid.Techn. 1990. -V.33, N3. — P.551−560.
- Habel K. Post-exposure vaccination and antiserum prophylaxisU of rabies in man. //In.: Proceedings National rabies symposium, Atlanta, 1966. P.89−94.
- Johnson H.N. General epizootiology of rabies. IIIn: Rabies, proceedings of Working conference on rabies sponsored by the Japan United states cooperative medical science program.
- Jayakumar R., Ramadass P., Raghavan N. Studies on immune response and protective capacity of rabies vaccine in Indian dogs. //Rev.Sci.Techn.Off.lnt.Epiz. -1989. -V.8, N1. P. 199−208.
- Kaplan M.M., Koprowski H. Laboratory techniques in rabies. (World Health Organization). Geneva, 1973. — P.367.
- Kasempimolporn S., Hemachudha T., Khawplod P., Manatsathit S. Human immune response to rabies nucleocapsid and glycoprotein antigens. //Clin Exper.lmmunol.-1991. V.84, N2. — P.195−199.
- Kawaoi A., Matsumoto S. Transcriptase activity associated with rabies virion. //J.Virol. -1977. V.24, N3. — P.826−836.
- Klietmann W., Klietmann B., Cox T., Chorbonnier C. Effectiveness and tolerance of pre- and postexposure treatment with purified inactivated rabies vaccine prepared on Vera cell line Vaccine. IN.6, February, 1988, N1. P.39.
- Laboratory techniques in rabies 3-ed. //Geneva. -1973. P.358.
- Laboratory techniques in rabies 4-ed. //Geneva. -1996. P.476.
- Laton M., Wiktor T., Mactarlan R. Antigenic sites on the CVS rabies virus glycoprotein: analysis with monoclonal antibodies. //J.Gen.Viroi. 1983. — V.64, N4. -P.843−851.114
- Larghi O.P. by, Nebel A.E. Duration of immunity afforded to cattle by a binary-ethylenimine inactivated rabies vaccine. //Zbi.Vet.Med.B.-1985.-V.32, N8.-P.609−615.
- Modelska A., Dietzscheld B., Sleysh N., Fu Z.F., Steplewski K. et.al. Immunization against rabies with plant-derived antigen. //Proc.Natl.Acad.Sci.USA. -1998. V.95. — P.2481−2485.
- Nagano F.M. Davenport, Tokyo, 1971. P.237−253.
- Nikiel J. Attempts to obtain rabies virus haemagglutining and evaluation of their immunogenic properties. //Bull.Veter.lnst. in Pulary, 1974, 18, ¾.
- Nogueira yeda L., Amaral Claudia F.C. do. Rabies virus in McCoy cell line Part2 titration. //Rev.lnstALutz. -1992. -20. P. 109−116.
- Nogueira yeda L. Rabies virus in McCoy Cell line Parti Cyfophagic effect and replication //Rev.InstAZutz. -1992. 52, N1−2. — P.9−16.
- Patrick I.W., Heinemann S.F., Boss B. et.al. Synthetic peptide-based antirabies compositions and methods. //Patent 4 707 356. USA. — 12.12.86. N941163.
- Precausta P., Soulebot J.P., Bugand M., Brun A., Chappuis G. Eine inaktivierte Tollwut-Zellkulturvakzine ad us Vet.: Herstellungsverfahren und Ergebnisse Immunologischer Untersuchungen. //Tierarztl.Umschau.-1982.-V.37, N1.-P.274−281.
- Preto A.A., Fernandes M.J., Hayashi Y., Germano P.M.L., Burer S.P. Preparation of rabies vaccine PV/BHK in oili emulsion and evaluation of immunogenic power in bovines. //Arg.Biol.Tecnol. -1991. V.34, N314. — P.609−616.
- Rakhmanine P.P., Vedernikov V.A., Sedov V.A. Moyens permettant de limeter et d’eraquer la rage canine. //Bull.Office int.epizoot. -1981. V.93, N1−2. — P.83−89.
- Reagan K.J., Wunner W.H., Wiktor T.J., Koprowski H. Anti-idiotypic antibodies induce neutralizing antibodies to rabies virus glycoprotein. //J.Viroi. 1993. — V.48, N3. — P.660−666.
- Sagara J., Kawai A. Identification of heat shock protein in the rabies virion. //Virol. -1992,-V.190, N2. P.845−848.
- Saliov P., Chomel B., Chappuis G., Bullon F., Cardenas E. et.al. Serological Results of a Dog Vaccination Campaigh against Rabies in Peru. //23 World Vet. Congr. August, 16−21.-1987, — Montreal, Quebec.-1987.- P.410.115
- Saliov P., Roumyantzeff M., Ajjan N., Lombord M., Chomel B. Uses and Value of Purified Vero Rabies Vaccine (PVRV). //23 World Vet.Congr. August, 16−21, 1987.- Monhreal, Qubec. 1987. — P.410.
- Seroka D., Karpincki S., Labunska E. Adaptaoja szerowwirusa wscieklizny Flura Lep I Hep do pierwotnej hodowli fibroblastow zarodka przepiorki japonskiej (Coturnix coturnix japenica). //Med.dosw.i.mikrobiol. -1986. V.38, N4. — P.228−233.
- Siebel H. Die Tollwut ein europaisches Problem.-Kleintier-Prax., 1969, N14, 3.- S.70−76.
- Sikes R.K. Wolf, Fox and Coyote Rabies. //In: Proceedings of national Rabies Symposium Atlanta, 1966. P.31−33.
- Schneider L. Epidemiologie und diagnostik der Tollwut. //Med.Klin., 1976, Bd 71, N15. P.609−615.
- Schneider L. et.al. Spaltprodukt des tollwutverfahren zu suner Gewinnung und dieses enthaltender impfstoff. //ФРГ, Авт. заявка, А 61 К 399/28 С07 7/00, № 2 605 469 от 15.09.77.
- Schneider L., СохН. Ein Feldversuch Zur oralen Immunisierung von Fuchsen gegen die Tollwut in der Bundesrepublik Deutschland. Tierarstliche Umschan, 1983, Bd 38, N5. -S. 315−324.
- Sokol F., Kuwert E., Wiktor Т., Hummeler K., Koprowski H. Purification of rabies virus grown in tissue culture. //J.Virol. -1968, N2. P.836−844.
- Steck F., Wandeler A., Buchsel P., Capt S. et.al. Oral immunization of foxes against rabies. Laboratory and field Studies. //Compar. Immun. Microbiol. Infect.dis., 1982. -V.5, N1−3.-P.165−173.
- Surecu P. Rabies vaccine production in animal cell cultures. //Vertrebrate Cell.Cult. 1987. -P.111−128.
- Surecu P., Perrin P. The use of immunosome technology for vaccines againstrabies and other viral diseases. //European J.Epidemiology. 1989. — V.5, N3.- P.275−278.
- Tordo N. Characteristics and molecular biology of the rabies virus. //In: Laboratory techniques in rabies 4-th ed.Geneva. 1996. — P.28−45.
- Tordo N., Poch O. Structure of rabies virus. //In: Campbell J.В., Charlton K.M., eds Rabies. Boston, kluwer Academic Publishers. 1998. — P.25−45.
- Tockusch H. Two Mutants of Tobacco Mosaic Virus Temperature Sensitive in Two Different Funutions. //Virology. — 1968. — V.35, N1. — P.94−101.116
- Toma B., Andral L. Epidemiology of fox rabies. Adv. virus res., 1977, N21. -P. 1−35.
- Tuncman Z.M. Kuduz hasteligi hakkinda bilgiler. Istanbul Kuduz tedavi enstitutsu. Istanbul, 1973.
- Voodopija I. Current issues in human rabies immunization. //Rev. Infec.Diseases. 1988. — V.10, N4. — P.758−763.
- Warrell D.A., Warrell M.I. Human rabies: A continuing challenge in the tropical world. //Schweiz. Med.Wochnschr. 1995. -V. 125, N18. — P.879−885.
- Wiktor T., Gyorgy E., Schlumberger H., Sokol F., Koprowski H. Antigenic properties of rabies virus components. //J.Immunol., 1973, N4. P.243−251.
- Wiktor T.J. Immunogenic properties of concentrated virions and rabies virus components. //Symposia series in immunobiol. standard, 1974. V.21. — P. 102−118.
- Wiktor T.J., Koprowski H. Successful Immunization of Primates with Rabies Vaccine Prepared in Homan Diploid Ceil Strain Wi-38. //Proceedings of the Society for Experm.Biol. and Med. April, 1965. -V. 118, N4. — P. 1069−1073.
- Wiktor T., Plotkin S., Koprowski H. Development and clinical afrials of the new human rabies vaccine of fissue culture (human diplord cell) origin. //Proc.of the 25 sypf. WHO, 1977. -P.3−11.
- Wiktor T., Koprowski H. Monoclonal antibodies against rabies virus produced by somatic cele hybridization: detection of antigenic Variants. //Proc.Natl.Acad.Shi, 1978, N78. P.39−48.
- Wiktor T.J., Kieny M.P., Lathe R. New generation of rabies vaccine. //Applied virology research. -1988. V. 1. — P.69−90.
- Winohradhyk V., Popodonol M., Sasu E. Cultiwarea in cultuti de tesuturi a neitilpini de virus pestes poroine isolata de pe teren. //Frast Patol gigiena Anim. -1960.-V.10. P.39.
- Wunner W.H. Structure of rabies viruses. //World's debt to Pasteur. 1985. -P.171−186.
- Zimmermann Th. Zur Brauchbarkeit des Cornea-Testes bei der Tollwutdiagnose. //Berl.Munch.tierarztl.Wschr., 1971, 84, 9. P. 172−174.1. СОДЕРЖАНИЕ ПРИЛОЖЕНИЙ
- Методические рекомендации по подготовке посевного вируса .для промышленного культивирования вируса бешенства .в суспензионной культуре клеток ВНК-21/2 .
- Методические рекомендации по использованию полиакриловой кислоты и ее соли в качестве стимулятора иммуногенности и стабилизатора.. антигена в антирабической вакцине .
- Методические рекомендации по инактивации вируса бешенства. амино-этилэтиленимином (АЭЭИ).
- Вакцина антирабическая инактивированная культуральная. сухая (ВНИИЗЖ) — Технические условия .
- Вакцина антирабическая инактивированная культуральная. жидкая (ВНИИЗЖ). Технические условия .г. Владимир, 1999 год1201. СОДЕРЖАНИЕ1. Введение2. Сущность метода3. Область применения4. Реактивы и оборудование
- Получение матровой расплодки на овцах
- Получение посевного вируса бешенства в суспензионной культуре клеток
- Хранение и контроль посевного вируса бешенства
- Аннотация экспериментальных данных, на основе которых составлены методические рекомендации1. Д|1. Введение
- Бешенство относится к группе наиболее опасных инфекционных заболеваний теплокровных животных и человека, характеризующихся поражением центральной нервной системы. Восприимчивы к бешенству домашние и дикие животные всех видов, а также человек.
- Болезнь зарегистрирована в различных странах мира. Не отмечалось случаев бешенства в Австралии, Великобритании и Японии.
- Несмотря на то, что в мире ежегодно вакцинируется более 4 млн. человек против бешенства, гибель от покусов бешеными животными, остается еще высокой.
- Вакцинопрофилактика бешенства занимает ведущее место в борьбе с этим заболеванием.
- Благодаря успехам биотехнологии, таким как культивирование клеток в суспензии, появилась возможность производить антирабические вакцины в промышленных масштабах при снижении их стоимости.
- Успешное культивирование вируса в культуре клеток во многом зависит от качества посевного вируса, способности такого вируса сохранять иммунобиологические свойства.2. Сущность метода
- При непрерывном промышленном культивировании вируса бешенства, необходимо иметь запас качественного посевного материала, который периодически используется для инфицирования суспензии клеток.
- Для подготовки вируса таким способом требуется продолжительное время.
- Предлагаемый нами способ подготовки посевного вируса включает два этапа:1. расплодка вируса на овцах (матровая расплодка)-2. получение посевного вируса в суспензионной культуре клеток.
- При данном методе сокращается время подготовки вируса и активность вакцин выше, чем при классическом.3. Область применения
- Получение матровой расплодки на овцах
- Для работы используют овец в возрасте 1−1,5 года, которых инфицируют стерильной суспензией с титром инфекционности не ниже 6,5 ЛДбо/мл. Перед заражением вируссодержащую суспензию разводят 1:10 раствором Хенкса рН 7,0−7,2.
- Можно использовать как культуральный, так и мозговой вирус.
- Надосадочную жидкость собирают, отбирают пробы на стерильность, инфекционность, специфичность.
- Стерильный материал, прошедший тест специфичности с титром инфекционности не менее 6,5 lg ЛДбо/мл фасуют по флаконам и хранят при температуре минус 40 °C в течение 12 месяцев.
- Получение посевного вируса бешенства в суспензионной культуре клеток
- Стерильную вируссодержащую суспензию с титром инфекционности 7,0 1д ЛДбо/мл и выше используют в качестве посевного.
- Хранение и контроль посевного вируса бешенства
- Вируссодержащую суспензию после культивирования замораживают в специальных емкостях по 35 литров. Отобранные образцы исследуют на стерильность, инфекционность. «
- Посевной вирус хранят при минус 30 °C в течение трех месяцев. Допускается его использование после истечения 3-х месяцев, только после дополнительного исследования на инфекционность.
- Аннотация экспериментальных данных, на основе которых составлены методические рекомендации
- Культивирование мозгового вируса в суспензии клеток ВНК позволило получать качественный посевной вирус и сократить срок его подготовки на 3−4 суток.
- Подготовку посевного вируса в аппаратах КС-40 при суспензионном культивировании удалось осуществить в течение 48−96 часов.
- Иммунобиологические свойства полученного вируса отражены в таблице1.
- Иммунобиологические свойства посевного вируса репродуцированного всуспензии клеток ВНК-21/2пп Титр инфекционности 1д ЛДбо/мл Индекс иммуногенности1 6,75 2,32 7,5 3,13 7,0 2,51. М±т 7,08±0,24 2,63±0,261. Р<0,001 Р<0,005
- Данные таблицы № 1 показали, что средний титр инфекционности был равен 7,08 1д ЛДбо/мл и индекс иммуногенности 2,63.
- Использование посевного вируса при культивировании промышленных серий, дало следующие результаты. Данные представлены в таблице № 2.