Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Плазмидные ДНК со вставкой гена ангиогенина как потенциальные инструменты для генотерапии

Диссертация: Плазмидные ДНК со вставкой гена ангиогенина как потенциальные инструменты для генотерапии
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Плазмидные «чистые» рекДНК после введения в организм существуют в нём недолгое время (1−1,5 месяца), успевают экспрессировать нужный ген, стоящий под запускающим экспрессию в организме млекопитающих промотором и разрушаются. Такое их непродолжительное существование в организме даёт временный адресный эффект. Надо сказать, что за последнее десятилетие генотерапевтическое лечение (раковые… Читать ещё >

Содержание

  • Список принятых сокращений
  • Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Новые подходы в генотерапии. Рекомбинантные ДНК как инструменты переноса генов и потенциальные лекарственные ф препараты
      • 1. 1. 1. Преимущества и недостатки молекулярных структур, переносящих гены
      • 1. 1. 2. «Терапевтический ангиогенез» как часть генотерапии
    • 1. 2. Ангиогенез
      • 1. 2. 1. Ангиогенин и его роль в ангиогенезе: функциональная активность, генетическая и белковая структура
      • 1. 2. 2. Гомеобоксные гены белковых ростовых факторов и регуляторная роль их белков в процессах морфогенеза и ангиогенеза
    • 1. 3. Ранний постнатальный онтогенез как чувствительная модель для генотерапевтических воздействий (переноса клонированных генов)
    • 1. 4. Биореакторы в современной микробиологии и биотехнологии (сравнительный аспект)
    • 1. 5. Теоретическое обоснование процесса вихревого принципа 43 ферментации

Плазмидные ДНК со вставкой гена ангиогенина как потенциальные инструменты для генотерапии (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Новая область науки — генотерапия — возникла как интегральное развитие биотехнологии, генетики и медицины. За последнее десятилетие в развитых странах мира значительно возрос интерес к генотерапии. Причина такого интереса заключается в том, что генотерапия обещает революционизировать медицину, лечить не следствие, а причину болезни. Ранее результаты клинической эффективности генотерапии были определены, как слабо управляемые и недостаточно безопасные. Впоследствии удалось перейти от опасных вирусных векторов, интегрирующихся в геном млекопитающих и человека, к невирусным плазмидным ДНК (Баранов и др., 2000; Горбунова, Баранов, 1997).

Плазмидные «чистые» рекДНК после введения в организм существуют в нём недолгое время (1−1,5 месяца), успевают экспрессировать нужный ген, стоящий под запускающим экспрессию в организме млекопитающих промотором и разрушаются. Такое их непродолжительное существование в организме даёт временный адресный эффект. Надо сказать, что за последнее десятилетие генотерапевтическое лечение (раковые заболевания, инфекционные заболевания, ревматоидные артриты, наследственные нарушения нервной системы, заболевания сердечно-сосудистой системы, послеоперационное восстановление тканей, заживление трофических язв) в Европе и Америке прошло около 3 тысяч волонтёров (Моп1ат, 2000). Большинство клинических наблюдений у пациентов, прошедших курс генотерапевтического лечения, сделаны благодаря использованию генов белков факторов роста кровеносных сосудов (ангиогенина и подобных ростовых факторов), способных вызывать пролиферацию определённых клеток (в частности, ангиогенез).

Ангиогенез, — это неоваскуляризация или образование новых кровеносных сосудов из уже сформированной кровеносной системы. Он наблюдается при нормальном состоянии организма в постнатальном онтогенезе и в случаях восстановления патологических изменений и повреждений сосудов или ран, а также коллатеризации, стимулированной ишемией. Известно, что ангиогенез практически полностью отсутствует в тканях взрослого организма. Это многоступенчатый процесс формирования кровеносных сосудов, связанный с серией скоординированных биохимических реакций. Ангиогенез состоит из ряда отдельных взаимосвязанных этапов, реализуемых на клеточном и биохимическом уровнях (Мертвецов, Стефанович., 1997).

До недавнего времени клинические способы регуляции роста кровеносных сосудов ограничивались лишь подавлением ангиогенеза с целью предотвращения образования, роста и метастазирования раковых опухолей. Однако в последнее время локальную стимуляцию ангиогенеза стали применять для лечения ишемических заболеваний миокарда и конечностей человека, а также диабетических язв и при заживлении ран (Baumgartner et al., 1998; Giordano et al., 1996). В связи с этим в последнее время наиболее активно развивается такое направление генотерапии, как «терапевтический ангиогенез». «Терапевтический ангиогенез» и перенос генов факторов роста сосудов в клетки тканей млекопитающих (трансгенозис) — актуальная проблема современной биологии и медицины. Для исследовательских целей в области «терапевтического ангиогенеза» применяют тест-системы на биологических объектах.

В качестве тест-системы для оценки биологической активности белка ангиогенина, нередко используют хориоаллантоисную мембрану (ХАО) развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ) (Denefle et al., 1987).

В нашей работе было решено применить аналогичную схему, тестируя экспрессирующиеся в организме млекопитающих генетические конструкции, содержащие клонированные гены. Предполагалось, что в случае активности рекомбинантной ДНК (рекДНК) результаты могут оказаться близки по степени ангиогенеза белковым тестам, проводимым ранее в нашей лаборатории (Кислых и др., 2000), или иметь положительную направленность.

На сегодняшний день наработка полупрепаративных количеств рекомбинантной плазмидной ДНК в мире в основном ведётся по стандартной методике на шейкерах в колбах. Эффективность при этом низка. В то же время на проведение курса лечения одного пациента необходимо использовать 4−8 мг рекДНК, что снижает интерес к такому лечению из-за высокой стоимости препарата, произведенного по старой методике (Жданов и др., 2000; Montain, 2000). Для наработки рекомбинантной плазмидной ДНК в Е. col. мы решили использовать газо-вихревые биореакторы типа «Биок» (Кислых и др., 2000). К такому решению проблемы мы пришли потому, что эти ферментеры работают при любом заполнении, стерилизуются текущим паром и позволяют менять скорость вращения и объём культуры во время работы. Простоту работы с их использованием можно приравнять к обычной лабораторной методике.

Используя низкоскоростные многолитражные центрифуги, можно работать с большими объёмами культуральной жидкости, выделяя биомассу бактерий. В дальнейшем мы предполагали модифицировать щелочную методику выделения ДНК и литиевую доочистку ДНК (Мазин и др., 1990; Sambrook et al., 1989) и уменьшить скорость центрифугирования. Таким образом, мы предполагали получать очищенные препараты рекДНК в больших количествах на низкоскоростных, но крупногабаритных центрифугах. Поскольку в стандартных методиках при выделении рекДНК, не теряя своих свойств, проводится через отмывку 96% этанолом, то видимо этот этап можно было бы использовать для её стерилизации, хранения и доставки к месту назначения. Таким образом, весь процесс от создания генетических конструкций до испытания их активности можно было бы вести в одном специализированном исследовательском центре, в котором будут соблюдаться необходимые стандарты и условия стерильности.

Во взрослом организме ангиогенез в норме практически отсутствует по причине реализации в тканях регулирующего онтогенез механизма (Мертвецов, Стефанович., 1997). Мы учитывали, что генотерапевтические конструкции плазмид, несущие клонированные гены (в том числе ген ангиогенина) успешно функционируют в эукариотических организмах и используются для лечения заболеваний, связанных с необходимостью временного увеличения дозы гена в органах и тканях. Механизм экспрессии таких плазмид в организме, причину их непродолжительного существования там, а также место локализации (клеточное ядро или цитоплазма) установить пока не удаётся. Плазмиды не содержат в своем составе генов, кодирующих вирусные белки, и поэтому более безопасны. По той же причине они не защищены от действия нуклеаз клеток и плазмы организма. Тем не менее, они функционируют в тканях млекопитающих (Баранов, Баранов 2000; Baumgartner et al., 1998). Ядерная локализация генов ангиогенина и других ангиогенных белковых факторов предполагает регуляторную роль таких белков в ходе онтогенеза (Moenner et al., 1999; Hu G.-Fu et al., 2000). Нами было решено разработать эксперимент на новорожденных мышах с целью испытать определённую генноинженерную конструкцию на предмет возможной трансформации и последующей экспрессии в развивающемся организме мышей.

Целью диссертационной работы являлась разработка методов для препаративной наработки, очистки и тестирования генотерапевтических генноинженерных конструкций, содержащих клонированные гены ангиогенных ростовых факторов человека. Основными задачами работы были следующие:

1. Отработка метода получения биомассы бактерий Е. coli JM 109, содержащих рекомбинантные ДНК, с клонированными генами млекопитающих в газо-вихревых биореакторах «Биок» .

2. Наработка и очистка экспериментальных полупрепаративных количеств рекомбинантных ДНК, предназначенных для экспериментов в области генотерапии.

3. Тестирование активности генноинженерных плазмидных конструкций, содержащих клонированные гены ангиогенина человека на модели хориоаллантоисной мембраны развивающихся куриных эмбрионов (ХАО РКЭ) и в раннем постнатальном онтогенезе линейных мышей.

4. Исследование возможности разработки оригинальной схемы для переноса клонированных генов в постнатальном онтогенезе линейных мышей.

Ф Научная новизна работы:

1. Создана система культивирования в газо-вихревых биореакторах «Биок» для наработки биомассы бактерий Е. coli, содержащих рекомбинантныеДНК, а также выделения из неё рекДНК с клонированными генами человека.

2. Разработана оригинальная схема эксперимента по переносу генов, заключённых в рекомбинантных плазмидных конструкциях, в раннем постнатальном онтогенезе мышей для генотерапевтических воздействий.

Практическая ценность: 1. Разработанные способы культивирования, выделения и очистки рекДНК, содержащих клонированные гены животных и человека, позволяют получать полупрепаративные количества рекДНК для использования в генотерапии.

2. Разработанная схема переноса клонированных генов в раннем постнатальном онтогенезе мышей представляет практическую ценность для реализации генотерапевтических конструкций в тканях млекопитающих.

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Разработан способ суспензионного культивирования бактерий Е coli в газо-вихревом биореакторе «Биок» для получения полу препаративных количеств рекомбинантных ф плазмид, содержащих кДНК ангиогенина человека.

2. Модифицирована и апробирована методика выделения, очистки и хранения полупрепаративных количеств рекомбинантных плазмидных ДНК, нарабатываемых в газо-вихревом биореакторе «Биок» .

3. Тестирование рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих ген ангиогенина человека на хориоаллантоисной мембране развивающихся куриных эмбрионов (ХАО РКЭ), свидетельствует об их биологической активности.

4. Генноинженерные конструкции, введённые мышам на второй день после рождения (голая рекомбинантная ДНК, содержащая клонированный ген ангиогенина человека), влияют на постнатальный онтогенез мышей линии Tg-8, значительно тормозя их рост с 28 по 40 день ф послеутробного развития. Период раннего постнатального онтогенеза (вторые сутки) показал себя чувствительным к влиянию рекомбинантной ДНК ангиогенина человека. Таким образом, впервые отработана схема переноса генов плазмидных рекДНК в ткани млекопитающих в раннем постнатальном онтогенезе.

Выводы.

1) Разработан способ и отработаны параметры суспензионного культивирования бактерий Е. coli в газо-вихревом биореакторе «Биок» для получения полупрепаративных количеств рекомбинантных плазмид, содержащих клонированные кДНК.

2) С целью перехода на полупрепаративные количества рекДНК модифицирована методика выделения, очистки и хранения полупрепаративных количеств рекомбинантных ДНК, содержащих клонированные гены факторов роста кровеносных сосудов.

3) В результате тестирования биологической активности наработанных рекомбинантных ДНК на ХАО РКЭ показано, что плазмидные ДНК с клонированными генами ангиогенина обладают выраженной биологической активностью.

4) Опробована схема доставки клонированных генов млекопитающих (кДНК) в раннем постнатальном онтогенезе мышей. Исследовано влияние рекомбинантных ДНК, содержащих клонированные гены ангиогенина, на рост мышей линии Tg-8 при введении их в раннем постнатальном периоде. Установлено двукратное торможение роста развивающихся мышей.

Автор выражает благодарность:

Доктору технических наук Кислых Василию Ивановичу за ценные советы и помощь в проведении экспериментов по наработке рекомбинантных ДНК в газо-вихревых биореакторах «Биок».

Доктору биологических наук Войтенко Нинель Николаевне за ценные советы и организацию физиологических экспериментов по изучению биологической активности рекомбинантных ДНК в раннем постнатальном онтогенезе.

Заключение

.

Становится ясным, что генотерапия сердечно-сосудистых заболеваний в скором будущем может прочно утвердится в мире как отдельная научно-практическая отрасль медицины. Можно предположить, что для этого потребуется развитие таких её направлений, как:

1) Совершенствование материально-технической базы с целью получения препаратов для клинических испытаний и внедрения их в медицину. Совершенствование приборов для наработки клеточных биомасс, содержащих рекДНК (в том числе и гены ростовых факторов). Это означает возможный переход к новым более удобным в использовании ферментёрам лабораторного типа с более мягким режимом ферментации, каким является газо-вихревой биореактор «Биок».

2) Совершенствование плазмидных конструкций для переноса генов за счёт специфических фрагментов генома, усиливающих экспрессию в организме и повышающих продолжительность экспрессии и время существования плазмид после введения в организм.

3) Разработка новых тест-схем (возможно, как в нашем случае, в раннем постнатальном онтогенезе) на лабораторных животных для проверки активности рекомбинантного генетического материала, его безопасности в период развития организма и интенсивности его экспрессии.

4) Постепенный переход к доклиническим испытаниям рекДНК для успешного внедрения в практику таких препаратов, произведенных на основе новых технологий.

Такое важное направление, как генотерапевтические технологии, безусловно, имеет немало неисследованных и спорных аспектов. Но потеря приоритетов в этой области сейчас в дальнейшем может поставить в зависимость от развития иностранных технологий. Работы нашей и других российских и зарубежных лабораторий — это лишь начало усиливающегося процесса, имеющего серьёзную перспективу.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В. С., Баранов А. Н. Генная терапия моногенных наследственных болезней. Миодистрофия Дюшена // Вопросы медицинской химии, 2000, т. 46, № 3, с. 279−292.
  2. В. С., Баранова Е. В., Иващенко Т. Э., Асеев М. В. Геном человека и гены «предрасположенности». (Введение в предиктивную медицину) // СПб, «Интермедика», 2000, 272 с.
  3. Е. В., Свиридов Ю. В., Московцев А. А., Жданов Р. И. Адресная доставка функциональных генов в генотерапии с помощью углерод содержащих векторов // Вопросы медицинской химии, 2000, т. 46, № 3, с. 226−245.
  4. Г. А. Нейротрансмиттеры в эмбриогенезе // М.: Мир, 1987, 230 с.
  5. У. Э., Кристансонс Н. Ж., Былинкина Е. С. Культивирование микроорганизмов // М.: Пищевая промышленность, 1980, 230 с.
  6. И. Д., Кислых В. И., Харченко В. А., Массообмен в клеточном культиваторе «Биоколь» // Гидродинамика и процессы переноса в биореакторах. Сб. под ред. Р. С. Горелика / Ин-т теплофизики, Новосибирск, 1989, с. 35−40.
  7. С. Биология развития // 1993, т. 1, 288 с.
  8. С. Биология развития // 1995, т. 3, 352 с.
  9. Р. И., Семенова Н. В., Арчаков А. И. Реальности и надежды генотерапии // Вопросы медицинской химии, 2000, т. 46, № 3, с. 197−206.
  10. В. В., Винаров А. Ю., Гордеев Л. С. Моделирование биохимических реакторов // М: Лесная промышленность, 1979, 344 с.
  11. В. И., Репков А. П., Рамазанов Ю. А., Воробьёв И. Д. Аппарат для суспензионного культивирования клеток тканей и микроорганизмов // Пат. России, № 2 099 413, опубл. 20. 04.97.
  12. Г. Г., Жданов Р. И. Адресная доставка функциональных генов в генотерапии с помощью углерод содержащих векторов // Вопросы медицинской химии, 2000, т. 46, № 3, с. 246−255.
  13. Л. С. Микробиологическая промышленность за рубежом. Экономика, рынок, конъюнктура. Обзор // Новосибирск, НПО «Вектор», 1989, 33 с.
  14. Л. Н., Науменко Е. В. О роли глюкокортикоидов в модификации гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной функции у крыс, вызванной стрессорными воздействиями в раннем онтогенезе // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова, 1997, т. 83, № 8, с.80−86.
  15. Н. П., Стефанович Л. Е. Ангиогенин и механизмы ангиогенеза // Новосибирск: Наука, 1997, 77 с.
  16. Н. П., Рамазанов Ю. А., Репков А. П., Дударев А. Н., Кислых В. И. Газо-вихревые биореакторы «Биок». Использование в современной биотехнологии // Новосибирск, Наука, 2002, 117 с.
  17. Н. С., Макарова И. В., Крамерова И. А., Бендукидзе К. А., Божков В. М., Газарян К. Г. Ген ангиогенина представлен несколькими копиями в геномах млекопитающих // Молекулярная биология, 1990, т. 24, вып. 3, с. 709−713.
  18. Е. В., Ткачук В. А. Перспективы генной терапии сердечно-сосудистых заболеваний // Вопросы медицинской химии, 2000, т. 46, № 3, с. 293−310.
  19. Пат. № 4 259 449, США: МКИ с. 12 5/02, опубл. 1981. (Кислых В. И., Репков А. П., Рамазанов Ю. А.)
  20. Пат. № 2 940 446, ФРГ: МКИ с. 13 5/00, опубл. 1982. (Кислых В. И., Репков А. П., Рамазанов Ю. А.)
  21. Пенков J1. И., Платонов Е. С. Влияние факторов роста фибробластов (FGF 2, FGF 4) на развитие партеногенетических эмбрионов мышей // Онтогенез, 1999, т. 30, № 6, с. 448−452.
  22. Е. С., Пенков Л. И., Нью Д. А. Т. Действие ростовых факторов FGF2 и FGF2 на развитие партеногенетических эмбрионов мышей in utero и in vitro // Онтогенез, 2002, т. 33, № 1, с. 60−67.
  23. В. Д. Нейрогуморальные механизмы регуляции гомеостазиса и интенсивности роста в различные возрастные периоды. Ведущие факторы онтогенеза // Под ред. В. Н. Никитина, Киев: Наукова Думка, 1972, с.232−250.
  24. Р., Коффман Т. Эмбрионы, гены, эволюция // M.: Мир, 1986, 400 с.
  25. Н. Ю., Маркова J1. Н., Лепихов К. А. Положительное влияние предобработки серотонином и гликозидами на развитие ранних зародышей мышей после криоконсервации // Онтогенез, 1997, т. 28, с. 125−131.
  26. Ю. В., Коробицын Л. П., Милютина И. В., Воробьёв А. А. Гибридомная технология: сущность, проблемы и перспективы, рынок (по зарубежным данным) // Обзорная информация: М., 1984,40 с.
  27. М. В. Механизмы нейроэндокринной регуляции // М.: Наука, 1999, 299 с.
  28. О. П., Никонов С. Д., Мертвецов Н. П. Ангиогенин и его роль в ангиогенезе // Молекулярная биология, 2001, т. 35, № 3, с. 1−23.
  29. Р., Тевс Г. Физиология человека // М.: Мир, 1996, том 2, 393 с.
  30. И. М., Бобрищева И. В., Гривенников И. А., Тарантул В. 3. Эффекты действия генов nef и tat на клетки феррохромоцитомы крысы PC 12 // Генетика, 2000, № 8, т. 36, с. 1140−1146.
  31. В. К., Халатов А. А. Теплообмен, массообмен и гидродинамика закрученных потоков в осесимметричных каналах // М.: Машиностроение, 1982, 200 с.
  32. Asa S. L., Kovacs K., Horvath E. Electron microscopic and ultrastructural immunocitochemical analysis //Neuroendocrinology, 1988, Vol. 48, pp. 423−431.
  33. Bartke A., Cecim M., Tand K. Neuroendocrine and reproductive conseguences of overexpression of growth hormone in transgenic mice // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1994, Vol. 206, pp. 345−359.
  34. Birdwell C. R., Gospodarowicz D., Nicholson G. L. Factors from 3T3 cells stimulate proliferation of cultured vascular endothelial cells //Nature, 1977, Vol. 268, pp. 528−531.
  35. Bischoff J. Cell adhesion and angiogenesis // J. Clin. Invest., 1997, Vol. 99, pp. 373−376.
  36. Bond M. D., Strydom D. J. Amino- acid seguence of bovine angiogenin //Biochemisry, 1989, vol.28,pp. 6110−6113.
  37. Bond M. D., Strydom D. J., Vallee B. L. Characterization and sequencing of rabbit, pig and mouse angiogenins: discerment of functionally important residues and regions // Biochemica et Biophysica acta., 1993, vol. 1162, pp. 177−186.
  38. Brunger A. T., Brooks C. L., Karplus M. Active site dynamics of ribonuclease // Protocol National Academie Sciences of USA, 1985, vol. 82, pp. 8458−8462.
  39. Chitra S., Jones P. F., Patan S., Bartunkova S., Maisonpierre P. C., Davis S., Sato T. N., Yancopulos G. D. Requisite role of angiopoetin-1 a ligand for the TIE- 2 receptor, during embryonic angiogenesis // Cell, 1996, Vol. 87, pp. 1171−1180.
  40. Clair D. K. St., Rybac S. M., Riordan J. F. and Vallee B. L. Angiogenin abolishes cell-free protein syntesis by specific ribonucleolytic inactivation of ribosomes // Protocol National Academie Sciences of USA, 1987, Vol. 84, pp. 8330−8334.
  41. Cohen S., Carpenter G., King L. Epidermal growth factor-receptor protein kinase interaction // Journal of Biological Chemistry, 1980, Vol. 255, pp. 4834−4842.
  42. Denefle P., Kovarik S., Guitton J-D., Cartwright T. and Mayaux J-F. Chemicall synthesis of a gene coding for human angiogenin, its expression in E. coli, and conversion of the product into its active form // Gene, 1987, vol.56, pp. 66−70.
  43. Desgranges C., Razaka G., Rabaud M., Picard P., Dupuch F., Bricaud H. The human blood platelet: a cellular model to study the degradation of thymidine and its inhibition // Biochem. Pharmacol., 1982, Vol. 31, pp. 2755−2759.
  44. Folkman J., Klagsbrun M. Angiogenic factors // Science, 1987, Vol. 235, pp. 442−447.
  45. Furcht L. T. Critical factors controlling angiogenesis: cell products, cell matrix and growth factors // Lab. Invest., 1986, Vol. 55, pp. 505−509.
  46. Garcia-Aragon J., Lobie P. E., Muscat G. E. O. Prenatal expression of the growth hormone (GH) receptor/binding protein in the rat- a role for GH in embryonic and fetal development // Development, 1992, Vol. 114, pp. 869−876.
  47. Gimbrone M. A. Jr., Cotran R. S, Leapman S. B., Folkman J. Tumor growth and neovascularization: an experimental model using the rabbit cornea // J. Natl. Cancer Inst., 1974. Vol. 52, pp. 413−427.
  48. Givol D., Yayon A. Complexity of FGF receptors: genetic basis for structural diversity and functional specificity. // FASEB J., 1992, Vol. 6, pp. 3362−3369.
  49. Gospodarowicz D. Fibroblast growth factor and its involvement in developmental processes // Curr. Top. Dev. Biol., 1990,24 pp. 57−93.• 66. Grant D. S., Kleinman H. K" Goldberg I. D., Bhargava M. M., Nickoloff B. J., Kinsella J. L.,
  50. Polverini P., Rosen E. M. Scatter factor induces blood vessel formation in vivo // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, Vol. 90, pp.1937−1941.
  51. M., Miyadera K., Uemura K., Sumizawa T., Furukawa T., Yamada K., ^ Akiyama S., Yamada. Y. Angiogenic activity of enzymes // Nature, 1994, Vol. 368, pp. 198.
  52. Heldir C. H., Westermark B. Growth factors: Mechanism of action and relation to oncogenes // Cell, 1984, Vol. 37, pp. 9−20.
  53. Hlodan R., Pain R. H. Tumor necrosis factor is in equilibrium with a trimeric molten globule at low pH // FEBS Lett., 1994, Vol. 343, pp. 256−260.
  54. Hu G. Fu, Chang S., Riordan J. F. Human angiogenin is rapidly translocated to the nucleus of human umbilical vein endothelial cells and bind to DNA // Journal of Cellular Biochemistry, 2000, Vol. 76, pp. 452−462.
  55. Hu G. Fu, Chang S. — I., Riordan J. F., Vallee B. L. An angiogenin-binding protein fromendothelial cells // Protocol National Academie Sciences of USA, 1991, vol., 88, pp. 22 272 231.
  56. Hu G. Fu, Riordan J. F. Angiogenin enhances actin acceleration of plasminogen activation // Biochemical and Biophysical Research Communications, 1993, Vol. 197, № 2, pp. 682−687.
  57. Hu G. Fu, Riordan J. F. and Vallee B. L. Angiogenin promotes invasiveness of cultured endothelial cells by stimulation of cell-associated proteolytic activates // Protocol National Academie Sciences of USA, 1994, vol. 92, pp. 12 096−12 100.
  58. Hughes S. E., Hall P. A. The fibroblast growth factor and receptor multigene families // J. Pathol., 1993, Vol. 170, pp. 219−221.
  59. Ishikawa K., Katakami H., Jansson J. O., Frohman L. A. Ontogenesis of growth hormone-releasing hormone neurons in the rat hypothalamus // Neuroendocrinology, 1986, Vol. 43, pp. 537- 542.
  60. Kelly P. A. Growth hormone and prolactine // Hormones: from molecules to diseases, 1990, pp. 191−217.
  61. Kimelman D., Kinschner M. Synergistic induction of mesoderm by FGF and TGF-B and the identification of an mRNA coding for FGF in the early Xenopus embryo // Cell, 1987, Vol. 51, pp. 869−877.
  62. Klagsbrun M., Knighton D., Folkman J. Tumor angiogenesis activity in cells grown in tissue culture // Cancer Res., 1976, Vol. 36, pp. 110−114.
  63. Koch A. E., Polverini P. J., Kunkel S. L., Harlow L. A., Di Pietro L. A., Elner V. M., Elner S. G., Strieter R. M. Interleukin-8 as a macrophage- derived mediator of angiogenesis // Science, 1992, Vol. 258, 1798−1801.
  64. Kurachi K., Davie E. W., Strydom D. J., Riordan J. F. and Vallee B. L. Sequence of the cDNA and gene for angiogenin a human angiogenesis factor // Biochemistry, 1985, vol. 24, pp. 5494.5499.
  65. Langer R., Folkman J. Polymers for the sustained release of proteins and other macromolecules // Nature, 1976, Vol. 263, pp. 797−800.
  66. Lee F. S., Vallee B. L. Binding of placental ribonuclease inhibitor to the active site of angiogenin // Biochemistry, 1989, Vol. 28, pp. 3556−3561.
  67. Lee F. S., Shapiro R., Vallee B. L. Fight- binding inhibition of angiogenin and ribonuclease A by placental ribonuclease inhibitor // Biochemistry, 1989, Vol. 28, pp. 225−230.
  68. Lyman D. F., White B. A. Molecular cloning of hepatic mRNAs in Rana catesheiana response to thyroid hormone during induced and spontaneous metamorphosis // J. of Biological Chemistry, 1987, Vol. 262, pp. 5233−5237.
  69. Luqmani Y. A, Graham M., Coombes R. C. Expression of basic fibroblast growth factor, FGFR1 and FGFR2 in normal and malignant human breast, and comparison with other normal tissues // Brit J. Cancer., 1992, Vol. 66, pp. 273−280.
  70. Mayo K. E., Cerelli G. M., Leo R. V. Gene encoding human growth hormone- releasing factor precursor: structure, seguence and chromosomal assigment // Protocol National Academie Sciences of USA, 1985, Vol. 62, pp. 63−67.
  71. Moenner M., Chauviere M., Chevaillier P., Badet J. Basic homoamino acids, histones and protamines are potent antagonists of angiogenin binding to ribonuclease inhibitor // FEB S Letters, 1999, Vol. 443, pp. 303−307.
  72. Montain A. Gene therapy: the first decade // Trends in Biotechnology, 2000, Vol.18, pp. 113−127.
  73. Moore F., Riordan J. F. Angiogenin activites phospholipase C and elicits a rapid incorporation of fatty acid into cholesterol esters in vascular smooth muscle cells // Biochemistry, 1990, Vol. 29, pp. 228−233.
  74. Naumenko E. V., Maslova L. N. Stress in early ontogenesis and reactivity of hypothalamo-pituitary-adrenal system in adult rats // Endocrinol. Experim., 1985, Vol.19, pp.171−178.
  75. Naumenko E. V. Modification in early ontogenesis of the stress response of adults // News Physiolog. Sci., 1991, Vol.6, pp. 219−223.
  76. Olson K. A., Fett J. W., French T. C., Key M. E. and Vallee B. L. Angiogenin antagonists prevent tumor growth in vivo // Protocol National Academie Sciences of USA, 1995, vol. 92, pp. 442−446.
  77. Olwin B. B., Hauschka S. D. Cell type and tissue distribution of the fibroblast growth factor receptor // J. Cell Biochem., 1989, Vol. 39, pp. 443−454.
  78. Pohorecki R., Balduga J. New model of micromixing in chemical reactors // Ind. Eng. Chem. Fundam., 1983, Vol. 22, № 4, pp.398−405.
  79. Resine T. Somatostatin receptors // American Journals of Physiology, 1995, Vol. 269, № 6, pt. l, pp. G813-G820.
  80. Ribatti D., Vacca A., Bertossi M., Roncali L. Anti-angiogenesis: a multipurpose therapeutic tool // Int. J. Clin. Lab. Res., 1993, Vol. 23, pp. 117−120.
  81. Sambrook J., Fritsch E. F., Maniatis T. Molecular Cioning: A Laboratory Manual // Cold Spring Harbor Laboratory Pres, NY, Vol. 1,2,3.
  82. Schor A. M" Schor S. L. Tumor angiogenesis // J. Pathol., 1983, Vol. 141, pp. 385−413.
  83. Schultz G. A., Heyner S. Growth factors in preimplantation mammalian embryos // Oxf. Rev. Report. Biol., 1993, vol. 15, pp. 43−81
  84. Schumacher B., Specher P., Specht B. U., Segmann T. Induction of neoangiogenesis in ischemic myocardium by human growth factors // Circulation, 1998, Vol. 97, pp. 645- 650.
  85. Shapiro R., Riordan J. F., Vallee B. L. Characteristic ribonucleolytic activity of human angiogenin // Biochemistry, 1986, Vol. 25, pp. 3527−3532.
  86. Soncin F. Angiogenin supports endothelial and fibroblasts cell adhesion // Protocol National Academie of USA., 1992, vol. 89, pp. 2232−2236.
  87. Soncin F., Shapiro R. and Fett J. W. A cell- surface proteolgycan mediates human angiogenin // The Journal of Biological Chemistry., 1994, vol. 269, № 12, pp. 8999−9005.
  88. Steinhelper M. E., Field L. J. Assignment of the angiogenin gene to mouse chromosome 14 using a rapid PCR-RELP mapping technique // Genomics, 1992, Vol. 12, pp. 177−179.
  89. Tuder R. M., Floor B. E., Voelkel N. F. Increased gene expression for FGEF and the FGEF receptors KDK/Fik and Fit in lungs exposed to acute or to chronic hypoxia // Journal of Clinic Investigation, 1995, Vol. 95, pp. 1798−1807.
  90. Ugrumov M. V., Mitskevich M. S. Development of neuroendocrine regulation during ontogenesis // Sov. Sci. Rev. Sec. F Physiol. Gen. Biol., 1992, Vol. 5, pp. 41−96.
  91. Wein N. Non- vial vectors vor gene therapy // In Biotechnology, 1999, Vol. 5a, pp. 427- 442.
  92. Weiner H. L., Weiner L. H., Swain J. L. Tissue distribution and development expression of the messenger RNA, encoding angiogenin // Science, 1987, Vol. 237, pp. 280−283.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!