Диагностическое значение различных микромицетов, выделенных из ногтевых пластин
В" настоящее время используют несколько методов исследования соскобов с ногтевой-пластины, от традиционных, предложенных несколько десятков лет назад и актуальных в. настоящее время, до новейших разработок в связи с внедрением методов молекулярной биологии в диагностику онихомикоза. Вместе с тем, применение молекулярно-генетических методов не дало ответ на вопрос о клинической… Читать ещё >
Содержание
- ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 1. 1. Микромицеты — возбудители онихомикоза
- 1. 1. 1. Современные подходы к интерпретации результатов микологического исследования
- 1. 1. 2. Молекулярно-генетические методы при диагностике онихомикоза
- 1. 1. 3. Гистологическое исследование ногтевой пластины
- 1. 1. Микромицеты — возбудители онихомикоза
Диагностическое значение различных микромицетов, выделенных из ногтевых пластин (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Наиболее частыми возбудителями онихомикоза являются первичные патогены- — дерматомицеты (Trichophyton rubrum, Т. inter digitale, Т. tonsurans и др.). Условно-патогенные микромицеты — дрожжевые {Candida spp. и др.) и нитчатые недерматомицеты (Scopulariopsis spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Acremonium spp. и др.) также могут играть важную роль в возникновении этого заболевания, и их доля в этиологической структуре онихомикоза, по данным разных авторов, составляет 2−48% и 55−59,1% соответственно [14, 22, 97]. Такие вариации в этиологии связывают с особенностями климато-географических зон, а также с различными подходами к интерпретации данных, полученных при лабораторном исследовании [96].
В случае выделения нитчатых недерматомицетов и дрожжей имеются объективные трудностипри интерпретации результатов культурального исследования патологического* материала (ногтевых пластин): Поскольку ногтевые пластины не являются стерильным субстратом, то возможна, контаминация на разных-этапах проведения материала от пациента до чашки Петри при посеве, а кроме того, дрожжи рода Candida входят в состав, нормобиоты нашего организма. — Это может привести к гиперили гиподиагностике онихомикоза, обусловленного нитчатыми недерматомицетами и/или дрожжами.
В" настоящее время используют несколько методов исследования соскобов с ногтевой-пластины, от традиционных, предложенных несколько десятков лет назад и актуальных в. настоящее время, до новейших разработок в связи с внедрением методов молекулярной биологии в диагностику онихомикоза. Вместе с тем, применение молекулярно-генетических методов не дало ответ на вопрос о клинической значимости-нитчатых-недерматомицетов и дрожжей при онихомикозе [35].
Существует несколько подходов к оценке клинического значения-нитчатых недерматомицетов и дрожжей, выделенных при исследовании ногтевых пластин. Одни авторы считают, что при выделении недерматомицета необходимо подтверждение вида при повторном посеведругие — предлагают ограничиться однократным посевом с подсчетом количества выросших колоний, признавая истинным возбудителем' недерматомицет, выросший в 5-ти точках из 20-ти засеянных кусочков ногтевой пластины или в 11—ти из 15—титретьи предлагают забирать материал однократно, но из трех пораженных областей измененного ногтячетвертые — сочетать культуральную диагностику с гистологическим исследованием ногтевой пластины [56, 73, 91, 96].
Следует признать, что в большинстве публикаций авторы сообщают данные «об этиологии онихомикоза, вызванного нитчатыми недерматомицетами и дрожжами, полученные наиболее простым методом, т. е. с помощью критерия простой ассоциации. При этом любой микромицет, выделенный при посеве патологического материала, расценивают в качестве возбудителя, независимо-от результата микроскопии патологического материала [78].
Есть мнение, чтодля выяснения роли нитчатых недерматомицетов и дрожжей в < этиологии онихомикоза необходимо, исследовать их кератиназную активность. Причем, единых подходов к ее выявлению в диагностике онихомикоза не предложено [21, 80]. Следовательно, вопрос об этиологической роли-нитчатыхнедерматомицетов и дрожжей при онихомикозе остается открытым, поскольку реальные возбудители заболевания изучены недостаточно, так как универсального подхода1 к оценке клинической значимости нитчатых недерматомицетов идрожжей — в мире сегодня не существует. Очевидно, необходимы усилия специалистов по достижению консенсуса в области лабораторной диагностики онихомикоза.
ВЫВОДЫ.
1. Установлен спектр микромицетов (дерматомицетов, нитчатых недерматомицетов, дрожжей и их ассоциаций), изолированных от пациентов с онихомикозом в Санкт-Петербурге (стоп — 77,4%, 9,7%, 10,5% и 2,4% соответственнокистей -20%, 3,3% и 73,4% и 3,3% соответственно): а) дерматомицеты: на стопах — Т. rubrurn (67,7%), Т. tonsurans (7,3%) и Т. interdigitale (2,4%) — на кистях — Т. rubrum (16,7%) и Т. tonsurans (3,3%). б) нитчатые недерматомицеты: на стопах — Acremonium sp. (0,8%), Aspergillus spp. (3,2%), Chaetomium globosum (1,7%), Fusarium spp. (3,2%) и Scopulariopsis brevicaulis (0,8%) — на кистях — Fusarium spp. (3,3%). в) дрожжи: на стопах — Candida spp. (9,7%) и Trichosporon spp. (0,8%) — на кистях — Candida spp. (70,1%) и Trichosporon spp. (3,3%). г) микромицеты в ассоциациях: на стопах Trichophyton rubrum и Acremonium sp. (1,6%), Acremonium sp. и Scytalidium hyalinum (0,8%) — на кистях — Candida sp. и Exophiala sp. (3,3%).
2. Микромицеты, выделенные из ногтевых пластин у больных онихомикозом, обладают различной кератиназной активностью: дерматомицетывыраженной, нитчатые недерматомицеты — от выраженной до слабой и дрожжевые организмы — слабой или совсем не проявляют активности.
3. Адгезия и-инвазия дерматомицетами, нитчатыми недерматомицетами или дрожжами здоровой ногтевой пластины на модели ex vivo является показателем способности микромицетов поражать кератинизированные ткани и может служить одним из критериев патогенности микромицета.
4. Воспроизведение роста культур нитчатых недерматомицетов и дрожжей в повторных посевах в сочетании с определением кератиназной активности (на модели инвазии грибом ногтевых пластин ex vivo) — основной критерий в разграничении клинически значимых патогенов и контаминантов при онихомикозе.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:
• При диагностике онихомикоза рекомендуется проводить исследование патологического материала с помощью люминесцентной (калькофлюор белый) или световой микроскопии с применением раствора KOH+DMSO+MQTKRtnom, m синий.
• При культуральном методе исследования соскобов с ногтевых пластин предпочтение следует отдавать «классическому» методу с повторными заборами патологического материала и последующими посевами.
• Метод ПЦР-дагностики (тест-система «ТрифАм») рекомендуется использовать только для комплексной диагностики онихомикоза, обусловленного дерматомицетами (дополнительно к микроскопическому и культуральному).
• Для установления этиологической роли нитчатых недерматомицетов и/или дрожжей при онихомикозе целесообразно проведение теста на инвазию грибом ногтевой пластины на модели ex vivo.
Список литературы
- Боровиков В.П. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов. // СПб.: Питер. 2001. — 656 с.
- Дудка И.А., Вассер С. П., Элланская И. А. и др. Методы экспериментальной микологии. Справочник. // Киев. «Наукова думка». -1982.-С. 210−211.
- Блинов Н.П. Рецензия на книгу «Биология дерматофитов и других кератинофильных грибов». Под ред. Р.К. С. Кушвага и X. Гуарро. // Проблемы Медицинской Микологии. 2000. — Т.2, № 4. — С. 50−58.
- Блинов Н.П., Васильева Н. В., Разнатовский К. И. Дерматомикозы, или поверхностные микозы кожи и ее придатков волос и ногтей. Лабораторная диагностика. // Проблемы Медицинской Микологии. -2008. — Т.10, № 1. — С. 27−34.
- Блинов Н.П. Дерматомицеты (Лекция). Учебное пособие // СПб.: КОСТА. -2010.-48 с.
- Кожичкина Н.В. Плесневой онихомикоз (диагностика, клиника, лечение, профилактика). // Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 2005. — 98 с.
- Ломоносов К.М., Цыкин А. А. Онихомикоз: этиология, диагностика, клиническая картина и лечение. // РМЖ. 2007. — № 19. — С. 1371−1376.
- Разнатовский К.И., Родионов А. Н., Котрехова Л. П. Дерматомикозы. Руководство для врачей. // Издательский дом СПбМАПО. 2003. — 159 с.
- Реброва О.В. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ «Статистика». // Москва: Медиа Сфера. 2002. — 380 с.
- Родионов А. Н. Грибковые заболевания кожи: руководство для врачей (2-е изд.). — СПб: Издательство «Питер». — 2000. -288 с.
- Сергеев А. Ю, Щербо С. Н., Богуш П. Г. и др. Успехи медицинской микологии. // М., 2006. Т. 8. — С. 105−106.
- Сергеев А.Ю. Грибковые заболевания ногтей. 2-е изд. // М.: Национальная академия микологии, 2007. 156 с.
- Сергеев В.Ю. Совершенствование лабораторной диагностики онихомикозов на основе метода полимеразной цепной реакции. // Автореф. дис.. .канд. мед. наук М., 2008. — 24 с.
- Халдин А.А., Новоселов B.C., Новоселов А. В. Онихомикозы: проблемы терапии и пути их решения. // РМЖ. 2008. — Т. 16, № 8. — С. 556−561.17. «ПГёклаков Н. Д. Болезни ногтей. // М., 1975. 216 с.
- Юнкеров В.И., Григорьев С. Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. Лекции для адъюнктов и аспирантов. //СПб.: ВмедА, 2005. 266 с.
- Allpress J., Mountain D.G., Gowland P.C. Production, purification and characterization of an extracellular keratinase from Lysobacter NCIMB 9497. // Letters in Applied Microbiology. 2002. — № 34. — P. 337−342.
- Anbu P., Gopinath S.C.B., Hilda A. et al. Secretion of keratinolytic enzymes and keratinolysis by Scopulariopsis brevicaulis and Trichophyton mentagrophytes: regression analysis. I I Can. J. Microbiol. 2006. — № 52. — P. 1060−1069.
- Baran R. Hay R.J., Haneke E. et al. Onychomycosis. The current approach to diagnosis and therapy. 2nd edition, 2006. — 160 p.
- Barlow A.J.E., Chattaway F.W.W. Attack of chemically modified keratin by certain dermatophytes. // J Invest Dermatol. 1955. — № 24. — P. 65−74.
- Beifuss B., Bezold G., Gottlober P. et al. Direct detection of five common dermatophyte species in clinical samples using a rapid and sensitive 24-h PCR-ELISA technique open to protocol transfer. // Mycoses. 2009. — V. 29, № 7. — P.537−540.
- Bockle B., Galunsky B., Muller R. Characterization of a keratinolytic serine proteinase from Streptomyces pactum DSM 40 530. // Appl. Env. Microbiology. 1995. — V/61, № 10. — P. 3705−3710.
- Bressollier P. Letourneau F., Urdaci M. et al. Purification and characterization of a keratinolytic serine proteinase from Streptomyces albidoflavus. //Appl. Env. Microbiology. 1999. — V.' 65, № 6. — P. 25 702 576.
- Brillowska-Dabrowska A., Nielsen S.S., Nielsen N.V. et al. Optimized 5hour multiplex PCR test for the detection of tinea unguinum: performance in a routine PCR laboratory. // Medical Mycology. 2010. — № 48. — P. 828−831.
- Brouta F., Descamps F., Monod M. et al. Secreted metalloprotease gene family of Microsporum canis. // Infection and Immunity. 2002. — P. 56 765 683.
- Budak A., Macura A.B., Mazur T. et al. Fungal species isolated from skin and nail lesions of hands and feet of patients suspected of mycotic infection. // Mykosen. 1987. -№ 30. — P. 434−439.
- Chang A., Wharton J., Tarn S. et al. A modified approach to the histologic diagnosis of onychomycosis. // J Am Acad Dermatol. 2005. — № 57. — P. 849−853.
- Crespo Erchiga V. Casanas Carrillo C., Ojeda Martos A. et al. Examen direct versus culture. Etude sur 1115 cas de dermatomycoses. // J Mycol Med. -1999.-№ 9.-P. 154−157.
- Dawber R.P.R. The ultrastructure and growth of human nails. // Arch Dermatol Res. -1980. № 269. — P. 197−204.
- De Vries G.A. Keratinophilic fungi and their action. // Antonie van Leeuwenhoek. 1962. -№ 28. — P. 121−133.
- Dominik T., Inhatowicz A., Kopylow H. et al. Mycoflore of sand boxes in kindergardens in Szczecin. // Ekologia Polska. 1973. — № 21. — P. 901−923.
- Ebihara M., «Makimura K., Sato K. et al. Molecular detection of dermatophytes and nondermatophytes in onichomycosis by nested polymerase chain reaction based on 28S ribosomal RNA gene. // British Journal of Dermatoljgy. 2009.-№ 161.-P. 1038−1044. «
- Ellis D.H. Watson A.B., Marley J.E. et al. Non-dermatophytes in onychomycosis of the toenails. // British Journal of Dermatoljgy. 1997. — № 136. — P. 490493.
- El-Naghy M.A., El-Ktatny M.S., Fadl-Allah E.M. et al. Degradation of chicken feathers by Chrysosporium georgia. II Mycopathologia. 1998. — № 143.-P. 77−84.
- English M.P. The saprophytic growth of keratinophilic fungi on keratin. // Sabouraudia. 1963. — № 2. — P. 115−130.
- English M.P. The saprophytic growth of non-keratinophilic fungi onkeratinized substrata and a comparison with keratinophilic fungi. // Trans Br
- Mycol Soc. 1965. — № 48. — P. 219−235.
- English M.P. The developmental morphology of the perforating organs and eroding mycelium of dermatophytes. // Sabouraudia. — 1968. № 6. — P. 218 227.
- English M.P. Destruction of hair by Chrysosporium keratinophilum. I I Transactions of the British Mycological Society. 1969. — № 52. — P. 247−255.
- English M.P. Destruction of hair by two species of Chrysosporium. II Transactions of the British Mycological Society. 1976. — № 66. — P. 357−358.
- English M.P. Nails and fungi. // British Journal of Dermatoljgy. 1976. — № 94.-P. 699−700.
- Filipello Marchisio V. Curetti V., Cassinelli C. et al. Keratinolytic and keratinophilic fungi in the soil of Papua New Guinea. // Mycopathologia. -1991.-№ 115. -P. 113−120.
- Filipello Marchisio V., Fusconi A., Rigo S. Keratinolysis and its morphological expression in hair digestion by airbone fungi. // Mycopathologia. 1994. — № 127. — P. 103−115.
- Filipello Marchisio V. Keratinophilic fungi: their role in nature and degradation of keratinic substrates. // Revista Iberoamericana de Micologia. -2000.-P. 86−92.
- Filipello Marchisio V., Fusconi A., Querio F.L. Scopulariopsis brevicaulis: a keratinophilic or a keratinolytic fungus? // Mycoses. 2000. — V. 43, № 7−8, P. 281−292.
- Friedrich J., Gradisar H., Mandin D. et al. Screening fungi for synthesis of keratinolytic enzymes. // Letters in Applied Microbiology. 1999. — № 28. — P. 127−130.
- Gentles J.C. Laboratory investigations of dermatophyte infections of nails. // Sabouraudia. 1971. — № 9. — P. 149−152.
- Greer D.L. Evolving role of nondermatophytes in onychomycosis. // Int J Dermatol. 1995. № 34. — 521−524.
- Griffin D.M. Fungal colonization of sterile hair in contact with soil. // Trans Br Mycol Soc. 1960. — № 43. — P. 583−596.
- Gromadzki S., Ramani R., Chaturvedi V. Evaluation of new medium for identification of dermatophytes and primary dimorphic pathogens. // J. Clin. Microbiol. 2003. — V. 41, № 1. — P. 467−468.
- Gugnani H.C., Vijayan V.K., Tyagi P. et al. Onychomycosis due to Emericella quadrilineata. II J Clin Microbiol. 2004. — V.42, № 2. — P. 914 916.
- Gupta A.K., Jain H.C., Lynde C.W. et al. Prevalence and epidemiology of unsuspected onychomycosis in patients visiting dermatologists offices in Ontario, Canada a multicentre survey of 2001 patients. // Int.J. Dermatol. — 1997.-№ 26.-P. 783−787.
- Gupta A.K., Cooper E.A., McDonald P. et al. Inoculum counting (Walshe/English criteria) in the clinical diagnosis of onychomycosis caused by nondermatophytic filamentous fungi. // J Clin Microbiol. 2000. — № 39. — P. 2115−2121.
- Gupta R., Ramnani P. Microbial keratinases and their perspective applications: an overview, // Appl Microbiol Biotechnol. 2006. — № 4. — P. 1— 13.
- Gutcho S J. Microbial Enzyme Production. // Molecular nutrition. 1974— 456 p.
- Hattori M., Yoshiura K., Negi M. et al. Keratinolytic proteinase prodused by Candida albicans. II Sabouraudia: J Med Vet Mycology. 1984. — № 22. -P. 175−183.
- Hilmioglu-Polat S., Metin D.Y., Inci R. et al. Non-dermatophytic molds as agents of onychomycosis in Izmir, Turkey — a prospective study. // Mycopathologia. — 2005. — № 160.-P. 125−128.
- Kanbe T. Molecular approaches in the diagnosis of dermatophytosis. // Mycopathologia. 2008. — V. 166, № 5−6. — P. 307−317.
- Karimzadegan-Nia M., Mir-Amin-Mohammadi A.- Bouzari N. et al. Comparison of direct smear, culture and histology for the diagnosis of onychomycosis. // Australasian Journal of Dermatology. 2007. — № 48. — P. 18−21.
- Kaul S., Sumbali G. Keratinolysis by poultry1 farm soil fungi. // Mycopathologia. 1997. — № 139. — P. 137−140.
- Kaul S., Sumbali G. Production of extracellular keratinases by keratinophilic fungal species inhabiting feathers of living poultry birds (Gallus domesticus): A comparison. // Mycopathologia. 1999. — № 146. — P. 19−24.
- Kunert J. Keratin decomposition by dermatophytes, I: sulfite production as a possible way of substrate decomposition. // Z Allg Microbiol. 1973. — V. 13,6.-P."489498»
- Kunert J. Biology of dermatophytes and other keratinophilic fungi. / R.K.S. Kushwaha, J. Guarro // Physiology of keratinophilic fungi. Bilbao: Revista Iberoamericana de Micologia. 2000. — P. 77−85.
- Kushwaha R. K. S., Gupta P. Relevance of keratinophilic fungi. // Current Science. 2008. -V. 94, № 6. — P.706−707.
- Lawry M.A., Haneke E., Strobeck K. et al. Methods for diagnosing onychomycosis: a comparative study and review of the literature. // Arch Dermatol.-2000.-№ 136.-P. 1112−1116.
- Lin X., Lee C.-G., Casale E. et al. Purification and characterization of a keratinase from a feather-degrading Bacillus licheniformis strain. // Applied Env. Microbiology. 1992. — V. 58, № 10. — P. 3271−3275.
- Lin X., Tang J., Koelsch G. et al. Recombinant Canditropsin, an extracellular aspartic protease from yeast Candida tropicalis. // J. Biol. Chem. 1993. -№ 268. — P. 20 143−20 147.
- Marcondes N. R., Taira C.L., Vandresen D.C. et al. New feather-degrading filamentous fungi. // Microb Ecol. 2008. — № 56. — P. 13−17.
- Mercantini R., Marsella R., Moretto D. Onychomycosis in Rome, Italy. // Mycopathologia. 1996. — № 136. — P. 25−32.
- Midgley G., Moore M.K., Cook C. et al. Mycology of nail disorders. // J Am Acad Dermatol. 1994. — № 31. — P. 68−74.
- Mitola G., Escalona F., Salas R. et al. Morphological characterization of in-vitro human hair keratinolysis, produced by identified wild strains of Chrysosporium species. // Mycopathologia. 2002. — № 156. — P. 163−169.
- Monod M., Capoccia S., Lechenne B. et al. Secreted proteases from pathogenic fungi. // Int. J. Med. Microbiol. 2002 — № 292. — P. 405−419.
- Monod M., Lechenne B., Jousson O. et al. Aminopeptidases and dipeptidyl-peptidases secreted by the dermatophyte Trichophyton rubrum. ll Microbiology.-2005.-№ 151.-P. 145−155.
- Monod M. Secreted Proteases from Dermatophytes. I I Mycopathologia. -2008. № 166. — P. 285−294.
- Naka W., Hanyaku H., Tajima S. et al. Application of neutral red staining for evaluation of the viability of dermatophytes and Candida in human skin scales. // J Med Vet Mycol. 1994. — № 32. — P. 31−35.
- Negi M., Tsuboi R., Matsui T. et al. Isolation and characterization of proteinase from Candida albicans: substrate specificity. // J. Investig. Dermatol. 1984. -№ 83. — P. 32−36
- Rajak R.C., Parwekar S., Malviya H. et al. Keratin degradation by fungi isolated from the grounds of a gelatin factory in Jabalpur, India. // Mycopathologia. 1991. — № 114. — P. 83−87.
- Robert R., Pihet M. Conventional methods for the diagnosis of dermatophytosis. // Mycopathologia. 2008. — V. 166, № 5−6. — P. 295−306.
- Ruffin P. Andrieu S., Biserte G. et al. Sulfitolysis in keratinolysis: biochemical proof. // Sabouraudia. 1976. -№ 14. — P. 181−184.
- Scherer W.P., McCreary J.P., Hayes W.W. The diagnosis of onychomycosis in a geriatric population. A study of 450 cases in south Florida. // J Am Podiatr Med Assoc. 2001. — № 91. — P. 456−464.
- Scott J.A., Untereiner W.A. Determination of keratin degradation by fungi using keratin azure. // Medical Mycology. 2004. — № 42. — P. 239 -246.
- Shemer A., Davidovici B., Grunwald M.H. et al. New criteria for the• ilaboratory diagnosis of nondermatophyte moulds in onychomycosis. // British Journal of Dermatology. 2009. — № 160. — P. 37−39.
- Shu-hui Tan C., Hoekstra E.S., Samson R.A. Fungi that cause superficial mycoses. Centraalbureau voor Schimmelcultures, Baarn. In collaboration with the Dr. Paul Janssen Medical Institute. 1994. — 108 p.
- Summerbell R.C. Epidemiology and ecology of onychomycosis. // Dermatology. 1997. — № 194 (Suppl. 1). — P. 32−36.
- Summerbell R.C., Kane J. Physiological and other special tests for identifying dermatophytes. // Laboratory handbook of dermatophytes. -Belmont CA: Star Publishing, 1997. P. 45−77.
- Summerbell R.C. Nondermatophytic fungi causing onychomycosis and tinea // Laboratory Handbook of Dermatophytes. — Belmont CA: Star Publishing, 1997.-P. 213−259.
- Summerbell R.C., Cooper E., Bunn U. et al. Onychomycosis: a critical study of techniques and criteria for confirming the etiologic significance of nondermatophytes. // Medical Mycology. 2005. — № 43. — P. 39−59.
- Thomas J., Jacobson G.A., Narkowicz C.K. et al. Toenail onychomycosis: an important global disease Burden. // Journal of Clinical Pharmacy and Therapeutics. 2010. — № 35. — P. 497−519.
- Vanbreuseghem R. Keratin digestion by dermatophytes: a specific diagnostic method. // Mycologia. 1952. — № 44. — P. 176−182.
- Walker H.K., Dallas Hall W., Willis Hurst J. Clinical Methods, 3rd edition. The History, Physical, and Laboratory Examinations. // The Skin and Appendages. Nails. 1990.
- Walshe M.M., English M.P. Fungi in nails. // British Journal of Dennatoljgy. 1966. — № 78. — P. 198−207.
- Wawrzkiewicz K., Lobarzewski J., Wolski T. Intracellular keratinase of Trichophyton gallinae. // Medical Mycology. 1987. — V. 25, № 4. — P. 261 -268.
- Wawrzkiewicz K., Wolski T., Lobarzewski J. Screening the keratinolytic activity of dermatophytes in vitro. // Mycopathologia. 1991. — № 114. — P. 18.
- Weinberg J.M., Koestenblatt E.K., Tutrone W.D. et al. Comparison of diagnostic methods in the evaluation of onychomycosis. // J Am Acad Dermatol. 2003». -№ 49. -P. 193−197.
- Zaias N. The nail in health and disease. // MTP Press Limited International Medical Publisher Miami Beach. 1980.