Перенос генов в клетки костного мозга с помощью лентивирусных векторов ex vivo

выводы.

1. In vitro лентивирусный HIV-вектор способен эффективно трансдуцировать клетки костного мозга, тогда как FIV-вектор оказывает токсический эффект на эти клетки. HIV-вектор с промотором MSCV, в отличие от такового с промотором CMV, обеспечивает лучшую экспрессию трансгена в культуре клеток костного мозга.

2. Показана стабильная экспрессия (в течение 3-х мес.) трансгенов в фибробластах мыши NIH/3T3, трансдуцированных с помощью лентивирусных HIV-векторов.

3. Впервые методом селезеночных колоний показано, что лентивирусные HIV-векторы способны с высокой эффективностью трансдуцировать КОЕ-с ех vivo и в составе генома передаваться их потомкам. Морфологический и иммуноцитохимический анализ клеток селезеночных колоний не выявил различий в таковых, образованных трансдуцированными и нетрансдуцированными клетками костного мозга. Это свидетельствует об отсутствии выраженного негативного влияния использованных векторов на процесс гемопоэза в колониях.

4. Лентивирусный HIV-вектор способен трансдуцировать ex vivo костномозговые клетки-предшественники, находящиеся на разных ступенях иерархии гемопоэтических клеток, в том числе и стволовые. При этом процесс трансдукции не влияет на потенциал гемопоэтических стволовых клеток репопулировать костный мозг и кровь летально облученных животных. Трансген, доставленный в клетки костного мозга с помощью HIV-вектора, сохраняется в геноме клеток-«мишеней» как минимум в течение одного года.

Выражаю глубокую признательность своим научным руководителям Тарараку Эдуарду Михайловичу и Власик Татьяне Николаевне, а также Ильинской Ольге Петровне за внимательное руководство, постоянную помощь и поддержку как при планировании и проведении экспериментов, так и при оформлении работы, за искреннее участие в моей научной карьере.

Особую благодарность приношу сотруднику лаб. клеточной инженерии Павлу Руткевичу за участие и постоянную помощь при проведении экспериментов по трансфекции и трансдукции клеток.

Искреннюю благодарность выражаю Татьяне Арефьевой за помощь при проведении цитофлуориметрического анализа, а также за постоянную поддержку и готовность поделиться научным опытом.

Глубокую признательность выражаю сотрудникам лаборатории генной инженерии Игорю Николаевичу Рыбалкину и Татьяне Гурской, а также сотруднице нашей лаборатории Валентине Шишкиной за неоценимую помощь при проведении ПЦР-анализа.

Огромное спасибо сотрудникам нашей лаборатории Валентине Шишкиной и Артему Козлову за помощь при проведении экспериментов по получению селезеночных колоний и длительному восстановлению кроветворения у летально облученных мышей.

Искреннюю благодарность выражаю также Александру Ясеновичу Шевелеву, Михаилу Михайловичу Пекло, Нине Иосифовне Дризе, Владимиру Соколову, Елене Ромуальдовне Андреевой, Дмитрию Анатольевичу Ковалевскому, Юрию Аскольдовичу Романову, Элине Чермных, а также всем сотрудникам лаб. клеточной инженерии и молекулярной и клеточной кардиологии за разностороннюю помощь и консультации.

1. Ильинская О. П., Кудряшова Е. Ю., Антропова Ю. Г., Калинина Н. И., Соломатина М. А., Бобик А., Тарарак Э. М. Происхождение клеток неоинтимы, образованной в сонных артериях крыс после балонной ангиопластики // Цитология. 2003. — № 7. — С. 678−689.

2. Прасолов B.C., Иванов Д. С. Реторовирусные векторы в генной терапии. // Вопросы медицинской химии. 2000. — № 3. — С. 1−14.

3. Соболева Э. Л., Попкова В. М. Гемопоэтические клетки-предшественники (КОЕ-ГМ) в интиме атероматозной аорты человека. // Бюлл. эксп. биол. мед. 1989. — № 5. — С.600−604.

4. Спирин П. В., Вильгельм А. Э., Прасолов B.C. Лентивирусные векторы. Молекулярная биология. 2008. — № 5. — С.913−926.

5. Хрущов Н. Г. Тканевые системы со стволовыми клетками. Онтогенез. — 1991. № 2. — С.118−124.

6. Чертков И. Л., Фриденштейн А. Я. Клеточные основы кроветворения. М.: «Медицина», — 1977. — 8−27с.

7. Adam P.J., Clesham G.J., Weissberg P.L. Expression of endoglin mRNA and protein in human vascular smooth muscle cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. — Vol. 247. — P. 33−47.

8. Anderson W.F. Prospects for human gene therapy // Science. 1984. — Vol. 226.-P. 401−409.

9. Anson D.S. The use of retroviral vectors for gene therapy-what are the risks? A review of retroviral pathogenesis and its relevance to retroviral vector-mediated gene delivery // Genet. Vaccines Ther. — 2004. Vol. 2. — P. 9.

10. Asahara Т., Murohara Т., Sullivan A., Silver M., van der Zee R., Li Т., Witzenbichler В., Schatteman G., Isner J.M. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis // Science. — 1997. Vol. 275. — P. 964−967.

11. Ashman L.K., Cambareri A.C., To L.B., Levinsky R.J., Juttner C.A. Expression of the YB5. B8 antigen (c-kit proto-oncogene product) in normal human bone marrow//Blood. 1991. — Vol. 78. — P. 30−37.

12. Baddoo M., Hill K., Wilkinson R., Gaupp D., Hughes C., Kopen G.C., Phinney D.G. Characterization of mesenchymal stem cells isolated from murine bone marrow by negative selection // J. Cell. Biochem. — 2003. Vol. 89. — P. 12 351 249.

13. Barbara N.P., Wrana J.L., Letarte M. Endoglin is an accessory protein that interacts with the signaling receptor complex of multiple members of the transforming growth factor-beta superfamily // J. Biol. Chem. 1999. — Vol. 274.-P. 584−594.

14. Bastide C.3 Maroc N., Bladou F., Hassoun J., Maitland N., Mannoni P., Bagnis C. Expression of a model gene in prostate cancer cells lentivirally transduced in vitro and in vivo // Prostate Cancer Prostatic Dis. — 2003. Vol. 6. — P. 228 234.

15. Bengel F.M., Schachinger V., Dimmeler S. Cell-based therapies and imaging in cardiology // Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 2005. — Vol. 32. — P. 404 416.

16. Besmer P. The kit ligand encoded at the murine Steel locus: a pleiotropic growth and differentiation factor // Curr. Opin. Cell Biol. 1991;3(6):939−46.

17. Blasi F., Carmeliet P. uPAR: a versatile signalling orchestrator // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2002. — Vol. 3. — P. 932−943.

18. Blechman J.M., Lev S., Givol D., Yarden Y. Structure-function analyses of the kit receptor for the steel factor // Stem Cells. 1993. — Vol. 11. — P. 12−21.

19. Bradfute S.B., Graubert T.A., Goodell M.A. Roles of Sca-1 in hematopoietic stem/progenitor cell function // Exp. Hematol. 2005. — Vol. 33. — P. 836−843.

20. Brown J., Greaves M.F. Molgaard H.V. The gene encoding the stem cell antigen, CD34, is conserved in mouse and expressed in haemopoietic progenitor cell lines, brain, and embryonic fibroblasts // Int. Immunol. — 1991. -Vol.3.-P. 175−184.

21. Buchschacher G.L. Jr., Wong-Staal F. Development of lentiviral vectors for gene therapy for human diseases // Blood. 2000. — Vol. 95. — P. 2499−2504.

22. Bunting K.D. ABC transporters as phenotypic markers and functional regulators of stem cells // Stem Cells. 2002. — Vol. 20. — P. 274.

23. Challita P.M. and Kohn D.B. Lack of expression from a retroviral vector after transduction of murine hematopoietic stem cells is associated with methylation in vivo //Proc. Natl. Acad. Sci. 1994. — Vol. 91. — P. 2567−2571.

24. Chang A.H., Stephan M.T., Lisowski L., Sadelain M. Erythroid-specific human factor IX delivery from in vivo selected hematopoietic stem cells following nonmyeloablative conditioning in hemophilia В mice // Mol. Ther: — 2008. Vol. 16. — P. 1745−1752.

25. Chaudhary P.M., Roninson I.B. Expression and activity of P-glycoprotein, a multidrug efflux pump, in human hematopoietic stem cells // Cell. 1991. -Vol. 66.-P. 85−94.

26. Chen C.Z., Li L., Li M., Lodish H.F. The endoglin (positive) sca-1 (positive) rhodamine (low) phenotype defines a near-homogeneous population of long-term repopulating hematopoietic stem cells // Immunity. — 2003. Vol. 19. — P. 525−533.

27. Chen H., Yao H., Huang L., Shen Q., Jia W., Xue J. Expression of human factor IX gene in murine plasma through lentiviral vector-infected haematopoietic stem cells // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2006. — Vol. 33. — P. 1196−1201.

28. Chen W., Wu X., Levasseur D.N., Liu H., Lai L., Kappes J.C., Townes T.M. Lentiviral vector transduction of hematopoietic stem cells that mediate long-term reconstitution of lethally irradiated mice // Stem Cells. 2000. — Vol. 18. -P. 352−359.

29. Chen W., Wu X., Levasseur D.N., Liu H., Lai L., Kappes J.C., Townes T.M. Lentiviral vector transduction of hematopoietic stem cells that mediate long-term reconstitution of lethally irradiated mice // Stem Cells. 2000. — Vol. 18. -P. 352−359.

30. Cheng J., Baumhueter S., Cacalano G., Carver-Moore K., Thibodeaux H., Thomas R., Broxmeyer H.E., Cooper S., Hague N., Moore M., Lasky L.A. Hematopoietic defects in mice lacking the sialomucin CD34 // Blood. 1996. -Vol. 87.-P. 479−490.

31. Choi J.K., Hoang N., Vilardi A.M., Conrad P., Emerson S.G., Gewirtz A.M. Hybrid HIV/MSCV LTR enhances transgene expression of lentiviral vectors in human CD34(+) hematopoietic cells // Stem Cells. 2001. — Vol. 19. — P. 236 246.

32. Ciuffi A. Mechanisms governing lentivirus integration site selection // Curr. Gene Ther. 2008. — Vol. 8. — P. 419−429.

33. Clowes A.W., Reidy M.A., Clowes M.M. Mechanisms of stenosis after arterial injury // Lab. Invest. 1983. — Vol. 49. — P. 208−215.

34. Clowes A.W., Reidy M.A., Clowes M.M. Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. I. Smooth muscle growth in the absence of endothelium // Lab. Invest. 1983. — Vol. 49. — P. 327−333.

35. Conte M.S., Birinyi L.K., Miyata Т., Fallon J.T., Gold H.K., Whittemore A.D., Mulligan R.C. Efficient repopulation of denuded rabbit arteries withautologous genetically modified endothelial cells // Circulation. 1994. — Vol. 89.-P. 2161−2169.

36. Copreni E., Penzo M., Carrabino S., Conese M. Lentivirus-mediated gene transfer to the respiratory epithelium: a promising approach to gene therapy of cystic fibrosis // Gene Ther. 2004. — Vol. 11. — P. 67−75.

37. Curran M.A., Kaiser S.M., Achacoso P.L., Nolan G.P. Efficient transduction of nondividing cells by optimized feline immunodeficiency virus vectors // Mol. Ther. -2000. Vol. 1.-P. 31−38.

38. Dalle В., Rubin J.E., Alkan O., Sukonnik Т., Pasceri P., Yao S., Pawliuk R., Leboulch P., Ellis J. eGFP reporter genes silence LCRbeta-globin transgene expression via CpG dinucleotides // Mol. Ther. 2005. — Vol. 11. P. 591−599.

39. Dzau V.J., Braun-Dullaeus R.S., Sedding D.G. Vascular proliferation and atherosclerosis. New perspectives and therapeutic strategies // Nat. Med. -2002. Vol. 8. — P. 1249−1256.

40. Escribano L., Ocqueteau M., Almeida J., Orfao A., San Miguel J.F. Expression of the c-kit (CD117) molecule in normal and malignant hematopoiesis // Leuk. Lymphoma. 1998. — Vol. 30. — P. 459−466.

41. Fassler R. Lentiviral transgene vectors // EMBO Rep. 2004. — Vol. 5. — P. 2829.

42. Fina L., Molgaard H.V., Robertson D., Bradley N.J., Monaghan P., Delia D., Sutherland D.R., Baker M.A., Greaves M.F. Expression of the CD34 gene in vascular endothelial cells // Blood. 1990. Vol. 75. — P. 2417−2426.

43. Fritsch G., Stimpfl M., Kurz M., Printz D., Buchinger P., Fischmeister G., Hoecker P., Gadner H. The composition of CD34 subpopulations differs between bone marrow, blood and cord blood // Bone Marrow Transplant. -1996. Vol. 17.-P. 169−178.

44. Gallay P., Hope Т., Chin D., Trono D. HIV-1 infection of nondividing cells through the recognition of integrase by the importin/karyopherin pathway // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1997. Vol. 94. — P. 9825−9830.

45. Gaspar H.B., Parsley K.L., Howe S., King D., Gilmour K.C., Sinclair J., Brouns G., Schmidt M., Von Kalle C., Barington Т., Jakobsen M.A.,.

46. Geraerts M., Eggermont K., Hernandez-Acosta P., Garcia-Verdugo J.M., Baekelandt V., Debyser Z. Lentiviral vectors mediate efficient and stable gene transfer in adult neural stem cells in vivo // Hum. Gene Ther. 2006. — Vol. 17. -P. 635−650.

47. Gonzalez-Murillo A., Lozano M.L., Montini E., Bueren J.A., Guenechea G. Unaltered repopulation properties of mouse hematopoietic stem cells transduced with lentiviral vectors // Blood. 2008. — Vol. 112. — P. 3138−3147.

48. Gough P.J., Raines E.W. Advances in retroviral transduction of hematopoietic stem cells for the gene therapy of atherosclerosis // Curr. Opin. Lipidol. -2003.-Vol. 14.-P. 491−497.

49. Gough P.J., Raines E.W. Gene therapy of apolipoprotein E-deficient mice using a novel macrophage-specific retroviral vector // Blood. — 2003. Vol. 101.-P. 485−491.

50. Gougos A., Letarte M. Biochemical characterization of the 44G4 antigen from the HOON pre-B leukemic cell line // J. Immunol. 1988. — Vol. 141. — P. 1934;1940.

51. Gougos A., Letarte M. Primary structure of endoglin, an RGD-containing glycoprotein of human endothelial cells // J. Biol. Chem. 1990. — Vol. 265. -P. 8361−8364.

52. Gropp M., Reubinoff B. Lentiviral vector-mediated gene delivery into human embryonic stem cells // Methods Enzymol. 2006. — Vol. 420. — P. 64−81.

53. Guenechea G., Segovia J.C., Bueren J.A. Immunomagnetic enrichment of human and mouse hematopoietic stem cells for gene therapy applications // Methods Mol. Biol. 2009. — Vol. 506. — P. 1−11.

54. Handa M., Li W., Morioka K., Takamori A., Yamada N., Ihaya A. Adventitial delivery of platelet-derived endothelial cell growth factor gene prevented • intimal hyperplasia of vein graft // J. Vase. Surg. 2008. Vol. 48. -P. 15 661 574.

55. Hasegawa S., Becker G., Nagano H., Libby P., Mitchell R.N. Pattern of graft-and host-specific MHC class II expression in long-term murine cardiac allografts: origin of inflammatory and vascular wall cells // Am. J. Pathol. — 1998.-Vol. 153.-P. 69−79.

56. Hewlett I.K., Geyer S.J., Hawthorne C.A., Ruta M., Epstein J.S. Kinetics of early HIV-1 gene expression in infected H9 cells assessed by PCR // Oncogene. 1991. — Vol. 6. — P. 491−493.

57. Hillebrands J.L., Klatter F.A., van den Hurk B.M.H., Popa E.R., Nieuwenhuis P., Rozing J. Origin of neointimal endothelium and a-actin-positive smooth muscle cells in transplant arteriosclerosis // J. Clin. Invest. 2001. — Vol. 107/ -P.1411−1422.

58. Hofmann A., Kessler В., Ewerling S., Kabermann A., Brem G., Wolf E., Pfeifer A. Epigenetic regulation of lentiviral transgene vectors in a large animal model // Mol. Ther. 2006. — Vol. 13. — P. 59−66.

59. Horn P.A., Keyser K.A., Peterson L.J., Neff Т., Thomasson B.M., Thompson J., Kiem H.P. Efficient lentiviral gene transfer to canine repopulating cells using an overnight transduction protocol // Blood. 2004. Vol. 103. — P. 3710−3716.

60. Ihle J.N., Keller J., Henderson L., Klein F. and Palaszynski E. Procedures for the purification of interleukin 3 to homogeneity // J. Immunol. 1982. — Vol. 129.-P. 2431−2436.

61. Ito C.Y., Li C.Y., Bernstein A., Dick J.E., Stanford W.L. Hematopoietic stem cell and progenitor defects in Sca-l/Ly-6A-null mice // Blood. 2003. — Vol. 101.-P. 517−523.

62. Ito Т., Tajima F., Ogawa M. Developmental changes of CD34 expression by murine hematopoietic stem cells // Exp. Hematol. 2000. — Vol. 28. — P. 12 691 273.

63. Jakobsson J., Rosenqvist N., Thompson L., Barraud P., Lundberg C. Dynamics of transgene expression in a neural stem cell line transduced with lentiviral vectors incorporating the cHS4 insulator // Exp. Cell Res. 2004. — Vol. 298. — P. 611−623.

64. Jones P.L., Veenstra G.J., Wade P.A., Vermaak D., Kass S.U., Landsberger N., Strouboulis J., Wolffe A.P. Methylated DNA and MeCP2 recruit histone deacetylase to repress transcription // Nat. Genet. — 1998. Vol. 19. — P. 187 191.

65. Kafri Т., Blomer U., Peterson D.A., Gage F.H., Verma I.M. Sustained expression of genes delivered directly into liver and muscle by lentiviral vectors //Nat. Genet. 1997. — Vol. 17. — P. 314−317.

66. Katayama N., Shih J.P., Nishikawa S., Kina Т., Clark S.C., Ogawa M. Stage-specific expression of c-kit protein by murine hematopoietic progenitors // Blood. 1993. — Vol. 82. — P. 2353−60.

67. Kissler S., Stern P., Takahashi K., Hunter K., Peterson L.B., Wicker L.S. In vivo RNA interference demonstrates a role for Nrampl in modifying susceptibility to type 1 diabetes // Nat. Genet. 2006. — Vol. 38. — P. 479−483.

68. Klein R., Ruttkowski В., Knapp E., Salmons В., Gunzburg W.H., Hohenadl C. WPRE-mediated enhancement of gene expression is promoter and cell line specific // Gene. 2006. — Vol. 372. — P. 153−161.

69. Klug C.A., Cheshier S., Weissman I.L. Inactivation of a GFP retrovirus occurs at multiple levels in long-term repopulating stem cells and their differentiated progeny // Blood. 2000. — Vol. 96. — P. 894−901.

70. Kohn D.B. Gene therapy for genetic haematological disorders and immunodeficiencies // J. Intern. Med. 2001. — Vol. 249. — P. 379−390.

71. Krause D.S., Ito Т., Fackler M.J., Smith O.M., Collector M.I., Sharkis S.J., May W.S. Characterization of murine CD34, a marker for hematopoietic progenitor and stem cells // Blood. 1994. — Vol. 84. — P. 691−701.

72. Kuhn U., Terunuma A., Pfutzner W., Foster R.A., Vogel J.C. In vivo assessment of gene delivery to keratinocytes by lentiviral vectors // J. Virol. 2002. Vol. 76. — P. 1496−1504.

73. Kyrkanides S., Miller J.H., Federoff H.J. Systemic FIV vector administration: transduction of CNS immune cells and Purkinje neurons // Brain Res. Mol. Brain Res. 2003. — Vol. 119. — P. 1−9.

74. Laflamme M.A., Murry C.E. Regenerating the heart // Nat. Biotechnol. 2005. -Vol. 23.-P. 845−856.

75. Lastres P., Bellon Т., Cabanas C., Sanchez-Madrid F., Acevedo A., Gougos A., Letarte M., Bernabeu C. Regulated expression on human macrophages of endoglin, an Arg-Gly-Asp-containing surface antigen // Eur. J. Immunol. 1992. -Vol. 22.-P. 393−397.

76. Li C.L., Johnson G.R. Murine hematopoietic stem and progenitor cells: I. Enrichment and biologic characterization // Blood. 1995. — Vol. 85. — P. 1472−1479.

77. Li C.L., Johnson G.R. Rhodaminel23 reveals heterogeneity within murine Lin, Sca-1+ hemopoietic stem cells // J. Exp. Med. 1992. — Vol. 175. — P. 14 431 447.

78. Li J., Han X., Jiang J., Zhong R., Williams G.M., Pickering J.G., Chow L.H. Vascular smooth muscle cells of recipient origin mediate intimal expansion after aortic allotransplantation in mice // Am. J. Pathol. — 2001. Vol. 158. — P. 1943;1947.

79. Li S., Kimura E., Fall B.M., Reyes M., Angello J.C., Welikson R., Hauschka S.D., Chamberlain J.S. Stable transduction of myogenic cells with lentiviral vectors expressing a minidystrophin // Gene Ther. 2005. — Vol. 12. — P. 10 991 108.

80. Liang M., Pariente N., Morizono K., Chen I.S. Targeted transduction of CD34+ hematopoietic progenitor cells in nonpurified human mobilized peripheral blood mononuclear cells // J. Gene Med. — 2009. Vol. 11. — P. 185 196.

81. Lin G., Finger E., Gutierrez-Ramos J.C. Expression of CD34 in endothelial cells, hematopoietic progenitors and nervous cells in fetal and adult mouse tissues//Eur J Immunol. 1995. — Vol. 25.-P. 1508−1516.

82. Linton M.F., Atkinson J.B., Fazio S. Prevention of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice by bone marrow transplantation // Science. — 1995.-Vol. 267.-P. 1034−1037.

83. Lynch C.M., Clowes M.M., Osborne W.R., Clowes A.W., Miller A.D. Long-term expression of human adenosine deaminase in vascular smooth muscle cells of rats: a model for gene therapy // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1992. -Vol. 89. 1138−1142.

84. Matsuzaki Y., Kinjo K., Mulligan R.C., Okano H. Unexpectedly efficient homing capacity of purified murine hematopoietic stem cells // Immunity. -2004.-Vol. 20.-p. 87−93.

85. Miller A.M., McPhaden A.R., Wadsworth R.M., Wainwright C.L. Inhibition by leukocyte depletion of neointima formation after balloon angioplasty in a rabbit model of restenosis // Cardiovasc. Res. 2001. — Vol. 49. — P. 838−850.

86. Miyamoto Т., Sasaguri Y., Sasaguri Т., Azakami S., Yasukawa H., Kato S., Arima N., Sugama K., Morimatsu M. Expression of stem cell factor in human aortic endothelial and smooth muscle cells // Atherosclerosis. 1997. — Vol. 129.-P. 207−213.

87. Miyatake S. Gene therapy using tissue-specific replication competent HSV // Hum. Cell.-2002.-Vol. 15.-P. 130−137.

88. Miyoshi H., Smith K.A., Mosier D.E., Verma I.M., Torbett B.E. Transduction of human CD34+ cells that mediate long-term engraftment of NOD/SCID mice by HIV vectors // Science. 1999. — Vol. 283. — P. 682−686.

89. Modlich U., Schambach A., Brugman M.H., Wicke D.C., Knoess S., Li Z., Maetzig Т., Rudolph G., Schlegelberger В., Baum C. Leukemia induction after a single retroviral vector insertion in Evil or Prdml6 // Leukemia: 2008. -. Vol. 22.-P. 1519−1528.

90. Mulligan R.C. The basic science of gene therapy // Science. 1993. — Vol. 260. -P. 926−932.

91. Muul L.M., Tuschong L.M., Soenen S.L., Jagadeesh G.J., Ramsey W.J., Long Z., Carter C.S., Garabedian E.K., Alleyne M., Brown M., Bernstein W.,.

92. Nabel E.G., Plautz G., Nabel G.J. Site-specific gene expression in vivo by direct gene transfer into the arterial wall // Science. 1990. — Vol. 249. — P. 1285−1288.

93. Nabel E.G., Gordon D., Yang Z.Y., Xu L., San H., Plautz G.E., Wu B.Y., Gao X., Huang L., Nabel G.J. Gene transfer in vivo with DNA-liposome complexes: lack of autoimmunity and gonadal localization // Hum. Gene Ther. 1992.-Vol.3.-P. 649−656.

94. Nabel E.G., Plautz G., Boyce F.M., Stanley J.C., Nabel G.J. Recombinant gene expression in vivo within endothelial cells of the arterial wall // Science. — 1989. Vol. 244. — P. 1342−1344.

95. Nakamura Y., Komano H., Nakauchi H. Two alternative forms of cDNA encoding CD34 // Exp. Hematol. 1993. — Vol. 21. — P. 236−242.

96. Nakauchi H., Takano H., Ema H., Osawa M. Further characterization of CD34-low/negative mouse hematopoietic stem cells // Ann. N Y Acad. Sci. 1999. -Vol. 872.-P. 57−66.

97. Nakauchi H. Isolation and characterization of the hematopoietic stem cell. // Rinsho Ketsueki. 1995. — Vol. 36. — P. 400−405.

98. Neschadim A., McCart J.A., Keating A., Medin J.A. A roadmap to safe, efficient, and stable lentivirus-mediated gene therapy with hematopoietic cell transplantation // Biol Blood Marrow Transplant. 2007. — Vol. 13. — P. 14 071 416.

99. Novelli E.M., Ramirez M., Civin C.I. Biology of CD34+CD38- cells in lymphohematopoiesis // Leuk. Lymphoma. — 1998. Vol. 31. — P. 285−293.

100. Okada S., Nakauchi H., Nagayoshi K., Nishikawa S., Miura Y., Suda T. In vivo and in vitro stem cell function of c-kitand Sca-1-positive murine hematopoietic cells // Blood. 1992. — Vol. 80. — P. 3044−3050.

101. Okada S., Nakauchi H., Nagayoshi K., Nishikawa S., Nishikawa S., Miura Y., Suda T. Enrichment and characterization of murine hematopoietic stem cells that express c-kit molecule // Blood. 1991. — Vol. 78. P. 1706−1712.

102. Osawa M., Hanada K., Hamada H., Nakauchi H. Long-term lymphohematopoietic reconstitution by a single CD34-low/negative hematopoietic stem cell // Science. 1996. — Vol. 273. — P. 242−245.

103. Palmer T.D., Rosman G.J., Osborne W.R.A., Miller A.D. Genetically modified skin fibroblasts persist long after transplantation but gradually inactivate introduced genes // Proc. Natl .Acad. Sci. 1991. — Vol. 88. — P. 1330−1334.

104. Parmar K., Sauk-Schubert C., Burdick D., Handley M., Mauch P. Sca+CD34-murine side population cells are highly enriched for primitive stem cells // Exp Hematol. 2003. — Vol. 31. — P. 244−250.

105. Pierelli L., Bonanno G., Rutella S., Marone M., Scambia G., Leone G. CD105 (endoglin) expression on hematopoietic stem/progenitor cells // Leuk. Lymphoma. 2001. Vol. 42. — P. 1195−1206.

106. Ploug M., Ellis V. Structure-function relationships in the receptor for urokinase-type plasminogen activator. Comparison to other members of the Ly-6 family and snake venom alpha-neurotoxins // FEBS Lett. 1994. — Vol. 349.-P. 163−168.

107. Punzon I., Criado L.M., Serrano A., Serrano F., Bernad A. Highly efficient lentiviral-mediated human cytokine transgenesis on the NOD/scid background // Blood. 2004. — Vol. 103. — P. 580−582.

108. Qu R., Silver M.M., Letarte M. Distribution of endoglin in early human development reveals high levels on endocardial cushion tissue mesenchyme during valve formation // Cell Tissue Res. 1998. — Vol. 292. — P. 333−343.

109. Ramezani A., Hawley T.S., Hawley R.G. Lentiviral vectors for enhanced gene expression in human hematopoietic cells // Mol. Ther. — 2000. Vol. 2. — P. 458−469.

110. Rico-Vargas S.A., Weiskopf В., Nishikawa S., Osmond D.G. c-kit expression by В cell precursors in mouse bone marrow. Stimulation of В cell genesis by in vivo treatment with anti-c-kit antibody // J. Immunol. 1994. — Vol. 152. — P. 2845−2852.

111. Robledo M.M., Hidalgo A., Lastres P., Arroyo A.G., Bernabeu C., Sanchez-Madrid F., Teixido J. Characterization of TGF-beta 1-binding proteins inhuman bone marrow stromal cells // Br. J. Haematol. — 1996. Vol. 93. — P. 507−514.

112. Rohdewohld H., Weiher H.5 Reik W., Jaenisch R., Breindl M. Retrovirus integration and chromatin structure: Moloney murine leukemia proviral integration sites map near DNase I-hypersensitive sites // J. Virol. 1987. -Vol. 61.-P. 336−343.

113. Rokhlin O.W., Cohen M.B., Kubagawa H., Letarte M., Cooper M.D. Differential expression of endoglin on fetal and adult hematopoietic cells in human bone marrow // J. Immunol. 1995. — Vol. 154. — P. 4456−4465.

114. Romanov Yu.A., Soboleva E.L., Smirnov V.N., Bobik A. Human atherosclerosis: new participants? In: Frontiets in cardiovascular health. Dhalla N.S., Chokalingam A., Berkowitz H.I., Singal P.K. eds. Kluwer Academc Publishers, Boston. 55−71. 2003.

115. Rosenqvist N., Jakobsson J., Lundberg C. Inhibition of chromatin condensation prevents transgene silencing in a neural progenitor cell line transplanted to the rat brain // Cell Transplant. 2005. — Vol. 14. — P. 129−138.

116. Ross R. Atherosclerosis an inflammatory disease // N. Engl. J. Med. — 1999. -Vol. 340.-P: 115−126.

117. Ross R. The pathogenesis of atherosclerosis: a perspective for the 1990s // -Nature. 1993;362(6423):801−9.

118. Royer-Leveau C., Mordelet E., Delebecque F., Gessain A., Charneau P., Ozden S. Efficient transfer of HTLV-1 tax gene in various primary and immortalized cells using a flap lentiviral vector // J. Virol. Methods. 2002. — Vol. 105. — P. 133−140.

119. Saiura A., Sata M., Hirata Y., Nagai R., Makuuchi M. Circulating smooth muscle progenitor cells contribute to atherosclerosis // Nat. Med. 2001. — Vol. 7.-P. 382−383.

120. Sata M., Hirata Y., Nagai R. Circulating recipient cells contribute to graft coronary arteriosclerosis // J. Cardiol. 2002. — Vol. 39. — P. 48−49.

121. Sato Т., Laver J.H., Ogawa M. Reversible expression of CD34 by murine hematopoietic stem cells // Blood. 1999. — Vol. 94. — P. 2548−2554.

122. Schwartz R.S. The vessel wall reaction in restenosis // Semin. Interv. Cardiol. 1997.-Vol. 2.-P. 83−88.

123. Shimizu K., Sugiyama S., Aikawa M., Fukumoto Y., Rabkin E., Libby P., Mitchell R.N. Host bone-marrow cells are a source of donor intimal smooth-muscle-like cells in murine aortic transplant arteriopathy // Nat. Med. 2001 -Vol. 7.-P. 738−741.

124. Shintani S., Murohara Т., Ikeda H., Ueno Т., Honma Т., Katoh A., Sasaki K., Shimada Т., Oike Y., Imaizumi T. Mobilization of endothelial progenitor cells in patients with acute myocardial infarction // Circulation. 2001. — Vol. 103. -P. 2776−2779.

125. Spangrude G.J., Heimfeld S., Weissman I.L. Purification and characterization of mouse hematopoietic stem cells // Science. 1988. — Vol. 241. — P. 58−62.

126. Spangrude G.J., Johnson G.R. Resting and activated subsets of mouse multipotent hematopoietic stem cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1990. -Vol. 87. P. 7433−7437.

127. Stanley E.R., Heard P.M. Factors regulating macrophage production and growth. Purification and some properties of the colony stimulating factor from medium conditioned by mouse L cells // J. Biol. Chem. 1977/ - Vol. 252. — P. 4305−4312.

128. Stump M.M., Jordan G.L., de Bakey M.E., Harpet B. Endotelium grown from circulating blood on isolated intravascular Dacron hub // Am. J. Pathol. — 1963. -Vol. 43.-P. 361−367.

129. Sutherland D.R., Stewart A.K., Keating A. Stem Cells. CD34 antigen: molecular features and potential clinical applications. 1993; 11 Suppl 3:50−7.

130. Sutton R.E., Reitsma M.J., Uchida N., Brown P.O. Transduction of human progenitor hematopoietic stem cells by human immunodeficiency virus type 1-based vectors is cell cycle dependent // J. Virol. 1999. — Vol. 73. — P. 36 493 660.

131. Tahara-Hanaoka S., Sudo K., Ema H., Miyoshi H., Nakauchi H. Lentiviral vector-mediated transduction of murine CD34(-) hematopoietic stem cells // Exp. Hematol. 2002. — Vol. 30. — P. 11−17.

132. Tajima F., Sato Т., Laver J.H., Ogawa M. CD34 expression by murine hematopoietic stem cells mobilized by granulocyte colony-stimulating factor // Blood. 2000. — Vol. 96. — P. 1989;1993.

133. Takayama К., Torashima Т., Horiuchi H., Hirai H. Purkinje-cell-preferential transduction by lentiviral vectors with the murine stem cell virus promoter // Neurosci. Lett. 2008. — Vol. 443. — P. 7−11.

134. Tanaka K., Sata M., Hirata Y., Nagai R. Diverse contribution of bone marrow cells to neointimal hyperplasia after mechanical vascular injuries // Circ. Res. —i2003.-Vol. 93.-P. 783−790.

135. Terskikh A.V., Miyamoto Т., Chang C., Diatchenko L., Weissman I.L. Gene expression analysis of purified hematopoietic stem cells and committed progenitors//Blood.-2003. Vol. 102.-P. 94−101.

136. Till J., McCulloch E. A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells // Radiat. Res. — 1961. Vol. 14. — P. 75−85.

137. Torashima Т., Yamada N., Itoh M., Yamamoto A., Hirai H. Exposure of lentiviral vectors to subneutral pH shifts the tropism from Purkinje cell to Bergmann glia // Eur. J. Neurosci. 2006. — Vol. 24. — P. 371−380.

138. Tsygankov A.Y. Current developments in anti-HIV/AIDS gene therapy // Curr. Opin. Investig. Drugs. 2009. — Vol. 10. — P. 137−149.

139. Van Maele В., De Rijck J., De Clercq E., Debyser Z. Impact of the central polypurine tract on the kinetics of human immunodeficiency virus type 1 vector transduction // J. Virol. 2003. — Vol. 77. — -P. 4685−4694.

140. Vroemen M., Weidner N., Blesch A. Loss of gene expression in lentivirusand retrovirus-transduced neural progenitor cells is correlated to migration and differentiation in the adult spinal cord // Exp. Neurol. 2005. — Vol. 195. — P. 127−139.

141. Welm B.E., Tepera S.B., Venezia Т., Graubert T.A., Rosen J.M., Goodell M.A. Sca-l (pos) cells in the mouse mammary gland represent an enriched progenitor cell population // Dev. Biol. 2002. — Vol. 245. — 42−56.

142. Woods N.B., Mikkola H., Nilsson E., Olsson K., Trono D., Karlsson S. Lentiviral-mediated gene transfer into haematopoietic stem cells // J. Intern. Med. 2001. — Vol. 249. — P. 339−343.

143. Worsham D.N., Schuesler Т., von Kalle C., Pan D. In vivo gene transfer into adult stem cells in unconditioned mice by in situ delivery of a lentiviral vector // Mol. Ther. 2006. — Vol. 14. — P. 514−524.

144. Yamashita H., Ichijo H., Grimsby S., Moren A., ten Dijke P., Miyazono K. Endoglin forms a heteromeric complex with the signaling receptors for transforming growth factor-beta // J. Biol. Chem. — 1994. Vol. 269. — P. 1995;2001.

145. Yang S.H., Agca Y., Cheng P.H., Yang J.J., Agca C., Chan A.W. Enhanced transgenesis by intracytoplasmic injection of envelope-free lentivirus // Genesis. 2007. — Vol. 45. — P. 177−183.

146. Yao S., Sukonnik Т., Kean Т., Bharadwaj R.R., Pasceri P., Ellis J. Retrovirus silencing, variegation, extinction, and memory are controlled by a dynamic interplay of multiple epigenetic modifications // Mol Ther. 2004;10(l):27−36.

147. Zanjani E.D., Almeida-Porada G., Livingston A.G., Flake A.W., Ogawa M. Human bone marrow CD34- cells engraft in vivo and undergo multilineage expression that includes giving rise to CD34+ cells // Exp. Hematol. 1998. -Vol. 26.-P. 353−360.

148. Zhong R.K., Astle C.M., Harrison D.E. Distinct developmental patterns of short-term and long-term functioning lymphoid and myeloid precursors defined by competitive limiting dilution analysis in vivo // J. Immunol. 1996. -Vol.-P. 157.-P. 138−145.

149. Zimmet J.M., Hare J.M. Emerging role for bone marrow derived mesenchymal stem cells in myocardial regenerative therapy // Basic Res. Cardiol. 2005. -Vol. 100.-P. 471−481.