Экспрессия белков, контролирующих апоптоз, при раке молочной железы

Актуальность темы

.

Заболеваемость и смертность от рака молочной железы среди женщин в нашей стране имеет тенденцию к неуклонному росту [Трапезников H.H., Аксель E. JL, 1998; Давыдов М. И., Аксель E. JL, 2002]. В структуре онкологической заболеваемости женского населения и в России, и в других развитых странах Европы и США рак молочной железы занимает одно из первых мест [Трапезников H.H., Шайн A.A., 1995; Двойрин В. В. с соавт., 1995; Osborne С.К., Clark G.M., Ravdin P.M., 1996]. Отслеживая динамику заболеваемости, видна тенденция к заметному росту рака молочной железы у женщин [Трапезников H.H., Поддубная И. В., 1996]. Предполагается, что в 2005 году от рака молочной железы умрет 21 женщина на 100 000 женского населения, причем это женщины среднего возраста. По показателям ряда онкодиспансеров заболеваниями молочной железы чаще всего страдают женщины трудоспособного возраста.

В связи с этим разработка и внедрение в клиническую практику ранней диагностики и эффективных методов лечения продолжает оставаться важным разделом проблем борьбы со злокачественными опухолями.

Сокращение смертности может быть достигнуто с помощью раннего выявления заболевания, профилактики и адекватного лечения «ранних» форм рака молочной железы. В связи с этим особое значение приобретает изучение клинического течения, лечения и факторов прогноза рака молочной железы, таких как плоидность клеток, экспрессия онкобелков и гли-копротеинов, контролирующих апоптоз.

Исследование молекулярных механизмов запрограммированной гибели клеток стало в последние годы одной из самых трудных и актуальных проблем медико-биологических наук. Трудность этой проблемы очевиднанесмотря на большое количество экспериментальных данных, до сих пор не исследованы многие механизмы, не до конца выяснены пути регуляции апоптоза отдельных клеток в целостном многоклеточном организме. Актуальность проблемы определяется связью между нарушениями в регуляции апоптотических процессов с большинством заболеваний, в том числе и онкологических.

Апоптоз играет жизненно важную роль в процессе эмбрионального и онтогенетического развития. Во взрослом организме апоптоз наблюдается в различных типах тканей, где выполняет функцию гомеостатической регуляции. Реализация запрограммированной гибели клеток происходит при различных патологических состояниях. При апоптозе происходит удаление клеток, выживание которых нежелательно для организма, например, злокачественно трансформированных, мутантных клеток или клеток, зараженных вирусом.

Апоптоз — многофазный процесс. На первом этапе (инициаторная фаза) происходит инициация и трансдукция проапоптического сигнала. В качестве индукторов запрограммированной гибели могут выступать самые различные факторы, например, белковые продукты протоонкогенов, молекулы-лиганды мембранных рецепторов смерти, цитотоксические лекарственные препараты, радиация, вирусы и др. Существует большое количество белков, участвующих в апоптозе. Все их можно разделить на две функциональные группы: белки-триггеры и белки-модуляторы. Триггеры участвуют в индукции проапоптического сигнала (например, белки из семейства фактора некроза опухолей, Ти В-клеточные рецепторы, рецепторы гормонов). Модуляторы участвуют в трансдукции «сигнала смерти». За инициацией следует эффекторная фаза, в ходе которой происходит активация каспазной системы клетки. Вслед за эффекторной наступает фаза деградации клетки, характеризующаяся деструкцией клеточного материала. На этом этапе наблюдаются нуклеазная, протеазная и липазная гиперактивности, что неизбежно ведет к дезинтеграции клеточных подсистем. Существует несколько путей развития эффекторной фазы апоптоза, принципиальное отличие которых заключается в механизме инициации и трансдукции проапоптического сигнала. В настоящее время описано два основных пути апоптоза: митохондриальный (Вс1−2-зависимый) путь и путь, опосредованный через «рецепторы смерти» (Fas-опосредованный путь апоптоза).

Митохондриальный путь является Вс1−2-зависимым. Большое количество Bel-2 постоянно презентировано на внешней митохондриальной мембране. Этот протеин и его гомологи (Bcl-xL, Mcl-1 и др.) выполняют функцию защиты клеток от апоптоза. Среди белков Вс1−2-семейства существует также группа апоптоз-опосредующих факторов (например, Вах, Bad, Bak, Bik, Bid, Bcl-xs и др.). Для переключения клетки в режим апоптоза необходимо связывание Bel-2, что нейтрализует ингибирующее действие последнего. Такое связывание может осуществляться любым из проапоп-тических факторов Вс1−2-семейства [Rathmell J.C., Thompson C.B. et al., 1999]. Существует еще несколько механизмов, приводящих к апоптозу через ингибирование Bel-2. Например, возможна регуляция через онкосу-прессор — белок р53, замедляющий в нормальных клетках пролифератив-ную активность [Ginsberg D., Michael-Michalovitz D. et al., 1991]. При повреждении ДНК под действием ионизирующего или ультрафиолетового излучения, ингибиторов топоизомеразы II, а также при некоторых других воздействиях, происходит активация экспрессии гена р53. Белок р53 задерживает клетку в фазе G1/S клеточного цикла (через репрессию генов, регулирующих* транскрипцию), чтобы дать время для работы репаратив-ных систем [Carson D.A., 1995]. На уровне транскрипции фактор р53 регулирует экспрессию генов, участвующих в блокаде клеточного цикла — р21 (ингибитор большинства циклин-зависимых киназ), а также взаимодействует либо с комплексами, определяющими синтез и репарацию ДНК, либо с белками, модулирующими апоптоз (например, Вах). Если повреждения ликвидировать не удается, то р53 запускает апоптоз [Lane D.P., 1992]. Происходит это через инактивирование Bel-2 при связывании с белком.

Вах. Известно, что некоторые стимулы, такие как гипоксия или митоген-ные онкогены, активируют ген р53, переводя клетку на апоптический путь.

Инициаторная фаза апоптоза может осуществляться опосредовано через «рецепторы смерти». Хорошо изучен механизм Fas-опосредованного апоптоза СБ95-позитивных клеток. Для его развития необходимо взаимодействие Fas-рецептора, презентированного на мембране Fas-позитивных клеток, и Fas-лиганда [Walczak H., Krammer Р.Н., 2000]. Взаимодействие важно для киллинга опухолевых или инфицированных вирусом клеток цитотоксическими Т-лимфоцитами и NK-клетками [Ashkenazi A., Dixit V.M., 1998]. Принципиальное отличие Fas-опосредуемого пути апоптоза от митохондриального заключается в том, что он обходит регулирование со стороны белков Bel-2 [Nagata S., 2000] и является Са2± независимым [Walczak H., Krammer Р.Н., 2000].

Разнообразие клинических форм рака молочной железы (РМЖ), многовариантность течения и результатов лечения свидетельствует о значительной межопухолевой гетерогенности биологических характеристик РМЖ, оказывающей существенное влияние на течение и исход заболевания [Теп-лоухова И.М., Ермилова В. Д., 1991; Hakama M., Holli К., Isola J., Kal-liomiemi Olli-Pekk, 1995]. На различных моделях индуцированного канцерогенеза, клеточных линиях in vivo, in vitro изучено огромное количество биохимических и морфологических характеристик клеток в связи с регуляцией их пролиферации и метастатическим потенциалом [Gallaban R., 1992; Porter-Jardan К., 1994]. Исследования последних лет, выполненные в этом направлении, свидетельствуют об обосновании изучения кинетики клеточных популяций и особенностей жизненного цикла опухолевых клеток РМЖ как одного из путей предсказания агрессивности течения опухолевого процесса. Причины и возможные последствия нарушений регуляции пролиферации изучаются в разных областях онкобиологии с использованием различных подходов.

Одним из следствий нарушения прохождения фаз клеточного цикла в опухолевых клетках является изменение содержания ДНК (анеуплоидия, полиплоидия), что ведет к нарастанию генетической гетерогенности клеточной популяции. В большинстве типов злокачественных образований человека найдены популяции клеток, различающиеся по степени анеуп-лоидии. В связи с этим оценка распределения опухолевых клеток новообразований человека по содержанию ДНК, с одной стороны, является перспективным подходом к изучению внутрии межопухолевых различий, а с другой стороны, плоидность опухолевых клеток претендует на роль дополнительного маркера злокачественности карцином человека [O'Reilly S.M., et al, 1990; Raju U., Zarbo R.J., et al, 1993]. Таким образом, данные литературы свидетельствуют о возможной прогностической значимости таких биологических характеристик как пролиферативная активность и плоидность опухолевых клеток.

Иследования такого рода на примере больных раком молочной железы представляются нам актуальными по нескольким причинам. Во-первых, накопленны фундаментальные теоретические знания, свидетельствующие о внутрии межопухолевой гетерогенности РМЖ по этим параметрам. Во-вторых, сравнительно велико количество случаев быстрого прогрессиро-вания заболевания после проведенного лечения, в связи, с чем потребность клиницистов в получении объективных данных о прогнозе индивидуального лечения достаточно велика. В-третьих, исследования экспрессии р53, Вс1−2, пролиферативной активности и плоидности опухолевых клеток возможны до начала проведения терапии.

Цель работы.

Целью настоящей работы явилось изучение роли маркеров, контролирующих апоптоз, при раке молочной железы (РМЖ).

Для достижения цели работы были поставлены следующие задачи:

1. Провести сравнительный анализ иммуноцитохимического метода исследований экспрессии белков, контролирующих апоптоз, с иммуноги-стохимическим методом.

2. Оценить экспрессию С095 в клетках РМЖ человека.

3. Оценить экспрессию р53рап и р53гсй в клетках РМЖ человека.

4. Оценить экспрессию Вс1−2 и Вах в клетках РМЖ человека.

5. Исследовать плоидность и пролиферативные характеристики клеток РМЖ.

6. Сопоставить изученные биологические характеристики РМЖ с особенностями гистологической структуры и другими клинико-морфологическими факторами прогноза данного заболевания.

Научная новизна.

На основании анализа данных, касающихся пролиферативной активности, плоидности ДНК, гистологической структуры, степени злокачественности и экспрессии различных онкобелков (р53рап, р53т1, Вс1−2, Вах) сделан вывод о взаимодополняемости этих параметров как критериев биологической агрессивности РМЖ.

Установлено, что с ростом агрессивности опухоли молочной железы наблюдается гиперэкспрессия онкобелков Вс1−2, Вах, р53пй и увеличение степени анеуплоидии.

Научно-практическая значимость.

В работе изучена роль экспрессии биомаркеров, контролирующих апоптоз, рецепторов эстрогенов и плоидности ДНК в оценке злокачественности опухоли молочной железы. Применение комплекса исследований: экспрессии белков, контролирующих апоптоз, и параметров ДНК — проточной ци-тофлуорометрии повышает диагностическую эффективность при исследовании материала пункционных биоптатов РМЖ.

Полученные результаты будут полезны в клинической работе практических врачей онкологов. Результаты исследований могут использоваться в практической работе цитологических, иммунологических лабораторий и паталогоанатомических отделений онкологических и хирургических учреждений, занимающихся заболеваниями молочной железы.

Апуобаиия работы.

Апробация работы состоялась 23 октября 2002 года на совместной научной конференции с участием лабораторий эксперементальной диагностики и биотерапии опухолей, медицинской биотехнологии, фармакоцитокинети-ки, синтетических противопухолевых веществ НИИ ЭДиТО, лабораторий клинической цитологии, клинической иммунологии, патологической анатомии опухолей, хирургических отделений опухолей молочной железы, диагностики опухолей и химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей НИИ КО РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН. Основные положения диссертации представлены: на 3-ей ежегодной конференции (Санкт-Петербург, 1999), на II съезде онкологов стран СНГ (Киев, 2000), на III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000), на 14-ом интернациональном конгрессе цитологов (Амстердам, 2001).

1. Барышников А. Ю., Степанова Е. В. Проблемы лекарственной резистентности. 1999. Санкт-Петербург. Съезд онкологов.

2. Белоусова А. К. Загадки гена опухолевого супрессора р53 // Экспер.онкол., 1996, № 18, с. 197−208.

3. Богатырев В. Н. Значение количественных методов исследования (морфометрии, проточной цитофлуорометрии, сканирующей микрофотометрии) в клинической онкоцитологии. Дис. Д.м.н., ВОНЦ, 1991.

4. Богатырев В. Н., Портной С. М., Лактионов К. П., Летягин В. П. Проточная цитометрия при раке молочной железы T1−2N0M0. Анализ 10-летних наблюдений //Материалы 1 съезда онкологов стран СНГ. М., 1996.-ч.2.-с.482.

5. Владимирская Е. Б., Масчан A.A., Румянцев А. Г. // Ж. Гематология и переливание крови, 1997, № 5.

6. Владимирская Е. Б., Масчан A.A., Румянцев А. Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематол.трансфузиол., 1997, т.42, № 5, с.4−9.

7. Гуляк Н. С. Пролиферативная активность и плоидность ДНК рака молочной железы. Дис. на соиск. уч. ст. к.б.н., М., 1996.

8. Двойрин В. В., Аксель Е. М., Трапезников H.H. Заболеваемость и смертность от злокачественных новообразований населения России и некоторых других стран СНГ в 1993 г. Москва, 1995.

9. Малышев И. Ю. Феномен адаптационной стабилизации структур и роль в нем белков теплового шока: Автореф. Дис.. д-ра мед. наук. М., 1992. 46 с.

10. Новиков В.С.(под ред.) Программированная клеточная гибель. СПб, 1996, Наука, 276 с.

11. Петрова A.C., Зубрихина Г. Н., Зубриян Н. И. Опыт применения автоматических систем в онкологии // В сб.: Автоматизация цитологических исследований. Киев, 1985, с. 105−110.

12. Петрова A.C., Казанова Л. И., Зубрихина Г. Н. Исследование ДНК клеточных элементов лимфатических узлов при лимфои ретикулосаркоме с помощью импульсного цитофотоиетра // В кн.: Автоматизация цитологической диагностики опухолей. Рига, 1976, с. 157−161.

13. Петрова A.C., Полонская Н. Ю., Богатырев В. Н. Цитологические исследования в клинической лабораторной диагностике // Клиническая лабораторная аналитика. М., 1999, т. II. с.99−195.

14. Портной С. М. Рак молочной железы (факторы прогноза и лечение). Афтореф.дисс.доктора мед.наук. М., 1997,40с.

15. Репетюк Д. В. Клиническое течение, прогноз и лечение рака молочной железы Т1−2Н-1М0 у больных с рецепторотрицательными опухолями по эстрогенам и прогестерону. Дис. на соиск. уч. Ст. к.м.н., М., 1998.

16. Романенко A.M. // Архив патологии. 1996, N 3. с. 18.

17. Рябов Г. А., Ладыгин С. С., Азизов Ю. М., Пасечник И. Н. Оценка гипоксии по метаболизму пуриновых оснований // Вестн. Акад. Мед. наук СССР, 1991, т.7. с.3−7.

18. Самохин A.B., Томкевич М. С., Готовский Ю. В., Мизиано Ф. Г. Иммунология, апоптоз и гомеопатия. М., 1998, с. 137−138.

19. Ставровская A.A. Клеточные механизмы множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток // Биохимия, 2000, т. 65, № 1, с. 112 126.

20. Теплоухова И. М., Ермилова В. Д. Возможные подходы к прогнозированию при раке молочной железы // Вест. ВОНЦ, 1991,№ 1, с.53−57.

21. Трапезников H.H., Аксель Е. М. Статистика рака молочной железы // Новое в терапии рака молочной железы. М., 1998, с.6−10 .

22. Трапезников H.H., Поддубная И. В. Справочник по онкологии. М., 1996.

23. Урываева И. В. Клеточная репродукция и процесс дифференцировки. JL, 1990, с.94−109.

24. Фильченков A.A., Стойка P.C. Апоптоз (физиологическая гибель клетки) // Семинары по гематологии. Вып.2. Киев, 1995, № 2, с. 1−24.

25. Чумаков П. М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью // Биохимия, 2000, т. 65, № 1, с.34−37.

26. Шомова М. В. Мр РМЖ (лечение и факторы прогноза). Дис. на соиск. уч. ст. д.м.н, М., 1999.

27. Ярилин A.A. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология, 1996. № 6, с 10−23.

28. Ярилин A.A. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме // Пат.физиол.экспер.тер., 1998, т.2, с.38−48.

29. Adams J.M., Cory S. // Science, 1998, v.281, p.1322−1326.

30. Adolph K.W., Liska D.J., Bornstein P. // Gene, 1997. V.193, p.5−11.

31. Akbar A.N., Salmon M., Janossy C. Role of bcl-2 and apoptosis in viral infections // Intern. Arch. Allergy Immunol., 1994. V. 105, № 4. p. 359−362.

32. Albanell M., Belluht M., Sole S. Factores prognosticos del cancer de mama con ganglios negativos. Med.Clin., 1992. V.99, N 17, p.668−674.

33. Alderson L.M., Castleberg R.L., Harsh G.R. et al. Human gliomas with wildtype p53 express bcl-2 // Cancer Res., 1995. V. 55, № 5. p. 999−1001.

34. Allouche M., Bettaieb A., Vindis C., Rousse A., Grignon C., Laurent G. // Oncogene, 1997. V.14, p.1837−1835.

35. Baer R. Bcl-2 breathes life into embryogenesis // Amer. J. Pathol., 1994. V.145, № 1. P. 7−10.

36. Bakalkin G., Yakovleva T., Seiivanova G., Magnusson K.P., Szekely L., Kiseleva E., Klein G., Terenius L., Wiman K.G. II Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1994. V.92, p.9455−9459.

37. Bakhshi A.J., Jensen P., Goldman P. et al. // Cell, 1985. V.41, p.889.

38. Ballou F., Ross J., Wolf B.C. DNA aneuploidy in endometriosis: An image analysis study // Amer.J.Clin.Pathol., 1992. V.98, N3, p.35.

39. Bellamy C.O.C., Malcomson R.D.G., Harrison D.G., Wyllie A.H. Cell death in health and disease: the biology and regulation of apoptosis // Semin. Cancer Biol., 1995. V.6, № 1. P. 3−16.

40. Bennett M., Macdonald K., Chan S.W., Luzio J.P., Simari R., and Weissberg P. Cell surface trafficking of Fas: a rapid mechanism of p53-mediated apoptosis //Science, 1998. V.282, p.290−293.

41. Bergh J. Importance of p53 in the diagnosis and treatment of cancer // 23 ESMOcongres, 1998, p. 179−186.

42. Binder C., Hiddemann W. Programmed cell death many questions still to be answered // Ann. Hematol., 1994. V. 69, № 1. P. 45−55.

43. Binder C., Marx D., Binder L., Schauer A., Hiddemann W. Expression of Bax in relation to Bcl-2 amd other predictive parameters in breast cancer // Annals of Oncology 1996. N7. p.129−133.

44. Boise L.H., Gonzales-Garcia M., Rostema C.E. et al. Bcl-x and bcl-2 related gene that function as a dominant regulator of apoptotic cell death // Cell, 1993. V.74. P. 597−608.

45. Borner M.M., Brousset P., Pfanner-Meyer B., et al. Expression of apoptosis regulatory proteins of the bcl-2 family and p53 in primary resected non-small-cell lung cancer // BritJ. Cancer, 1999. V.79, p.952−958.

46. Bozzetti C., Nizzoli R., Naldi N., et al. Fine-needle aspiration technique for the concurrent immunocytochemical evaluation of multiple biologic parameters in primary breast carcinoma // Breast Cancer Res Treat., 1994. V.32, p.221−228.

47. Bozzetti C., Nizzoli R., Naldi N., et al. Bcl-2 expression on fine-needle aspirates from primary breast carcinoma (correlation with other biologic factors)// Cancer Cytopathol., 1999. V.87, p.224−230.

48. Bratstrom D., Bergqvist M., Lamberg K., et al. Complete sequence of p53 gene in 20 patients with lung cancer: comparison wit chemosensitivity and immunohistochemistry // Med.oncol., 1998. V. 15, p.255−261.

49. Brugarolas J., Chandrasekaran C., Gordon J.I., Beach D., Jaks T., and Hanonn G.J. //Nature, 1995. V.377, p.552−557.

50. Burger O. P53 and the cell cede. 1997.

51. Callahan R. Cellular and molecular heterogeneity of breast cancer cells //Fresenius J.Anal.Chem., 1992. V.343, N1, p.19.

52. Campana D., Coustan-Smith E., Manabe A. et al. Prolonged survival of B-lineage acute lymphoblastic leukemia cell // Blood, 1993. V.81, № 4, P. 10 251 031.

53. Camplejohn R.S., Ash C.M., Gillet C.E., Raikundilia B., et al. The prognostic significance of DNA flow cytometry in breast cancer: results flow 881 patients treated in a single centre H Br.J.Cancer, 1995. V.71, N1, p.140−145.

54. Campos L., Rovulut J.P., Sabido O. et al. High expression of bcl-2 protein in acute mieloid leukemia cell is associated With poor response to chemotherapy // Blood, 1993. V.81, p.3091−3096.

55. Canman C., Gilmer T., Coutts S., et al.// Genes Dev., 1995. V.9, p.600−611.

56. Carson D.A., Ribeiro J.M. Apoptosis and disease // Lancet, 1993. V. 341, № 8855. P. 1251−1254.

57. Cattoretti G., Rilke F., Andreola S., D’Amato L., Delia D. p53 Expression in breast cancer // Int. J. Cancer, 1988. V.41, p.178−183.

58. Chao D.T., Korsmeyer S.J. // Annu.Rev.Immund., 1998. N16, p.395−410.

59. Charpin C., Bonnier P., Piana L. Facteurs biologiques du prognostic dansles cancers du sein // Pathol.Biol., 1993. V.41, N1, p.62−63.

60. Cheng J., Yee J., Yeargin J. Suppression of acute lymphoblastic leukemia by the human wild-type p53 gene // Cancer Res., 1992. V.52, p.222−226.

61. Chiou S.K., Rao L., White E. II Mol.Cell.Biol., 1994. V.14. P.2556−2563.

62. Chittenden T., Harrington E., et al. // Nature, 1995. V.374. P.733.

63. Chowdary D.R., Dermody J.J., Jha K.K., Ozer H.L. // Mol.Cell.Biol., 1994. V.14, p. 1997;2003.

64. Clarke A.R., Purdie C.A., Harrison D.J. et al. Thymocyte apoptosis induced by p53-dependent and independent pathways // Nature. 1993. Vol. 362. P. 849−852.

65. Cohen JJ. Programmed cell death in the immune system // Adv. Immunol., 1991. V. 50. P. 55−85.

66. Cohen J.J. Apoptosis: the physiologic pathway of cell death // Hosp. Pract., 1993. V. 28, № 12. P. 35−43.

67. Cordon-Cardo C., Sheinfeld J., Dalbagni G. // Semin.Surg.Oncol., 1997. V.13,p.319−327.

68. Cornelisse C.J., Van de Velde C., Caspers R.C., Moolenar A.S., Hermans J. DNA ploidy and survival in breast cancer patient // Cytometry, 1987, v8, N2, p.225−234.

69. Dalton L.W., Page D.L., Dupont W.D. Histolodic grading of breast carcinoma: A reproducibility study // Cancer, 1994. V.73, N11, p.2765−2770.

70. Dameron K.M., Volpert O.V., Tainsky M.A. and Bouck N. II Science, 1994. V.265, p. 1582−1584.

71. Davidoff A.M., Herndon J.E., Glover N.S., et al. Relation between p53 overexpression and established prognostic factors in breast cancer // Surgery, 1991. V.110, p.259−264.

72. Davidoff A.M., Humphrey P.A., Igrehart J.D., Marks J.R.: Genetic basis for p53 overexpression in human breast cancer // Proc Nati Acad Sci USA, 1991. V.88, p.5006−5010.

73. Davidoff A.M., Kerns BJM, Iglehart J.D., Marks J.: Maintenance of p53 alterations throughout breast cancer progression // Cancer Res, 1991. V.51, p.2605−2610.

74. Dawson A.E., Norton J.A., Weinberg D.S. Comparative assessment of proliferation and DNA content in breast carcinoma by Image Analysis and Flow cytometry. Amer.J. of Pathology, 1990. V. 136, N5, p. 1115−1121.

75. Deichman G.J., Matveeva V.A., Kashkina L.M., Dyakova N.A., et al. // IntJ. Cancer, 1998. V.75, p.277−283.

76. Del-Porto G. Cytogenetics in human solid tumos // J.Esp. and Clin. Cancer Res., 1992. V.11,N1, suppl., p.31.

77. Deng C., Zhang P., Harper J.W., Elledge S.J., and Leder P. // Cell, 1995. V.82, p.675−684.

78. Desoize B. Anticancer drug resistance and inhibition of apoptosis // Anticancer Reseearch, 1994. V.14, p.2291−2294.

79. Dive C. //J.Intern.Med., 1997. V.242, suppl.740, 139−145.

80. Doll M.G., Jasty R., Cooper M.G., et al. Bcl-2 is expressed in neuroblastoma cell and modulates chemotherapy-induced apoptosis // Cancer Res., 1995. V.55, p.2576−2582.

81. E1-Deiry W.S. // Semin. Cacer Biol., 1998. V.8, p.345−357.

82. E1-Deiry W.S. //Curr. Top. Microbiol.Immunol., 1998. V.227, p.121−137.

83. E1-Deiry W.S., Tokino T., et al. //Cell, 1993. V.75, p.817−825.

84. Eliopoulus A.G., Kerr D.G., Hered J., et al. The control of apoptosis and drug resistance in ovarial cancer: influence of p53 and bcl-2 // Oncogene, 1995. V. ll, p.1217−1228.

85. EI-Naggar A.K. Clinical relevanceof the flow cytometric analisis in cancer. //J.Cancer, 1992. V.5, N6, p.321−327.

86. Eriksson E.T. Immunohistochemical expression of the mutant p53 protein and nuclear DNA content during the transition from benign to malidnant breast disease // Human Pathol., 1994. V.25, N11, p.1228−1233.

87. Falette N., Paperin M.P., Treilleux I., Gratadour A.C., Peloux N., Mignotte H., Tooke N., Lofman E., Inganas M., Bremond A., Ozturk M., Puisieux A. // Cancer Res., 1998. V.58, p.1451−1455.

88. Fernando I.N., Titley J., Troff P.A., Dowsett M., Powles TJ., Ormerod M.G. Sequential flow cytometry as a method of predicting responce and relapse to primary madical therapy in breast cancer // Brit. J. cancer, 1992. V.66, suppl. N17, p.16.

89. Fresno M., Molina R., Perez del Rio M.J., Alvarez S., Diaz-Iglesias J.M., Carcia I., Herrero A. // Eur.J.Cancer., 1997. V.33, p.1268−1274.

90. Friezen C., Herr I., Krammer P.H., Debatin K.M. // Nature Med., 1996. V.2, p.574−577.

91. Gaidano G., Ballerini P., Gong g.Z., et al. P53 mutations in human limfoid malignancies: association with Burkitt lymfoma and chronic limfocytic leukemia // Proc.Nat.Acad.USA, 1991. V.88, p.5413−5417.

92. Game J.P., Aspegren K., Linell F. Primary prognostic factors in invasive breast cancer with special reference to ductal carcinoma and histologic malignancy grade // Cancer, 1994. V.73, N5, p. 1438−1448.

93. Giatromanolaki A., Koukourakis M., Zaramboukas T., et al. P53 and bcl-2 expression in locally advanced squamous cell head neck cancer treated with platinum based chemotherapy and radiotherapy // Anticancer res., 1998. V.18, p.4685−4692.

94. Gilchrist K.W., Gray R., Van Driel-Kulker A.MJ. High DNA content and prognosis in lymph node positive breast cancer. A case control study by the university of Leida and ECOG // Breast cancer Res. Treatment., 1993. V.28, N1, p.1−8.

95. Ginsberg D., Mechta F., Yaniv M., Oren M. //Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1991. V.88, p.9979−9983.

96. Going J.J., Amstrong S., Stanton P.D., Cooke T.G. Cell-cycle kinetics and p53 expression in breast cancer // Diagn.Oncol., 1994. V. l, N1, p.2−4.

97. Gottlieb T.M. and Oren M. // Biochim.Biophys.Acta, 1996. V. 1287, p.77−102.

98. Gottlieb T.M. and Oren M. // Semin. Cancer Biol., 1998. V.8, p.359−368.

99. Graeber T.G., Osmanian C., Jacks T., Housman D.E., Koch C.J., Lowe S.W., Giaccia A.J. //Nature, 1996. V.379, p.88−91.

100. Guenter T., Schneider-Stock R., Rys J. et al. // J. Cancer Res.Clin.Oncol., 1997. V.123, p.388.

101. Gustafson P., Ferno M., Akerman M., Baldetorp B., Willen H., Killander D., Rydholm A. Flow Cytometric S-phase Fraction in soft-tissue sarcoma: prognostic importance analysed in 160 patients // Brit.J.cancer, 1997. V.75(l), p.94−100.

102. Guzman J., Ruckmann A., Glaser A., et al. DNA Cytophotometric Analysis of Breast cancer. Follow-up for 10 Years // AGCH, 1992. V. l 4, N6, p.427−432.

103. Fukasawa K., Choi T., Kuriyama R., Rulong S., van de Woude G.F. // Science, 1996. V.271, p.1744−1747.

104. Hacama M., Holli K., Isola J., Kalliomiemi Olli-Pekk. Aggressiveness of screen-detected breast cancer // Lancet, 1995. N 8944, p. 221−224.

105. Hamilton A., Piccart M. The contribution of molecular markers to the prediction of response in the treatment of breast cancer: A review of the literature on Her-2, p53 and Bcl-2 // Annals of Oncology, 2000. V. ll, p.647−663.

106. Harris C.C., Hollstein M. Clinical implications of the p53 tumor suppressor gene // N. Engl.J. Med., 1993. V.329, p. 1318−1327.

107. Harris C.C. Structure and iunction of the p53 tumor supressor gene: Clues for rational cancer therapeutic strategies // J.Nat.Cancer.Inst., 1996. V.88, p.1442−1455.

108. Harrison G. The role of clinical cytogenetics in medicine with special emphasis on oncology // Med. Lab.Sci., 1988. V.45, N.4, p.333−348.

109. Hasegawa M., Zhang Y., Niibe H., Terry N.H., Meistrich M.L. // RadiatRes., 1998. V.149, p.263−270.

110. Haupt Y., Rowan S., Oren M. p53 mediated apoptosis in HeLa cells can be overcome by express pRb // Oncogene, 1995. V. 10, № 8. P.1563−1571.124. Hedleyetal., 1991.

111. Hellemans P., van Dam P.A., Weyler J., van Oosterom A.T., Buytaert P., van Marck E: Prognostic value of bcl-2 expression in invasive breast cancer // Br.J. Cancer, 1995. V.72, p.354−360.

112. Hermeking H., Lengauer C., Polyak K., He T.C., Zhang L., Thiagalingam S., Kinzler K.W., and Vogelstein B. // Mol.Cell., 1997. V. l, p.3−11.

113. Herr I., Wilhelm D., Bohler T., Angel P., Debatin K.-M. // Int.J.Cancer, 1999. V.80, p.417−424.

114. Hibshoosh H., Johnson M., Weinstein J.B. Effects overexpression of ornithine decarboxylase (ODC) on growth control and oncogtnt-induced cell transformation // Oncogene, 1991. V.6. P.739−743.

115. Hickman J.A., Pritchard M.D., Potten C.S. Genetic controls of cell death: determinants of tumor responsiveness // South West Cancer News, 1997. V.10, p.14−15.

116. Hockenbery D., Nunez G., Milliman C. et al. Bcl-2 is an inner mitochondrial membrane protein that blocks programmed cell death // Nature, 1990. V.348,N6299. P.334−338.

117. Hockenbery D. M., Oltvai Z. N., Yin X. M. et al. Bcl-2 functions in an antioxidant pathway to prevent apoptosis II Cell, 1993. V. 75, № 2. P.241−251.

118. Hockenbery D. M., Zutter M., Hickey W. et al. Bcl-2 protein in topographically restricted in tissues characterized by apoptotic cell death // Proc. Nat. Sci. USA, 1991. V. 88. P.6961−6965.

119. Hollstein M., Sidransky D., Vogelstein B., Harris C. C. p53 mutations in human cancers // Science, 1991. V.253. P.49−53.

120. Homesley H.D., Zaino R: Endometrial cancer: Prognostic factors // Semin Oncol., 1994. V.21, p.71−78.

121. Hsu B., Marin M. C., Brishay S. et al. Expression of bcl-2 gene confers multidrug resistence to chemotherapy-induced cell dreath // Cancer Bull., 1994.V.46, N2. P. 125−129.

122. Ichihara A., Tanaka K. // Mol.Biol.Rep., 1995. V.21, p.49−52.

123. Iggo R., Gatter K., Bartek I., Lane D., Harris A.L.: Increased expression of mutant forms of p53 oncogene in primary lung cancer // Lancet, 1990. V.335, p.675−679.

124. Ikede N., Hirano T., Okusawa K., Uchuda O., Katsuni T., Kajirawa N., Hara E., Miura H., Kawata N., Konata C. Quantitative cytochemical analysis of T1 breast cancer // Gan-To-Kagaku-Ryoho, 1993. V.20, N6, p.821−823.

125. Iniesta P., Vega F.J., Caldes T., Massa M., de Juan C., Cerdan F.J., Sanchez A., Lopez J.A., Torres A.J., Balibrea J.L., Benito M. // Cancer Lett., 1998. V.130, p.153−160.

126. Ivkobski 1., Baseska N., et al. Preoperative Determination of DNA ploidy and Hormone Receptor Status (ER and PgR) on cytologic Material from breast cancer patients Using Image Cytometry II Acta Cytol., 1997. V.41, N4, p. 1208.

127. Jacobson M.D., Burne J.F., King M.P. et al. Bcl-2 blocks apoptosis in cells lacking mitochondrial DNA // Nature, 1993. V. 361, N 6410. P.365−366.

128. Jacobson M.D., Raff M.C. Programmed cell death and bcl-2 protection in very low oxygen // Nature, 1995. V.374, N 6525. P.814−816.

129. Jaros E., Perry R.H., Adam L. et al. Prognostic implications of p53 protein, epidermal growth factor receptor and Ki-67 labelling in brain tumors //Brit.J.Cancer, 1992. V. 66, p.373−375.

130. Jayaraman J., Prives C. // Cell, 1995. V.81, p.1021−1029.

131. Joosens E., Makar A., Van Leuven H., Declerq S., Beelaerts W., Van Den Weyngaert D., Gerris J., Becquart D., Kockx M. Bcl-2 expression and apoptosis in ductal breast cancer // Annals of Oncology, 1998, supp. 4 to vol. 9.

132. Jsaacs J.T. Clonal heterogeneityand its implications. In. Breast cancer treatment prognosis /Ed:Stoll B.A./ Oxford-London-Edinburgh:Blackwell scientific publications, 1986, p.45−56.

133. Kallioniemi O.-P. Comparison of fresh and paraffinembedded tissue as a starting material for DNA-flow cytometry and evaluation of intratumor heterogeneity // Cytometiy, 1988. V.9, N2, p. 164−169.

134. Kandemir E.G., Yaylaci M., Uskent N. Prognostic significance of p53 expression and its relationship with other prognostic factors in early breast carcinoma (BC) // Annals of Oncology, 1998, suppl.4 to v. 9.

135. Kastan M.B., Netson W.G., Chen Chaw-Yuan, Slichenmyer W.B. P53 and other molecular controls of the response to DNA damage // J.Cell.Biochem., 1994, suppl., V.18, p.164.

136. Kastan M.B., Onyekwere O., Sidransky D., Vogelstein B., Craig R.W. // Cancer Res., 1991. V.51, p.6304−6307.

137. Kastan M.B., Zhan Q., El-Peiry W.S., et al. A mammalian cell cycle check-point pathway utilizing p53 and GADD 45 is defective in ataxia-telangiestasia // Cell, 1992. V.71, p.587−597.

138. Keiichi I., Hitochi T., Hiraide H., Tamaki K., Tamakuma S. Nuclear p53 immunoreaction associated with poor prognosis of breast cancer // Jap.J.Cancer Res., 1991. V.82, N 7, p.835−840.

139. Kendal W.S. A perspective on tumor progression // Can.S.Surg., 1993. V.36, N2, p.133−136.

140. Komarova E.A., Diatchenko L., Rokhlin O.W., Hill J.E., Wang Z.J., Krivokrysenko V.I., Feinstein E. and Gudcov A.V. // Oncogene, 1998. V.17, p. 1089−1096.

141. Kommos F., Pfisteres J., Idris T. Steroid receptors in carcinoma of the breast: Results of immunocytochemical and biochemical determination and their effects on shortterm prognosis II Anal.Quant.Cytol.Histol., 1994. V.16, N3, p.203−210.

142. Korsmeyer S .J. Bcl-2 initiates a new category of oncogenes: regulators of cell death // Blood, 1992. V. 80. P.879−886.

143. Korsmeyer S.J., Shutter J. R., Veis D. J. et al. Bcl-2//Bax: a rheostat that regulates an antioxidant pathway and cell death // Semin. Cancer Biol., 1995. V.4, № 6. P.327−332.

144. Kozopas K. M., Yang T., Buchan H. L. et al. MCL-1, a gene expressend in programmed myeloid cell defferentiation, has seguence similarity to bcl-2 //Proc. Nat. Acad. Scl. USA., 1993. V. 90. P.3516−3520.

145. Kuerbitz S. J., Plunkett B. S., Walsh W. V., Kastan M. B. Wild-type p53 is a cell cycle check point detetminant followind irradiation // Proc. Nat. Acad. Scl. USA, 1992. V. 89. P.7491−7495.

146. Kusenda J. Bcl-2 family proteins and leukemia // Neoplasma, 1998. Y.45, p. l 17−122.

147. Lai J., Preudhomme C., Zandecki M., et al // Leukemia, 1995. V.9, p.370−381.

148. Lam M., Dubyak G., Chen L. et al. Evidence that BCL-2 represses• 24apoptosis by regulating endoplasmic reticulum-associated Ca fluxes // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1994. V. 91, N14. P.6569−6573.

149. Landowski T.H., Gleason-Gusman M.C., Dalton W.S. Selection for drug resistence results in resistence to Fas-mediated apoptosis// Blood, 1997. V.89, p.1854−1861.

150. Lane D. P., Xin L., Hupp T., Hall P. A. The role of the p53 protein in the apoptotic response // Phil. Trans. Roy Soc. London B., 1994. V.345, N1313. P.277−280.

151. Le P. T., Maecker H. T., Cook J. E., In situ detection and characterization of apoptotic thymocytes in human thymus. Expression of bcl-2 in vivo does not prevent apoptosis // J. Immunol., 1995. V. 154, № 9. P.4371−4378.

152. Le Brun D. P., Warnke R. A., Clearly M. Z. Expression of bcl-2 in fetal tissues suggests a role in morphogenesis // Amer. J. Pathol., 1993. Y.142. P.743−753.

153. Lee J.S., Lee M.C., Park C.S., Juhng S.W. Value of p53 Protein and Flow Cytometric DNA Analysis in the Study of serous Effusions // Acta Cytol., 1997. V.41, p.1719−1725.

154. Leek D.R., Kaklamanis L., Pezzell F., et al. Bcl-2 in normal human breast and carcinoma, association with oestrogen receptor-positive, epidermal growth factor receptor-negative tumors and in situ cancer // Brit.J.Cancer, 1994. V.69, p.135−139.

155. Leonardi E., Cristofori A., Caffo O., Dalla Palma P. Cytometric DNA analysis and prognostic biomarkers in breast carcinoma. Expression of p53 product in the different ploidy classes // Anal.Cell.Pathol., 1997. V.15, N1, p.31−45.

156. Levine A. J., Momand J., Finlay C. A. The p53 tumor suppressor gene // Nature, 1991. V.351. P. 453−456.

157. Lichtenstein A., Tu Y., Fady C. et al. Interleukin-6 inhibits apoptosis of malignant plasma cells // Cell. Immunol., 1995. V.162, № 2. P.248−255.

158. Lieberman D.A., Hoffman B., Steinman R.A. Mollecular control of growth arrest and apoptosis: p53-dependent and independent pathways // Oncogene, 1993. V. 11, p. 199−210.

159. Linette G. P., Korsmeyer S. J. Differentiation and cell death: lessons from the immune system // Curr. Opin. Cell. Biol., 1994. V. 6, № 6. P.809−815.

160. Lowe S. // Science, 1994. V.266, p.807−809.

161. Lowe S.W., Bodis S., McClatchey A., Remington L., Ruley H.E., Fisher D.E., Housman D.E., Jacks T. // Science, 1994. V.266, p.807−810.

162. Lowe S. w., Ruley H. E. Stabilization of the p53 tumor suppressor is induced by adenovirus El A and accompanies apoptosis // Genes Develop., 1993. V. 7. P.535−545.

163. Lowe S. w., Ruley H. E., Jacks T., Housman D. E. p53-dependent apoptosis modulates the cytotoxicity of anticancer agents // Cell, 1993. V. 74. P.957−967.

164. Lowe S.W., Schmitt E.M., Smith S.W., Osborne B.A., Jacks T. // Nature, 1993. V.362, p.847−849.

165. Lu Q. L., Hanby A. M., Nasser Hajibagheri M. A. et al. // Bcl-2 protein localizes to the chromosomes of mitotic nuclei and is correlated with the cell cycle in cultured epithelial cell lines // J. Cell Sci., 1994. V. 107, № 2. P. 363 371.

166. Magnelli L., Chiarugi V. // J. Cancer Res. Clin. Oncol., 1997. V.123, p.365.

167. Makris A., Allred D.C., Powles T.J., et al. Cytological evaluation of biological prognostic markers from primary breast carcinomas // Breast Cancer Res Treat. 1997. V.44, p.65−74.

168. Manchester K.M., Heston W.D., Donner D.B. Tumour necrosis factor-induced cytotoxicity is accompanied by intracellylar mitogenic signals in ME-180 human cervical carcinoma cells // Biochem.J., 1993. V.290, N1, p. 185−190.

169. Maltzman W., Czyzyk L. // Mol.Cell.Biol., 1984. V.4, p.1689−1694.

170. Mansour E.G., Ravdin P.M., Dressier L. Prognostic factors in early breast carcinoma // Cancer, 1994. V.74, N1, p.381−400.

171. Marks J.R., Davidoff A.M., Kerns B.J., Humphrey P.A., Pence J.C., Dodge R.K., Clarke-Pearson D.L., Igrehart J.D., Bast R.C., Jr Berchuck A.: Overexpression and mutation of p53 in epithelial ovarian cancer // Cancer Res, 1991. V.51, p.2979−2984.

172. Marcs J.R., Humphrey W.K. Overexpression of p53 and HER-2/neu proteins as prognostic markers in early stage breast cancer // Ann.Surg., 1994. V.219, N4, p.332−341.

173. Mazars R., Spinardi L., Bencheikh M., Simony-Lafontaine J., Jeanteur P., Theillet C. p53 Mutations occur in aggressive breast cancer // Cancer Res, 1992. V.52, p.3918−3923.

174. McCurrach M.E., Connor T.M., Knudson C.M., Korsmeyer S.J., and Lowe S.W. // Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1997. Y.94, p.2345−2349.

175. McDonnell T. J., Marin M. C., Hsu B. et al. The bcl-2 oncogene: apoptosis and neoplasia//Rad. Res., 1993. V.186, № 3. P.307−312.

176. Merritt A.J., Potten C.S., Kemp C.J., et al. // Cancer.Res., 1994. V.54, p.614−617.

177. Midulla C., Giovagnoli M.R., Valli G., Vecchione A. Correlation between ploidy status, ERB-B2 and p53 immunohistochemical expression in primary breast cancer // AQCH, 1994. V.16, N1, p.57.

178. Mikami T., Yanagisawa N., BabaH., et al. Association of bcl-2 protein expression with gallbladder carcinoma differentiation and progression and its relation to apoptosis // Cancer (Philad.), 1999. V.85, p.318−325.

179. Miyashita T., and Reed J.C. // Cell, 1995. V.80, p.293−299.

180. Molina R., Segui M.A., Climent M.A., Bellmunt J., et al. // Anticancer Res., 1998. V.18, p.507−511.

181. Motherby H., Marcy T., Hecker M., et al. Static DNA Cytometry as a Diagnostic Aid in Effusion Cytology//AQCH, 1998. V.20, p.153−161.

182. McManus D.T., Yaps E.P.N., Maxwell P. et all. P53 expression mutation in ovarian cancer // J.Path., 1994. V. 174, p. 159−168.

183. Mummenbrauer T., Janus F., Muller B., Wiesmuller L., Deppert W., Grosse F. // Cell, 1996. V.85, p.1089−1099.

184. Nagata S. Apoptosis by death factor // Cell, 1997. V.88, p.355−365.

185. Nizzoli R., Bozzetti C., Savoldi L., et al. Immunocytochemical assay of estrogen and progesterone receptors in fine needle aspirates from breast cancer patients // Acta Cytol., 1994. V.38, p.933−938.

186. Nooter K., Boersma A. w., Oostrum R. G. et al. Constitutive expression of the c-H-ras oncogene inhibits doxorubicin-induced apoptosis and promotes cell survival in a rhabdomyosarcoma cell line // Brit. J. Cancer, 1995. V.71, № 3. P.556−561.

187. Norberg T., Jannson T., Sjogren S., Martensson C., Andreasson I., Fjallskog M.L., Lindman H., Nordgren H., Lindgren A., Holmberg L., Bergh J. // Acta oncol., 1996, Suppl., V.5, p.96−102.

188. Nunez G., Hockenbery D., McDonnell T. J. et al. Bcl-2 maintains B cell memory//Nature, 1991. V.353, № 6339. P.71−73.

189. Okamoto A., Sameshima Y., Yamada Y., Teshima S., Terashima Y., Terada M., Yokota J.: Allelic loss on chromosome 17p and p53 mutation in human endometrial carcinoma of the uterus // Cancer Res, 1991. V.51, p.5632−5635.

190. Ogawa N., Fujiwara T., Kagawa S. // Int.J.Cancer, 1997. V.4, p.367−370.

191. Oltvai Z.N., Korsmeyer S.J. // Cell, 1994. V.79, p. 189−192.

192. Oltvai Z. N., Milliman C. L., Korsmeyer C. L. Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death // Cell, 1993. V.74, № 4. P.609−619.

193. Onishi Y., Kizaki H. Apoptosis and diseases // Hum. Cell., 1994. V.7, № 1. P.27−32.

194. O’Reilly S.M., Camplejohn R.S., Barnes D.M., Milis R.R., Allen D., Rubens R.D., Richards M.A. DNA indecs, S-phase fraction, histological grade and prognosis in breast cancer // BritJ. Cancer, 1990. V.61, N5, p.671−674.

195. Oren M. Relationship of p53 to the controll of apoptosis cell death // Semin. Cancer Biol., 1994. V. 5, № 3. P. 221−227.

196. Ostrowski J.L., Sawan A., Henry L., Wright C., Henry J.A., Hennessey C., Lennard T.J., Angus B., Home C.H. p53 Expression in human breastcancer related to survival and prognostic factors: An immunohistochemical study//J Pathol, 1991. V.164, p.75−81.

197. Owens G. P., Cohen J. J. Identification of genes involved in programmed cell death // Cancer Metastasis Rev., 1992. V. l 1, № 2. P. 149−156.

198. Owen-Schaub L.B., Zhang W., Cusack J.C., Angelo L.S., Santee S.M., FujiwaraT., Roth J.A., Deisseroth L.S., Zhang W.W., Kruzel E. // Mol.Cell.Biol., 1995. V.15, p.3032−3040.

199. Ozturk M., Ponchel F., Pulsleux A. P53 as a potential target in cancer therapy: (Pap.) Symp Foetal and Neonatal Cell Transplant and Rtroviral Gene Ther. Annecy, San, 5−8, 1992. Bone marrow transplant, 1992. V.9, suppl. N1, p. 164−170.

200. Pandrea I.V., Mihailovici M.S., Carasevici E., Szekely A.M., Reynes M., Tarcoveanu E., Dragomir C. // Rev.Med.Chir.Soc.Med.Nat.Iasi., 1995. V.99, p.171−178.

201. Patel D.D., Bhatavdekar J.M., Chikhlikar P.R., Ghosh N., Suthar T.P., Shah N.G., Mehta R.H., Balar D.B. // J.Surg.Oncol., 1996. V.62, p.86−92.

202. Pena G.S., Thompson C.B., Recant W., et al. Bcl-xl and Bcl-2 expression in squamous cell carcinoma of the head and neck // Cancer (Philad.), 1999. V.85, p. 164−170.

203. Pestell K.E., Medlow S.J., Titley J.S., et al. Characterisation of the p53 status, bcl-2 expression and radiation and platinum drug sensitivity of a panel of human ovarian cancer cell lines // IntJ. Cancer, 1998. V.77, p.913−918.

204. Pietenpol J., Vogelatain B. P53 function and dysfunction // J.Cell.Biochem., 1994, Suppl. 18, p. 163.

205. Plunkett W. Apoptosis. Oxford: CBC, 1995, p.35.

206. Porter-Jardan K., Lippoman M.E. Overview of the biologic markers of breast cancer // Hematol.Oncol.Clin.North Am., 1994. V.8, N1, p.73−100.

207. Qazilbasch M., Xiao X., Seth P. II Gene Ther., 1997. Y.4, p.675−682.

208. Raju U., Zarbo R.J., Kubus J., Schultz D.S. The histologic spectrum of apocrine breast proliferations: A comparative study of morphology and DNA content by Image analysis // Hum-Pathol., 1993. V.24, N2, p. 173−181.

209. Rathmell J.C., Thompson C.B. The central effectors of cell death in the immune system // Annu.Rev.Immunol., 1999. V.17, p.781−828.

210. Raycroft L., Wu H.Y., Lozano G. // Science, 1990. V.249, p. 1049−1051.

211. Reap E.A., Roof K., Maynor K., Borrero M., Booker J., Coher P.L. // Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1997. V.94, p.5750−5755.

212. Reed J.C. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death // J. Cell. Biol. 1994. V.124. P. l-6.

213. Reed J.C.: Regulation of apoptosis by bcl-2 family proteins and its role in cancer and chemoresistance// Curr. Opin. Oncol., 1995. V.7, p.541−546.

214. Reed J. // Semin. Hematol., 1998. V.34, p.9−19.

215. Reed J.C. // Oncogene, 1998. V.17, p.3225−3236.

216. Regele S., Kohlberger P., Vogl F.D., et al. Serum p53 autoantibodies in patients with minimal lesions of ductal carcinoma in situ of the breast // Br. J. Cancer, 1999. V.81, p.702−704.

217. Reith A., Danielsen H.E. Assessment of DNA ploidy in clinical tumor material by image cytometry // Anal. and Quant.Cytol.and Histol., 1994. V.16, N1, p.65.

218. Righetti S.C., Torre G.D., Pilloti S., et al. A comparative study of p53 gene mutations, protein accumulation, and response to cisplatin-based chemotherapy in advanced ovarian carcinoma // Cancer Res., 1996. V.56, p.689−693.

219. Rosse T., Olivier R., Monney L., Rager M., Conus S., Feilay I., Jansen B., Borner C. //Nature, 1998. V.391, p.496−499.

220. Sachs L., Lotem J. Control of programmed cell death in normal and leukemic cells: new implications for therapy // Blood, 1993. V.82, № 1. P.15−21.

221. Said S., Schlumberger M., Suarez H.G. // J.Endocrinol. Invest., 1994. V.17, p.371−379.

222. Sellers H.T., Bunken S.W., Crowe D.R., Conner M.M. Multivariate analysis of clinical and molecular prognostic factors in breast cancer: a 16-year follow-up //South.Med., 1994. V.87, N9, p. l 17.

223. Silvestrini R., Benini E., Daidone M.G., Veroni S., Boracchi P., Capelletti V., Di Fronzo G., Veronesi U.: p53 As an independent prognostic marker in lymph node-negative breast cancer patients // J Nati Cancer Inst, 1993. V.85, p.965−970.

224. Sentman C. L., Shutter J. R., Hockenbery D., et al. Bcl-2 inhibits multiple forme of apoptosis but not negative selection in thymocytes // Cell, 1991. V.67. P.879−888.

225. Serrano M., Lin A.W., McCurrach M.E., Beach D., Lowe S.W. // Cell, 1997. V.88, p.593−602.

226. Silvestrini R., Daidone M.G., et al. Prognostic sidnificance of proliferative activity and ploidy in node-negative breast cancer // Annals of Oncology, 1993. V.4,p.213−219.

227. Silvestrini R., Veneroni S., Daidone M.G., et al. The bcl-2 protein: A prodnostic indicator strongly related to p53 in lymph nodenegative breast cancer patients // J.Nat.Cancer Inst., 1994. V.86. p.499−504.

228. Siziopikou K.P., Prioleau J.E., Harris J.R., Schnitt S J. Bcl-2 expression in the spectrum of preinvasive brest lesions. // J. Cancer, 1996. V.77, N 3, p.499−506.

229. Smith M.L., Chen I.T., Zhan Q., Bae I., Chen C.Y., Gilmer T.M., Kastan M.B., O’Connor P.M., and Fornace A.J. // Jr. Science, 1994. V.266, p. 13 761 380.

230. Soussi T. Analyse multifaktorille des alterations du gtnt p53 dans les cancers //Publ.Assoc vanciens eleves Inst Pasteur. 1994. V.36, p.61−64.

231. Spyratos F., Pier-Marie M., Kamet H., Sylvie R. Multiparatric prognostic evaluation of biological factors in primary breast cancer // J.Nat.Cancer Inst., 1992. V.84, N16, p. 1266−1272.

232. Srinivasula S.M., Ahmad M., Fernandes-Almetri T., Almetri E.S. // Mol.Cell., 1998. V. l, p.949−957.

233. Stek K., McDonnely T., Sneige N., El-Naggar A. Flow cytometric analysis of apoptosis and bcl-2 in primary breast carcinomas: Clinical and biological implications. // Cytometry, 1996. V.24, N 2, p. 116−122.

234. Steller H. Mechanisms and genes of cellularsuicide // Science, 1995, v.267, p. 1445−1449.

235. Stewart C.C. Flow cytometric analysis of oncogene expression in human neoplasies 11 Arch.Pathol.lab.Med., 1989. V. 113, N6, p.634−640.

236. Stewart B.W. Mechanisms of apoptosis: integration of genetic, biochemical, and cellular indicator // J.Nat.Cancer Inst., 1994. V.86, N17, p.1286−1295.

237. Strasser A., O’Connor L., Dixit V.M. Apoptosis Signaling //Annu.Rev.Biochem., 2000. V.69. p.217−45.

238. Tandon A.K. Current and future prognostic factors in breast cancer // HistochemJ., 1992. V.24, N8, p.481.

239. Teodoro J.G., Shore G. C., Branton O. E. Adenovirus El A proteins indused apoptosis by both p53-dependent and p53-independent mechanisms // Oncogene, 1995. V. ll, № 3. P. 467−474.

240. Tetu B., Brisson J., Roberge N. Prognostic significance of tumor DNA content, and S-phase fraction by flow cytometry in node-positive breast carcinomas // Cancer J., 1993. V.6, N6, p.322−329.

241. Thorlacius S., Borresen A.L., Eyfjord J.E. Somatic p53 mutations in human breast carcinomas in an Icelandic population: a prognosnic factor // Cancer (Philad.), 1993. Y.53, p.1637−1641.

242. Tishler R.B., Lamppu D.M., Park S., Price B.D. // Cancer Res., 1995. V.55, p.6021−6025.

243. Utada Y., Yoshimoto M., Kasumi F., Akiyama F., sakamoto G. (Relationship between DNA ploidy and Survival in breast cancer) // Gan To KagakuRyoho. 1998. V.25, suppl.3, p.431−435.

244. Utrera R., Collavin L., Lasarevic D., Delia D., and Schneider C. // EMBO J., 1998. V.17, p.5015−5025.

245. Uzarevic B., Petrovecki M., Marusic M., Jakic-razumovic J., Hutinec Z., Sabioncello A., Gamulin S. Prognostic significance of cell cycle parameters in infiltrative ductal breast carcinoma // J.Clin.Lab.Anal., 1998. V.12, N.3, p.131−6.

246. Valenzuela M.T., Nunez M.I., Villalobos M., Siles E., McMillan T.J., Pedraza V., Ruiz de Almodovar J.M. // Int.J.Cancer., 1997. V.72, p.307−312.

247. Van den Berghe. Genetic aspects of breast cancer // Acta Clin.Belg., 1992. V.47, N5, p.358.

248. Vaux D. L., Weissman I. L., Neither macromolecular synthesis nor myc is required for cell death via the mechanism that can be controlled by Bcl-2 // Mol. Cell. Biol., 1993. V. 13,№ 11. P.7000−7005.

249. Vaux D. L., Weissman I. L., Kim S. K. Prevention of programmed cell death in C. elegans by human bcl-2 // Science, 1992. V. 258. P.1955;1957.

250. Veis D. J., Sorenson C. m., Shutter J. R., Korsmeyer S. J. Bcl-2-deficient mise demonstrate fulminant lymphoid apoptosis polycystic kindney andhypopegmented hair // Cell, 1993. V. 75. P.229−240.

251. Veis-Novack D., Korsmeyer S. J. Bcl-2 protein expression during murine development//Amer. J. Pathol., 1994. V. 145,№ 1. P.61−73.

252. Visscher D., Van Bree G., Ottosen S., Wykes S., Csissman J. Flow cytometric enumeration and kinetic analysis of inflammatory cell populations in breast carcinoma // Anal.Cell.Pathol., 1993. V.5, N6, p.321−330.

253. Volpert O.V., Tolsma S.S., Pellerin S., Feige J.J., Chen H., Moscher D.F., BouckN. // Biochem.Biophys.Res.Commun., 1995. V.217, p.326−332.

254. Waga S., Hannon G.J., Beach D., and Stillman B. // Nature, 1994. V.369, p.574−578.

255. Waldman T., Kinzler K.W., and Volgelstein B. // Cancer Res., 1995. V.55, p.5187−5190.

256. Walker R.A., Dearing J.L., Lane D.P., Varley J.M. Expression of p53 protein in infiltrating and in situ breast carcinomas // J Pathol, 1991. V. 165, p.203−211.

257. Webb A., Cunnigham D., Cotter F. et al. Bcl-2 antisense therapy in patients with non-Hodgkin lymphoma // Lancet, 1997. V.349, p. l 137−1141.

258. Wei-qiang Zheng and Roug-zhou Zhan: Quantitative Comparison of Apoptosis to Cell Proliferation and p53 Protein in Breast Carcinomas // AQCH, 1998. V.20, N1, p.1−6.

259. Williams G. T., Smith C. A. Molecular regulation of apoptosis: genetic controls on cell death// Cell, 1993. V. 74, № 5. P.777−779.

260. Yamaguchi A., Kurasaka Y., Fushida S., Kanno M., Yonemura Y., Miwa K., Miyazaki I. // Cancer, 1992. V.70, p.2778−2784.

261. Yang J.M., Thompson F.H., Dalton W., Viilar H., Salman S.E., Trent J.H. Cytogenetic findings in 122 cases of breast carcinoma // Cancer. Genet, and Cytogenet., 1991. V.56,Nl, p. l41.

262. Yonish-Rounash E., Grunwald D., Wilder S. et al. P53-mediated cell death: relationship to cell cycle control // Mol. Cell. Biol., 1993. V.13. P.1415−1423.

263. Zamazami N. Mitochondrial control of apoptosis // South West Cancer News, 1997. V.10, p.4−5.158.

264. Zhan Q., Kontny U., Iglesias M., Alamo I., Jr., Yu K., Hollander M.C., Woodworth C.D., and Fornace A J. // Oncogene, 1999. V.18, p.297−304.

265. Zheng C. Y., Pabello P., Skinnider L. F., Characteristics of a cell line established from a T-cell actute leukemia by transfection with the bcl-2 gene // Acta haematol., 1994. V. 91, № 4. P.181−186.