Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Анализ протеолитической активности в ядерных фракциях при прорастании семян пшеницы

Диссертация: Анализ протеолитической активности в ядерных фракциях при прорастании семян пшеницы
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В нашей работе в качестве объекта исследования молекулярно-генетических основ индивидуального развития растительного организма были использованы семена пшеницы, которые проращивали в течение гетеротрофной фазы онтогенеза и через определенные интервалы (24 ч), начиная от воздушно-сухого зародыша (0 ч) до окончания роста колеоптиля (120 ч), выделяли клеточные ядра и их фракции (нуклеоплазму… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА I. Структурно-функциональные особенности организации клеточных ядер
    • 1. 1. Структурно-функциональные особенности надмолекулярных структур клеточных ядер. б
      • 1. 1. 1. Нуклеоплазма
      • 1. 1. 2. Хроматин
      • 1. 1. 3. Ядерный матрикс

Анализ протеолитической активности в ядерных фракциях при прорастании семян пшеницы (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Проблема исследования молекулярно-генетических основ онтогенеза у растений является актуальной. Одним из подходов к анализу этого вопроса может быть исследование функциональной активности клеточных ядер. В 1988 г. и 1991 г. вышло в отечественной научной литературе две книги: И. Б. Збарского «Организация клеточного ядра» [42] и И. Б. Збарского, С. Н. Кузьминой «Скелетные структуры клеточного ядра» [43]. Эти книги представляют сводку мировой и отечественной литературы по всем аспектам структурной нефункциональной организации клеточных ядер, главным образом, представленных животными объектами. Что касается растительных объектов, то в вышепредставленных источниках имеются обрывочные сведения по растительным объектам.

В настоящее время ограниченный протеолиз рассматривается как одна из стадий посттрансляционной модификации белков [61, 62]. На уровне ядерных белков этот процесс взаимосвязан с реализацией, хранением и воспроизведением генетической информации [30].

Цель данной работы изучить закономерности проявления ограниченного протеолиза в ядерных фракциях в течение прорастания семян пшеницы.

В нашей работе в качестве объекта исследования молекулярно-генетических основ индивидуального развития растительного организма были использованы семена пшеницы, которые проращивали в течение гетеротрофной фазы онтогенеза и через определенные интервалы (24 ч), начиная от воздушно-сухого зародыша (0 ч) до окончания роста колеоптиля (120 ч), выделяли клеточные ядра и их фракции (нуклеоплазму, хроматин, ядерный матрикс) из отдельных органов проростков. О функциональной активности ядерных фракций судили по наличию ограниченного трипсиноподобного протеолиза и его ингибирования.

В нашу задачу входило изучение: 1. Провести отбор относительно физиологически равноценных семян и растущих проростков;

2. Определить количество клеток в органах растущих проростков;

3. Определить трипсиноподобную протеолитическую активность в ядерных фракциях;

4. Определить ингибитор-трипсиновую активность в ядерных фракциях;

5. Выделить методом аффинной хроматографии трипсиноподобные протеиназы и ингибитор-трипсиновые компоненты из ядерных фракций;

6. Определить компонентный состав трипсиноподобных протеиназ и их ингибиторов из ядерного матрикса.

Принятые сокращения и обозначения: Хр-1 — хроматин неп-рочносвязанный с ядерным матриксомХр-11 — хроматин прочносвя-занный с ядерным матриксомЯМ — ядерный матриксЯ0- ядерный остатокТПтрипсиноподобные протеолитические комплексыИТ-ингибитор-трипсиновые комплексыТЭА — триэтаноламинБАЭЭ•НС1 — Ы-бензоил-аргинин этиловый эфирБА — бензоил аргининШУЮвысокоподвижная группа белковЬМС — низкоподвижная группа белковЭПР — эндоплазматический ретикулум;

— б.

V. ВЫВОДЫ.

1. Выявлена на уровне ядерных фракций (нуклеоплазмы, хроматина, ядерного матрикса) внутриядерная активность трипсиноподобных протеиназ и ингибитора трипсина в процессе роста и развития проростков пшеницы.

2. Показан эндогенный ритм трипсиноподобного ограниченного протеолиза в ядерном матриксе и хроматине.

3. Выделены из ядерного матрикса трипсиноподобные протео-литические (ТП-) и ингибитор-трипсиновые (ИТ-) комплексы .

4. Показано, что трипсиноподобные и ингибитортрипсиновые комплексы — гетерополимерные структуры в состав которых входят белок, углеводы, ДНК, РНК. По соотношению РНК/ДНК это рибонуклеопротеидные структуры (РНП-структуры).

5. Содержание трипсиноподобных и ингибитортрипсиновых комплексов в ядерном матриксе зависит от физиологических особенностей циркадного ритма роста проростка пшеницы .

IV.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Предпринята одна из первых попыток биохимического анализа мо-лекулярно-генетических основ биологии индивидуального развития на примере прорастающих семян пшеницы. Прорастающие семена растений в настоящее время широко используются в качестве удобной модели для исследования механизмов регуляции генной активности на ранних этапах инициации ростовых процессов [95, 43]. Для того, чтобы изучить особенности функционирования клеточного ядра и его компонентов в процессе прорастания зерновок пшеницы выделяли ядра и их фракции (нуклеоплазму, хроматин, ядерный матрикс) из зародышей сухих семян (0 ч) и далее через каждые 24 ч от начала замачивания из целых проростков (24 ч), мезокотилей (48 ч120 ч), колеоптилей (48 4120 ч), листьев (72 4120 ч), корней (48 ч~*120 ч) проростков пшеницы.

На основании литературных данных по модификации ядерных белков и их роли в экспрессии генов [30, 46] было предположено, что в клеточных ядрах могут находиться собственные протеиназы и их ингибиторы, которые путем механизма ограниченного протеолиза гистонов и негистонов вовлекаются в регуляцию генетической активности. Для того, чтобы получить экспериментальные данные вышеизложенного предположения, был поставлен метод выделения клеточных ядер, сохраняющий внутриядерные метаболитические системы [48], а также метод определения внутриядерной протеиназной и ингибиторной активности [49].

Вопрос о присутствии протеолитических ферментов в клеточных ядрах долгое время подвергался сомнению. Считали, что это результат цитоплазматического загрязнения при выделении ядерных фракций [185]. Однако, все больше стало появляться работ, в которых доказывалось наличие протеиназ в клеточных ядрах [127, 128, 131, 149, 161, 169, 200]. Ученые при реконструкции хроматина давно использовали трипсин [37, 172], так как широко известна специфичность этого фермента расщепляющего, главным образом, Arg-X, Lys-X связи.

76]. В связи с тем, что белковые компоненты клеточного ядра представлены лизини аргининбогатыми гистонами [18]- то естественно, мы основное внимание уделили поиску сериновых-трипсинопо-добных протеиназ и их ингибиторов в надмолекулярных структурах ядер. Поэтому в качестве субстрата для выявления протеолитической активности использовали низкомолекулярный, аргининбогатый белокпротамин, который выпускается в виде протаминсульфата. Необходимо отметить, что определение протеолитической активности и ее инги-бирования в надмолекулярных структурах (нуклеоплазма, хроматин, ядерный матрикс) клеточных ядер в течение индивидуального развития организма, проведено впервые.

Физиологический смысл проявления ядерными фракциями трипси-ноподобной активности и ее ингибирования в процессе индивидуального развития проростков пшеницы (рис. 3.3.2.1), мы рассматривали с позиции реорганизации генетических структур (нуклеоплазмы, хроматина, ядерного матрикса), в процессе которого может происходить модификация ядерных белков путем их ограниченного (Агд-Х, Ьуэ-Х) протеолиза. Анализ рис. 3.3.2.1 показал четкую направленность разобщенности в хроматине и ядерном матриксе ограниченного протеолиза. То есть, если ограниченный протеолиз активно осуществляется в ядерном матриксе, то в хроматине он прекращается или замедляется и наоборот. Мы склонны предположить, что активный протеолиз в хроматине связан с интенсивностью клеточных делений, а в ядерном матриксе — с растяжением клеток. Такому предположению способствуют данные по физиологическим особенностям прорастающих семян пшеницы [75, 96]. Как известно наиболее активные клеточные деления происходят в апексе корневой системы 48 ч и колеоптиля 48 ч (рис. 3.3.3.1, 1,1У-48 ч). Это известно из литературных данных [96]. Кроме того, отмечено, что при проклевывании семян, вначале происходят процессы растяжения [75]. Анализ литературных данных [75, 96] и собственных экспериментальных данных (рис. 3.3.3.1: 1,48 чIV, 48 ч- 111,24 ч) позволил нам сделать вышеизложенное предположение. 24 ч проросток, с проклюнувшимся корешком — характеризуется, главным образом, ростовыми процессами, связанными с растяжением клеток, а 48 ч апексы отдельных органов проростков характеризуются ростовыми процессами связанными с клеточными делениями.

Чтобы выделить трипсиноподобные протеиназы и их ингибиторы, мы использовали соответственно колонки с иммобилизованным ингибитором трипсина и трипсином (рис. 3.1.2.1- 3.1.2.4- 3.1.2.5- 3.2.2.1- 3.2.2.2- 3.3.3.1), через которые пропускали: нуклеоплаз-му (0,14 М ИаС1) — хроматин-1 (непрочносвязанный с ядерным матрик-сом- 0,35 М ЫаС1) — хроматин-11 (прочносвязанный с ядерным матрик-сом- 2 М ЫаС1) — ядерный матрикс (6 М гуанидин гидрохлорид с Р~меркаптоэтанолом) и ядерный остаток (0,5 н. ЫаОН). Результаты эксперимента показали, что только компоненты ядерного матрикса способны связываться с иммобилизованным трипсином или с ингибитором трипсина и их содержание по белковому компоненту взаимосвязано с физиологическими особенностями роста и развития проростков пшеницы. Возможно, это связано с особенностью структур ядерного матрикса (ЯМ), так как в ЯМ воздушно-сухих зародышей (0 ч) мы не обнаружили компонентов связывающихся с иммобилизованным трипсином или его ингибитором. На животном объекте показано, что ядерный матрикс покоящихся клеток слабо развит [см. 43]. Возможно это относится и к ЯМ воздушно-сухих зародышей, которые находятся в состоянии покоя.

Исследование компонентного состава ТПи ИТ-комплексов показало, что помимо белка в их состав входят РНК, ДНКи по соотношению РНК/ДНК, это, главным образом, рибонуклеопротеидные структуры, о роли и функции которых, мы пока ничег<�о не знаем.

Сравнение протеолитической активности трипсиноподобных комплексов с активностью трипсина, а ингибиторных комплексов со способностью ингибировать трипсин и собственные трипсиноподобные протеиназы (рис. 3.1.2.3), показало, что они проявляют как проте-олитическую, так и ингибирующую активности.

Таким образом, на прорастающих семенах пшеницы на уровне надмолекулярных ядерных структур (нуклеоплазмы, хроматина, ядерного матрикса) показано функционирование ядерных протеиназ, активность которых взаимосвязана с физиологическими особенностями индивидуального роста отдельных органов и тканей проростков пшеницы .

Показать весь текст

Список литературы

  1. Л.В., Кадыков В. А. Ультраструктура клеток апикальной меристемы побега пшеницы, развивающегося при низких положительных температурах // Цитология. 1985. Т.27. 1.С.28−32.
  2. Л.В., Кадыков В. А. Ультраструктура клеток апикальной меристемы побега пшеницы, развивающегося при низких температурах // Цитология. 1985. Т.27. 2. С.136−141.
  3. Л.В., Шапошников Я. Д., Кадыков В. А. Изменения ультраструктуры ядер клеток апекса побега пшеницы в процессе прорастания // Онтогенез. 1988. Т.19. 2. С.181−190.
  4. А.Т., Атаханова Б. А., Туракулов Я. Х. Взаимодействие трийодтиронина с белками ядерного матрикса печени крыс // ДАН СССР. 1985. Т.284. С.752−754.
  5. A.B., Красильников В. А., Бойков П. Я. Участие сфингомиелина в образовании связи ДНК с ядерным матриксом в процессе репликации // ДАН СССР. 1983. Т.273. С.231−234.
  6. М.В., Кондрашова М. Д. Свойства хроматина зародышей семян, созревающих при разных температурах. В кн.: Физиология семян: формирование, прорастание, прикладные аспекты. Душанбе: Дониш, 1990. С.107−119.
  7. С.Ф., Глотов Б. Ю., Николаев Л. Г. Интерфазный хроматин в местах прикрепления к ядерному матриксу имеет нуклеосомную природу // ДАН СССР. 1982. Т.266. 5. С. 1274.
  8. С.Ф., Глотов Б. Ю., Николаев Л. Г. Свойства остаточного конденсированного хроматина селезенки мыши, ассоциированного с ядерным матриксом // Молекулярная биология. 1983. Т.17. 4. С.840−845.
  9. П.У. Деление клеток в меристемах и значение этого процесса для органогенеза и формирования растений // Онтогенез. 1994. Т.25. 5. С.5−28.
  10. С.И., Белинцев Б. Н., Белоусов Л. В. и др. Теоретические и математические аспекты морфогенеза / Отв. ред. Преснов Е. В. и др. М.: Наука, 1987. 295 с.
  11. Т.М. Умные гены //В мире науки.1991. 10. С.67−77.
  12. Д.Ю., Стручков В. А. Белковый состав ядерного матрикса в клетках различных тканей животных // Биополимеры и клетка. 1989. Т.5. 1. С.41−45.
  13. A.A. Некоторые аспекты узнавания нуклеиновых кислот белками при передаче генетической информации. В кн.: Итоги науки и техники. Молекулярная биология. М.: ВИНИТИ, 1982. Т.17. С.6−60.
  14. П.Я., Сидоренко Л. И., Шевченко Н.А, Чирков Г. П., Тодоров И. Н. Активация хроматина и протеолиза гистонов при подавлении синтеза белков в клетках печени // Биохимия. 1983. Т.48. 1. С.23−32.
  15. К., Самнер Э. Хромосома эукариотической клетки. М.: Мир, 1981. 592 с.
  16. В.Я. Неделящееся ядро // Руководство по цитологии / Ред. Жинкин Л. Н., Румянцев П. П. М.-Л., 1965. Т.1. С.269−344.
  17. Дж.Д., Ченг С. П., Маркус А. Синтез белка и прорастание семян. В кн.: Физиология и биохимия покоя и прорастания семян. М.: Колос, 1982. С.387−396.
  18. Буш Г. Гистоны и другие ядерные белки. М.: Мир, 1967. 150 с.
  19. А.Я. Структура хроматина // Журнал Всесоюзного химического общества им. Менделеева. 1975. Т.20. 3. С.254−258.
  20. А.Я., Бакаев В. В., Ильин Ю. В., Баев A.A., мл.Кадыков В. А., Венгеров Ю. Ю., Георгиев Г. П. Структура хромосомных дезоксирибонуклеопротеидов // Молекулярнаябиология. 1976. T.10. 1. С.35−54.
  21. А.Е. Сравнительная структурно-функциональная характеристика цитоскелета животных и высших растений //Ж.общ.биол. 1996. Т.57. N 3. С.293−325.
  22. Верем1енко К.H. Mi-крометод визначения протеолз. тично активности трипсину // Украинский биохимический журнал. 1963. Т.35. 2. С. 294.
  23. К.Н. Ферменты протеолиза и их ингибиторы в медицинской практике. Киев: Здоровье, 1971. 186 с.
  24. Витвицкий В.H. In vivo фосфорилирование белков цитоплазмы, клеточных мембран и цитоплазмы хроматина мозга и печени крыс при различных функциональных состояниях // Журнал общей биологии. 1983. T.XLIY. 1. С.83−93.
  25. C.B. Определение активности протеолитических ферментов в зерне злаковых культур. Одесса: Научные труды ВСГИ, 1979. 15. С.59−66.
  26. C.B., Левицкий А. П., Чарский В. В., Сиволап Ю. М. Обнаружение протеолитических ферментов и их ингибиторов в ядрах, выделенных из проростков ячменя // Бюлл. Всесоюзного селек.-генет. института. Одесса: 1981. 39. С.42−49.
  27. А.И., Куцый М. П. Протеиназа, специфичная к гистону HI, ассоциирована с ядерным матриксом и активируется ДНК, содержащей разрывы или денатурированные участки // ДАН СССР. 1988. Т.29. 1. С.240−242.
  28. А. Белки хроматина. Вильнюс: Мокслас, 1988. 138 с.
  29. Гистоны и перенос генетической информации. М.: Мир, 1968. 144 с.
  30. M.В. Структурно-функциональная организация DNA винтерфазном ядре. Функциональный аспект // Молекулярная биология. 1988. Т.22. 2. С.303−322.
  31. Глазков М.В. B-подобные повторы преимущественно ассоциированы с внутренними элементами ядерного матрикса // Молекулярные механизмы генетических процессов. Тезисные доклады 7-го Всесоюзного симпозиума. М., 1990. С. 16.
  32. .О., Николаев Л. Г. Структура, химическая модификация и взаимодействие гистона HI с компонентами хроматина // Молекулярная биология. 1983. Т.17. 5. С.891−915.
  33. О.П. Определение активности папаина // Украинский биохимический журнал. 1986. Т.58. 3. С. 61.
  34. Ю.Я., Вайсблай И. М. Определение ингибитора трипсина в семенах гороха // Прикладная биохимия и микробиология. 1975. Т.9. 5. С.777−782.
  35. Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений. М.: Мир, 1986. Т.1. С. 389.
  36. В.Г., Ребентиш Б. А. Различная устойчивость к триптическому гидролизу фракций гистонов в составе дезок-сирибонуклеопротеида// Биохимия. 1971. Т.36. N 5. С.1020−1025.
  37. Р., Амен А. Что такое прорастание? // В кн.: Физиология и биохимия покоя и прорастания семян. М.: Колос, 1982. С.19−46.
  38. H.H., Бакаева Т. Г., Бакаев В. В. Расщепление мо-нонуклеосом на гистоносодержащие субнуклеосомы // Молекулярная биология. 1982. Т.16. 3. С.541−550.
  39. И.Б. Структура и функции ядерной оболочки // Успехи современной биологии. 1969. Т.67. С.323−341.
  40. И.Б. Белковый состав и организация ядерного матрикса // Биополимеры и клетка. 1985. T.l. 1. С.26−32.
  41. И.Б. Организация клеточного ядра. М.: Медицина, 1988. 367 с.
  42. И.Б., Кузьмина С. Н. Скелетные структуры клеточного ядра. М.: Наука, 1991. 241 с.
  43. A.B., Кущ A.A. Активация хроматина и некоторые проблемы регуляции генетической активности в эукариоти-ческой клетке // Молекулярная биология. 1985. Т.19. 1. С.285−294.
  44. Г. Метаболитические отношения ядра с окружающей средой // Клеточное ядро. Морфология, физиология, биохимия. М. 1972. С.219−229.
  45. Э.А. Модификация гистонов у растений и ее физиологическое значение: Дис.канд. биол. наук. М.: ИФР АН СССР. 1977. 150 с.
  46. Э.А., Вафина Г. Х. Методика выделения протеиназ и ингибиторов из клеточных ядер проростков пшеницы // Физиология растений. 1990. Т.37. С.609−615.
  47. Э.А., Вафина Г. Х. Способ выделения растительных клеточных ядер. Авторское свидетельство 1 701 747 // Б.И. 1991. 48. С. 98.
  48. Э.А., Вафина Г. Х. Способ получения ядерных фракций, обладающих протеиназной и ингибирующей активностью. Авторское свидетельство 1 733 471 // Б.И. 1992. Т.18. С. 96.
  49. Э.А., Вафина Г. Х. Способ оценки физиологического состояния проростков. Патент N2111639 от 27.V.1998 г.
  50. В.А., Мерлин А. Б., Киселев О. И. Молекулярные шапероны: новые белки новые функции // Молекулярная биология. 1991. Т.25. 4. С.869−880.
  51. A.A. Транскрипционно-активные участки хроматина // Онтогенез. 1983. Т.14. 4. С.339−359.
  52. A.A., Афанасьев Б. Н. Негистоновые белки хроматина // Молекулярная биология. 1983. Т.47. 2. С.213−233.
  53. В.А., Панин В. М., Разин C.B. Увеличение степени ацетилирования гистонов нуклеосомного кора приводит к «разворачиванию» 30-нм нуклеосомной фибриллы // ДАН СССР. 1994. Т.334. 1. С.109−111.
  54. М.П., Газиев А. И. Активируемая ДНК и нуклеотидтри-фосфатами протеиназа ядерного матрикса печени крыс, специфичная к гистону HI// Молекулярная биология. 1988. Т.22. N 5. С.1430−1436.
  55. М.П., Малахова Л. В., Газиев А. И. Протеазная активность ядерного матрикса гепатоцитов крыс // Биохимия. 1987. Т.52. 8. С.1315−1318.
  56. В.М. Лектины регуляторы метаболизма // Биотехнология. 6. С.66−79.
  57. А.П. Классификация, номенклатура и биохимические свойства протеолитических ферментов зерна пшеницы и ячменя. Одесса: Научные труды ВСГИ. 1982. С.7−19.
  58. В.В., Миронов Н. М., Шапот B.C. Белки и функциональные свойства хроматина из ядер нормальной печени и экспериментальных гепатом // Бюлл. экспериментальной биологии. 1982. Т.23. С.60−63.
  59. Л.А. Протеолитические ферменты биологических процессов // Биоорганическая химия. 1994. Т.20. 2. С.134−142.
  60. Л.А., Былинкина B.C. Протеолитические ферменты в процессинге белков // Успехи современной биологии. 1990. Т.109. 2. С.219−237.
  61. Л.Ф. Роль структурной организации генома в регуляции морфогенетических процессов. В кн.: Структурно-функциональная организация генома. Новосибирск: Наука, 1989. С.59−80.
  62. Е., Колева С. Съвременни методи за изолиране на ядра от висши растения //Физиология на растенията. 1983. Т.9. 3. С. 89.
  63. Р.К., Инглис A.C. Определение состава белковых олигомеров, получение мономеров и полипептидных цепей. В кн.: Практическая химия белка. М.: Мир, 1989. С.51−81.
  64. Н.М. Содержание некоторых активных и неактивных генов во фракциях хроматина, различающихся доступностью ДНК к действию полициклических ароматических углеводородов // Биохимия. 1987. Т.52. 3. С.503−511.
  65. В.М., Михайлов B.C., Мичурина Т. В., Васецкий С. Г., Хрущев Н.Г. XII Международный конгресс по биологии развития /см. Posakony S.W. (с.711)// Известия АН РАН, серия биологическая. 1994. 4. С.709−720.
  66. М.А. Цитогенетические аспекты пространственной организации интерфазного ядра // Успехи современной биологии. 1990. Т.110. 4. С.163−179.
  67. В.В. Природные ингибиторы протеолитических ферментов //Успехи современной биологической химии. 1982. Т.22. С.100−118.
  68. В.В. Белковые ингибиторы как регуляторы процессов протеолиза. М.: Наука, 1983. С. 40.
  69. В.В. Ингибиторы протеолитических ферментов в растениях // Вопросы медицинской химии. 1987. 5. С.52−56.
  70. В.В., Валуева Т. А., Колосова Г. В. Выделение белка-ингибитора химотрипсина из семян гледичи // Биохимия. 1982. Т.17. 12. С.2015−2021.
  71. В.Ф., Пасхина Т. е. Определение антитриптической активности в сыворотке крови человека. В кн.: Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 188.
  72. A.A. Только ли ДНК определяет развитие организма? // Онтогенез. 1985. Т.16. 1. С.15−25.
  73. H.В. Физиология начальных этапов прорастания семян двудольных растений. Дисс.док. биол. наук. М., 1991. 47 с.
  74. Ю.А. Биоорганическая химия. М.: Просвещение, 1987. 795 с.
  75. Л.В., Климова С. П., Тарасова К. Я., Родионова В. М. Состав дезоксирибонуклеопротеидной фракции ядер клеток регенерирующей печени крыс // Журнал общей биологии. 1969. Т.30. 3. С.332−335.
  76. Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1981. С.37−105.
  77. Т. е., Кринская А. В. Количественное определение калликреина в сыворотке (плазме) крови человека. В кн.: Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 157.
  78. З.П. Практикум по цитологии растений. М.: Колос, 1980. С.108−109.
  79. О.М., Онищенко Г. Е. Особенности пролиферации многоядерных клеток при длительном воздействии цитохала-зина В // Цитология. 1987. Т.29. 2. С.214−219.
  80. В.В. Физиология растений. М.: Высшая школа, 1989. 463 с.
  81. А. Элементы физиологии клетки. Л.: Наука, 1976. С.65−192.
  82. C.B., Мантьева В. Л., Георгиев Г. П. Выделение и сравнительная характеристика участков ДНК, прилегающих к структурам остова интерфазного ядра и метафазной хромосомы // Молекулярная биология. 1990. Т.14. С.223−233.
  83. Э., Новинский В., Саэс Ф. Биология клетки. М.: Мир, 1973. С.33−53.
  84. Э. Открытие основных законов жизни. М.: Мир, 1978. 327 с.
  85. К., Уэбстер П. Клетка. М.: Мир, 1980. С.44−45.
  86. М.В. Взаимосвязь хромосом в интерфазном ядре // Цитология. 1990. Т.32. 6. С.664−666.
  87. Р. Методы очистки белков. М.: Мир, 1985. С. 342.
  88. М.М., Бердышев Г. Д., Тюленев В. И. Гидролаза гис-тонов печени и почек крыс в постнатальном онтогенезе // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1979. Т.15. С.131−135.
  89. A.C. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот // Биохимия. 1958. Т.23. 5. С.656−662.
  90. С.Д. Выделение и характеристика ядерного матрик-са лука Allium сера // Цитология. 1984. Т.26. 8. С.874−877.
  91. Н.И., Блохин Д. Ю. Белковый состав комплексов ДНК-матрикс с «прочным» и «слабым» типом связи, выделенных из клеток асцитной карциномы Эрлиха // Биохимия. 1989. 7. Т.54. С.1217−1223.
  92. В.М., Калинин Ф. Л. Изменение свойств хроматина на ранних этапах прорастания семян // Физиология и биохимия культурных растений. 1985. Т.17. 3. С.219−230.
  93. Ф., Филлипс И. Рост растений и дифференцировка. М.:Мир, 1984. 520 с.
  94. H.A. Белки высокоподвижной группы: структура, локализация, функции // Биохимия. 1991. Т.56. 1. С.9−16.
  95. Физиология и биохимия покоя и прорастания семян / Ред. Николаевой М. Г., Обручевой H.B. М.:Колос, 1982. 495 с.
  96. С.Н., Сиволаб A.B., Кучеренко Н. Е. Особенностибелково-нуклеиновых взаимодействий в составе хроматина эукариот // Успехи современной биологии. 1984. Т.98. 2. С.163−176.
  97. Чен П., Густа Л. Роль воды в морозостойкости озимых злаков // Холодостойкость растений. М.: Колос, 1983. С.132−140.
  98. В.В. Ядерный матрикс эукариотической клетки: некоторые вопросы выделения, структуры, функционирования // Успехи современной биологии. 1985. Т.99. 3. С.371−383.
  99. Ю.Г., Шахбазов В. Г. Биоэлектрические свойства клеточных ядер // Успехи современной биологии. 1992. Т.112. 4. С.499−511.
  100. О.В., Разин С. В. Два типа участков прикрепления ДНК к ядерному скелкту в клетках асцитной карциномы Эрли-ха // Молекулярная биология. 1983. Т.17. С.303−313.
  101. Adachi У., Kas Е., Laemmli U. Preferential, cooperative binding of DNA topoisomerase II to scaffold-associated regions // EMBO 0. 1989. V.8. 13. P.3997−4006.
  102. Appelbaum D., Blobel G., Georgatos S. In vivo phosphorylation of the lamin В to its' nuclear membrane receptor is affected by phosphorylation // D. Biol. Chem. 1990. V.265. 8. P.4181−4187.
  103. Barondes S.H. Bifunctional properties of lectins: lectins redefined // TIBS. 1988. V.13. P.480−482.
  104. Barrett A.CJ. An introduction to the proteinases// Proteinase Inhibitors (Barrett and Salvesen (eds.)). 1986. Elsevier Science Publishers BV (Biomedical Division) P. 3−22.
  105. Baluska F. Nuclear size, DNA content and chromatin condensation are different in individual tissues of the maize root apex // Protoplasma. 1990. V.150. 1. P.45−52. РЖ, 12T171.
  106. Bcach D. et al. Cell cycle control in eukaryotes: Meet. Cold Spring Harbor, March, 1988. XII. P.211. (Curr. Commun. Mol. Biol.) ISBNO-87 969−317−7. P) K.6H339K.
  107. Benavente R. Postmitotic nuclear reoeganization events analyzed in living cells // Chromosoma. 1991. V.100. 4. P.215−220.
  108. Berezney R., Coffey D.S. Identification of a nuclear protein matrix // Biochem, Biophys. Res. Commun. 1974. V.60. P.1410−1417.
  109. Bouteille M., Laval M., Dupuy-Coin A.M. Localization of nuclear functions as revealed by ultrastructural autoradiography and cytochemistry // The cell nucleus / Ed. H.Busch. New York. 1974. V.l. P.3−71.
  110. Brandt W.F., Bohm L., Holt C.V. Proteolytic degradai ion of histones and site of cleavage in histone F2al, F3 // Febs Letters. 19. V.51. 1. P.88−93.
  111. Carter D., Chae C-B. Chromatin-bound protease: degradation of chromosomal proteins under chromatin dissociation conditions // Biochemistry. 1976. V.15. 1. P.180−185.
  112. Chae C-B., Gadski R.A., Carter D.B., Efird P.H., Integrity of proteins in reconstituted chromatin // Biochemical and Biophisical research communications. 1975. V.87. 4. P.1459−1465.
  113. Chaly N. Electron microscopy of nuclear matrixes prepared in situ under oxidizing conditions // Cell Biol. Int. Repts. 1988. V.12. 8. P.587−595. P) K 4T158.
  114. Chamborn P. Eukariotic nuclear RNA polymerases // Ann. Rev. Biochem. 1975. V.44. P.613.
  115. V., Bouchara S. ДНК-белковые комплексы ядерного матрикса: РНК присутствует в ДНК-комплексах с наиболее сильно связанными белками // Int. Symp. Mol. Organization of biol. strucnures. Moscow, 1989. P.286. РЖ 6Б580.
  116. V., Georgiev G. Комплексы ДНК ядерного матрикса с белками, прочносвязанными с ДНК, содержат специфическую низкомолекулярную РНК нового типа // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1990. V.169. 1. P.95−101. РЖ 11И39.
  117. Clark D.D., Kimura T. Electrostatic mechanism of chromatin folding // J. Mol. Biol. 1990. V.211. 4. P.883−896.
  118. Cox H. The use of guaidinum chloride in the isolation of nuclei acids // Methods in Enzymology. Acad. Press. New York. 1968. V.12. Part B. P.120.
  119. Crampton C.F., Stein W.H., Moore S. Comparative studies on chromatographically purified histones // J. Biol. Chem. 1957. V.225. 1. P.363−386.
  120. De Boni U. Chromatin motion in interphase nuclei its modulation and its potential role in gene expression // Anticancer Res. 1988. V.8. 5a. P.885−898. РЖ 4Б447.
  121. Dingwall C. The accumulation of proteins in the nucleus // Trends Biochem. Sci. Netherlands. 1985. V.10. P.64−66.
  122. Dingwall C., Sharnick S., Laskey R. A polypeptide domain that specifics migration of nucleoplasmin into the nucleus // Cell. 1982. V.30. N 1. P.449−458.
  123. Djondjurov L.P., Yancheva N.Y., Ivanova E.Ch., Christov K. Increased proteolysis in chromatin of terminally differentiated and quiescent cells // Experimental Cell Research. 1984. V.152. P.134−147.- 128
  124. Dyson M., Walker J.M. The purification of a proteolytic enzyme from calf thymus nuclei // Biochem. Soc. Trans. 1983. V.ll. 2. P.187−188.
  125. Earnshaw W.C., Bernat R.L. Chromosomal passengers: Toward an integrated viev of mitosis // Chromosoma. 1991. V.100. 3. P.751−761.
  126. Elckbush T.H., Moudrianakis E.N. The compaction of DNA helices into either continious supercoils of Folded-fiber rods and toroids // Cell. 1978. V.13. N 1. P.295−306.
  127. Elia M.C., Moudrianakis E.N. Regulation of H2A-specific proteolysis by the histone H3: H4 tetramer // 0. of Biol. Chemistry. 1988. V.263. 20. P.9958−9964.
  128. Ellis R. Molecular chaperones: the plant connection // Science. 1990. V.250. 4983. P.954−959.
  129. Ellison M., Pulleyblank D. Pathways of assembly of nucle-ohistone complexes formed in vitro under physiological conditions //D. of Biological Chemistry. 1983. V.258. 21. P.13 321−13 327 .
  130. Faiferman I., Pogo A.O. Isolation of nuclear ribonucleop-rotein notwork that contains heterogeneous RNA and is bound to the nuclear envelope // Biochemistry. 1975. V.14. P.3808−3816.
  131. Faraday C.D., Spanswick R.M. Evidence for a membrane skeleton in higher plants. A spectrin-like polypeptide co-isolates with rice root plasma membranes //FEBS Lett. 1993. V.318. N 3. P.313−316.
  132. Feldnerr C.M., Dworetzky S.I. The pore complexs in nucle-ocytoplasmic exchange // Cell Biol. Int. Repts. 1988. V. 12. 9. P.791−808. P) K 4H17.
  133. Findlay W.A., Mackenzie R.E. Renaturation of formiminot-ransferase-cyclodeaminase from guanidine hydrochloride // Biochemistry. 1988. V.27. 9. P.3404−3408.
  134. Fields A.P., Shaper J.H. A major 62-kD intranuclear matrix polypeptide is a component of metaphase chromosomes // J. Cell Biol. 1988. V.107. 3. P.833−840.
  135. Filipski 0., Leblanc 3., Youdate T., Sikorska M., Walker P.R. Periodicity of DNA folding in higher order chromatin structures // EMBO J. 1990. V.9. 4. P.1319−1327.
  136. Finlay D.R., Forbes D.3. Reconstitution of biochemically altered nuclear pores: transport can be eliminated and restored // Cell. 1990. V.60. 1. P.17−29.
  137. Foisy S., Bibor-Hardy V. Synthesis of nuclear lamins in BHK-21 cells synchronized with aphidicolin // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1988. V.156. 1. P.205−210.
  138. Forbes D.S., Kirschner M.W., Hewport S.W. Spontaneous formation of nucleus-like structures around bacteriophage DNA injected into Xenopus eggs // Cell. 1983. V.34. N 1. P.13−23.
  139. Goodwin G.H., Walker S.M., Johns E.W. Studies on the degradation of high mobility group non-histone chromosomal proteins // Biochem. Biophys. Acta. 1978. V.519. P.233.
  140. Greber U.F., Senior A., Gerace L. A major glycoprotein of the nuclear pore complex is a membranespanning polypeptide with a large lumenal domain and a small cytoplasmic tail // EMBO J. 1990. V.9. 5. P.1495−1502.
  141. Grunstein M. Nucleosomes: regulators of transcription // Trends Genet. 1990. V.6. 12. P.395−400.
  142. Haaf T., Schmid M. Chromosome topology in mammalian interphase nuclei // Exp. Cell. Res. 1991. V.192. 2. P.325−332. P) K 8H478.
  143. Hagiwara H., Miyazaki K., Matuo Y., Yamashita J., Horio T. Purification and characterization of alkaline protease and neutral protease from chromatin of rats // Biocimica et Biophysica Acta. 1981. V.660. N 1. P.73−82.
  144. Hamilton R.N., Kusch U., Temperli A. Simple rapid procedure for isolation of tabacco leaf nuclei // Analytical Biochemistry. 1972. V.49. N 1. P.48.
  145. Hatch C.L., Bonner W.M., Moudrianakis E.N. Minor histone 2A variants and ubiquinated forms in the native H2A: H2B dimer // Science. 1983. V.221. 4609. P.468−470.
  146. He D., Nickerson S., Penman S. Core filaments of the nuclear matrix //0. of Cell Biology. 1990. V.110. P.569−580.
  147. Hennekes H., Vorburger К., Nigg E. Analysis of a lamin a processing protease // Experientia. 1991. V.47. N 1.P.71.
  148. Hirasawa E., Takahashi E., Matsumoto H. A transcription inhibitor in non-histone proteins of germinated pea cotyledon // Plant and Cell Physiol. 1978. V.19. 4. P.599−608.
  149. Izaurralde E., Kas E., Laemmli U.K. Highly preferential nucleation of histone HI assembly on scaffold-associated regions // D. Mol. Biol. 1989. V.210. 3. P.573−585.
  150. Jacson D.A., Cook P.R. Transcription occurs at a nucleos-keleton // EMBO J. 1985. V.4. P.919−925.
  151. Jacson D.A., Cook P.R. Replication occurs at the nuclear skeleton // EMBO J. 1986. V.5. P.1403−1410.
  152. Dehn В., Niedenthal R., Wilmen A., Funk M., Escher К., Hegemann O.H. Structure and function of centromeres in mitosis and meiosia: Suppl. // Eur. J. Cell Biol.: Suppl. 1990. V.51. 30. P.36. РЖ 11И48.
  153. John W., Jones G.S., Ellis Ch.H.(Jr). Доменная модель организации ДНК эукариот, молекулярная основа ограничений в развитии и эволюции // 3. Theor. Biol. 1989. V.137. 2. P.281−320. РЖ 2А86.
  154. Kas Е., Izaurralde Е., Laemmli U.K. Specific inhibition of DNA binding to nuclear scaffolds and histone HI by distamycin. The role of oligo (dA) oligo (dT) tracts //
  155. J. Mol. Biol. 1989. V.210. 3. P.587−599.
  156. Kim Y., Chae Ch.-B. A protease is bound to rat liver nuc-leosomes //Biochimica et Biopisica Acta. 1983. V.755. P.151−154.
  157. Romberg L.D. Ann. Rev. Biochem. 1977. V.46. P.931−954.
  158. Kowalska-Loth В., Brudzynski Т., Toczko K., Chmielewska I. The presence of serine protease in pea embryo chromatin // Acta biochimica Polonica. 1976. V.23. 4. P.369−374.
  159. Krachmarov Ch.P., Dessev G.N. Reversible contractility of the nuclear lamina // Докл. Болг. АН 1988. V.41. 9. P. 119−122.
  160. Kuehl L. Isolation of plant nuclei // Ztschr. Naturforsch. 1964. 19b. 6. P.83.
  161. Kurecki Т., Kowalska-Loth В., Toczko K., Chmielewska I. Evidence that neutral protease from calf thymus chromatin is a serine type enzyme // FEBS Letters. 1975. V.53. 3. P. 313−315.
  162. Kwo P., Patel Т., Bronk S.F., Gores G.J. Nuclear serine protease activity contributes to bile acid-induced apop-tosis in hepatocytes//Amer. J. Physiol. 1995. V.268. N 4. Pt.l. P.613−621.
  163. Laemmli V.K., Cheng S.M., Adolph K.W. et al. Metaphase chromosome structure: the role of nonhistone proteins // Cold Spr. Harb. Symp. Quant Biol., 1978. V.42 (Chromatin). P.351−360.
  164. Laskey R.A., Leno G.H. Assembly of the cell nucleus // Trends Genet. 1990. V.6. 12. P.406−410.
  165. Leno G.H., Laskey R.A. The nuclear membrane determines the timing of DNA replication in Xenopus egg extracts //
  166. J. Cell. Biol. 1991. V.112. 4. P.557−566.
  167. Lloyd C.W., Hardreaves A.J., Dawson P.J., Ridge R.W.,
  168. Loury H.O., Rosebrough T.N., Farr G.A., Randall R.J. Protein measurement with the follinphenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. V.193. 2. P.265−275.
  169. Manjula K., Rao M.R.S. What makes a cell tick? The A, B, and C of the matter // Curr. Sci. (India). 1996. 70. N 6. P.441−446 (P)K 97.07−04H6.148)
  170. Marks D.B., Keller B.S. Proteolytic degistion of histones indicates that the nucleosomes of nuclei and of sheared chromatin are sililar // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1977. V.74. 1. P.134−139.
  171. Marks D.B., Keller B.S. The use of proteolytic enzymes to determine the location of histones in chromosomal substructures // Arch. biochem. and biophys. 1976. V.175. P.598−605.
  172. Matrisian L.M. Metalloproteinasis and their inhibitors in matrix remodeling // Trends Genet. 1990. V.6. 4. P.121−125.
  173. Matsumoto L.H. Enrichment of satellite DNA on the nuclear matrix of bovine cell // Nature. 1981. V.294. P.481−482.
  174. M., Defelice L.J., Cohen J., Malter H. // Nature, 1990. V.343. 6260. P.764−767.
  175. Munks R.J.L., Moore J., O’Neill L.P., Turner B.M. Histone H4 acetylation in drosophilla. Frequency of acetylation at different sites defined by immunolabelling with sites-pecific antibodies // FEBS Lett. 1991. V.284. 2. P.245−248. P) K 12K91.
  176. Miller Ch.G. Protein degradation and proteolytic modification //"Escherichia coli and Salmonella typhimurium: Cell. and Mol. Biol., V. l". Washington D.C., 1987. P.680−691
  177. Nakamura H., Morita T., Sato C. Structural organization of replicon domains during DNA synthetic phase in the mammalian nucleus //Exp. Cell Res. 1986. V.165. N 1. P.291−297.
  178. Nelson W.G., Lin L.F., Coffey D.S. Newby replicated DNA is associated with DNA topoisomerase II in cultured rat prostatic adenocarcinoma cells // Nature. 1986. V.322. N 1. P.187−189.
  179. Nelson W.G., Pienta K.L., Barrack E.R., Coffey D.S. The role of the nuclear matrix in the organization and function of DNA // Annual review of Biophysics and Biophysical Chemistry. 1986. V.15. P.457−475. P) K 1B513.
  180. Newport D., Spann T. Disassembly of the nucleus in mitotic extracts: membrane vesicularization, lamin disassembly and chromosome condensation are independent processes // Cell. 1987. V.48. 2. P.219−230.
  181. Nicolas P., Lamy A., Reymond S. Determination of proteolytic enzymes by flow-injection analysis // Analytical Biochemistry. 1991. V.192. N 1. P.70−73.
  182. Paniym S., Jensen R., Chalkley R. Proteilytic contamination of calf thymus nucleohistone and its inhibition // Biochem. Biophys. Acta. 1968. V.160. N 1. P.252−255.
  183. Peter M., Nakagawa CJ., Doree M., Labbe CJ.C., Nigg E. A. In vitro disassembly of the nuclear lamina and M-phasespecific phosphorylation of lamins by cdc2 kinase // Cell. 1990. V.61. 4. P.591−602.
  184. Pluta A.F., Cooke C.A., Earnshaw W.C. Structure of the human centromere at metaphase // Trends Biochem. Sci. 1990. V. 15. 5. P.181−185. P) K 12T269.
  185. Prat A.G., Caniello H.F. Actin cytoskeleton regulates nuclear pore ion channel activity: Abstr. 49th Annu. Meet. Soc. Gen. Physiol., Woods Hole, Mass., 6−10 Sept., 1995 //3. Gen.Physiol. 1995. 106. N 6. P.26. P) K 97.05−042.361.
  186. Price C.A. Isolation of plant nuclei // Plant organells. New York. 1979. P.200.
  187. Rivett 0.A. Regulation of intracellular protein turnover: covalent modification as a mechanism of marking proteins for degradation // Current topics in cellular regulation. England, 1986. V.28. P.291−337.
  188. Rodrigo M.3., Franco L. Histone variants from pea (Pisum Sativum): Their differential presence in fractions obtained by DH-ase 1 digestion of nuclei // Physiol. Plant. 1990. V. 78. 4. P.602−608. P) K 10H10.
  189. Sadgopal A., Bonner S. Proteins of interphase and metaphase chromosomes compared // Biochem. Biophys. Acta. 1970. V.207. 1.P.227−239.
  190. Sanchez-Chiang L., Contreras M., Ainol L. Partial characterization of a nuclear proteolytic activity from fertilized sea urchin eggs // Biochemistry International. 1988. V.16. P.453−463.
  191. Symp. Lyon. 1988. Paris, London. P. 349−362. P) K 7H149.
  192. Shibaoka H., Nagai R. The plant cytoskeleton//Curr. Opinion Cell. Biol. 1994. 6. N 1. P.10−15. P) K 95.10−04H6.63.
  193. Severini A., Morgan A.R. An assay for proteinases and their inhibitor based on DNA // Ethidium bromide fluorescence //Analytical Biochemistry. 1991. V.193. N 1. P.83−89.
  194. Stedman E., Stedman E. Cell specificity of histones // Nature. 1950. N 166. P.780−781.
  195. Stefanovsky V., Dimitrov S., Russanova V., Pashev I. Histones HI and H4 are present near the replication fork // Mol. Biol. Repts. 1990. V. 14. 4. P.231−235. P) K 12B442.
  196. Strauss A.W., Zimmerman M., Boime I., Ashe B., Momford R.A., Alberts A.W. Characterization of an endopeptidase involved in preprotein processing // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1979. V.76. 9. P.4225−4229.
  197. Stellwagen R.H., Reid B.R., Cole R.D. Degradation of histones during the manipulation of isolated nuclei and deo-xyribonucleoprotein // Biochim. Biophys. Acta. 1968. V.155. 2. P.581−592.
  198. Suzuki Y., Murachi T. A chromatin-bound neutral proteaseand its inhibitor in rat peritoneal macrophages // J. Bi-ochem. 1978. V.84. 4. P.977−984.
  199. Sweadner K.S. Trypsin inhibitor paradoxically stabilizes trypsinactivity in sodium dodecyl sulfate, facilitating proteilytic fingerprinting // Analytical Biochemistry. 1991. V.194. N 1. P.130−135.
  200. Tsanev R. Behaviour of nucleosomes during DNA replication // Cell. Biol.: Int. Repts. 3-rd Eur. Congr. Cell. Biol., 2−7 Sept. 1990. Firenze, Italy-London etc. P.536. P) K 12B440.
  201. Tsurugi K., Ogata K. Studies on the serine proteases associated with rat liver chromatin // 0. Biochem. 1982. V.92. P.1369−1381.
  202. Wang T.J. Isolation of mammalian an nuclear nucleic acids // Methods in Enzymology. Acad. Press. New York. 1968. V.12. Part B. P.115−120.
  203. Watson D., Moudrianakis E. Histone dependent reconstitution and nucleosomal localization of a nonhistone chromosomal proteins the H2A-specific protease // Biochemistry. 1982. V.21. N 1. P.248−256.
  204. Werner D., Muller M. High salt stable attachment of RNP-particles to chromosomal DNA // Abstr. nuclear Work-shoop., Banyuls: ECBO. 1983. P.29.
  205. West M.H.P., Bonner W.M. Histone 2A, f heteromorphous family of eight protein species //Biochemistry. 1980. V.19. P.3238.
  206. Wong R.L., Gutowski J.K., Katz M., Goldfarb R.H., Cohen S. Induction of DNA synthesis in isolated nuclei by cytoplasmic factors: inhibition by protease inhibitors // Proc. of the Nat. Acad. Sci. USA. 1987. V.84. 1. P.241−245.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!