Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Фенотипический эффект экспрессии рекомбинантных генов в организме трансгенных животных

Диссертация: Фенотипический эффект экспрессии рекомбинантных генов в организме трансгенных животных
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Материалы диссертации были представлены на международных конференциях: «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2001; «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения», Быково, 2002; «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2002, 2003, 2006; «Прошлое… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Методы трансгенеза в животноводстве
      • 1. 1. 1. Микроинъекция ДНК в пронуклеус зигот
      • 1. 1. 2. Использование ретровирусных векторов
      • 1. 1. 3. Липосомы как переносчики ДНК
      • 1. 1. 4. Трансфекция эмбриональных стволовых клеток и получение трансгенных химер
      • 1. 1. 5. Пересадка ядер из трансфецированных соматических клеток
      • 1. 1. 6. Использование сперматозоидов в качестве переносчиков чужеродной ДНК
    • 1. 2. Применение трансгенных животных
      • 1. 2. 1. Трансгенные животные с измененными хозяйственно- 36 ценными признаками
      • 1. 2. 2. Трансгенные животные — биореакторы
        • 1. 2. 2. 1. Преимущества использование трансгенных животных для производства рекомбинантных белков
        • 1. 2. 2. 2. Продукция рекомбинантных белков в молоко трансгенных животных
        • 1. 2. 2. 3. Использование вирусных векторов для получения трансгенных животных
      • 1. 2. 3. Трансгенные животные, генетически устойчивые к инфекционным заболеваниям
      • 1. 2. 4. Трансгенные животные как доноры внутренних органов
        • 1. 2. 4. 1. Проблемы при ксенотрансплантации
        • 1. 2. 4. 2. Экспериментальные наработки в ксенотрансплантации
        • 1. 2. 4. 3. Создание генетически модифицированных доноров
        • 1. 2. 4. 4. Исследования в области ксенотрансплантации
    • 1. 3. Особенности трансгенеза сельскохозяйственной птицы
      • 1. 3. 1. Микроинъекция ДНК в цитоплазму зиготы
      • 1. 3. 2. Использование вирусных векторов для переноса экзогенной 72 ДНК в эмбриональные клетки и органы птицы
      • 1. 3. 3. Использование эмбриональных стволовых клеток
      • 1. 3. 4. Использование примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) для получения трансгенной птицы
      • 1. 3. 5. Осеменение самок трансформированными спермиями
    • 1. 4. Влияние интегрированных рекомбинантных генов на генотип и фенотип трансгенных животных

Фенотипический эффект экспрессии рекомбинантных генов в организме трансгенных животных (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

Успехи в технологии получения рекомбинантных ДНК открыли возможность создания новых генотипов путем введения, удаления или изменения генома животного уже в первом поколении. Значительный прогресс, достигнутый в этой области, связан прежде всего с разработкой новых более эффективных способов получения трансгенных организмов и созданием качественно новых генных конструкций, обеспечивающих более высокие уровни экспрессии трансгенов в организме животных. Однако, несмотря на достигнутые успехи, при получении трансгенных животных все еще остается проблема, связанная с не прогнозируемостью физиологических последствий реализации внесённой генетической информации.

Данные последствия являются с одной стороны результатом изменений на уровне генотипа, обусловленных дестабилизацией генома трансгенных животных [Кленовицкий и др., 1998, Медведев, 1992, Brem., 1993, Constantini et ah, 1989, Gasaryan et ah, 1987]. С другой стороны нарушения в функционирование отдельных систем организма могут быть связаны с дополнительной экспрессией экзогенного белка, изменяющего характер и уровень^ синтеза эндогенных белков. Последнее является наиболее актуальным при получении трансгенных животных с измененными хозяйственно-полезными признаками и продуцентов рекомбинантных белков фармакологического назначения. Причем в первом случае степень влияния интеграции чужеродных генов на функциональное состояние отдельных систем и организма в целом бывает высокой. Так, при введении генов, кодирующих белки каскада гормона роста (гормон роста, рилизинг фактор гормона роста, инсулиноподобный фактор гормон роста) у трансгенных животных наряду с положительным эффектом, выражающимся в улучшении мясных и товарных качеств получаемых мясопродуктов, наблюдается и негативное влияние экспрессии экзогенных белков на характер и уровень синтеза эндогенных белков организма. Результатом данного влияния являются различные отклонения в развитии животного.

Pursel et ah, 1988; Murray et ah, 1989, Nancarrow et ah, 1991; Rexroad et ah, 1990].

При получении трансгенных животных — продуцентов рекомбинантных белков следует ожидать меньшего влияния интеграции чужеродного гена на физиологические показатели организма, так как направленная экспрессия ре-комбинантного продукта носит, как правило, локальный характер, в связи с чем не оказывает существенного влияния на организм животного. Однако данный факт является исключением в случае высокого уровня синтеза экзогенного белка или неспецифической его экспрессии в других органах и тканях.

Таким образом, экспрессия экзогенных белков в организме трансгенных животных может в различной степени влиять на функциональное состояние отдельных систем организма и проявляться на различных уровнях организации индивидуумов (генетическом, цитологическом, тканевом, организмен-ном). И если влияние чужеродных генов на организм трансгенных животных достаточно полно изучено на макроуровне (организм в целом), то исследований на цитологическом и тканевом уровнях (микроуровне) проводится мало. Хотя именно последнее в некоторых случаях может дать полный ответ на ряд вопросов, касающихся взаимодействия вырабатываемых в организме трансгенных животных рекомбинантных белков с собственными (эндогенными) белками организма и объяснить вызванные данным взаимодействием нарушения в нормальном развитии животного.

В связи с этим, с точки зрения оценки влияния интеграции чужеродного гена на состояние здоровья трансгенных животных необходимо наряду с анализом генотипа проводить комплексные исследования данных животных по фенотипическим признакам, затрагивая оценку экспрессии вырабатываемого рекомбинантного продукта на уровне ткани и клетки.

Цель и задачи.

Исходя из вышеизложенного, целью диссертационной работы являлось изучение фенотипического эффекта экспрессии рекомбинантных генов в организме трансгенных животных разных форм на различных уровнях организации индивидуумов: организменном, тканевом и клеточном.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Разработать технологию получения соматических трансгенных сельскохозяйственных животных (коров, коз, свиней) посредством использования ретровирусных векторов.

2. Изучить молекулярные аспекты трансформации клеток молочной железы сельскохозяйственных животных при локальном трансгенезе и исследовать динамику синтеза рекомбинантных белков с молоком полученных соматических трансгенных животных.

3. Изучить наследование трансгенов в ряде поколений свиней, интегрировавших ген соматолиберина человека, и кроликов со встроенными генами кластера RCA и оценить влияние интеграции чужеродной ДНК на сохранение стабильности генома трансгенных животных.

4. Исследовать изменения биохимического статуса, морфофункцио-нальных характеристик внутренних органов и тканей, динамики роста, показателей откормочной и мясной продуктивности у трансгенных свиней по сравнению с аналогами. Выполнить анализ корреляционных зависимостей в организме трансгенных и интактных свиней.

5. Исследовать экспрессию генов кластера RCA в организме трансгенных кроликов и изучить характер изменения фенотипа кроликов под влиянием трансгенеза.

6. Выполнить теоретическое и экспериментальное обоснование отдельных элементов технологии трансгенеза кур, направленное на повышение результативности создания трансгенной птицы.

7. Изучить характер интеграции и экспрессии рекомбинантных генов в органах и тканях трансгенных кур.

8. Выполнить сравнительную оценку влияния интеграции и экспрессии рекомбинантных генов на фенотип и генотип трансгенных животных различных форм.

Научная новизна.

В ходе выполнения диссертационной работы впервые исследованы механизмы создания соматических трансгенных животных (коров, коз, свиней) методом локального трансгенеза и изучены факторы, обуславливающие результативность генетической трансформации клеток молочной железы in vivo. Выполнено исследование уровня синтеза рекомбинантных белков — гра-нулоцитарного колониестимулирующего фактора (ГКСФ) и эритропоэтина человека (ЭПО) в молоко полученных трансгенных животных в динамике и оценены изменения морфофункциональных характеристик ткани молочной железы опытных животных под воздействием экспрессии трансгенов.

Впервые выполнена комплексная оценка влияния интеграции и экспрессии трансгена на генотип и фенотип свиней, трансгенных по гену соматоли-берина человека в ряде генераций в сравнительном аспекте. Изучен характер изменения корреляционных связей в организме опытных животных.

Изучена возможность использования генных конструкций на основе искусственных хромосом дрожжей (YAC) для получения трансгенных кроликов, интегрировавших гены-ингибиторы комплемента кластера RCA, как моделей для ксенотрансплантации. Проведена оценка влияния интеграции больших фрагментов ДНК (700 тысяч пар оснований) на сохранение стабильности генома трансгенных животных. Исследована экспрессия генов кластера RCA в организме трансгенных кроликов и изучены особенности их фенотипа.

Оценена результативность генетической модификации эмбрионов кур in vivo с использованием ретровирусных векторов. Изучены факторы, влияющие на эффективность получения трансгенных кур. Исследован характер экспрессии репортерных генов lacZ и GFP (зеленый флюоресцирующий белок) в различных органах и тканях полученной трансгенной птицы.

На основании проведенных исследований дана оценка фенотипического эффекта экспрессии рекомбинантных белков в организме трансгенных животных разных форм.

Практическая значимость.

Разработана технология локального трансгенеза молочной железы сельскохозяйственных животных — коров, коз и свиней с целью создания соматических трансгенных животных — биореакторов. Установлены факторы, обуславливающие результативность генетической трансформации клеток вымени сельскохозяйственных животных in vivo. Получены соматические трансгенные коровы, козы и свиноматки, продуцирующие с молоком грану-лоцитарный колониестимулирующий фактор (Г-КСФ) и эритропоэтин (ЭПО) человека.

Изучены биологические и некоторые продуктивные особенности свиней, трансгенных по гену соматолиберина человека, в сравнительном аспекте в ряде поколений. Выявлены изменения показателей биохимического статуса и морфофункциональных характеристик внутренних органов.' Установлено изменение характера корреляционных связей в организме трансгенных свиней.

Изучены биологические особенности кроликов, трансгенных по генам-ингибиторам комплемента кластера RCA. Установлено, что интеграция больших фрагментов ДНК (длиной 700 тысяч п.о.) на основе YAC не оказывает существенного влияния на жизнеспособность трансгенных кроликов, что позволяет рассматривать этих животных в качестве функциональной модели для изучения проблем ксенотрансплантации. Показана повышенная устойчивость клеток трансгенных кроликов к лизису сывороткой крови человека, что указывает на потенциальную значимость генов-ингибиторов комплемента кластера RCA в разработке технологий клеточной терапии.

Усовершенствована технология получения трансгенных кур, основанная на использовании ретровирусных векторов. Разработан способ введения рет-ровирусных векторов в эмбрионы кур in vivo. Установлены факторы, влияющие на результативность генетической модификации эмбрионов кур. Получена трансгенная птица с интеграцией и экспрессией репортерных генов lacZ и GFP (зеленый флюоресцирующий белок) в ряде внутренних органов: сердце, печени, кишечнике, желудке, мышцах, репродуктивных органах.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Опосредованный ретровирусами перенос генов как результативный способ доставки экзогенной ДНК в клетки молочной железы животных и создания соматических трансгенных сельскохозяйственных животных — коров, коз и свиней.

• Тип генной конструкции и вектора, способ подготовки инъекционного препарата и стадия введения в организм животных как факторы, обуславливающие результативность локального трансгенеза молочной железы и создания соматических трансгенных животных-продуцентов.

• Изменения биохимического статуса, морфофункциональных характеристик внутренних органов и некоторых продуктивных показателей у свиней, трансгенных по гену соматолиберина, разных генераций.

• Повышенная устойчивость различных типов клеток кроликов, трансгенных по генам-ингибиторам комплемента кластера RCA, к лизису сывороткой крови человека.

• Динамика уровня хромосомных нарушений у трансгенных животных — свиней и кроликов в ряде генераций.

• Усовершенствованная технология создания трансгенных кур и факторы, обуславливающие ее результативность.

• Сравнительный анализ проявления интеграции и экспрессии реком-бинантных генов в фенотипе трансгенных сельскохозяйственных животных различных форм.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на международных конференциях: «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2001; «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения», Быково, 2002; «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2002, 2003, 2006; «Прошлое, настоящее и будущее зоотехнической науки», Дубровицы, 2004, 2005; «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», Москва, 2004; «Биологические и медицинские технологии: от научных результатов — к инновационным разработкам», Москва, 2005; «Биотехнология: состояние и перспективы развития», Москва, 2005, 2006; «Новые методы генодиагностики и генотерапии: современное состояние и перспективы использования в сохранении генофонда сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2005; «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006; «Биотехнология в мире животных и растений», Бишкек, 2005; «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования, образование», Санкт-Петербург, 2007.

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 45 научных работ, в том числе в центральных научных журналах, рекомендованных ВАК — 12, книг — 1, методических рекомендаций — 2, патентов — 1.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 324 страницах, содержит 69 таблиц, 35 рисунков, 17 графиков, 10 схем. Библиографический список содержит 407 источников, в том числе 366 на иностранных языках.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

4. ВЫВОДЫ.

1. Разработана технология локального трансгенеза клеток молочной железы сельскохозяйственных животных на основе использования рекомби-нантных ретровирусных векторов. Установлено, что результативность генетической трансформации клеток-мишеней зависит от (1) метода введения рекомбинантных векторов, (2) способа подготовки конструкций для инъекций (клетки-упаковщицы, культуральная жидкость) и их концентрации, (3) стадии введения векторов в вымя животных и (4) типа пакующей линии клеток. Показано, что оптимальным с точки зрения результативности трансгенеза является введение векторов в молочную железу коров на 4−6 месяцах стельности, коз — на 4−5 месяцах сукозности, свиноматок — на 3-ем месяце супоростности.

2. Получены соматические трансгенные коровы (п=24), козы (п=14) и свиноматки (п=24), продуцирующие с молоком эритропоэтин в концентрации до 138+18, 192+16, 185+35 нг/мл, соответственно, и гранулоцитарный колониестимулирующий фактор в концентрации до 34+10, 46+7, 25+7 нг/мл, соответственно. Показано, что уровень экспрессии рекомбинантных белков с молоком варьирует в течение лактации и зависит от вида животного, периода лактации, используемой генной конструкции и способа ее подготовки для инъекции. Уровень синтеза рекомбинантных белков в молоко животных в первую треть лактации превышает аналогичные показатели во вторую и последнюю треть лактации в среднем в 2−3 раза.

3. Установлено, что интеграция рекомбинантных генов в геном трансгенных животных (кроликов и свиней) оказывает дестабилизующее влияние на кариотип и модифицирует активность ядрышковых организаторов (ЯОР). У трансгенных животных наблюдается повышение уровня хромосомных аберраций до 38,8% (против 3,1% в контроле) и происходит достоверное увеличение активности ЯОР (у трансгенных свиней) до 2,88+0,12 (Р<0,001). С увеличением числа генераций у трансгенных животных отмечается уменьшение частоты аберраций.

4. Показано, что характер наследования чужеродных генов у трансгенных животных (кроликов и свиней) зависит от типа спаривания и происхождения животных. При скрещивании по типу «трансген» х «нетрансген» доля трансгенных потомков составила 28,4−40,0% у свиней и 31,7−36,7% у кроликов, по типу «трансген» х «трансген» — 50,0−62,5%) и 50,0−72,7%), соответственно.

5. Установлено, что интеграция в геном свиней гена соматолиберина оказывает влияние на продуктивные признаки свиней разных генераций. У трансгенных свиней по сравнению с аналогами отмечается тенденция увеличения среднесуточных приростов до 35,7%), которая более заметно проявляется у трансгенных свиней ранних (II и III) генераций. У трансгенных свиней поздних генераций (IX и X), а также при откорме животных до более тяжелых кондиций (150 кг) установлена тенденция увеличения содержания мяса в тушах (+1,5%) и снижения доли сала (-1,9%). Отмечено снижение толщины шпика у трансгенных свиней с увеличением числа генераций.

6. Выявлено изменение гормонального и биохимического статуса трансгенных свиней. У трансгенных животных по сравнению с аналогами практически всех исследованных генераций усиливается синтез соматотро-пина в среднем в 1,5−2 раза, повышается содержание в крови общего белка (до +13,9%)), глюкозы (до +39,2%), триглицеридов (до +31,5%), магния (до + 11,6%) и снижается уровень хлоридов (до -4,3%).

7. Выявлен ряд морфометрических изменений в структуре органов пищеварительной, сердечнососудистой, выделительной систем организма, мышечной ткани и желез внутренней секреции. У трансгенных животных практически всех исследованных генераций по сравнению с контролем наблюдается увеличение толщины печеночных балок до 22,7%. У трансгенных животных поздних генераций (VIII, IX и X) обнаружено уменьшение диаметра ацинусов поджелудочной железы (до 8,8%, Р<0,01) и фолликулов щитовидной железы (до 21,8%, Р<0,001). Установлены изменения ряда морфологических корреляций в организме трансгенных свиней по сравнению с контрольными животными.

8. Показана перспективность использования генов-ингибиторов комплемента генного кластера RCA для генетической модификации животных, в частности кроликов, с целью использования их в клеточной терапии. На модели in vitro показана устойчивость клеток трансгенного происхождения к лизису сывороткой крови человека по сравнению с контрольными культурами. Доказано, что продукты экспрессии чужеродных генов не оказывают влияния на гистоструктуру внутренних органов трансгенных кроликов.

9. Усовершенствована технология получения трансгенных кур, позволяющая получать трансгенную птицу с эффективностью 8,0−8,7%. Установлено влияние на результативность трансформации эмбрионов кур in vivo метода и стадии введения рекомбинантных векторов, концентрации генных конструкций и способа их подготовки для инъекции. Максимальная результативность трансгенеза установлена при введении клеток-упаковщиц (в концентрации 1000 клеток/эмбрион) в дорсальную аорту 3-дпевных эмбрионов кур.

10. Установлен мозаичный характер интеграции генных конструкций в эмбрионах кур. Наличие ДНК генной конструкции выявлено, преимущественно, в клетках сердца, печени, желудка, кишечника, репродуктивных органах, а также мышечной ткани.

11. Показано, что степень влияния рекомбинантных генов на фенотипи-ческие особенности трансгенных животных зависит от целей эксперимента. Наибольшие изменения наблюдаются у трансгенных животных с измененными хозяйственно-полезными признаками: отмечены изменения характера обмена веществ, ряда биохимических, физиологических и морфологических показателей. При локальном переносе чужеродной ДНК влияние трансгенов на организм животных является минимальным: экспрессия рекомбинантных белков с молоком соматических трансгенных животных не оказывает заметного влияния на гистоструктуру вымени опытных животных.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Лабораториям, занимающимся созданием и изучением трансгенных форм животных, рекомендуем:

1. Для результативного проведения локального трансгенеза вымени сельскохозяйственных животных использовать векторные конструкции на основе модифицированных ретровирусов и осуществлять их введение в паренхиму молочной железы на 4−6 месяцы стельности у коров, 4−5 месяцы су-козности — у коз и 3-й месяц супоросности — у свиней.

2. С целью повышения результативности получения трансгенных кур на основе использования ретровирусных векторов проводить введение генных конструкций в дорсальную аорту эмбрионов на 3-й день инкубации.

3. Использовать гены-ингибиторы комплемента генного кластера RCA для генетической модификации животных с целью их последующего применения в клеточной терапии.

4. Учитывать уровень хромосомных аберраций при отборе трансгенных животных для дальнейшего воспроизводства.

1.5.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Таким образом, в последние годы достигнуты значительные успехи в технологии получения трансгенных животных: разработано множество методов направленного переноса генов в клетки животных, изучены механизмы интеграции, экспрессии и наследования введенных генов. Вместе с тем, методы генетической трансформации клеток животных, успешно применяемые на лабораторных животных, не всегда бывают такими же эффективными при получении трансгенных сельскохозяйственных животных. Все это требует разработки методологических подходов к проблеме создания генных конструкций и усовершенствования методов их введения, что позволит наряду с повышением общей эффективности трансгенеза у сельскохозяйственных животных снизить негативное влияние интегрированных рекомбинантных генов на жизнеспособность и здоровье получаемых трансгенных животных.

В настоящее время выделяют несколько направлений в использовании трансгенных животных. Все более востребованным становится получение трансгенных животных, в том числе и птицы, продуцирующих рекомбинант-ные белки фармакологического назначения. Такие животные рассматриваются как альтернатива традиционным методам получения рекомбинантных белков человека, характеризующихся более высокими материальными затратами. К тому же не все белки человека могут быть синтезированы в микроорганизмах. С развитием методов генной инженерии, направленных на создание эффективных генных конструкций и методов их введения, станет возможным преобразовать животноводство в стабильный источник производства широкого спектра веществ, обладающих фармакологическими и иными полезными свойствами.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Работа была выполнена в период с 2001 по 2008 гг. в Центре биотехнологии и молекулярной диагностики животных ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии» (ГНУ ВНИИЖ), физиологическом дворе и экспериментальных хозяйствах ГНУ ВНИИЖ ОПХ «Дубровицы», ОНО э/х «Кленово-Чегодаево», а также агрофирме «Толмачево» Нижегородской области согласно схеме, представленной на рисунке 10.

2.1. Материалы.

2.1.1. Реактивы и оборудование Реактивы.

Агароза (Lift Tehnologies, США) Антибиотик-антимикотик (Sigma, США) Бромид димидия (Boehringer, Германия) Бычий сывороточный альбумин (Sigma, США) Генетицин (ПанЭко, Россия) Гидроксид натрия (Merk, Германия) Глюкоза (ПанЭко, Россия) L-глутамин (ПанЭко, Россия) Двузамещенный фосфат натрия (Диа-М, Россия) Изоамиловый спирт (Merk, Германия) Лимонная кислота (Диа-М, Россия) Митомицин С (Sigma, США) О-фенилендиамин (Sigma, США) Протеиназа К (Диа-М, Россия) Раствор гентамицина сульфат (ПанЭко, Россия) Соляная кислота (Merk, Германия) Среда DMEM (ПанЭко, Россия) Среда F-12 (ПанЭко, Россия) Сульфат аммония (Merk, Германия).

Рис. 10. Схема исследований.

Сыворотка плода крупного рогатого скота (ПанЭко, Россия).

Tagполимераза (Диалат, Россия).

Твин-20 (Диа-М, Россия).

Трипсин (Sigma, США).

Фосфатно-солевой буфер (Sigma, США).

Уксусная кислота (Merk, Германия).

Хлорид натрия (Merk, Германия).

Хлорид магния (Merk, Германия).

Хлороформ (Merk, Германия).

Оборудование.

Автоклав (Harvard/LTE, Великобритания) Амплификатор «Amply 4L-50» (Biokom, Россия) Амплификатор «Cyclotemp» (СМТ, Россия) Водяная баня (Bio-Rad, США) Деионизатор воды (Elgastat UHQ, Англия) Дистиллятор АЦД-4 (Россия).

Источник ультрафиолетового света (Pharmacia Biotech, Швеция) Ламинарный шкаф (БОВ-001-АМС, Россия) Магнитная мешалка «Magnetic stirrer» (Польша) Микроскоп (Opton, ICM, ГерманияDiaphot, Nikon, Япония) Микротом ротационный (TermoShandon, Великобритания) Микроцентрифуга (Eppendorf, США) Перистальтический насос Walson-Marlow (США), Пластиковые криопробирки (Nunk, Дания).

Прибор для горизонтального электрофореза (Life Technologies, США) Рефрижератор «Ultra low» (Sanio, Япония) С02-инкубатор (Sanyo, Япония) Сосуд Дьюара (Франция).

Спектрофотометр «DYNATECH MR5000» (Life Technologies, США).

Сухожаровой шкаф «КВС G-65/250» (Польша) Термостат (Bio-Rad, США) Термостат ТС-80М-2 (Россия).

Фильтры GS Millipore с диаметром пор 0,22 мкм (Sigma, CUTA) Центрифуга «Janetzki» (ГДР), «Precyzyjna» (Польша) Центрифужные пробирки объемом 15 и 50 мл (Corning, Германия) Цифровой фотоаппарат «Olympus Camedia С-4000 700М» (Корея) Чашки Петри d=35 и 60 мм (Corning, США) Электронные весы R 200D (Sartorius, Германия).

2.1.2. Животные.

Объектом исследований служили различные трансгенные формы сельскохозяйственных животных:

1. Свиньи, трансгенные по гену соматолиберина (генная конструкция MTl-hGRF). Исследования проводили на свиньях II, III, IV, VIII, IX и X генераций. Животные II генерации были восстановлены посредством внутриутробного осеменения нетрансгенных маток глубоко замороженным семенем трансгенных хряков, хранившимся в криобанке более 10 лет [Багиров В.А., 2004]. Возобновление поколений трансгенных свиней позволило провести сравнительные исследования свиней генераций II — VIII, III — IX и IV — X.

2. Кролики, интегрировавшие гены-ингибиторы DAF и MCP кластера регуляторов активации комплемента (генная конструкция RCA-YAC размером 700 тыс. п.о.). При различных типах спаривания от двух трансгенных самцов первого поколения было получено и изучено три генерации трансгенных кроликов (п=164).

3. Куры, трансгенные по генам LacZ и GFP, полученные методом опосредованного ретровирусами переноса генов. Для трансформации эмбрионов кур (п=780) использовали два ретровирусных вектора pBMN-lacZ и pLN-GFP, содержащих, соответственно, репортерные гены lacZ и GFP под контролем промотора цитомегаловируса человека (CMV). В качестве источника генных конструкций использовали клетки-упаковщицы и рекомбинантный вирусный препарат, представляющий собой среду культивирования клеток-упаковщиц [Новое в клонировании ДНК, 1989].

4. Соматические трансгенные коровы, козы и свиноматки, продуцирующие с молоком эритропоэтин (ЭПО) и гранулоцитарный колониестимули-рующий фактор (Г-КСФ) человека. Животные были получены методом локального трансгенеза молочной железы с использованием технологии, усовершенствованной в ходе выполнения диссертационной работы. Для трансгенеза были использованы векторные конструкции pLN-a, содержащая ген ЭПО человека (ген предоставлен д.б.н., профессором Рябых В. П., ВНИИФ-БиП, г. Боровск), и pLN-G-CSF, содержащая ген Г-КСФ человека. Конструкции были получены к.б.н. Фоминым И. К. (Институт цитологии и генетики HAH Беларуси) на основе вектора pLNS путем встраивания в прямой ориентации в сайт Xho I под контролем промотора а51-казеина крупного рогатого скота генов ЭПО (вектор pLN-a) и Г-КСФ (вектор pLN-G-CSF) человека (рис. 11).

Xhol.

ЕР рА pLNS pLNa pLN-G-CSF.

LTR Н4 NEO LTR.

600 900 / '" BOG—. / 1400. 420 as iказеин/эритро поэтин asi-казеин/Г-КСФ.

Рис. 11. Схема строения вектора pLNS: LTR — длинный концевой повтор, — сигнал упаковки, Н4 — промотор гистона человека, NEO — ген устойчивости к неомицину, ЕР — делеция в области промотора-энхансера, рА — сигнал полиадени-лирования.

Для упаковки ретровирусных векторов в вирусные частицы были использованы две пакующие линии клеток GP+envAml2 и pg!3. Обе пакующие линии были получены на основе эмбриональных фибробластов мыши N1H3T3, в которые последовательно были встроены вирус-кодирующие последовательности gag, pol и env. Линия GP+envAml2 содержала белок env амфотропного вируса лейкемии мышей Молони (MLV), который способен взаимодействовать с рецепторами, присутствующими на клетках многих видов — от птиц до человека. Линия pgJ3 экспрессировала белок env вируса лейкемии гиббона (GaLV), который также проявляет тропизм к широкому спектру клеток-хозяев за исключением мыши.

2.2. Работа с культурой клеток.

2.2.1. Культивирование клеток.

Культивирование пакующих линий клеток, продуцирующих рекомби-нантный ретровирус, осуществляли в среде DMEM с добавлением 10% сыворотки плода коров (СПК), 2 мМ L-глутамина, D-глюкозы (4−4,5 г/л) и антибиотика (гентамицина) в конечной концентрации 50 мкг/мл. L-глутамин обновляли каждые 14 дней. Пассирование клеток-«упаковщиц» проводили каждые 3−5 суток в соотношении 1:3, 1:5.

Для культивирования первичной культуры клеток молочной железы коровы, свиньи, козы и эмбрионов кур использовали ростовую среду следующего состава: 45% F-12, 45% DMEM, 10% СПК, 2 мМ L-глутамин, гентами-цин (50 мкг/мл). В случае культивирования первичных клеток молочной железы в ростовую среду добавляли инсулин в конечной концентрации 3,5мкг/мл. Клетки пассировали каждые 3−5 суток в соотношении 1:3.

Снятие клеток с субстрата проводили с помощью 0,25% раствора трипсина, рН=7,6 (2,5 г трипсина, 1 г NaCl, 0,37 г KCl, 0,15 г Na2HP04) 0,24 г КН2РО4, 1 г D-глюкозы, Зг Tris, 1 мл фенолового красного растворяли в 1л деионизированной воды). Клетки после удаления ростовой среды промывали.

94- 94.

ФСБ без ионов Ca, Mg и инкубировали при 37 °C 3−5 минут в растворе трипсина. Для инактивации трипсина использовали ростовую среду, содержащую сыворотку.

Криоконсервирование клеток осуществляли с использованием криопро-тектора диметилсульфоксида (ДМСО). Клетки в концентрации ЗЛО6 ресус-пензировали в криозащитной среде, включающей 10% ДМСО, 40% СПК, 50% БМЕМ, и замораживали в криопробирках при -70°С. Для длительного хранения клетки через сутки переносили в сосуд Дьюара с жидким азотом (-196°С).

2.2.2. Получение первичной культуры клеток молочной железы.

Ткань молочной железы сразу после взятия помещали в физиологический раствор, содержащий гентамицин (100 мкг/мл.). В асептических условиях ткань переносили в чашку Петри и максимально измельчали с помощью ножниц, периодически промывая в физиологическом растворе. После удаления 0,9% раствора ЫаС1 путем низкоскоростного центрифугирования (1.

2 Н тыс. об/мин) измельченную ткань помещали в раствор ФСБ без ионов Са, М£2+, хорошо пипетировали и центрифугировали при 1 тыс. об/мин в течение 5 мин. Эту процедуру повторяли 3 раза.

Для наиболее полной дезагрегации ткани использовали растворы 0,25% трипсина и коллагеназы. Максимально измельченную ткань инкубировали в растворе трипсина в течение 25−30 минут при 37 °C, периодически помешивая, после чего для нейтрализации трипсина добавляли свежую ростовую среду, содержащую сыворотку, и центрифугировали при 1 тыс. об/мин. в течение 5 мин. К осадку добавляли свежую ростовую среду, хорошо пипетировали и высевали на чашки Петри (1=6см.

К оставшимся крупным кусочкам ткани приливали раствор коллагеназы (конечная концентрация 1мк1ткл) и выдерживали в течение 30 минут в термостате (+37°С), периодически помешивая. Среду, содержащую коллагеназу, удаляли путем низкоскоростного центрифугирования (1000 об/мин) в течение 5 минут. Осадок ресуспензировали в свежей ростовой среде и высевали на чашки Петри d=6cM.

2.2.3. Получение первичной культуры клеток эмбриона курицы.

Извлечение эмбрионов кур из яиц осуществляли на 5−8 дни инкубации в асептических условиях. Эмбрион помещали в физиологический раствор, измельчали и центрифугировали при 1 тыс. об/мин в течение 5 минут. Осадок дополнительно промывали в растворе ФСБ без ионов Са2+, Mg2+, после чего измельченную ткань инкубировали в 0,25% растворе трипсина в течение 5−7 минут при 37 С, периодически помешивая. По истечению периода инкубации с целью инактивации трипсина добавляли свежую ростовую среду с сывороткой, хорошо пипетировали и центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 минут. Осадок ресуспензировали в свежей ростовой среде и высевали на чашки Петри d=6cM.

2.2.4. Трансформация клеток-мишеней in vitro ретровирусными векторами.

Трансформацию клеток молочной железы и эмбрионов кур осуществляли путем совместного культивирования с клетками-«упаковщицами» и инфицирования культуральной жидкостью, содержащей рекомбинантный рет-ровирус [Новое в клонировании ДНК, 1989]. Частоту генетической трансформации определяли как отношение числа полученных генетически трансформированных клонов к общему числу инфицированных клеток.

Совместное культивирование с клетками-«упаковщицами». Клетки, продуцирующие ретровирус, высевали на чашки Петри диаметром 6 см в концентрации 4*105 клеток на чашку. Через сутки для подавления митоза клетки обрабатывали летальной дозой митомицина С (конечная концентрация 30мке4ш) в течении 4 часов, после чего промывали раствором ФСБ без ионов Са2+ и Mg2+ и заливали ростовой средой. На эту же чашку высевали клетки-мишени в концентрации 4*105 и одновременно добавляли полибрен конечная концентрация 8 мкг/кл). Клетки совместно культивировали в течение 2−3 дней до формирования полного монослоя, затем рассевали на чашки Петри (1=1 Осм для получения стабильных генетически трансформированных клонов. В качестве селективной среды использовали ростовую среду, содержащую 0418 (Оепсйст, С1Ьсо). Селекцию клеток проводили на протяжение 15−20 дней с 4-х суточной сменой среды.

Инфицирование культуральной жидкостью, содержащей рекомбинант-ный ретровирус. Клетки-мишени в концентрации 4*105 высевали на чашки Петри диаметром 6 см и культивировали 24 часа до формирования субкон-флуентного монослоя. После удаления ростовой среды клетки заливали 2 мл культуральной жидкости с добавлением полибрена (8 мкг/мл). С целью получения препарата с высоким титром сбор культуральной среды осуществляли на стадии, предшествующей формированию слитного монослоя, т.к. именно в этот период достигается максимальное содержание вируса в среде. При формировании монослоя на 80−90%, клетки помещали в новую ростовую среду и инкубировали 12−24 часа, после чего собирали вирус. Флотирующие клетки и клеточные обломки удаляли центрифугированием при 1000 об/мин. в течение 5 минут.

Инкубацию клеток-мишеней с культуральной жидкостью осуществляли в течение 16 часов при 37 °C в присутствии С02. По прошествии времени инкубации среду, содержащую вирус, удаляли и приливали к клеткам свежую ростовую среду, после чего проводили предселективный период (24 часа) до следующего пассирования. Селекцию генетически трансформированных клонов осуществляли также как и при совместном культивировании с клетками-упаковщицами.

2.2.5.

Введение

ретровирусных векторов в клетки-мишени in vivo.

2.2.5.1. Трансформация клеток молочной железы сельскохозяйственных животных.

Трансформацию клеток молочной железы осуществляли путем множественной инъекции раствора генных конструкций непосредственно в паренхиму вымени взрослых животных (коров, коз и свиноматок). В качестве источника генных конструкций использовали как суспензию клеток-упаковщиц, так и культуральную жидкость, представляющую собой среду культивирования клеток-упаковщиц. Клетки-упаковщицы перед введением в молочную железу ресуспензировали в физиологическом растворе с высоким содержанием глюкозы (4−4,5 г/л). В полученную суспензию клеток добавляли полибрен в конечной концентрации 8 мкг/мл.

2.2.5.2.

Введение

генных конструкций в эмбрионы кур

Введение

генных конструкций в эмбрионы кур осуществляли на разных стадиях развития эмбриона: до начала инкубации в зародышевый диск, на первый день инкубации непосредственно в эмбрион, на третий день — в дорсальную аорту. Для инъекций использовали как суспензию клеток-упаковщиц, так и культуральную жидкость, содержащую рекомбинантный ретровирус. Для получения инъекционного раствора клеток-упаковщиц, последние ресуспензировали в среде DMEM, содержащей полибрен (8мкг/мл). Культуральную жидкость также вводили с добавлением полибрена (8 мкг/мл), причем наряду с неконцентрированным вирусным препаратом использовали и концентрированный. Концентрирование культуральной среды проводили следующим образом. В суточный супернатант добавляли анион хондроитин сульфат С (CSC) в концентрации 80 мкскл и инкубировали в течение 10 минут при 37 °C. Затем вносили катион полибрен (РВ) в той же концентрации и инкубировали еще 10 минут при 37 °C. Среду, содержащую CSC и РВ удаляли путем центрифугирования при 10 тыс. об/мин в течение 5 минут. Осадок разводили в ростовой среде в нужной нам концентрации и использовали для работы.

2.3. Анализ на наличие генной конструкции.

Выделение ДНК из крови, ткани и соматических клеток молока, осуществляли с использованием солевого и перхлоратного методов [, Зиновьева H.A. и др., 1998].

ПЦР проводили в объёме 20 мкл., применяя следующую инкубационную смесь: х10 буфер для ПЦР (166,7 мМ (NH4)2S04- ЮОмМ Трис-HCl, рН=8,3- 1,5 мМ MgCl2- 0,1% Tween 20) — 0,2 мМ dNTP, 25 пкмол каждого из праймеров, 1 ЕД Taq-полимеразы. ДНК для анализа брали в объёме 1,0 мкл. Праймеры, используемые для анализа, представлены в таблице 3.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , И.К. Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих/ И. К. Абдрахманов //Автореф. дисс.. канд. биол. наук. — Дубровицы — 2001 — 21с.
  2. , М.И. Секреция гормона роста в норме и патологии / М. И. Балаболкин М.: Медицина, 1978. — 173 с.
  3. , М.И. Эндокринология / М. И. Балаболкин М.: Медицина, 1989.-416 с.
  4. , Г. Генные фермы новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными / Г. Брем, H.A. Зиновьева, Л. К. Эрнст // Биотехнология — 1993 — № 6 — С. 3−27.
  5. , Г. Трансгенные свиньи (mMTl- hGRF): оценка качества туш и химического состава мяса при убое животных / Г. Брем, Л. К. Эрнст, Л. А. Андропов // Генноинженерные сельскохозяйственные животные / Сб. науч. тр,-1995.-Вып. 1.- С.26−33.
  6. , Г. Экспериментальная генетика в животноводстве / Г. Брем, Х. Кройслих, Г. Штранцингер М.: РАСХН, 1995. — 326с.
  7. , В.В. Методы микроинъекции спермиев как инструмент вспомогательной репродукции и изучения биологии оплодотворения / В. В. Галат // Онтогенез 2000 — Т.31 — № 1 — С.5−13.
  8. Гистология / Под ред. Ю. И. Афанасьева, H.A. Юрина М.: Медицина, 2002. — 695с.
  9. , O.K. Генетическая трансформация соматических клеток / O.K. Глебов-Л.: Наука, 1989−251 с.
  10. , Б. Молекулярная биотехнология: принципы и применение / Б. Глик, Дж. Пастернак. Пер. с англ. М.: Мир, 2002. — 589с.
  11. , И.Л. Молекулярно-биологические аспекты проблемы позиционно-независимой экспрессии чужеродных генов в клетках трансгепных животных / И. Л. Гольдман, C.B. Разин, Л. К. Эрнст, С. Г. Кадулин, М. А. Гращук // Биотехнология 1994 — N.2 — С.3−8.
  12. , А.П. Трансгенные млекопитающие: изучение фенотипиче-ских эффектов гена гормона роста человека, индуцированного животным / А. П. Дыбан, С. И. Городецкий // Биотехнология 1987 — N3 — С.352−357.
  13. , А.Н. Анализ хромосомной локализации фрагмента вируса лейкоза коров у трансгенных кроликов / А. Н. Завада // Молекулярно-генетические маркеры животных Киев: Аграрная наука, 1994. — С.56−57.
  14. , H.A. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве / H.A. Зиновьева,
  15. A.Н. Попов, Л. К. Эрнст и др. Дубровицы: ВИЖ, 1998. — 47с.
  16. , H.A. Трансгенные животные и возможности их использования: молекулярно-генетические аспекты трансгенеза в животноводстве / H.A. Зиновьева, Л. К. Эрнст, Г. Брем Дубровицы, ВИЖ, 2000. — 128с.
  17. , П.М. Анализ дифференциальной структуры хромосом у кролика, трансгенного по гену mMTI/bGHatt / П. М. Кленовицкий, М. М. Миталлипова, Т. Г. Цветкова // Бюлл. науч. работ ВИЖ.1. B.109. 1994 — С.80−83.
  18. , П.М. Мутационные изменения у трансгенных животных / П. М. Кленовицкий, A.A. Некрасов // Актуальные проблемы развития животноводства Дубровицы — 1998 — С.184−191.
  19. , П.М. Цитогенетика сельскохозяйственных животных / П. М. Кленовицкий, Л. Г. Моисейкина, Н. С. Марзанов Элиста: Джангар, 1999.- 142 с.
  20. , П.М. Ядрышкообразующие районы у трансгенных свиней (гпТ-1/hGRF) / П. М. Кленовицкий, А. Н. Завада, И. К. Живалев // Генноинженерные с.-х. животные. Сб. науч. тр. ВИЖ М. — Вып.1 — 1995 -С.64−68.
  21. , A.B. Исследования переноса чужеродных генов сперматозоидами в яйцеклетки мидии Mytilus Galloprovincialis Lam. / A.B. Кузнецов, A.B. Пиркова, Г. А. Дворянчиков и др. // Онтогенез 2001 — Т.32 — № 4 -С.309−318.
  22. , JI.B. Соматотропин человека / JI.B. Лашас, Д. Г. Лашене -Вильнюс:Мокслас, 1981.- 143 с.
  23. , С.Ю. Перенос гена рилизинг-фактора гормона роста человека кроликам, овцам и свиньям / С. Ю. Медведев // Автореф. дисс.. канд. биол. наук. С.- П.- Пушкин — 1992 — 17с.
  24. , С.Ю. Рост и развитие трансгенных кроликов и свиней с перенесенным геном рилизинг-фактора гормона роста человека / С. Ю. Медведев, Л. В. Козикова, В. Г. Бавин, А. Ф. Яковлев // Сельскохозяйственная биология, — 1995.- №.6.- С. 43- 48.
  25. Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д. С. Саркизова, Ю. П. Перова. М.: Медицина, 1996. — 544 с.
  26. Новое в клонировании ДНК. Методы. / Под ред. Д. Гловера. М.: Мир, 1989. — 368с.
  27. , B.C. Ретровирусные векторы эффективная система переноса и экспрессии чужеродных генов в клетках млекопитающих / B.C. Прасолов // Молекулярная биология — 1989 — Т.23, вып.2. — С.8−12.
  28. , Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. Пер. с нем. В. Я. Александрова, З. И. Кроковой М.: Изд.-во иностр. лит.-ры, 1953. — 718с.
  29. , М. Гены и геномы / М. Сингер, П. Берг. Пер. с англ. М.: Мир, 1998.-391с.
  30. , В.Н. Биологические и продуктивные качества трансгенных свиней / В. Н. Шатайло, Л. К. Эрнст M: РАСХН, 2001. — 200 с.
  31. , B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха, Е. А. Калашникова, C.B. Дегтярев, Е. З. Кочиева, М. И. Прокофьев и др. М.: Высшая школа, 1998. — 416с.
  32. , И .Я. Методические рекомендации по количественному определению нуклеиновых кислот в клетках и тканях сельскохозяйственных животных / И. Я. Шихов, М. П. Хамицеева, A.C. Лепнов и др. Дубровицы -1985 -28с.
  33. , С.Н. Генетическая инженерия. 4.2. / С. Н. Щелкунов -Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 1997. 400с.
  34. Щит, И. Ю. Негативное действие экзогенной ДНК на оплодотворение / И. Ю. Щит, A.B. Кузнецов, С. А. Каурова, И. В. Кузнецова, В. В. Гусев // Проблемы репродукции 1998 — № 4.
  35. , Л.К. Биотехнология сельскохозяйственных животных / Л. К. Эрнст, H.A. Зиновьева, Г. Брем М.: РАСХН, 2002. — 192с.
  36. , Л.К. Биотехнология сельскохозяйственных животных / Л. К. Эрнст, М. И. Прокофьев М.: Колос, 1995. — 192с.
  37. , Л.К. Генная инженерия в животноводстве: трансгенные сельскохозяйственные животные, кормовые растения, микроорганизмы рубца / Л. К. Эрнст, И. Л. Гольдман, С. Г. Кадулин // Биотехнология 1993 -N5 — С.2−14.
  38. , Л.К. Молекулярно-генетические аспекты в создании и использовании трансгенных сельскохозяйственных животных / Л. К. Эрнст, Н. А. Зиновьева // Вестник РФФИ. 2002. — № 3(29). — С.56−65.
  39. Aaronson, S.A. Endogenous type-C RNA viruses of mammalian cells / S.A. Aaronson, J.R. Stephenson // Biochim. Biophys. Acta. 1976. — V.458, P.323−354.
  40. Adams, D.H. Cardiac xenotransplantation: clinical experience and future direction / D.H. Adams, R.N. Chen, A. Kadner // Ann. Thorac. Surg. 2000. -V.70. — P.320.
  41. Ahearn, J.M. Rosengard A.M. Complement receptors // In: The Human Complement System In Health And Disease. Eds: J.E. Volanakis., M.M. Frank. New York: Marcel Dekker. 1998. — P. 167−202.
  42. Akiyoshi, D.E. Identification of a full-length cDNA for an endogenous retrovirus of miniature swine / D.E. Akiyoshi, M. Denaro, H. Zhu, J.L. Greenstein, P. Banerjee et al. // J. Virol. 1998. — V.72. — P.4503−4507.
  43. Alexander, L.J. Complete nucleotide sequence of bovine p-lactoglobulin gene / L.J. Alexander, G. Hayes, Bawden W., Stewart A.F., Mackinley A.G.// Animal Biotechnology. 1993. -1 — P. 1−10.
  44. Ali, S. Characterisation of the gene encoding ovine B-lactoglobulin: mi-larity to the genes for retinol-binding protein and other secretory proteins/ S. Ali, A.J.Clarke // Mol. Biol. 1988.-V. 199. — P. 415−426.
  45. Anderson, D.J. The role of complement component C3b and its receptors in sperm-oocyte interaction / D.J. Anderson, A.F. Abbott, R.M. Jack // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993.- V.90. — P.10 051−10 055.
  46. Archibald, A.L. Molekular Biological Approaches and their Possible Aplications, in J.W. Owen and R.F.E. Axford (eds), Breeding for Disease Resistance in Farm Animals / A.L. Archibald // C.A.B. International, UK. 1991. -P.100−122.
  47. Archibald, A.L. High-level expression of biologically active human alpha 1-antitrypsin in the milk of transgenic mice / A.L.Archibald, M. McClenaghan, V. Hornsey, J.P. Simons, A.J. Clark // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. -V. 87. -P. 5178−5182.
  48. Arezzo, F. Sea urchin sperm as a vector of foreign genetic information / F. Arezzo // Cell Biol. Int. Rep. 1989. — V.13 (4). — P.391−404.
  49. Auchincloss, H.J. Xenogeneic transplantation / H.J. Auchincloss, D.H. Sachs // Annu. Rev. Immunol. 1998. — V.16. — P.433−470.
  50. Bach, F.H. Barriers to xenotransplantation / F.H. Bach, et al. // Nature Medicine. 1995. — V.l. — P.869−873.
  51. Bachiller, D. Liposome-mediated DNA uptake by sperm cells / D. Bachiller, K. Schellander, J. Peli, et al. // Mol. Reprod. Dev. 1991. — V.30 (3). -P. 194−200.
  52. Bailey, L. Baboon-to-human cardiac xenotransplantation in a neonate / L. Bailey, S. Nehlsen-Canarella, W. Concepcion, et al. // Journal of the American Medical Association (JAMA). 1985. — V.254. — P.3321−3329.
  53. Ballard, L. A polymorphism of the complement regulatory protein MCP (membrane cofactor protein or gp45−70) / L. Ballard, T. Seya, J. Teckman, et al. // J. Immunol. 1987. -V.138. -P.3850−3855.
  54. Barash, I. Expression of B-lactoglobulin/human serum albumin fusion genes in transgenic mice: hormonal regulation and in situ localization / I. Barash, A. Faerman, T. Ratovitsky, R. Puzis, M. Nathan et al. // Transgenic Res. 1994. -V.3. — P. 141−151.
  55. Barilla-LaBarca, M. Role of Membrane Cofactor Protein (CD46) in Regulation of C4b and C3b Deposited on Cells / M. Barilla-LaBarca, M. Liszewslci, J. Lambris, D. Hourcade, J. Atkinson // The Journal of Immunology. 2002. -V. 168. — P.6298−6304.
  56. Barre-Sinoussi, F. Isolation of a T-lymphotropic retrovirus from a patient at risk for aquired immune deficiency syndrome (AIDS) / F. Barre-Sinoussi, J.C. Cherman, F. Rey, M.T. Nugeyre, S. Chamaret et al. // Science. 1983. V.220. -P.868−871.
  57. Bawden, W.S. The genes encoding the major milk-specific proteins and their use in transgenic studies and protein engineering / W.S.Bawden, R.J.Passey, A.G. Mackinlay // Biotechnology and Genetic Engineering Reviews. 1994. — V. 12. — P. 89−137.
  58. Bayna, E.M. Tissue-specific, high level expression of the rat whey adic protein gene in transgenic mice / E.M.Bayna, J.M. Rosen // Nucl. Acids Res. -1990.-V. 18. P.2977−2985.
  59. Berardino, M. Development and chromosomal constitution of nuclear transplants derived from male germ cells / M. Berardino, M. Hoffher // J. of Exper. Zoology. 1976. — V.176(1). — P.61−72.
  60. Berggard, K. Bordetella pertussis binds the human complement regulator C4BP: role of filamentous hemagglutinin / K. Berggard, E. Johnsson, F.R. Mooi, G. Lindahl Infect. Immun. — 1997. — V.65. — P.3638−3643.
  61. Bhatti, F. Survival of life-supporting HDAF transgenic kidneys in primates is enhanced by splenectomy / F. Bhatti, A. Zaidi, M. Schmoeckel, E. Cozzi,
  62. G. Chavez et al. // Transplant. Proc. 1998. — V.30. — P.2467.
  63. Bigam, D. Xenotransplantation / D. Bigam, R. Zhong, G. Levy, D. Grant //Can. J. Surg. 1999.-V.42.-P. 12−16.
  64. Blake, J. Beta geo, a combined selection and reporter gene for retroviral and transgenic studies / J. Blake, P. S. Salinas, S.M. Hughes // Biotechnigues. — 1997. V.23(4). — P.690−695.
  65. Bora, N.S. Membrane cofactor protein (MCP) of the complement system: a Hind III RFLP that correlates with expression polymorphism / N.S. Bora, T.W. Post, J.P. Atkinson // J. Immunol. 1991. — V. 146. — P.2821 -2825.
  66. Borwompinyo, S. Germ-line transmission of a lacZ gene in chickens using an avian Spleen Necrosis Virus-based vector / S. Borwompinyo, D.W. McCoy, P.E. Mozdziak, J.N. Petitte // J. Anim. Sei., 79 (1), 54th Annu. Ree. Meat Conf., Vol. II, Abstr. 174,42.
  67. Bosselman, R.A. Germline transmission of exogenous genes in the chicken / R.A. Bosselman, R.Y. Hsu, T. Boggs, S. Hu, J. Bruszewski et al. // Science. 1989. — V.243 (4890). — P.533−535.
  68. Braskett, B.G. Uptake of heterologous genome by mammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization / B.G. Braskett, W. Baranska, W. Sawicki et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. 1971. — V.68. — P.353−357.
  69. Brazolot, C.L. Efficient transfection of chicken cells by lipofection, and introduction of transfected blastodermal cells into the embryo / C.L. Brazolot // Mol. Reprod. Dev. 1991.-V.30.-P.304−312
  70. Brem, G. Expression synthetic cDNA sequences encoding human insulinlike growth factor-1 (IGF-1) in the lammary gland of transgenic rabbits / G. Brem, P. Hartl, U. Besenfelder, E. Wolf, N. Zinovieva et al. // Gene. 1994. — V. 149. — P. 351−355.
  71. Brem, G. Mammary and specific expression of chymosin constructs in transgenic rabbits / G. Brem, U. Besenfelder, N. Zinovieva, S J. eregi, L. Solti et al. // Theriogenology. 1995. — V. 43. — P. 175.
  72. Brem, G. Production of foreign proteins in the mammary ands of transgenic mammals / G. Brem, U. Besenfelder, P. Hartl // Chimica Oggi. 1993. — V. 11.-P. 21−25.
  73. Brem, G. Production of transgenic mice rabbits and pigs by microinjection into pronuclei / G. Brem, B. Brenig, H.M. Goodman, R.C. Seiden, F. Graf et al. // Zuchthygiene. 1985. — V. 20. — P. 251 — 252.
  74. Brinster, R.L. Germline transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation / R.L. Brinster, M.R. Avarbock // Proc. Natl. Acad. Sei. 1994.-V.91.-P.l 1303−11 307.
  75. Brinster, R.L. No simple solution for making transgenic mice / R.L. Brinster, E.P. Sandgren, R.R. Behringer, A.F. Palmiter 1989. — V.59. — P.239−241.i
  76. Buehler, T. Rabbit b-casein promoter directs secretion of human interleu-kin-2 into the milk of transgenic rabbits / T. Buehler, T. Bruyer, D.F.Went, G. Stranzinger, K. Buerki // Theriogenology. 1990. — V. 8. — P. 140−143.
  77. Byrne, G.W. Protection of xeno-geneic cardiac endothelium from human complement by ex-pression of CD59 or DAF in transgenic mice / G.W. Byrne, K.R. McCurry, D. Kagan, C. Quinn, M.J. Martin et al. // Transplantation. 1995. -V.60.- P. l 149−1156.
  78. Caffin, J.P. Physiological and pathological factors fluencing bovine a-lactalbumin and p-lactoglobulin concentrations in milk / J.P. Caffin, B. Poutrel, P. Rainard // J. Dairy Sei.- 1985.-V. 68. P. 1087−1094.
  79. Capecchi, M.R. High efficiency transformation by direct microinjection of DNA into cultured mammalian cells / M.R. Capecchi // Cell. 1980. — V.22 (27). -P.9139−9143.
  80. Carrington, C.A. Expression of human DAF and MCP on pig endothelial cells protects from human complement / C.A. Carrington, A.C. Richards, E. Cozzi, G. Langford, N. Yannoutsos, D.J. White // Transplantation Proceedings. 1995. -V.27 (1). — P.321.
  81. Carsience, R.S. Germline chimeric chickens from dispersed donor blasto-dermal cells and compromised recipient embryos / R.S. Carsience // Development. 1993. — V. 117. — P.669−675.
  82. Casasnovas, J.M. Crystal structure of two CD46 domains reveals an extended measles virus-binding surface / J.M. Casasnovas, M. Larvie, T. Stehle // EMBO J. 1999.-V.18.-P.2911−2922.
  83. Castro, F.O. Introduction of foreign DNA into the spermatozoa of farm animals / F.O. Castro, et al. // Theriogenology. 1990. — V.34. — P. 1099−1110.
  84. Chang, I.K. Germ line chimera produced by transfer of cultured chick primordial germ cells / I.K. Chang, A. Yoshiki, M. Kusakabe, A. Tajima, T. Chi-kamune et al. // Cell Biol Int. 1995. — V.19 (7). — P.569−576.
  85. Chapman, L.E. Xenogenic infections and public health / L.E. Chapman // Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 1999. — V.26. -P.1005−1008.
  86. Chapman, L.E. Xenotransplantation and xenogeneic infections / L.E. Chapman, T.M. Folks, D.R. Salomon, A.P. Patterson, T.E. Eggerman et al. // New England Journal of Medicine. 1995. — V.333 — P.1498−1501.
  87. Chapman, S.C. Ubiquitous GFP expression in transgenic chickens using a lentiviral vector / S.C.Chapman, A. Lawson, W.C. Macarthur, R.J.Wiese, R.H. Loechcl et al. // Development 2005 — V. 132. — P.935−940.
  88. Chong, H. Replication-competent retrovirus produced by a 'split-function' third generation amphotropic packaging cell line / H. Chong, R.G. Vile // Gene Ther. 1996. — V.3. — P.624−629.
  89. Clark, A.J. Pharmaceuticals from transgenic livestock. / A.J. Clark // Trends Biotechnol. 1987. — V.5. P.20−24.
  90. Clark, A.J. Expression of human anti-gemophilic Factor IX in the milk of transgenic sheep / Clark A.J., Bessos H., Bishop J.O., Brown P., Harris S. et al. // BioTechnology. 1989. — V.7. — P.487−492.
  91. Clark, A.J. Expression of human anti-hemophilic factor ix in the milk of transgenic sheep / A.J. Clark, H. Bessos, J.O. Bishop et.al. Bio/Tech. — 1989. -V.7. — P.487−492.
  92. Clark, A.J. Expression of human antihemophilic factor IX in the milk of transgenic sheep / A.J. Clark // Biotechnology. N 7. — 1989. — P.487−492.
  93. Clark, A.J. Gene targeting in livestock: a preview / A.J. Clark, S. Burl, C. Denning, P. Dickinson Transgenic Research. — 2000. — V.9. — P.263−275.
  94. Coffin, J.M. Structure and classification of retroviruses. In 'The Retrovi-ridae' (ed. L.A. Levy) / J.M. Coffm // Plenum Press, NY. 1992. — P. 19−49.
  95. Cone, R.D. High-efficiency gene transfer into mammalian cells: generation of helper-free recombinant retrovirus with broad mammalian host range / R.D. Cone, R.C. Mulligan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. — V.81. — P.6349−6353.
  96. Constantini, F. Insertional mutations in transgenic mice / F. Constantini, G. Radoce, G. Lee // Progr. Nucl. Acid Res. And Mol. Biol. San Diego. 1989. -V.36. — P.159−169.
  97. D., Lanza R. // In: Xeno: the promise of transplanting animal organs into humans // Oxford Univ. Press. 2000. — P. 180−184.
  98. Cosset, F.L. A new avian leukosis virus-based packaging cell line that uses two separate transcomplementing helper genomes / F.L. Cosset // J. Virol. -1990.-V.64.-P. 1070−1078.
  99. Cosset, F.L. Packaging cells for avian leukosis virus-based vectors with various host ranges / F.L. Cosset // J. Virol. 1992. — V.66. — P.5671−5676.
  100. Cozzi, E. The generation of transgenic pigs as potential organ donors for humans / E. Cozzi, D. White // Nature Medicine. 1995. — V. 1. — P.964−966.
  101. Dahlback, B. Protein S and C4b-binding protein: components involved in the regulation of the protein C anticoagulant system / B. Dahlback // Thromb Haemost. -1991.- V.66. P.49−61.
  102. Das, R.C. Production of therapeutic proteins from transgenic animals / R.C. Das // BioBusiness. 2001. — Feb. — P.60−62.
  103. Davies, A. Policing the membrane: cell surface proteins which regulate complement / A. Davies // Res. Immunol. 1996. — V.147. — P.82−87.
  104. De Rooij, D.G. Proliferation and differentiation of spermatogonial stem cells / D.G. De Rooij //Reproduction. 2001. — V. 121. — P.347−354.
  105. Deacon, T. Histologic evidence of fetal pig neural cell survival after transplantation into a patient with Parkinson’s disease / T. Deacon, J. Schumacher, J. Dinsmore, C. Thomas, P. Palmer et al. // Nature Medicine. 1997. — V.3. -P.350−353.
  106. Denman, J. Transgenic expression of a variant of human tissue-type plasminogen activator in goat milk: purification and characterization of the recombinant enzyme / J. Denman // Biotechnology. 1991. — V.9. — P.839−843.
  107. Diamond, L. Characterization of transgenic pigs expressing functionally active human CD59 on cardiac endothelium / L. Diamond, K. McCurry, M.J. Martin, S. McLennan, E. Oldham et al. // Transplantation. 1996. — V.61. -P. 1241.
  108. Diamond, L.E. Human CD59 expressed in transgenic mouse hearts inhibits the activation of complement / L.E. Diamond, K.R. McCurry, E.R. Oldham, M. Tone, H. Waldmann et al. // Transpl. Immunol. 1995. — V.3. -P.305−312.
  109. DiTullio, P. Production of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator in the milk of transgenic mice / P. DiTullio, S. H Cheng., J. Marshall, RJ. Gregory, K.M.Ebert et al. // Biotechnology. 1992. — V. 10. — P. 74−77.
  110. Dobrovolsky, V.N. Human gamma-interferon expression in the mammary gland of ansgenic mice / V.N.Dobrovolsky, O.V.Lagutin, T.V.Vinogradova, I.S.Frolova, P. Kuznetsov et al.//FEBS Lett. 1993. -V. 319. — P. 181−184.
  111. Dolci, S. Combined action of stem cell factor, leukemia inhibitory factor and cAMP on in vitro proliferation of mouse primordial germ cells / S. Dolci, M. Pesce, M. de. Felici // Mol. Reprod. Dev. 1993. — V.35 — P. — 134−139.
  112. Donahue, R.E. Helper vims induced T-cell lymphomas in non-human promates after retroviral mediated gene transfer / R.E. Donahue, S.W. Kessler, D. Bodine, K. McDonagh, C. Dunbar et al. // J. Exp. Med. 1992. — V.176. — P. l 1 251 135.
  113. Dorig, R.E. CD46, a primate-specific receptor for measles virus / R.E.
  114. Dorig, A. Marcil, C.D. Richardson // Trends Microbiol. 1994. — V.2. — P.312−318.
  115. Dym, M. Expression of c-kit receptor and its autophosphorylation in immature rat type A spermatogonia / M. Dym, M.-C. Jia, G. Dirami, J.M. Price // Biology of reproduction. 1995 — V.52. — P.8−19.
  116. Ebert, K.M. Porcine growth hormone gene expression from viral promotors in transgenic swine / K.M. Ebert, T.E. Smith, F.C. Buonoma, E.W. Overstrom // Animal Biotechnology. 1990. — V.l. — P. 145−159.
  117. Ebert, K.M. Transgenic production of a variant of human tissue-type plasmingen activator in goat milk: generation of transgenic goats and analysis of expression / K.M. Ebert, J.P. Selgrath, P. Ditullo et el. // BioTechnology. N 9. -1991. — P.835−838.
  118. Ebert. K.M. Induction of human tissue asminogen activator in the mammary gland of transgenic goats / K.M.Ebert, P. DiTullio, C.A.Barry, J.E.Schindler, S.L.Ayers et al. // Biotechnology. -1994.-V. 12. P. 699−702.
  119. Emery, D.W. Development of a condensed locus control region cassette and testing in retrovirus vectors for a gamma-globin / D.W. Emery // Blood Cells Mol Dis. V.24 (3). — 1998. — P.322−339.
  120. Erickson, R.P. Minireview: creating animal models of genetic diseases / R.P. Erickson //Amer. J. Hum. Genet. 1988. — V.43. — P.382−386.
  121. Ernst, L.K. Transgenic rabbits with antisense RNA gene targeted at adenovirus H.5 / L.K. Ernst, V.I. Zaharchenko, N.M. Suraeva, T.I. Ponomoreva, O.I. Miroshnichenk et al. // Theriogenology. 1991. — V.35. — P. 1257−1271.
  122. Evans, M.G. Establishment in culture of plurepotential cells from mouse embryos / M.G. Evans, M. Kaufman //Nature. 1982. — V.292. — P. 154−156.
  123. Eyal-Giladi, H. Avian primordial germ cells are of epiblastic origin / H. Eyal-Giladi, M. Ginsburg, A. Farbarov // J Embryol Exp Morphol. 1981. — V.65.- P.139−147.
  124. Fabre, J.W. Nudging xenotransplantation towards humans / J.W. Fabre // Nature Medicine 1995. — V.l. -P.403−404.
  125. Fearon, D.T. Identification of the membrane glycoprotein that is the C3b receptor of the human erythrocyte, polymorphonuclear leukocyte, B lymphocyte and monocyte / D.T. Fearon // J. Exp. Med. 1989. — V. l52. — P.20.
  126. Fearon, D.T. The CD 19/CR2/TAPA-1 complex of B lymphocytes: linking natural to acquired immunity / D.T. Fearon, R.H. Carter // Annu. Rev. Immunol. 1995. — V. l3. — P. 127−149.
  127. Fischer, E. Characterization of the human glomerular C3 receptor as the C3b/C4b complement type one (CR1) receptor / E. Fischer, M. D. Appay, J. Cook, M.D. Kazatchkine // J. Immunol. 1986. — V. l36. — P. 1373.
  128. Folch, J.M. Complete sequence of the caprine B-ttoglobulin gene / J.M. Folch, A. Coll, A. Sanchez//J. Dairy Sci. 1994. -V. 77. — P. 3493−3497.
  129. Fransolini, M. Evidence for nuclear internalization of exogenous DNA into mammalian sperm cells / M. Fransolini et al. // Mol. Reprod. and Dev. 1993.- V.34. -P.133−139.
  130. Fraser, R.A. Efficient incorporation of transfected blastodermal cells into chimeric chicken embryos / R.A. Fraser // Int. J. Dev. Biol. 1993. — V.37. -P.381−385.
  131. Gahne, M.B. Electroporation of bovine spermatozoa to carry foreign DNA in oocytes / M.B. Gahne, F. Pothier, M.A. Sirard //Mol. Reprod. Dev. -1991.-V.29.-P.6−15.
  132. Galili, U. A unique natural human IgG antibody with anti-alphagalactosyl specificity / U. Galili, E.A. Rachmilewitz, A. Peleg, I. Flechner // J. Exp. Med. 1984. — V. 164. — P. 1519.
  133. Gallo, R.C. Frequent detection and isolation of cytophatic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and at risk for AIDS / R.C. Gallo, S.Z. Sala-huddin, M. Popovic, G.M. Shearer, M. Kaplan et al. // Science. 1984. — V.224. -P.500−503.
  134. Gandolfi, F. Spermatozoa, DNA binding and transgenic animals / F. Gandolfi // Trasgenic Research. 1998. — V.7. — P.147−155.
  135. Gilbert, A.B. Egg albumen and its formation / A.B. Gilbert // Physiology and Biochemistry of the Domestic Fowl (Bell, D.J., Free, B.M. eds), Academic Press. 1984.-pp. 1291−1329.
  136. Gordon, J.W. Genetic transformation of mouse embryos by microinjection of purified DNA / J.W. Gordon, G.A. Scangos, D.J. Plotkin, J.A. Barbosa, F.H. Ruddle // Proc. Natl. Acd. Sci. USA. 1980. — V.77. — P.7380−7384.
  137. Gorodetskii, S.I. Isolation and characterisation Ithe bos taurus b-casein gene / S.I.Gorodetskii, T.M.Tkach, T.V. Kapelinskaya // Gene. 1988. — V. 66. -P. 87−96.
  138. Gottschalk, S. Synthetic vehicles for effecient gene transfer and expression in mammalian cells / S. Gottschalk // J. Cell Biochem. Suppl. 21a. — 1995. -P.393.
  139. Gray, D.A. Insertional mutagenesis: neoplasia arising from retroviral integration / D.A. Gray // Cancer Invest. 1991. — V.9. — P.295−304.
  140. Grosovsky, A.J. Insertional inactivation of the tk-locus in a human B lymphoblastoid cell line by a retroviral shuttle vector / A.J. Grosovsky, A. Skandalis, L. Hasegawa, B. N Walter // Mutat. Res. 1993. — V.289. — P.297−308.
  141. Gruendbaum, J. Sperm cells as vectors for generation of transgenic chickens / J. Gruendbaum, E. Revel, S. Yarns, A. Fainsod //J. Cell Biochem. -1991.-Suppl.15.-P.194.
  142. Guenzburg, W.H. A mammary-specific romoter directs expression of growth hormone not only to the mammary gland, but also to Bergman glia cells in transgenic mice / W.H.Guenzburg, B. Salmons, B. Zimmerman // Mol. Endocr. -1991. -V. 5. P. 123−33.
  143. Hammer, R.E. Production of transgenic rabbits, sheep and pigs by microinjection / R.E. Hammer, V.G. Pursel, C.E. Rexroad, R.J. Wall, D.J. et al. // Nature. 1985.- V.315. — P.680−683.
  144. Han, J. Y. Production of germline chimeras by transfer of chicken gonadal primordial germ cells maintained in vitro for an extended period / J.Y.Han, T.S. Park, Y.H. Hong, D.K. Jeong, J. N. Kim et al.// Theriogenology. 2002. -V.58. — P.1531−1539.
  145. Hancock, W.W. Beyond hyperacute rejection: strategies for development of pig-to-primate xenotransplantation / W.W. Hancock // Kidney Int. 1997. -V.58. — P.36−40.
  146. Hansson, L. Structure of the human b-casein encoding gene / L. Hansson, A. Edlund, J. Tohhansson, O. Hernell, M. Stromqvist et al. // Gene. 1994. -V. 13. -P. 193−199.
  147. Harvey, A.J. Expression of exogenous protein in the egg white of transgenic chickens / A.J. Harvey // Nat. Biotechnol. 2002. — V.20. — P.396−399.
  148. Heneine, W. No evidence of infection with porcine endogenous retrovirus in recipients of porcine islet-cell xeno-grafts / W. Heneine, A. Tibell, W.M. Switzer, P. Sandstrom, G.V. Rosales et al. // Lancet. 1998. — V.352. -P.695−699.
  149. Hill, K.G. Production of transgenic cattle by pronuclear injection / K.G. Hill, J. Curry, F.J. DeMayo, K. Jones-Diller, J.R. Slapak // Theriogenology. 1992. -V.37.-P.222.
  150. Hitchin, E. Bovine beta-casein expressed in transgenic mouse milk is phosphorylated and incorporated to micelles/ E. Hitchin, E.M.Stevenson, A.J.Clark, M. McClenaghan, J. Leaver // Protein Expr. Purif. 1996. — V. 7. — № 3. — P. 247 252.
  151. Hochi, S. Fate of exogenous DNA carried into mouse eggs spermatozoa / S. Hochi, T. Ninomiya, A. Mizuno, M. Honma, A. Yuki //Anim. Biotech. 1990. — V.1.-P.21−31.
  152. Hu, S. Generation of competent virus in the REV helper cell line C3 / S. Hu, J. Bruszewski, M. Nicolson, J. Tseng, R.Y. Hsu et al. // Virology. 1987. -V. 159. — P.446−449.
  153. Hyttinen, J.M. Generation of transgenic dairy cattle from transgene analysed and sexed embryos produced in vitro / J.M. Hyttinen, T. Peura, M. Tolvanen, J. Aalto, L. Alhonen et al. // BioTechnology. 1994. — V.12. — P. 606−608.
  154. Ibanez, E. Expression of caprine beta-lactoglobulin in the milk of transgenic mice / E. Ibanez, J.M.Folch, F. Vidal, A. Coll, J. Santalo et al. // Transgenic les. 1997. -V. 6. — P. 69−74.
  155. Ivarie, R. Avian transgenesis: progress towards the promise // Trends Biotechnol. -2003. V.21. — P. 14−19.
  156. Izadyar, F. Spermatogonial stem cell transplantation / F. Izadyar, F. van Dissel-Emiliani, A. van Pelt, D.G. de Rooij // Molecular and Cellular Endocrinology. 2000. — V. 169. — P.21−26.
  157. Jiang, F.X. Behaviour of spermatogonia following recovery from busul-fan treatment in the rat / F.X. Jiang // Anat. Embryol. 1998. — V.198 (1). — P.53−61.
  158. Jin, H. Expression of porcine endogenous retrovirus in peripheral blood leukocytes from ten different breeds / H. Jin, Y. Inoshima, D. Wu, A. Morooka, H. Sentsui // Transplant Infectious Disease. 2000. — V.2. — P. 11−14.
  159. Jones, W.K. The rat casein mltigene family. Fine structure and the evolution of the b-casein gene / W.K.Jones, L.-Y.Yu-Lee, S.M.Clift, T.L.Brown, J.M. Rosen// Biol. Chem. 1985.- V. 260. — P. 7042−7050.
  160. Kagan, D. Expression of complement regulatory factors using heterologous promoters in transgenic mice / D. Kagan, L. Piatt, J. Logan, G. Byrne // Transpl. Proc. 1994. — V.26. — P. 1242.
  161. Kamihira, MTransgenic birds for the production of recombinant proteins / M. Kamihira, K. Nishijima, S. Iijima // Adv. Biochem. Eng. Biotechnol. -2004.-V.91.-P.171−189.
  162. Karagenc, L. Soluble factors and the emergence of chick primordial germ cells in vitro / L. Karagenc, J.N.Petitte // Poult. Sci.- 2000. V.79. — P.80−85.
  163. Khoo, H.-W. Sperm-mediated gene transfer: a review / H.-W. Khoo, J. Patil, E. Chen // SEAMEO Jasper Fellowship Monograph 1993 Seriesl. 1993. -P.75−92.
  164. Kiies, W. A. The contribution of farm animals to human health / W. A. Kiies, H. Niemann // Trends Biotechnol. 2004 — V.22. — P.286−294.
  165. Kim, J.H. Development of a positive method for male stem cellmediated gene transfer in mouse and pig / J.H. Kim, H.S. Jung-Ha, H.T. Lee, et al. // Mol. Reprod. Dev. 1997. — V.46. — P.515−526.
  166. Kitamura, M. Possible association of infertility with sperm-specific abnormality of CD46 / M. Kitamura, M. Matsumiya, M. Yamanaka, S. Takahara, T. Hara et al. // J. Reprod. Immunol. 1997. — V.33. — P.83−88.
  167. Ko, J.H. Production of biologically active human granocyte colony stimulating factor in the milk of transgenic goat / J.H. Ko // Transgenic Reseach. V. 9. — 2000. — P.215−222.
  168. Koczan, G., Genomic organisation of the bovine aSl-asein gene / G. Koczan, G. Hobom, H.-M. Seyfert // Nucl. Acids Res. 1991. — V. 19. — P. 55 915 596.
  169. Kooyman, D.L. In vivo transfer of GPI-linked complement restriction factors from erythrocytes to the endothelium / D.L. Kooyman, G.W. Byrne, S. McClellan, D. Nielsen, M. Tone et al. // Science 1995. — V.269. — P.89−92.
  170. Korhonen, V.P. Expression of bovine beta-lactoglobulin human erythropoietin fusion protein in the milk of transgenic mice and rabbits / V.P. Korhonen, M. Tolvanen, J.M. Hyttinen // Eur. J. Biochem. 1997. — V.15. — P.482−489.
  171. Krimpenfort, P. Generation of transgenic dairy cattle using in vitro embryo production / P. Krimpenfort, A. Rademakers, W. Eyestone, A. van der Schans, S. van den Broek et al. // Bio.Tech. 1991. — V.9. — P.844−847.
  172. Lai, L.X. Production of alpha-1,3-galactosyltransferase knockout pigs by nuclear transfer cloning / L.X. Lai, D. Kolber Simonds, K.W. Park, H.Y. Cheong, J.L. Greenstain et al. // Science. — 2002. — V.295 (5557). -P.1089−1092.
  173. Lambris, J.D. The chemistry and biology of C3, C4, and C5 / J.D. Lambris, A. Sahu, R. Wetsel // In: Volanakis J.E., Frank M. Eds. The Human Complement System in Health and Disease. Marcel Dekker, New York. 1998. -P.83−118.
  174. Lampe, DJ. Factors affecting transposition of the Himarl mariner trans-poson in vitro / D.J. Lampe // Genetics. 1998. — V.149. — P. 179−187.
  175. Larsson, E. Human endogenous pro viruses / E. Larsson, N. Kato, M. Cohen // Curr. Top. Microbiol, Immunol. 1989. — V.148. — P. 115−132.
  176. Lavitrano, M. Sperm cells as vectors for introducing foreign DNA into eggs: genetic transformation of mice / M. Lavitrano, A. Camaioni, V.M. Fasio, et al. // Cell. 1989. — V.57. — P.717−723.
  177. Lavitrano, M. The interaction of sperm cells with exogenous DNA a role of CD4 and major histocompatibility complex class II molecules / M. Lavitrano, B. Maione, E. Forte, M. Francolini, S. Sperandio, et al. // Exp. Cell Res. -1997. — V.233. — P.56−62.
  178. Le Tissier, P. Two sets of human-tropic pig retrovirus / P. Le Tissier, J.P. Stoye, Y. Takeuchi, C. Patience, R.A. Weiss // Nature 1997. — V.389. — P.681
  179. Lee, C.S. An efficient expression of human growth hormone (hGH) in the milk of transgenic mice using rat beta-casein/hGH fusion genes / C.S.Lee, K. Kim, D.Y.Yu, K.K. Lee // Ippl. Biochem. Biotechnol. 1996. -V. 56. — P. 211 222.
  180. Lee, K.F. Tissue-specific expression of le rat p-casein gene in transgenic mice / K.F.Lee, F.J.DeMayo, S.H.Atiee, J.M. Rosen // Nucl. Acids Res. 1988. -V. 16. — P.1027−1041.
  181. Levy, J.A. Isolation of lymphocytopathic retroviruses from San Francisco patients with AIDS / J.A. Levy, A.D. Hoffmann, S.M. Kramer, J.A. Landis, J.M. Shimabukuro et al. // Science. 1984. — V.225. — P.840−842.
  182. Li, Y. Ballistic transfection of avian primordial germ cell in ovo / Y. Li, J. Behnam, K. Simkiss // Transgenic Res. 1995. — V.4 (1). — P.26−29.
  183. Lindenmann, J. Inheritance of resistance to influenza virus in mice / J. Lindenmann Proc. Soc. Exp. Biol. Med. — 1964. — V. l 16. — P.506−509.
  184. Linial, M. An avian oncovirus mutant (SE21Qlb) deficient in genomic RNA: biological and biochemical characterization. / M. Linial, E. Medeiros, W. S Hayward // Cell. 1978. — V.15. — P.1371−1381.
  185. Linial, M. Transfer of defective avian tumor virus genomes by a Rous sarcoma virus RNA packaging mutant / M. Linial // J. Virol. 1981. — V.38. -P.380−382.
  186. Lipinski, D. Transgenic rabbit producing human growth hormone in milk / D. Lipinski, J. Jura, R. Kalakl, A. Plawski, M. Kala, M. Szalata. // J. Appl. Genet. 2003. — 44(2). — P. 165−174.
  187. Liszewski, M.K. Membrane cofactor protein (MCP or CD46): newest member of the regulators of complement activation gene cluster / M.K. Liszewski,
  188. T.W. Post, J.P. Atkinson//Ann. Rev. Immunol. 1991. — V.9. -P.431−455.
  189. Logan, J.S. Potential use of genetically modified pigs as organ donors for transplantation into humans / J.S. Logan, A. Sharma // Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 1999. — V.26. — P. 1020−1025.
  190. Love, J. Transgenic birds by DNA microinjection / J. Love // Biotechnology. 1994. — V. 12. — P.60−63.
  191. Lower, R. Identification of human endogenous retroviruses with complex mRNA expression and particle formation / R. Lower, K. Boiler, B. Hasenmaier, C. Korbmacher, N. Muller-Lantsch et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. -V.90. — P.4480−4484.
  192. Maga, E.A. Expression of human fsozyme mRNA in the mammary gland of transgenic mice / E.A.Maga, G.B.Anderson, M.C.Huang, J.D. Murray // Transgenic Res. 1994. — V.3.-P. 36−42.
  193. Maga, E.A. Mammary gland expression of transgenes and the potential for altering the properties of milk / E.A.Maga, J.D. Murray // Biotechnol. 1995. -V.13. — P.1452−1457.
  194. Makowka, L. The use of a pig liver xenograft for temporary support of a patient with fulminant hepatic failure / L. Makowka, D.V. Cramer, A. Hoffman // Transplantation. 1995. — V.59. — P. 1654−1659.
  195. Malhotra, R. Identification of human complement factor H as a ligand for L-selectin / R. Malhotra, M. Ward, R.B. Sim, M.T. Bird // Biochem. J. 1999. -V.341. — P.61−69.
  196. Mann, R. Construction of a retrovirus packaging mutant and its use to produce helper-free defective retrovirus / R. Mann, R.C. Mulligan, D. Baltimore // Cell. 1983. — V.33. — P. 153−159.
  197. Manon, K. Prenatal letality in a transgenic mouse line is the result of a chromosomal translocation / K. Manon, P. Overbeek, H. Westphal // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1988. — V.85. — P. 1165−1168.
  198. Mark, W. An insertional mutation in a transgenic mouse line results in developmental arrest at day 5 of gestation / W. Mark, E. Signorelli, E. Lacy // Cold
  199. Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1985. — P.453−460.
  200. Martin, U. Expression of pig endogenous retrovirus by primary porcine endothelial cells and infection of human cells / U. Martin, V. Kiessig, J.H. Blusch, A. Haverich, K. von der Helm et al. // Lancet. 1998. — V.352. — P.692−694.
  201. Massoud, M. The deleterious effects of human erythropoietin gene driven by the rabbit whey acidic protein gene promoter in transgenic rabbits / M. Massoud, J. Attal, D. Thepot// Reprod. Nutr. Dev. 1996. — V.36. — P.555−563.
  202. Mccreath, K.J. Production of genetargered sheep by nuclear transfer from cultured somatic cells / K.J. Mccreath, J. Howcroft, K.H.S. Campbell, A. Colman, A.E. Shnieke et al. // Nature. 2000. — V.405 (6790). — P. 1066−1069.
  203. McCurry, K.R. Human complement regulatory proteins protect swine-to-primate cardiac xenografts from humoral injury / K.R. McCurry, D.L. Kooyman, C.G. Alvarado, A.H. Cotterell, M.J. Martin et al. // Nat. Med. 1995. — V.l. -P.423−427.
  204. McGrew, M. J. Efficient production of germline transgenic chickens using lentiviral vectors / M. J. McGrew, A. Sherman, F.M.Ellard, S.G.Lillico, H. J. Gilhooley et al. // F. MBO Rep. 2004. — V.5. — P.728−733.
  205. Meade, H. Bovine alpha SI-casein gene equences direct high level expression of active human urokinase in mouse milk / H. Meade, L Gates, E. Lacy, N. Lonberg // Biotechnology. 1990. — V. 8. — P. 443−446.
  206. Meri, S. Distribution of protectin (CD59), a complement membrane attack inhibitor, in normal human tissues / S. Meri, H. Waldmann, P.J. Lachmann
  207. Laboratory Investigation. 1991. — V.65 (5). — P.532.
  208. Michaels, M.G. Xenotransplant-associated zoonoses. Strategies for prevention / M.G. Michaels, R.L. Simmons // Transplantation. 1994. — V.57. -P.1−7.
  209. Miller, A. D Retroviral packaging cells./ A.D. Miller // Hum. Gene Ther. 1990.-V.l.-P.5−14.
  210. Miller, A.D. Generation of helper-free amphotropic retroviruses that transduce a dominant-acting, methotrexate-resistant dihydrofolate reductase gene / A.D. Miller, M.F. Law, I.M. Verma // Mol. Cell. Biol. 1985. — V.5. — P.431−437.
  211. Miller, A.D. Redesign of retroviral packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production / A.D. Miller, C. Buttimore // Mol. and Cell. Biol. 1986. — V.6. — P.2895−2902.
  212. Miyagawa, S. In vitro and in vivo studies to prevent hyperacute rejection / S. Miyagawa, M. Mikata, H. Matsuda, M. lkawa, M. Okabe et al. // Transplantation Proceedings. 1996. — V.28 (2). — P. 1031.
  213. Miyagawa, S. The mechanism of discordant xenograft rejection / S. Miyagawa, H. Hirose, R. Shirakura, Y. Naka, S. Nakata et al. // Transplantation. -1988. V.46. — P.825−830.
  214. Mollnes, T.E. Xentransplantation: how to overcome the complement obstacle? / T.E. Mollnes, A.E. Fiane // Molecular Immunology. 1999. — V.36. -P.269−276.
  215. Morgan, B.P. Complement Regulatory Proteins / B.P. Morgan, C.L. Harria // San Diego: Academic Press. 1999.
  216. Mozdziak, P. E. Isolation of chicken primordial germ cells using fluorescence-activated cell sorting / P.E.Mozdziak, J. Angerman-Stewart, B. Rushton, S. L. Pardue, J. N. Petitte // Poult. Sci.-2005.-V.84.-P.594−600.
  217. Mozdziak, P.E. Development of transgenic chickens expressing bacterial beta-galactosidase / P.E. Mozdziak, S. Borwornpinyo, D.W. McCoy, J.N. Petitte // Dev Dyn. 2003. — V.226 (3). — P.439−445.
  218. Muller, M. Transgenic strategies to increase disease resistance in livestock / M. Miiller, G. Brem // Reproduction Fertility and Development. 1996. -V.6.-P. 605−613.
  219. Muller, M. Disease resistance of farm animals / M. Muller, G. Brem -Experientia. 1991.
  220. Murakami, H. Production of transgenic pigs expressing human DAF (CD55) regulated by the porcine MCP promoters / H. Murakami, H. Nagashima, Y. Takahagi, T. Fujimura, S. Miyagawa et al. // Transplant. Proc. 2001. — V.32. — P.2505−2506.
  221. Murray, J.D. The production of transgenic Merino sheep by microinjection of ovine metallothionein-ovine growth hormone fusion genes / J.D. Murray, C.D.Nancarrow, J.T.Marshall, I.G. Flazelton, K.A.Ward // Reprod. Fert. Dev. -1989- V.1.-P.147−155.
  222. Naito, M. Production of germline chimeric chickens, with high transmission rate of donor-derived gametes, produced by transfer of primordial germ cells / M. Naito, A. Tajima, Y. Yasuda, T. Kuwana // Mol Reprod Dev. 1994. — V.39 (2). — P.153−161.
  223. Nakanishi, A. Gene transfer in the chicken by sper-mediated methods / A. Nakanishi, A. Iritani //Mol. Reprod. Dev. 1993. — V.36. — P.258−261.
  224. Naldini, L. In vivo gene delivery and stable transduction of nondividing cells by a lentiviral vector / L. Naldini, U. Blomer, P. Gallay, D. Ory, R. Mulligan et al. // Science. 1996. — V.272. — P.263−267.
  225. Naniche, D. Human membrane cofactor protein (CD46) acts as a cellular receptor for measles virus / D. Naniche, G. Varior-Krishnan, F. Cervoni, T.F. Wild, B. Rossi et al. // J. Virol. 1993. — V.67. — P.6025−6032.
  226. Nicholson-Weller, A. Structure and function of decay accelerating factor CD55 / A. Nicholson-Weller, C.E. Wang // J. Lab. Clin. Med. 1994. — V.123. -P.485−491.
  227. Niekrasz, M. The pig as organ donor for man / M. Niekrasz, Y. Ye, L.L. Rolf// Transplant. Proc. 1992. — V.24. — P.625.
  228. Nilson, B.H.K. Targeting of retroviral vectors through protease- substrate interactions / B.H.K. Nilson //Gene Ther. 1996. — V.3. — P.280−286.
  229. Ninomiya, H. The human complement regulatory protein CD59 binds to the alpha-chain of C8 and to the «b"domain of C9/ H. Ninomiya, P.J. Sims // Journal of Biological Chemistry. 1992. — V.267 (19). — P.13 675.
  230. Ninomiya, T. Functions of milk protein gene flanking regions oh human growth hormone gene / T. Ninomiya, M. Harabayashi, J. Sagara, A. Yuki // Mol. Reprod. Dev. 1994. — V.37. — P. 276−283.
  231. Nocka, K. Expression of c-kit gene products in known cellular targets of W mutations in normal and W mutant mice-evidence for an impaired c-kit kinase in mutant mice / K. Nocka, S. Majumder, B. Chabot, et al. // Genes Dev. 1989. -V.3. — P.816−826.
  232. Norin, A.J. Enhanced survival of porcine endothelial cells and lung xenografts expressing human CD59 / A.J. Norin, R.J. Brewer, N. Lawson, G.A. Grijalva, M. Vaynblatt et al. // Transplant. Proc. 1996. — V.28. — P.797−798.
  233. Norman, D.G. Three-dimensional structure of a complement control protein module in solution / D.G. Norman, P.N. Barlow, M. Baron, A.J. Day, R.B. Sim, I.D. Campbell // J. Mol. Biol. 1991. — V.219. — P.717−725.
  234. Ogawa, T. Leuorolide, a gonadotropin-releasing hormone agonist, enhances colonization after spermatogonial transplantation into mouse testes / T. Ogawa, I. Dobrinski, M.R. Avarbock, R.L. Brinster //Tissue Cell. 1998. — V.30 (5). — P.583−588.
  235. Ogawa, T. Transplantation of male germ line stem cells restores fertility in infertile mice / T. Ogawa, I. Dobrinski, M.R. Avarbock, R.L. Brinster //Nature Medicine. 2000. — V.6. — P.29−34.
  236. Ogawa, T. Transplantation of testis germinal cells into mouse seminiferous tubules / T. Ogawa, J.M. Arechaga, M.R. Avarbock, R.L. Brinster //International Journal of Developmental Biology. 1997. — V.41. — P. l 11−122.
  237. Ogawa, T. Xenogeneic spermatogenesis following transplantation of hamster germ cells to mouse testes / T. Ogawa, I. Dobrinski, M.R. Avarbock, R.L. Brinster //Biol. Reprod. 1999a. — V.60. — P.515−521.
  238. Oglesby, T.J. Membrane cofactor protein (CD46) protects cells from complement-mediated attack by an intrinsic mechanism / T.J. Oglesby, C.J. Allen, M.K. Liszewski, D.J. White, J.P. Atkinson // J. Exp. Med. 1992. — V.175. -P.1547−1551.
  239. Okada N. Membrane cofactor protein (CD46) is a keratinocyte receptor for the M protein of the group A streptococcus / N. Okada, M.K. Liszewski, J.P. Atkinson, M. Caparon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. — V.92. — P.2489−2493.
  240. Oldstone, M. Measles virusinfection in a transgenic model: virus-induced immunosuppression and central nervous system disease / M. Oldstone, H.1.wicki, D. Thomas, A. Tishon, S. Dales et al. // Cell. 1999. — V.98. — P.629−640.
  241. Ory, D.S. A stable human-derived packaging cell line for production of high retrovirus / vesicular stomatitis virus G pseudotypes / D.S. Ory, B.A. Neugeboren, R.C. Mulligan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. — V.93. — P. 11 400 -11 406.
  242. Pain, B. Long-term in vitro culture and characterisation of avian embryonic stem cells with mul tiple morphogenetic potentialities / B. Pain, M. E. Clark, M. Shen, H. Nakazawa, M. Sakurai et al. // Development. 1996. — V.122. — P.2339−2348.
  243. Paleyanda, R.K. Transgenic pigs produce functional luman factor VIII in milk / R.K.Paleyanda, W.H.Velander, T.K.Lee, D.H.Scandella, F.C.Gwazdauskas et al. //Nat. Biotechnol. 1997. -V. 15. — P. 971−975.
  244. Palmiter, R. Dramatic growth of mice that develop from eggs microinjected with metallothioneingrowth hormone fusion genes / R. Palmiter, R. Brinster, R. Hammer, M. Trumbauer, M. Rosenfeld et al. // Nature 1982. -V.300.-P.611−615.
  245. Paradis, K. Search for cross-species trans-mission of porcine endogenous retrovirus in patients treated with living pig tissue / K. Paradis, G. Langford, Z. Long, W. Heneine, P. Sandstrom et al. //Science 1999. — V.285. -P.1236−1241.
  246. Parreira, C.G. Development of germ cell transplants in mice / C.G. Par-reira, T. Ogawa, M.R. Avarbock, L.R. Franca, L.R. Brinster et al. //Biology of Reproduction. 1998. — V.59. — P. 1360−1370.
  247. Parrish, J.J. Capacitation of bovine sperm by heparin / J.J. Parrish, J.L. Susko-Parrish Biol Reprod. — 1989. — V.41. — P.683−699.
  248. Passoni, L. Sperm cells mediated gene transfer: presence of foreign
  249. DNAinto bovine blastocyst obtained from in vitro fertilization / L. Passoni, L. Mauri, A. Luciano, P. Pocar, Ajmone-Marsan, et. al. // A preliminary report. -1995. P.427−428.
  250. Patience, C. Infection of human cells by an endogenous retrovirus of pigs / C. Patience, Y. Takeuchi, R.A. Weiss Nat. Med. — 1997. — V.3. — P.282−286.
  251. Patience, C. No evidence of pig DNA or retroviral infection in patients with short-term extracorporeal connection to pig kidneys / C. Patience, G.S. Patton, Y. Takeuchi, R.A. Weiss, M.O. McClure et al. // Lancet. 1998. — V.352. — P.699−701.
  252. Perry, A.C. Mammalian transgenesis by intracytoplasmic sperm injection / A.C. Perry, T. Wakayama, H. Kishikawa, et al. // Science. 1999. — V.284 (5417).-P.l 180−1183.
  253. Pervaiz, S. Homology of b-lactoglobulin, serum retinol-binding protein md protein HC / S. Pervaiz, K. Brew // Science. 1985. — V. 228. — P. 335−337.
  254. Petitte, J. N. Avian pluripotent stem cells / J.N. Petitte, G. Liu, Z. Yang // Mech. Dev. 2004. — V. 121. — P. 1159−1168.
  255. Petitte, J.N. Production of somatic and germline chimeras in the chicken by transfer of early blastodermal cells / J.N. Petitte // Development. 1990. -V.108. — P.185−189.
  256. Petitte, J.N. The origin of the avian germ line and transgenesis in birds / J.N. Petitte, L. Karagenc, M. Ginsburg // Poult. Sei. 1997. — V.76 (8). — P. 10 841 092.
  257. Petranka, J. Structure-Function Relationships of the Complement Regulatory Protein, CD59 / J. Petranka, J. Zhao, J. Norris, N. Tweedy, R. Ware, et al. // Blood Cells, Molecules, and Diseases. 1996. — V.22. — P.281−296.
  258. Platenburg, G.J. Expression of human lactoferin in milk of transgenic mice / G.J.Platenburg, E.P.Kootwijk, P.M.Kooiman, S. L Woloshuk, J.H.Nuijens et al. // Transgenic Res. 1994. — V. 3. — P. 99−108.
  259. Piatt, J. The transplantation of organs and tissues between species / J. Piatt, J. Logan // In: Xenotransplantation, Eds: Cooper D., et al Springer. — 1997. — P.650−658.
  260. Piatt, J.L. Xenotransplantation: recent progress and current perspectives / J.L. Piatt // Current Opinion In Immunology. 1996. — V.8 (5). — P.721.
  261. Prunkard, D. High-level expression of recombinant human fibrinogen in the milk of transgenic mice / D. Prunkard, I. Cottingham, I. Garner, M. Dalrymple, G. Lasser et al. //Nat. Biotechnol. 1996. — V. 14. — P. 867−871.
  262. Pursel, V. Growth potential of transgenic pigs expressing a bovine growth hormone gene / V. Pursel, R. Cambell, K. Miller, R. Behringer, R. Palmiter et al. // J. Anim. Sci. 1988. — V.66. — P.267.
  263. Pursel, V.G. Genetic engineering of livestock / V.G. Pursel, C.A. Pin-kert, K.F. Miller, D.J., Bolt, R.G.Campbell et al. // Science. 1989. — V. 244. -P.1281−1288.
  264. Pursel, V.G. Modification of production traits. In: Clark, A.J. (Ed.), Animal breeding. Technology for the 21st century. Harwood Academic Publishers, 1998, P. 187.
  265. Pursel, V.G. Progress in gene transfer in farm animals / V.G. Pursel,
  266. C.E. Jr. Rexroad, D.J. Bolt, K.F. Miller, R.J. Wall et al. // Vet. Immunol. Histopath. 1987. -V. 17. — P.303−312.
  267. Pursel, V.G. Transfer of an ovine metallothionein-ovine growth hormone fusion gene into swine / V.G.Pursel, R.J. Wall, M.B.Solomon, D.J. Bolt, J.D. Murray et al. // Journal of Animal Science. 1997. — V.75. — P. 2208 — 2214.
  268. Ram, S. Interactions between Neisseria gonorrhoeae and C4b-binding protein: a molecular basis for gonococcal serum resistance / S. Ram, S. Gulati,
  269. D.P. McQuillen, R. Boden, C. Elkins et al. // Mol. Immunol. Abstr. 1999. — V.36. — P.297.
  270. Rapp, J.C. Biologically active human interferon alpha-2b produced in the egg white of transgenic hens / J.C. Rapp, A.J.Harvey, G.L.Speksnijder, W. Hu, R. Ivarie // Transgenic Res. 2003 — V.12. — P.569−575.
  271. Reemtsma, K. Renal heterotransplantation in man / K. Reemtsma, B. McCracken, J. Schlegel // Annals of Surgery. 1964. — V.160. — P.384−408.
  272. Rexroad, C.E. Insertion, expression and phisiology of growth-regulating genes / C.E. Rexroad, R.E. Hammer, R.R. Behringer, R.D. Palmiter, R.L. Brinster // J. Reprod. Fert. Suppl. 1990. — V.41. — P. 119−124.
  273. Rexroad, C.E. Production of transgenic sheep with growth relating genes / C.E.Rexroad, R.E. Hammer, D.J. Bolt, T.H. Elsasser, K.F. Miller, R.R. Behringer // Molecular Reproduction and Development. 1989. — V. 1. — P. 164−169.
  274. Rexroad, C.E. Transferrin- and albumin-directed expression of growth-related peptides in transgenic sheep / C.E. Rexroad, K.M. Mayo, D.J. Bolt, T.H.Elsasser, K.F. Miller et al. // Journal of Animal Science. 1991. — V.69. — P. 2995 — 3004.
  275. Rigg, R.J. A novel human amphotropic packaging cell line: High titer, complement resistance, and improved safety / R.J. Rigg, J. Chen, J.S. Dando, S.P. Forestell, I. Plavec, E. Bohnlein//Virology. 1996. — V.218. — P.290−295.
  276. Rijnkels, M. Expression analysis of the individual bovine beta-, alpha si- and kappa-casein genes in transgenic mice / M. Rijnkels, P.M. Kooiman, P.J.Krimpenfort, H.A. de Boer, F.R. Pieper // Biochem. J. 1995. — V. 311. — P. 929−937.
  277. Roberts, B. Cloning of the goat b-casein encoding gene and expression in transgenic mice / B. Roberts, P. DiTulio, J. Vitale, K. Hehir, K Gordon // Gene. -1992.-V. 121.-P. 255−262.
  278. Rodriguez, A. Exogenous cloned DNA can penetrate living sperm cells / A. Rodriguez, F. O. Castro, J. Guillen, et al. //Advances in Gene Technology: Feeding the World in the 21st Century. 1991. — P.53.
  279. Rollins, S.A. The complement-inhibi-tory activity of CD59 resides in its capacity to block incorpo-ration of C9 into membrane C5b-9 / S.A. Rollins, P.J. Sims // J. Immunol. 1990. — V.144. — P.3478−3483.
  280. Rooney, I.A. Complement in human reproduction: activation and control / I.A. Rooney, T.J. Oglesby, J.P. Atkinson // Immunol. Res. 1993. — V.12. -P.276−294.
  281. Roshlau, K. Gene transfer experiments in cattle / K. Roshlau, P. Rommel, L. Andreewa, M. Tackel, D. Roshlau et al. // Journal of Reproduction and Fertility. 1989. — V.38. — P.153−160.
  282. Rottman, O. Liposomemediated gene transfer via spermatozoa into avian egg cells / O. Rottman, R. Antes, P. Hofer, G. Maierhofer //J. Anim. Breed. Genet. 1991. — V. 109. — P.64−70.
  283. Rowe, J.A. Plasmodium falciparum rosetting mediated by a parasite-variant erythrocyte membrane protein and complement-receptor 1 / J.A. Rowe, J.M. Moulds, C.I. Newbold, L.H. Miller // Nature. 1997. — V.388. — P.292−295.
  284. Rowe, P.M. Xenotransplantation: from animal facility to the clinic? / P.M. Rowe//Molecular Medicine Today. 1996. -V.2 (1). — P.10−15.
  285. Rubanyi, G. The future of human gene therapy / G. Rubanyi // Mol. aspects of Medicine. 2001. — V.22. — P. 113−142.
  286. Russell, S.J. Gene therapy: Science, medicine and the future / S.J. Russell // Br. Med. J. 1997. -V.315. -P.803−815.
  287. Ruysschaert, J.-M. A novel cationic amphiphile for transfection of mammalian cells / J.-M. Ruysschaert, A. Ouahabi, V. Willeaume //Biochem. and Bioph. Res. Comm. 1994.-V.203 (3). — P. 1622−1628.
  288. Saadi, S. Role of compliment in xenotransplantation / S. Saadi, J.L. Piatt // Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 1999. — V.26. -P.1016−19.
  289. Sachs, D.H. The pig as a potential xenograft donor / D.H. Sachs // Vet1. munol Immunopathol. 1994. — V.43. — P. 185.
  290. Salter, D.W. Gene insertion into the chicken germ line by retroviruses / D.W. Salter, E.J. Smith, S.H. Hughes, S.E. Wright, A.M. Fadly et al. // Poult Sci. 1986. — V.65 (8). — P.1445−1458.
  291. Salter, D.W. Insertion of a disease resistance gene into the chicken germline / D.W. Salter, L.B. Crittenden // Biotechnology. 1991. — V. 16. — P. 125 131.
  292. Salter, D.W. Transgenic chickens: insertion of retroviral genes into the chicken germ line / D.W. Salter, E.J. Smith, S.H. Hughes, S.E. Wright, L.B. Crittenden//Virology. 1987. — V. 157 (1). — P.236−240.
  293. Sang, H. Prospects for transgenesis in the chick // Mech. Dev. 2004 -V.121. — P. l 179−1186.
  294. Sato, M. Direct injection of foreign DNA into mouse testis as a possible alternative of sperm-mediated gene transfer / M. Sato, R. Iwase, K. Kasai, N. Tada //Animal Biotechnology. 1994. — V.5 (1). — P. 19−31.
  295. Scott, B. B. Generation of tissue-specific transgenic birds with lentiviral vectors / B.B. Scott and C. Lois // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. — V.102. -P.16 443−16 447.
  296. Seamon, J.A. Inserting a nuclear targeting signal into a replication-competent Moloney murine leukemia virus affects viral export and is not sufficient for cell cycle-independent infection / J.A. Seamon //J. Virol. V.76 (16). — 2002. -P.8475−8484.
  297. Seidel, G. Embryo transfer: the next 100 years / G. Seidel // Therioge-nology.- 1991.-V.35 (1). P.171−180.
  298. Seidel, G. Production of genetically identical sets of Mammals: Cloning / G. Seidel //J. Exp. Zool. 1983. — V.2. — P.228.
  299. Seya, T. Functional properties of membrane cofactor protein of complement / T. Seya, J.P. Atkinson // Biochem. J. 1989. — V.264. — P.581−588.
  300. Seya, T. Human membrane cofactor protein (MCP, CD46): multiple isoforms and functions / T. Seya, A. Hirano, M. Matsumoto, et al. // Int. J. Biochem. Cell Biol. 1999.-V.31.-P.1255−1260.
  301. Seya, T. Purification and characterization of a membrane protein (gp45−70) that is a cofactor for cleavage of C3b and C4b / T. Seya, J.R. Turner, J.P. Atkinson// Journal of Experimental Medicine. 1986. — V.163 (4). — P.837.
  302. Shafren, D.R. Coxsackievirus A21 binds to decay-accelerating factor but requires intercellular adhesion molecule 1 for cell entry / D.R. Shafren, D.J. Dorahy, R.A. Ingham, G.F. Bums, R.D. Barry // Journal of Virology. 1997. -V.71 (6). — P.4736.
  303. Shank, P. Avian oncovirus mutant (SE21Qlb) deficient in genomic RNA: characterization of a deletion in the provirus / P. Shank, M. Linial // J. Virol. -1980. V.36. — P.450−456.
  304. Sherman, A. Transposition of the Drosophila element mariner into the chicken germ line / A. Sherman // Nat. Biotechnol. 1998. — V. 16. — P. 1050−1053.
  305. Shinohara, T. Enrichment and transplantation of spermatogonial stem cells / T. Shinohara, R.L. Brinster //Int. J. Androl. 2000. — V.23. — P.89−91.
  306. Shnieke, A.E. Humanfactor IX transgenic seep produced by transfer of nuclei from transfected fetal fibroblasts / A.E. Shnieke, A.J. Kind, W.A. Ritchie, K. Mycock, A.R. Scott etal. //Science. 1997. -V.278 (5346). — P.2130−2133.
  307. Simons, J.P. Gene transfer into sheep / J.P. Simons, I. Wilmut, A.J.Clark, A.L. Archibald, J.O. Bishop et al. // Biotechnology. 1988. -V. 6. — P. 189−183.
  308. Sperandio, S. Sperm-mediated DNA transfer in bovine and swine species / S. Sperandio, V. Lulli, M. Bacci, M. Form, B. Maioni, et al. //Anim. Biotech. -1996.-V.7.-P.59−77.
  309. , T. // Baboon-to-human liver transplantation / T. Starzl, J. Fung, A. Tzakis, A. Todo, A. J. Demetris et al. // Lancet. 1993. — V.341. — P.65−71.
  310. Steele D.J., Auchincloss H.J. Xenotransplantation // Annu. Rev. Med. -1995. V.46. — P.345−360.
  311. Stevens, R.B. The pathogenesis of hyperacute xenograft rejection / R.B. Stevens, J.L. Platt // American Journal of Kidney Diseases 1992. — V.20 (4). -P.414.
  312. Stoye, J.P. The dangers of xenotransplantation / J.P. Stoye, J.M. Coffin // Nature Medicine 1995. — V. 1. — P. 1100.
  313. Stromqvist, M. Recombinant human extracellular superoxide dismutase produced in milk of transgenic rabbits / M. Stromqvist, M. Houdebine, J.O. Anders-son, A. Edlund, C. Johansson et al. //Transgenic Res. 1997. -V. 6. — P. 271−278.
  314. Subramanian, A. Rate limitations in posttranslational processing by the mammary gland of transgenic animals / A. Subramanian, K. Paleyanda, H. Lubon, B.L.Williams, F.C.Gwazdauskas et al. // Ann. NY Acad. Sei. 1996. — V. 782. — P. 87−96.
  315. Sugita, Y. Determination of carboxyl-terminal residue and disulfide bonds of MACIF (CD59), a glycosyl-phosphatidylinositol-anchored membrane protein / Y. Sugita, Y. Nakano, E. Oda, et al. // J. Biochem. (Tokyo) 1993. -V. 14. — P.473−477.
  316. Takeuchi, Y. Host range and interference studies of three classes of pig endogenous retrovirus / Y. Takeuchi, C. Patience, S. Magre, R.A. Weiss, P.T. Banerjee, P. Le Tissier, J.P. Stoye // J. Virol. 1998. — V.72. — P.9986−9991.
  317. Temin, H.M. Safety considerations in somatic gene therapy of human disease with retrovirus vectors / H.M. Temin // Hum. Gene Ther. 1990. — V.l. -P.111−123.
  318. Thepot, D. Structure of the gene incoding rabbit beta-casein / Thepot D., Devinoy E., Fontaine M.L., Houdebine L.M. //Gene. -1991. V. 97. — P. 301−306.
  319. Thern, A. Expression of two different antiphagocytic M proteins by Streptococcus pyogenes of the OF + lineage / A. Thern, M. Wastfelt, G. Lindahl // J. Immunol. 1998. — V.60. — P.860−869.
  320. Thern, A. Ig-binding surface proteins of Streptococcus pyogenes also bind human C4b-binding protein (C4BP), a regulatory component of the complement system / A. Thern, L. Stenberg, B. Dahlback, G. Lindahl // J. Immunol. 1995. — V. 154. — P.375−386.
  321. Todaro, G.J. Characterization of a type C virus released from the porcine cell line PK (15) / G.J. Todaro, R.E. Benveniste, M.M. Lieber, C.J. Sherr // Virology. 1974. — V.58. — P.65−74.
  322. Tsai, H.J. Sperm as a carrier to introduce an exogenous DNA fragment into the oocyte of Japanese abalone (Haliotis divorsicolor suportexta) / H.J. Tsai, C.H. Lai, H.S. Yang //Transgenic Res. 1997. — V.6 (1). — P.85−95.
  323. Tsunoda, Y. The recent progress on nuclear transfer in mammals / Y. Tsunoda, Y. Kato // Zool. Sei. 2000. — V.17 (9). — P. 1177−1184.
  324. Uckert, W. Retrovirus-mediated gene transfer in cancer therapy / W. Uckert, W. Walther //Pharmac. Ther. 1994. — V.63. — P.323−247.
  325. Urven, L.E. Distribution of extracellular matrix in the migratory pathway of avian primordial germ cells / L.E. Urven, U.K. Abbott, C.A. Erickson // Anat Ree. 1989. — V.224 (1). — P.14−21.
  326. Van Cott, K.E. Phenotypic and genotypic stability of multiple lines of (ansgenic pigs expressing recombinant human protein C / K.E.Van Cott, H. Lubon,
  327. C.G.Russel, S.P.Butler, F.C.Gwazdauskas et al. // Transgenic Res. 1997. — V.6. -P. 203−212.
  328. Velander, W.H. High-level expression of a heterologous protein in the milk of transgenic swine using the c DNA encoding human protein C / W.H. Velander// Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1992. — V.89. — P. 12 003−12 007.
  329. Vial, C.M. Life supporting function for over one month of a transgenic porcine heart in a baboon / C.M. Vial, D.J. Ostlie, F.N.K. Bhatti, E. Cozzi, M. Goddard et al. // The Journal of Heart and Lung Transplantation. 2000. — V.19. -P.224−229.
  330. Vick, L. Transgenic birds from transfonned primordial germ cells / L. Vick, Y. Li, K. Simkiss // Proc. R. Soc. Lond. 1993. — V.251. — P. 179−182.
  331. Vize, P.D. Introduction of a porcine growth hormone fusion gene into transgenic pigs promotes growth / P.D. Vize, A.E. Michalska, R. Ashman, B. Lloyd, B.A. Stone, P. Quinn // Journal of Cell Science. 1988. — V.90. — P. 295 -300.
  332. Waddington, D. Chronology of events in the first cell cycle of the polys-permic egg of the domestic fowl (Gallus domesticus) / D. Waddington // Int. J. Dev. Biol. 1998. — V.42. — P.625−628.
  333. Wakayama, T. Mouse cloning with nucleus donor cells of different age type / T. Wakayama, R. Yanagimachi Mol. Reprod. Dev. — 2001. — V.58 (4). -P.376−383.
  334. Wall, R.J. Synthesis and secretion of the mouse whey acidic protein in transgenic sheep / RJ. Wall, C.E.Rexroad, A. Powell, A. Shamay, R. McKnight et al. // Transgenic Res. 1996. — V. 5. — P. 67−72.
  335. Weiss, R.A. Xenografts and retroviruses / R.A. Weiss // Science. 1999. — V.285. — P.1221−1222.
  336. Wentworth, B.C. Manipulation of avian primordial germ cells and gonadal differentiation / B.C. Wentworth, H. Tsai, J.H. Hallett, D.S. Gonzales, G. Rajcic-Spasojevic // Poult Sci. 1989. — V.68 (7). — P.999−1010.
  337. White, D. Hearts from pigs transgenic for human DAF are not hyperacutely rejected when xenografted to primates / D. White, R. Braidley, J. Dunning, et.al. // 3rd Int. Congr. Xenotranspl. 1995. — P. 128.
  338. Whitelaw, C.B.A. Position-ndependent expression of the ovine beta-lactoglobulin gene in transgenic mice / C.B.A.Whitelaw, S. Harris, McClenaghan, J.P.Simons, A.J. Clark // Biochem. J. 1992. — V. 286. — P. 31−39.
  339. Wilmut, J. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells / J. Wilmut, A.E. Shnieke, J. McWhir, A.J. Kind, K.H.S. Campbell // Nature. 1997. — V.3 85 (6619). — P.810−813.
  340. Wilson, J.G. Characterization of human T lymphocytes that express the C3b receptor / J.G. Wilson, T.F. Tedder,. D.T. Fearon // J. Immunol. 1983. -V.131. — P.684.
  341. Wilton, A.N. Strong associations between RFLP and protein polymorphism for CD46 / A.N. Wilton, R.W. Johnstone, I. McKenzie, et al. // Immunogenetics. 1992. — V.36. — P.79−85.
  342. Wolf, E. Expressionbedingte Veranderungen bei Wachstumshormong-transgenen Mausen / E. Wolf// Munchen, Diss. med. vet. 1990.
  343. Wolf, E. Transgenic technology in farm animals-progress and perspectives / E. Wolf, W. Shernthaner, V. Zakhartchenko, K. Prelle, M. Stojkovic, G. Brem // Exp.Physiol. 2000. — V.85 (6). — P.615−625.
  344. Wright, G. High level expression of active human alpha-1-antitrypsin in the milk of transgenic sheep / G. Wright, A. Carver, D. Cottom, D. Reeves, A. Scott et al. // Biotechnology. -1991. -V. 9. P. 830−834.
  345. Xu, C. A critical role for murine complement regulator crry in fetomaternal tolerance / C. Xu, D. Mao, V.M. Holers, B. Palanca, A.M. Cheng, H. Molina // Science. 2000. — V.287. — P.498−501.
  346. Yamazaki, Y. In vivo gene transfer to mouse spermatogenic cells by deoxyribonucleic acid injection into seminerous tubules and subsequent electropo-ration / Y. Yamazaki, H. Fujimoto, H. Ando, et al. //Biol. Reprod. 1998. — V.59. -P. 1439−1444.
  347. Yarus, S. Secretion of unprocessed human surfactant protein B in milk of transgenic mice / S. Yarus, N.M.Greenberg, Y. Wei, J.A.Whitsett, T.E.Weaver et al. // Transgenic Res. 1997. — V. 6. — P. 51−57.
  348. Yasuda, Y. A method to obtain avian germ-line chimaeras using isolated primordial germ cells / Y. Yasuda, A. Tajima, T. Fujimoto, T. Kuwana // J Reprod Fertil. 1992. — V.96 (2). — P.521−528.
  349. Ye, Y. Secondary organ allografting after a primary «bridging» xenotransplant / Y. Ye, Y. Luo, T. Kobayashi, S. Taniguchi, S. Li, S. Kosanke, et al. // Transplantation. 1995. — V.60 (1). — P. 19−22.
  350. Ye, Y. The pig as a potential organ donor for man. A study of potentially transferable disease from donor pig to recipient man / Y. Ye, M. Niekrasz, S.
  351. Kosanke, R. Welsh, H. E. Jordan et al. // Transplantation. 1994. — V.57. — P.694−703.
  352. Yeatman, M. Complement-mediated pulmonary xenograft injury studies in swine-to-primate orthotopic single lung transplant models / M. Yeatman, C.W. Daggett, W. Parker, G.W. Byrne, J.S. Logan et al. // Transplantation. 1998. -V.65. — P.1084−1093.
  353. Yoshimura, M. Isolation and the structural analysis of the mouse B-casein gene / M. Yoshimura, T. Oka // Gene. 1989. — V. 78. — P. 267−272.
  354. Yu, J. Mapping the Regions of the Complement Inhibitor CD59 Responsible for Its Species Selective Activity / J. Yu, S. Dong, N. Rushmere, B. Morgan, R. Abagyan, S. Tomlinson // Biochemistry. 1997. — V.36. — P.9423−9428.
  355. Yu, Z. Gene expression profiles in different stages of mouse spermato-genic cells during spermatogenesis / Z. Yu, R. Guo, Y. Ge, et al. //Biol. Reprod. -2003. V.69 (1). — P.37−47.
  356. Zaidi, A. Life-supporting pig-to-primate renal xenotransplantation using genetically modified donors / A. Zaidi, M. Schmoeckel, F. Bhatti, P. Waterworth, M. Tolan et al. // Transplantation. 1998. — V.65. — P.1584−1590.
  357. Zandrum, B. Diploid nuclear replacement in mature human ova with cleavage / B. Zandrum, M.D. Shettles //Am. J. Obstet. Gynecol. 1979. — V. l 33. -P.222−224.
  358. Zelenin, A.V. Genetic transformation of mouse cultured cells with help of high velocity mechanical DNA-injection / A.V. Zelenin, A.V. Titomirov, V.A. Kolesnikov //FEBS Letters. 1989. — V.244. — P.65−67.
  359. Zhao, D. F. Purification of avian circulating primordial germ cells by nycodenz density gradient centrifugation / D. F. Zhao, T. Kuwana. 2003.// Br. Poult. Sci. 2003. — V.44. — P.30−35.
  360. Zhu, L. Production of human monoclonal antibody in eggs of chimeric chickens / L. Zhu, M. C. van de Lavoir, J. Albanese, D.O. Beenhouwer // Nat. Biotechnol. 2005. — V.23. — P. 1159−1169.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!