Постановка и решение задачи

Материалом для исследований служили растения малины (Rubus idaeus L.) ремонтантных сортов Брусвяна, Брусиловский стандарт, Примара, Joan J, характеризующихся комплексом ценных признаков.

При проведении экспериментальной работы использовали методы, общепринятые в исследованиях по культуре изолированных клеток, тканей и органов растений [4, 7, 8]. Культивирование эксплантов осуществляли на питательной среде Мурасиге и Скуга (МС), содержащей 2% сахарозы и 0,7% агара. Для инициации морфогенетических процессов в качестве регуляторов роста использовали 6-бензиламинопурин (БАП) и гибберелловую кислоту (ГК) в различных концентрациях. Условия культивирования: температура 24−26°С, относительная влажность воздуха 60−70%, 16-ти часовой фотопериод и освещенность 2,0−3,0 тыс. люкс.

Для размножения использовали регенерировавшие в условиях in vitro из верхушечных и пазушных почек микропобеги малины. Отбор растений, пригодных для микрочеренкования, осуществляли визуально, оценивая высоту основного побега, количество дополнительно сформированных побегов и состояние питательной среды. Растения-регенеранты извлекали из пробирок и перемещали в чашки Петри, где разделяли на сегменты длиной 6−10 мм с одним-двумя междоузлиями, которые использовали для посадки на свежую питательную среду. При перемещении эксплантов на питательную среду контролировали, чтобы нижняя часть микрочеренка была погружена в питательную среду, для чего у некоторых микрочеренков отсекали нижние листья. Для статистической обработки экспериментальных данных использовали пакет прикладных программ Excel 7.0 для Microsoft Windows.

Основная задача на втором этапе клонального микроразмножения растений состоит в получении максимального количества микроклонов, что позволяет существенно снизить себестоимость полученных растений-регенерантов. Интенсивный рост и развитие микропобегов сортов Брусвяна и Брусиловский стандарт, отмеченные на первом этапе микроразмножения, позволяют перейти ко второму этапу микроразмножения уже через 30 суток после введения почек в культуру in vitro, поскольку за этот период из одной почки формируется 1,8−2,4 побега высотой 26,5−30,0 мм [2, 9]. Увеличение длительности культивирования повышает риск травмирования нежных тканей побегов при извлечении их из пробирки. Микрочеренки, полученные при разделении основного и дополнительных побегов на сегменты длиной 6−10 мм с одним-двумя междоузлиями помещали на свежие питательные среды, дополненные регуляторами роста группы цитокининов и гиббереллинов. В результате проведенных исследований отмечено, что частота регенерации побегов малины на втором этапе микроразмножения была высокой и варьировала от 78,5 до 96,0% в зависимости от генотипа и концентрации экзогенных гормонов (рис. 1).

малина микропобег клональный ремонтантный Уровень регенерации микропобегов малины сортов Брусвяна и Joan J был наиболее высоким при добавлении в питательную среду БАП и ГК в равном соотношении (0,5 мг/л) и составил 92,5% и 88,0% соответственно. Для микропобегов сорта 'Брусиловский стандарт' оптимальным является вариант питательной среды, содержащий БАП в концентрации 0,5 мг/л и ГК 0,3 мг/л, увеличение концентрации регуляторов роста не оказывало существенного влияния на уровень регенерации. Частота регенерации микропобегов сорта Примара варьировала от 78,5% до 85,0%, при этом разница между вариантами была статистически не доказуема.

Выявлено, что у сортов Брусвяна и Брусиловский стандарт наряду с интенсивным ростом основного побега, происходило формирование и развитие одного-двух дополнительных побегов, тогда как сорта Joan J и Примара характеризовались меньшей побегообразовательной способностью (табл.).

Таблица.