Исследование функциональной активности генов рДНК у рабочих Салаирского горно-обогатительного комбината

ИССЛЕДОВАНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЕНОВ рднк у рабочих Салаирского горно-обогатительного комбината

Минина В.И., Савченко Я. С., Ахматьянова В. Р., Ковальская Т.Н.

Одним из важнейших направлений генетической токсикологии является изучение комплексных эффектов производственной среды на организм человека и прежде всего на его геном. При этом основное внимание уделяется оценке генных и хромосомных мутаций. Вместе с тем, генотоксиканты способны не только разрушать ДНК, но вызывать изменения экспрессии генов.

В клетках эукариот существует группа жизненно важных генов, которые контролируют весь биосинтез белка в клетке — комплекс генов рДНК. В результате их транскрипционной активности в ядре формируется такая структура как ядрышко. В нормальных условиях размеры и структура ядрышек в большинстве случаев адекватны интенсивности клеточного белкового синтеза. Для идентификации ядрышка существует сравнительно простой метод, основанный на способности белков ядрышка окрашиваться нитратом серебра [Howell W., Black D., 1980]. Исходя из этого, сравнительный анализ размеров аргентофильных зон ядра (т.е. размер ядрышка) может давать ценную информацию о степени функциональной активности генов рДНК. Изучение таких показателей в клетках крови доноров профессионально контактирующих с производственными токсикантами может дать ценную информацию о функционировании отдельных групп генов в условиях выраженной мутагенной нагрузки.

В связи с этим в качестве объекта исследования были выбраны рабочие Салаирского горно-обогатительного комбината Кемеровской области (30 человек), в периферической крови которых ранее было отмечено существенное повышение частоты хромосомных нарушений -3,81 ± 0,46% [Дружинин В.Г., 2003]. В качестве контроля использовали кровь жителей г. Салаир (27 человек), не контактировавших с производственными вредностями. Частота аберрантных метафаз в данной группе составляла — 2,22±0,35%. Материалом для исследования, как в опытной, так и в контрольной группе послужили лимфоциты периферической крови, стимулированные к делению в культуре с помощью ФГА. Зафиксированные клетки раскапывали на предметные стекла, окрашивали нитратом серебра по стандартной методике [Howell W., Black D., 1980]. Для каждого донора фотографировали по 30 ядер лимфоцитов. Цифровые изображения анализировали с помощью ППП «Photoshop 6.0».

Результаты измерений площадей аргентофильных зон ядра у обследованных доноров представлены в таблице. Было установлено, что у рабочих Салаирского горно-обогатительного комбината размеры аргентофильных зон достоверно меньше, чем у контрольных доноров.

генетический токсикология организм производственный Размеры аргентофильных зон ядер лимфоцитов у рабочих горно-обогатительного комбината и контрольных доноров.

* p<0,001.

Это указывает на существование значимых отличий в функциональной активности генов рДНК. Причиной наблюдаемого снижения транскрипционной активности рибосомных генов может служить комплексное токсическое воздействие производственной среды на геном рабочих, приводящее к снижению экспрессии генов. Последствиями такого явления могут стать нарушения клеточного метаболизма, способные приводить к стойким нарушениям здоровья.