Спектрофотометрический анализ полисахаридов, выделенных из лекарственного препарата «Бефунгин»

С целью подтверждения полученных результатов было проведено фотометрическое изучение выделенной группы биологически активных веществ. Для этого в мерную колбу вместимостью 25 мл вносили 0,1 г полисахаридов (точная навеска), доводили водой до метки, 1 мл полученного раствора переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл и также доводили водой до метки. К 1 мл полученного раствора приливали 1 мл раствора резорцина 0,2% и 5 мл конц. серной кислоты, осторожно перемешивали. Оптическую плотность полученного раствора измеряли на СФ-2000 в области 250−550 нм. В качестве раствора сравнения использовали 0,2% раствор резорцина с тем же количеством конц. серной кислоты. На полученной спектральной кривой наблюдали два максимума при длинах волн 4902 нм (рис. 22).

Рисунок 22 — Спектр поглощения продуктов взаимодействия полисахаридов, содержащихся в бефунгине с резорцином в присутствии концентрированной серной кислоты Идентичный спектр имеет раствор глюкозы, поэтому полученные результаты подтвердили наличие глюкозы в составе полисахаридов, содержащихся в лекарственном препарате «Бефунгин» .

Содержание полисахаридов рассчитывали по калибровочному графику, построенному для стандартных растворов глюкозы, так как она является структурным элементом полисахаридов, выделенных из бефунгина, что доказано проведёнными нами хроматографическими.

Для построения калибровочного графика 0,1400 г (точная навеска) глюкозы, высушенной до постоянной массы при 100−105С, растворяли в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводили водой до метки (раствор А).

Переносили 2 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили объём раствора водой до метки (раствор Б).

В 10 пробирок вносили раствор Б и воду в количествах, указанных в табл. 4.

Таблица 4 — Условия приготовления стандартных растворов глюкозы для построения калибровочного графика.

Калибровочный график приведён на рис. 23.

Рисунок 23 — Калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации глюкозы Расчёт содержания полисахаридов, содержащихся в полисахаридном комплексе бефунгина, проводили по калибровочному графику и по формуле:

где С — количество глюкозы, определённое по калибровочному графику г/мл;

а — навеска лекарственного препарата, г;

W, W₁ — объёмы мерных колб, мл;

V₁ — аликвота, мл;

Результаты определения полисахаридов в бефунгине, рассчитанные по калибровочному графику, представлены в табл.9.

Таблица 5 — Результаты фотометрического определения полисахаридов, содержащихся в бефунгине.

Таким образом, содержание полисахаридов составило 2,9%. Относительная погрешность определения составляет 2,3%.