Методы выделения и исследования

Выделение. Сырье обезжиривают петролейным или этиловым эфиром, четыреххлористый углерод для разрушения нерастворимых в воде и водных спиртах комплексов сапонинов. Суммарный экстракт сапонинов конечно получают обработкой сырья полярными растворителями: метанолом, этанолом, водными спиртами. Существуют методы, основанные на способности сапонинов образовывать нерастворимые в воде или водном спирте соли с гидроксидом бария или ацетат свинца, комплексы с холестерином, танинами, белками. Соли затем разлагают серной кислотой, холестериновые комплексы — экстракция холестерина бензолом или эфиром, таниновые — экстракцией водной суспензией окиси цинка, белковые — экстракцией сапонинов полярными органическими растворителями.

Очень распространены хроматографические методы очистки сапонинов с использованием окиси алюминия, силикагеля, активированного угля.

Фракции сапонинов являются смесью близких по строению и свойствам гликозидов, разделение их стало возможным только в последнее время благодаря хроматографическим методам, но всегда является сложной задачей.

Идентификация. Для предварительного определения сапонинов в растительном материале пользуются реакциями, которые основаны на физических свойствах сапонинов (реакции пенообразования и определения химической природы сапонинов); химических свойствах (осадочные и цветные реакции); биологическим свойствам (гемолиз), но они недостаточно специфичны. Вероятные результаты дают хроматографические методы обнаружения и идентификации сапонинов. В последнее время для исследования сапонинов используют физико-химические методы (адсорбционная хроматография, УФ и ИК-спектроскопия).

Количественное определение. Для количественного определения сапонинов используют биологические, весовые и физико-химические методы. Долгое время основными методами выявления сапонинов в растительном сырье были: определение гемолитического индекса и пенного числа.

Гемолитический индекс — это наименьшая концентрация сапонинов, вызывает полный гемолиз эритроцитов в течение 24 часов.

Показателем сапонинности или пенным числом, называют наименьшую концентрацию настоя (приведенную к единице вещества), образует устойчивую пену, которая не исчезает в течение минуты. Пенное число — показатель, типичный только при высоком содержании сапонинов в сырье. Пенность вызывают и сопутствующие вещества. Этот метод используют для предварительного исследования лекарственного растительного сырья.

Содержание сапонинов можно установить и весовым методом. Он основывается на способности сапонинов осаждаться из водных растворов эфиром, крепким спиртом и некоторыми солями (гидроксидом бария). Весовые методы не нашли широкого применения из-за сложности выделения, очистки и доведения индивидуальности.

Общих физико-химических методов определения в сырье сапонинов не существует. То, что достоверно для одних сапонинов, не подходит для других.