Π”ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌΡ‹, курсовыС, Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚Ρ‹, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅...
Брочная ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² ΡƒΡ‡Ρ‘Π±Π΅

ИсслСдованиС Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vitro ΠΈ in vivo

Π”ΠΈΡΡΠ΅Ρ€Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΡΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈΠ£Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΠΌΠΎΠ΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹

К Π½Π°ΡΡ‚ΠΎΡΡ‰Π΅ΠΌΡƒ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½ΠΎ большоС количСство ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ввСдСния Ρ‡ΡƒΠΆΠ΅Ρ€ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš Π² ΡΡƒΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ичСскиС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ (Yang, 1992; Desnick and Schuchman, 1998). Π’ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ врСмя проводятся интСнсивныС исслСдования Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΠΈ систСм доставки Π”ΠΠš Π² ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ…, Π² Ρ‚ΠΎΠΌ числС — Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции. Π Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная доставка гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° сочСтаСт использованиС… Π§ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Ρ‘ >

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

  • Бписок сокращСний
  • ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹
  • 1. Π Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная трансфСкция
    • 1. 1. Π”ΠΠš-пСрСносящиС конструкции для Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции
      • 1. 1. 1. Π”ΠΠš
      • 1. 1. 2. Π›ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Ρ‹
      • 1. 1. 3. ΠŸΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°Ρ‚ΠΈΠΎΠ½Ρ‹
      • 1. 1. 4. ΠšΠΎΠΌΠΏΠ°ΠΊΡ‚ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ Π”ΠΠš ΠΈ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Ρ‹ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΡ„Π΅Ρ†ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… комплСксов
    • 1. 2. Вранспорт Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций
      • 1. 2. 1. Π­Π½Π΄ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ·
      • 1. 2. 2. Π’Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ транспорт конструкций
        • 1. 2. 2. 1. Вранспорт Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρƒ эндосом
        • 1. 2. 2. 2. Вранспорт Π² ΡΠ΄Ρ€ΠΎ
  • 2. ИспользованиС адСновирусов для усилСния эффСктивности трансфСкции
    • 2. 1. Вранспорт адСновирусов
    • 2. 2. ВлияниС адСновирусов Π½Π° Ρ‚ранспорт ΠΌΠ°ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ
    • 2. 3. УсилСниС Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π°
    • 2. 4. Π’ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ адСновирусов Π² ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΡƒ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки Π”ΠΠš
    • 2. 5. ДСйствиС адСновирусов Π½Π° Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ трансфСкции
  • 3. Доставка гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° in vivo
    • 3. 1. Бпособы ввСдСния Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций in vivo
    • 3. 2. НСкоторыС особСнности Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ш vivo
      • 3. 2. 1. Π’Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅
  • Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций ΠΈ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°
    • 3. 2. 2. ΠŸΡƒΡ‚ΠΈ увСличСния ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ экспрСссии трансгСна
      • 3. 2. 2. 1. Частичная гСпатэктомия
      • 3. 2. 2. 2. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ кондСнсация Π”ΠΠš
  • 4. Π–ΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Π΅-Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹

ИсслСдованиС Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vitro ΠΈ in vivo (Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚, курсовая, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ)

14. Анализ активности Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Ρ‹.44.

14.1. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΈ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅Π²Ρ‹Ρ… Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΠ².44.

14.2 ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ содСрТания Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π°Ρ….45.

14.3. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ активности Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Ρ‹.45.

15. ВСстСрн-Π±Π»ΠΎΡ‚ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·.45.

Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹.46.

1. Π‘Π±ΠΎΡ€ΠΊΠ° Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций.46.

1.1. Π‘ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π· ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций.46.

1.2. ΠžΡ†Π΅Π½ΠΊΠ° связывания Π”ΠΠš с ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³Π°Ρ‚ΠΎΠΌ инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½.46.

1.3. Π‘Π±ΠΎΡ€ΠΊΠ° Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций.48.

2. ИсслСдованиС транспорта Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ½ΠΈΠΈ НБ-11 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ видСоинтСнсификационной микроскопии.49.

2.1. Вранспорт ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³Π°Ρ‚Π° инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½.49.

2.2. Вранспорт флуорСсцСнтно-ΠΌΠ΅Ρ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš-пСрСносящСй конструкции Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ½ΠΈΠΈ НБ-11.51.

2.3. ВнутриклСточная локализация Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций.53.

3. ВлияниС адСновирусов Π½Π° ΠΏΡ€ΠΎΠ½ΠΈΡ†Π°Π΅ΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ фосфолипидной ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹.54.

3.1. Π’Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ содСрТимого липосом ΠΏΠΎΠ΄ дСйствиСм адСновирусов.54.

3.2. ΠœΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠ°Ρ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ адСновируса, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π² ΡΠΎΡΡ‚Π°Π² Π”ΠΠš-пСрСносящСй конструкции.56.

4. ВрансфСкция ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΌΡ‹ΡˆΠΈ in vitro.59.

4.1. ВрансфСкция ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΌΡ‹ΡˆΠΈ Π»ΠΈΠ½ΠΈΠΈ НБ-11 конструкциСй инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½-Π”ΠΠš.59.

4.2. ИспользованиС адСновирусов для усилСния Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции.60.

4.2.1. ВрансфСкция Π² ΠΏΡ€ΠΈΡΡƒΡ‚ствии свободных адСновирусов.60.

4.2.2. ВрансфСкция конструкциями (инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½)-Π”ΠΠš-(стрСптавидин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½)-адСновирус.61.

4.2.3. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ содСрТащих вирус конструкций.64.

5. Π Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная трансфСкция эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· in vivo.66.

5.1. ВрансфСкция ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· ΠΌΡ‹ΡˆΠΈ.66.

5.2. ВрансфСкция ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· ΠΎΠ²Π΅Ρ†.69.

6. БСкрСция ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ Π² ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎ послС трансфСкции ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vivo.71.

6.1. Π‘Π΅ΠΊΡ€Π΅Ρ‚ΠΎΡ€Π½Ρ‹Π΅ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Ρ‹.71.

6.2. Анализ активности Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ Π² ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠ΅ трансгСнных ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ….72.

ΠžΠ±ΡΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚ΠΎΠ².75.

Π’Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹.83.

Бписок Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹

84.

Благодарности.100.

Бписок сокращСний.

Ad2 — адСновирус Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° сСротип 2 Ad5 — адСновирус Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° сСротип 5.

BES — К, К-бис (2-оксиэтил)-2-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΡΡ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΎΠ²Π°Ρ кислота CELO — Chicken Embryo Lethal Orphan CMV — цитомСгаловирус.

EDS-76 — Egg Drop Syndrome-76 Π‘ΠΈΠ½Π΄Ρ€ΠΎΠΌ сниТСния яйцСноскости EGF — ΡΠΏΠΈΠ΄Π΅Ρ€ΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ роста HBS — 25 ΠΌΠœ HEPES, рН 7,5, 150 ΠΌΠœ NaCl.

HEPES — К-(2-оксиэтил)ΠΏΠΈΠΏΠ΅Ρ€Π°Π·ΠΈΠ½-Π“Ρ‡Π“'-(2-ΡΡ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΎΠ²Π°Ρ кислота) LA — Π°-Π»Π°ΠΊΡ‚Π°Π»ΡŒΠ±ΡƒΠΌΠΈΠ½ Luc — Π»ΡŽΡ†ΠΈΡ„Π΅Ρ€Π°Π·Π°.

NHS-AC-Π±ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½ — N-оксисукцинимидный эфир Π±ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈΠ΄ΠΎΠΊΠ°ΠΏΡ€ΠΎΠ°Ρ‚Π° RSY — вирус саркомы Рауса SDS — Π΄ΠΎΠ΄Π΅Ρ†ΠΈΠ»ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„Π°Ρ‚ натрия.

SpBLG — ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄ ΠΎΠ²Π΅Ρ‡ΡŒΠ΅Π³ΠΎ Π -Π»Π°ΠΊΡ‚ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½Π°.

SPDP — N-сукцинимидил 3-(2-ΠΏΠΈΡ€ΠΈΠ΄ΠΈΠ»Π΄ΠΈΡ‚ΠΈΠΎ)ΠΏΡ€ΠΎΠΏΠΈΠΎΠ½Π°Ρ‚.

ББА — Π±Ρ‹Ρ‡ΠΈΠΉ сывороточный Π°Π»ΡŒΠ±ΡƒΠΌΠΈΠ½ Π².Ρ‡. — Π²ΠΈΡ€ΡƒΡΠ½Ρ‹Π΅ частицы.

Π”Π’Π’ — Π΄ΠΈΡ‚ΠΈΠΎΡ‚Ρ€Π΅ΠΈΡ‚ΠΎΠ» ΠΎ.Π΅. — ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ свСтовыС Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Ρ‹ Ρ‚.ΠΏ.Π½. — Ρ‚ысяча ΠΏΠ°Ρ€ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ².

ЀИВЦ — флуорСсцСинизотиоцианат.

ЭГВА — этилСнгликоля, бис (2-аминоэтиловый эф ΠΈΡ€)-Π«, N, N ', N ' -Ρ‚Π΅Ρ‚Ρ€Π°Π°Ρ†Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ ЭДВА — этилСндиаминтСтраацСтат.

К Π½Π°ΡΡ‚ΠΎΡΡ‰Π΅ΠΌΡƒ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ ΠΈ ΠΎΡ…Π°Ρ€Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ сотни Π³Π΅Π½ΠΎΠ², ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ большоС Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ для ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡ†ΠΈΠ½Ρ‹ ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… потрСбностСй Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² Π΄ΠΎΡΡ‚Π°Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… количСствах являСтся ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ· Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ являСтся дорогостоящСй ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€ΠΎΠΉ, сопряТСнной с Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ ΠΈΠ½Ρ„Π΅ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π°Π³Π΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ. Π Π°Π·Π²ΠΈΡ‚ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠ²Π΅Π»ΠΎ ΠΊ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡŽ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… систСм экспрСссии для получСния Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². Однако, Π² Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… систСмах Π½Π΅ Π²ΡΠ΅Π³Π΄Π° удаСтся ΠΎΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚ΡŒ посттрансляционныС ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ эукариотичСских Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ фосфорилированиС, Π³Π»ΠΈΠΊΠΎΠ·ΠΈΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅. Π‘ ΡΡ‚ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅ Ρ†Π΅Π»ΡŒΡŽ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ эукариотичСскиС систСмы экспрСссии, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€ — ΠΌΠ°ΡΡˆΡ‚Π°Π±Π½ΠΎΠ΅ ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ…. НСдостатком эукариотичСских систСм экспрСссии являСтся ΠΈΡ… Π½ΠΈΠ·ΠΊΠ°Ρ Ρ€Π΅Π½Ρ‚Π°Π±Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ, Ρ‚.ΠΊ. для ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ большиС Π·Π°Ρ‚Ρ€Π°Ρ‚Ρ‹, Π° Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ ΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚рация Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π½Π΅ Π²Π΅Π»ΠΈΠΊΠΈ. Π”Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠ΅ Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ основано Π½Π° ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠΈ трансгСнных ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ…-Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ², способных ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° ΠΈ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠΏΠΎΡ€Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈΡ… Π²ΠΎ Π²Π½Π΅ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ Тидкости ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°.

Π’ ΡΡ‚ΠΎΠΉ связи молочная ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Π° ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… прСдставляСтся СстСствСнным Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ для ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈ ΡΠ΅ΠΊΡ€Π΅Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈΡ… Ρ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ. ΠœΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Π°Ρ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Π° ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ³Ρ€ΠΎΠΌΠ½Ρ‹ΠΌ синтСтичСским ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π»ΠΎΠΌ, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ исходно ΠΏΡ€Π΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½Π° для синтСза ΠΈ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΡ большого количСства Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. ΠšΠΎΠ½Ρ†Π΅ΠΏΡ†ΠΈΡ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΊΠ°ΠΊ Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π° ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ряд прСимущСств с Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ зрСния Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ: ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², большой Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄, отсутствиС токсичных примСсСй.

Π’ ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ· ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΉ ввСдСния трансгСна для создания ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ…-Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² прСдлагаСтся использованиС ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² трансфСкции соматичСских ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ. ВрансфСкция ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΎΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²Π»ΡΡ‚ΡŒΡΡ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ нСпосрСдствСнного ввСдСния гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊ. ΠœΠ΅ΡΡ‚Π½ΠΎΠ΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций прСдставляСтся нСслоТной ΠΈ ΠΌΠ°Π»ΠΎΡ‚Ρ€Π°Π²ΠΌΠ°Ρ‚ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€ΠΎΠΉ, ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, ΠΎΠ½ΠΎ позволяСт ΡΠΎΠ·Π΄Π°Ρ‚ΡŒ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ высокиС ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΡ„Π΅Ρ†ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… конструкций ΠΈ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠΎΡ‚Π΅Ρ€ΠΈ, Π½Π΅ΠΈΠ·Π±Π΅ΠΆΠ½Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΈ систСмном Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ.

К Π½Π°ΡΡ‚ΠΎΡΡ‰Π΅ΠΌΡƒ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½ΠΎ большоС количСство ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ввСдСния Ρ‡ΡƒΠΆΠ΅Ρ€ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš Π² ΡΡƒΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ичСскиС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ (Yang, 1992; Desnick and Schuchman, 1998). Π’ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ врСмя проводятся интСнсивныС исслСдования Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΠΈ систСм доставки Π”ΠΠš Π² ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ…, Π² Ρ‚ΠΎΠΌ числС — Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции. Π Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная доставка гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° сочСтаСт использованиС СстСствСнного для ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованного транспорта ΠΈ ΡΠΈΠ½Ρ‚СтичСских Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… конструкций, Ρ‡Ρ‚ΠΎ, Π² ΠΏΡ€ΠΈΠ½Ρ†ΠΈΠΏΠ΅, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ΡŒ спСцифичСски Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΡ„Π΅Ρ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ любой Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Ρ‚ΠΈΠΏ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ (Michael and Curiel, 1994; Guy et al. 1995). Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π΄Π°Π΅Ρ‚ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΡ„Π΅Ρ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄ΠΈΡ„Ρ„Π΅Ρ€Π΅Π½Ρ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΈ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΡΡ‰ΠΈΠ΅ΡΡ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ. Он ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅Ρ‚ся для трансфСкции in vitro ΠΈ in vivo. Π”Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ позволяСт Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ конструкций, Π² Ρ‚ΠΎΠΌ числС доставляСмый гСнСтичСский ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π» ΠΈ Π°Π΄Ρ€Π΅ΡΠ½Ρ‹ΠΉ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π½Π΅ Π½Π°ΠΊΠ»Π°Π΄Ρ‹Π²Π°Π΅Ρ‚ строгих ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ ΠΏΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΈ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π°ΠΌ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Π”ΠΠš. ΠšΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½Ρ‹ (ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹) ΠΈΠ»ΠΈ синтСзированы (Π±ΠΈΡ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³Π°Ρ‚Ρ‹) Π² Π΄ΠΎΡΡ‚Π°Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎ большом количСствС. Для внСдрСния ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° Π² Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡŽ прСдставляСтся Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΌ дальнСйшСС исслСдованиС закономСрностСй ΠΈ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ² Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΈ Π΅Π΅ ΠΎΠΏΡ‚имизация, особСнно для примСнСния in vivo.

Под руководством A.C. Π‘ΠΎΠ±ΠΎΠ»Π΅Π²Π° Π±Ρ‹Π»Π° Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π° систСма Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° с ΠΈΠ½ΡΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠΌ Π² ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° (Π‘ΠΎΠ±ΠΎΠ»Π΅Π², 1988). Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ ΡƒΡΠΏΠ΅ΡˆΠ½ΠΎ использовался ΠΏΡ€ΠΈ трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π³Π΅ΠΏΠ°Ρ‚ΠΎΠΌΡ‹ Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅ (Π ΠΎΠ·Π΅Π½ΠΊΡ€Π°Π½Ρ† ΠΈ Π΄Ρ€. 1990; Rosenkranz et al. 1992). Π˜ΡΡ…ΠΎΠ΄Ρ ΠΈΠ· Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ инсулиновыми Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ (Burnol et al. 1990), инсулин Π±Ρ‹Π» Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π½ Π² ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° для Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‰Π΅ΠΉΡΡ Π½Π° ΡΠ΅Π³ΠΎΠ΄Π½Ρ совокупности Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Ρ‹Π»Π° ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° идСя создания ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ-Π±ΠΈΠΎΡ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π° ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹. Π’ Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΡ‚ΠΈΠ΅ этой ΠΈΠ΄Π΅ΠΈ ΠΈ Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠ»Π°ΡΡŒ данная Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°. 7.

ЦСль исслСдования:

ЦСлью настоящСй Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ возмоТности использования Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· для получСния Ρ†Π΅Π»Π΅Π²Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² с ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ ΡΠ΅Π»ΡŒΡΠΊΠΎΡ…ΠΎΠ·ΡΠΉΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ….

Для Ρ€Π΅Π°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ†Π΅Π»ΠΈ Π±Ρ‹Π»ΠΈ поставлСны ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ практичСскиС Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ΠΈ:

1. Π˜ΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованный эндоцитоз ΠΈ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ транспорт ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³Π°Ρ‚Π° инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½ ΠΈ Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций, содСрТащих Π΄Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³Π°Ρ‚, Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅.

2. Π˜ΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ состав ΠΈ ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡ‚Π²Π° Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций для получСния наибольшСго уровня трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅.

3. ΠžΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-ΠΎΠΏΠΎΡΡ€Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ доставку Ρ€Π΅ΠΏΠΎΡ€Ρ‚Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½Π° Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vivo.

4. ΠžΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки Π³Π΅Π½Π°, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ сСкрСтируСмый с ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vivo.

ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹.

ЧСловСчСскоС Π·Π½Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠΌΠΎ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ стороны, ΠΈ ΠΈΠ· Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ достойно знания, Π½ΠΈΠΊΡ‚ΠΎ Π² ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ΠΎΡ‡ΠΊΡƒ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ Π΄Π°ΠΆΠ΅ ΠΈ Ρ‚ысячной Π΄ΠΎΠ»ΠΈ.

Артур ШопСнгауэр «ΠΡ„ΠΎΡ€ΠΈΠ·ΠΌΡ‹ ΠΈ ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡ‹ «.

Π’ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ дСсятилСтия ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΠ»ΠΈ ΡˆΠΈΡ€ΠΎΠΊΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΡ‚ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ создания Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π”ΠΠš, доставки Π”ΠΠš Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… in vitro ΠΈ in vivo, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ исслСдования экспрСссии Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π³Π΅Π½ΠΎΠ². Π­Ρ‚ΠΈ тСхнологичСскиС достиТСния ΠΏΡ€ΠΈΠ²Π΅Π»ΠΈ ΠΊ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ практичСского примСнСния Π² Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ — для производства Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² клиничСской ваТности, Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ΠΌΡ‹Ρ… ΠΈΠ· ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ… источников, ΠΈ Π² ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡ†ΠΈΠ½Π΅ — для лСчСния гСнСтичСских Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ ΠΈΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ Π½ΠΎΡ€ΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½Π° Π² ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ больного ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° (гСнная тСрапия).

НСсмотря Π½Π° Ρ‚ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΊ Π½Π°ΡΡ‚оящСму Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½ΠΎ большоС количСство ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ввСдСния Ρ‡ΡƒΠΆΠ΅Ρ€ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš, ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΠ° эффСктивного транспорта Π”ΠΠš in vivo остаСтся Π½Π΅Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ (Yang, 1992; Desnick and Schuchman, 1998). БущСствуСт ряд Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΉ, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈ ΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ примСнСния in vivo Ρ‚Π΅Ρ… ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ½Ρ‹Ρ… систСм доставки: 1) Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ — поступлСниС Π”ΠΠš Π² ΠΈΠ·Π±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Ρ‚ΠΈΠΏ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ/Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ, 2) ΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ, 3) отсутствиС токсичности ΠΈ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ для ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°, 4) ΡƒΡΡ‚ΠΎΠΉΡ‡ΠΈΠ²ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ Ρ…Ρ€Π°Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΈ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ Π² ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ, 5) Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Π°Ρ дСшСвизна получСния пСрСносчиков Π”ΠΠš, 6) отсутствиС ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ пСрСносимой Π”ΠΠš. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции Π²ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΌ соотвСтствуСт этим трСбованиям (Michael and Curiel, 1994; Guy et al. 1995). Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ сочСтаСт использованиС СстСствСнного для ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованного транспорта ΠΈ ΡΠΈΠ½Ρ‚СтичСских Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… конструкций, Ρ‡Ρ‚ΠΎ, Π² ΠΏΡ€ΠΈΠ½Ρ†ΠΈΠΏΠ΅, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ΡŒ спСцифичСски Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΡ„Π΅Ρ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ любой Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Ρ‚ΠΈΠΏ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ. Он ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅Ρ‚ся для трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ… in vitro ΠΈ in vivo. Π’ Π½Π°ΡΡ‚оящСС врСмя Π²ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ… Π½Π°ΡƒΡ‡Π½Ρ‹Ρ… лабораториях ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚ интСнсивная Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π° ΠΏΠΎ ΠΏΡ€Π΅Π²Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΡŽ ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… возмоТностСй Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° Π² Ρ€Π΅Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ высокоэффСктивный способ Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ доставки Π³Π΅Π½ΠΎΠ² in vivo.

Π’Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹.

1. Показано, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π”ΠΠš-пСрСносящиС конструкции, содСрТащиС инсулин-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΈΠ½, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ транспорт Π”ΠΠš Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΌΡ‹ΡˆΠΈ Π»ΠΈΠ½ΠΈΠΈ НБ-11 Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· инсулиновыС Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹. УспСшно ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Π° Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная трансфСкция ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅.

2. Показано, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ адСновирусов Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° ΠΈ ΠΏΡ‚ΠΈΡ† Π² ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ мСмбранолитичСских ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π² ΡΠΎΡΡ‚Π°Π² Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций ΠΈ Π΄Π°Π»ΡŒΠ½Π΅ΠΉΡˆΠ°Ρ оптимизация Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… конструкций приводят ΠΊ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΡŽ эффСктивности трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π»ΠΈΠ½ΠΈΠΈ НБ-11 Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Ρ‡Π΅ΠΌ Π½Π° 3 порядка. Максимальная экспрСссия Ρ€Π΅ΠΏΠΎΡ€Ρ‚Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½Π° Π½Π°Π±Π»ΡŽΠ΄Π°Π΅Ρ‚ΡΡ Π² Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π΅ трансфСкции конструкциями с ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π»ΠΈΠ·ΠΈΠ½/Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ ΠΎΡ‚ 2 Π΄ΠΎ 4, ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π°/вирус ΠΎΡ‚ 4 Π΄ΠΎ 10.

3. Π’ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ осущСствлСна Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованная трансфСкция эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ in vivo ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ мСстного ввСдСния Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΎΠ± ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ях Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной доставки Π”ΠΠš in vitro ΠΈ in vivo.

4. ИсслСдована Π΄ΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈΠΊΠ° экспрСссии Ρ€Π΅ΠΏΠΎΡ€Ρ‚Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½Π° Π² Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π΅ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ эпитСлия ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· ΠΌΡ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΈ ΠΎΠ²Π΅Ρ†.

5. Π’ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ продСмонстрирована ΠΏΡ€ΠΈΠ½Ρ†ΠΈΠΏΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ получСния сСкрСтируСмых Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² с ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ ΡΠ΅Π»ΡŒΡΠΊΠΎΡ…ΠΎΠ·ΡΠΉΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ… Π² Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π΅ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованной трансфСкции ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΆΠ΅Π»Π΅Π· ΠΏΡ€ΠΈ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ Π”ΠΠš-пСрСносящих конструкций Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊ.

ΠŸΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ вСсь тСкст

Бписок Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹

  1. А.А., Π―Ρ‡ΠΌΠ΅Π½Π΅Π² Π‘. Π’., Π‘ΠΎΠ±ΠΎΠ»Π΅Π² А. Π‘. (1990) ИспользованиС искусствСнных конструкций для сСлСктивного пСрСноса гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€-опосрСдованного эндоцитоза, Π”ΠΎΠΊΠ». А.Н. Π‘Π‘Π‘Π  312: 493−494.
  2. А.Π‘. (1988) Π”ΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈΠΊΠ° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ². ΠœΠ΅ΠΆΠ΄ΡƒΠ½Π°Ρ€ΠΎΠ΄Π½Π°Ρ конфСрСнция ΠΏΠΎ ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡ†ΠΈΠ½ΡΠΊΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΡ…ΠΈΠΌΠΈΠΈ ΠœΠ— Π‘Π‘Π‘Π , 17−21 ΠΎΠΊΡ‚ября Москва.
  3. А.Π‘., Π ΠΎΠ·Π΅Π½ΠΊΡ€Π°Π½Ρ† А. А., Иванова М. М., Π‘ΠΌΠΈΡ€Π½ΠΎΠ²Π° О. А., Никитин Π’. А., Народицкий Π‘. Π‘., Эрнст J1.K. (1996) Бпособ получСния трансгСнных ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ…. ΠŸΠ°Ρ‚Π΅Π½Ρ‚ Π Π€ № 2 108 714.
  4. А. Π‘., Π ΠΎΠ·Π΅Π½ΠΊΡ€Π°Π½Ρ† А. А., Никитин Π’. А. (1994) Бпособ гСнСтичСской трансформации ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ ΡƒΡΡ‚ройство для ввСдСния гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π° Π² ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ‹ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ. ΠŸΠ°Ρ‚Π΅Π½Ρ‚ Π Π€ № 2 025 487.
  5. Π€Ρ€ΠΈΡ† Π₯анс-Π˜ΠΎΠ°Ρ…ΠΈΠΌ. (1988) Π“Π». 8. НаправляСмый ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠ½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄Π°ΠΌΠΈ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π· Π² Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π½ΠΈΡ‚Π΅Π²ΠΈΠ΄Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Π°Π³Π°Ρ…. Π‘Ρ‚Ρ€. 191−205 Π² ΠΊΠ½ΠΈΠ³Π΅ ΠšΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π”ΠΠš. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹: ΠŸΠ΅Ρ€. Ρ Π°Π½Π³Π»./ Под Ρ€Π΅Π΄. Π”. Π“Π»ΠΎΠ²Π΅Ρ€Π°. М.: ΠœΠΈΡ€,.-538 Π΅., ΠΈΠ».
  6. Airth, R.L., Rhodes, W.C. and McElroy, W.D. (1958) The function of coenzyme A in luminescence. Biochim. Biophys. Acta, 27: 519−532.
  7. Akhlynina, T.V., Jans, D.A., Rosenkranz, A.A., Statsyuk, N.V., Balashova, I.Y., Toth, G., Pavo, I., Rubin, A.B. and Sobolev, A.S. (1997) Nuclear targeting of chlorin e6 enhances its photosensitizing activity, J. Biol. Chem. 272: 20 328−20 331.
  8. Akhlynina, T.V., Rosenkranz, A.A., Jans, D.A., Gulak, P.V., Serebryakova, N.V. and Sobolev, A.S. (1993) The use of internalizable derivatives of chlorin e6 for increasing its photosensitizing activity, Photochem. Photobiol. 58: 45−48.
  9. Akhlynina, T.V., Rosenkranz, A.A., Jans, D.A. and Sobolev, A.S. (1995) Insulinmediated intracellular targeting enhances the photodynamic activity of chlorin e6, Cancer Res. 55: 1014−1019.
  10. Baker, A. and Cotten, M. (1997) Delivery of bacterial artificial chromosomes into mammalian cells with psoralen-inactivated adenovirus carrier, Nucleic Acids Res. 25: 19 501 956.
  11. Ball, R.K., Friis, R.R., Schoenenberger, C.A., Doppler, W. and Groner, B. (1988) Prolactin regulation of beta-casein gene expression and of a cytosolic 120-kd protein in a cloned mouse mammary epithelial cell line, EMBO J. 7: 2089−2095.
  12. Batra, R.K., Wang-Johanning, F., Wagner, E., Garver, R.I., Jr. and Curiel, D.T. (1994) Receptor-mediated gene delivery employing lectin-binding specificity, Gene Ther. 1: 255−260.
  13. Blumenthal, R., Seth, P., Willingham, M.C. and Pastan, I. (1986) Ph-dependent lysis of liposomes by adenovirus, Biochemistry, 25: 2231−2237.
  14. Boletta, A., Benigni, A., Lutz, J., Remuzzi, G., Soria, M.R. and Monaco, L. (1997) Nonviral gene delivery to the rat kidney with polyethylenimine, Hum. Gene Ther. 8: 12 431 251.
  15. Bommineni, V.R., Chowdhury, N.R., Wu, G.Y., Wu, C.H., Franki, N., Hays, R.M. and Chowdhury, J.R. (1994) Depolymerization of hepatocellular microtubules after partial hepatectomy, J. Biol. Chem. 269: 25 200−25 205.
  16. , P. (1996) Recombinant proteins for therapy, Trends Pharmacol. Sci. 17: 450 456.
  17. Bunnell, B.A., Askari, F.K. and Wilson, J.M. (1992) Targeted delivery of antisense oligonucleotides by molecular conjugates, Somat. Cell Mol. Genet. 18: 559−569.
  18. Burnol, A.F., Loizeau, M. and Girard, J. (1990) Insulin receptor activity and insulin sensitivity in mammary gland of lactating rats, Am. J. Physiol. 259: E828−34.
  19. Campbell, P.G., Frey, D.M. and Baumrucker, C.R. (1987) Changes in bovine mammary insulin binding during pregnancy and lactation, Comp. Biochem. Physiol. BJ. 87: 649−653.
  20. , M.R. (1980) High efficiency transformation by direct microinjection of dna into cultured mammalian cells, Cell, 22: 479−488.
  21. Carstea, E.D., Miller, S.P., Christakis, H. and ONeill, R.R. (1993) Analogues of butyric acid that increase the expression of transfected DNAs, Biochem. Biophys. Res. Commun. 192: 649−656.
  22. Chardonnet, Y. and Dales, S. (1970) Early events in the interaction of adenoviruses with HeLa cells. I. Penetration of type 5 and intracellular release of the DNA genome. Virology, 40: 462−477.
  23. Charnock Jones, D.S., Sharkey, A.M., Jaggers, D.C., Yoo, H.J., Heap, R.B. and Smith, S.K. (1997) In-vivo gene transfer to the uterine endometrium, Hum. Reprod. 12: 1720.
  24. Chen, J., Gamou, S., Takayanagi, A. and Shimizu, N. (1994) A novel gene delivery system using egf receptor-mediated endocytosis, FEBSLett. 338: 167−169.
  25. Cheng, D.Y., Kolls, J.K., Lei, D. and Noel, R.A. (1997) In vivo and in vitro gene transfer and expression in rat intestinal epithelial cells by El-deleted adenoviral vector, Hum. Gene Ther. 8: 755−764.
  26. Cheng, S., Merlino, G.T. and Pastan, I.H. (1983) A versatile method for the coupling of protein to dna: synthesis of alpha 2-macroglobulin-dna conjugates, Nucleic Acids Res. 11: 659−669.
  27. Chin, D.J., Green, G.A., Zon, G., Szoka, F.C., Jr. and Straubinger, R.M. (1990) Rapid nuclear accumulation of injected oligodeoxyribonucleotides, New Biol. 2: 1091−1100.
  28. Chiou, H.C., Tangco, M.Y., Levine, S.M., Robertson, D., Kormis, K., Wu, C.H. and Wu, G.Y. (1994) Enhanced resistance to nuclease degradation of nucleic acids complexed to asialoglycoprotein-polylysine carriers, Nucleic Acids Res. 22: 5439−5446.
  29. Chu, B.C., Wahl, G.M. and Orgel, L.E. (1983) Derivatization of unprotected polynucleotides, Nucleic Acids Res. 11: 6513−6529.
  30. Cotten, M., Baker, A., Saltik, M., Wagner, E. and Buschle, M. (1994) Lipopolysaccharide is a frequent contaminant of plasmid dna preparations and can be toxic to primary human cells in the presence of adenovirus, Gene Ther. 1: 239−246.
  31. Cotten, M., Wagner, E., Zatloukal, K. and Birnstiel, M.L. (1993) Chicken adenovirus (celo virus) particles augment receptor-mediated dna delivery to mammalian cells and yield exceptional levels of stable transformants, Virol. 67: 3777−3785.
  32. Cristiano, R.J., Smith, L.C. and Woo, S.L. (1993) Hepatic gene therapy: adenovirus enhancement of receptor-mediated gene delivery and expression in primary hepatocytes, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 90: 2122−2126.
  33. Croughan, M.S., Chiou, T.W. and Wang, D.I. (1995) Immobilized animal cell bioreactors, Bioprocess. Technol. 21: 377−411.
  34. , D.T. (1994) High-efficiency gene transfer employing adenovirus-polylysine-dna complexes, Nat. Immun. 13: 141−164.
  35. Curiel, D.T., Agarwal, S., Wagner, E. and Cotten, M. (1991) Adenovirus enhancement of transferrin-polylysine-mediated gene delivery, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 88: 8850−8854.
  36. Curiel, D.T., Wagner, E., Cotten, M., Birnstiel, M.L., Agarwal, S., Li, C.M., Loechel, S. and Hu, P.C. (1992) High-efficiency gene transfer mediated by adenovirus coupled to dna-polylysine complexes, Hum. Gene Ther. 3: 147−154.
  37. Defer, C., Belin, M.T., Caillet-Boudin, M.L. and Boulanger, P. (1990) Human adenovirus-host cell interactions: comparative study with members of subgroups b and c, J. Virol. (United. States),. Aug. 64: 3661−3673.
  38. Desnick, R.J. and Schuchman, E.H. (1998) Gene therapy for genetic diseases, Acta Paediatr. Jpn. 40: 191−203.
  39. Dunlap, D.D., Maggi, A., Soria, M.R. and Monaco, L. (1997) Nanoscopic structure of DNA condensed for gene delivery, Nucleic Acids Res. 25: 3095−3101.
  40. Ebbinghaus, S.W., Vigneswaran, N., Miller, C.R., Chee Awai, R.A., Mayfield, C.A., Curiel, D.T. and Miller, D.M. (1996) Efficient delivery of triplex forming oligonucleotides to tumor cells by adenovirus-polylysine complexes, Gene Ther. 3: 287−297.
  41. Edwards, R.J., Carpenter, D.S. and Minchin, R.F. (1996) Uptake and intracellular trafficking of asialoglycoprotein-polylysine-DNA complexes in isolated rat hepatocytes, Gene Ther. 3: 937−940.
  42. Egilmez, N.K., Iwanuma, Y. and Bankert, R.B. (1996) Evaluation and optimization of different cationic liposome formulations for in vivo gene transfer, Biochem. Biophys. Res. Commun. 221: 169−173.
  43. Erbacher, P., Bousser, M.T., Raimond, J., Monsigny, M., Midoux, P. and Roche, A.C. (1996) Gene transfer by DNA/glycosylated polylysine complexes into human blood monocyte-derived macrophages, Hum. Gene Ther. 7: 721−729.
  44. Erbacher, P., Roche, A.C., Monsigny, M. and Midoux, P. (1996) Putative role of chloroquine in gene transfer into a human hepatoma cell line by dna/lactosylated polylysine complexes, Exp. Cell Res. 225: 186−194.
  45. Erbacher, P., Roche, A.C., Monsigny, M. and Midoux, P. (1997) The reduction of the positive charges of polylysine by partial gluconoylation increases the transfection efficiency of polylysine/DNA complexes, Biochim. Biophys. Acta, 1324: 27−36.
  46. Ferkol, T., Kaetzel, C.S. and Davis, P.B. (1993) Gene transfer into respiratory epithelial cells by targeting the polymeric immunoglobulin receptor, J. Clin. Invest. 92: 23 942 400.
  47. Ferkol, T., Mularo, F., Hilliard, J., Lodish, S., Perales, J.C., Ziady, A. and Konstan, M. (1998) Transfer of the human Alphal-antitrypsin gene into pulmonary macrophages in vivo, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 18: 591−601.
  48. Ferkol, T., Perales, J.C., Eckman, E., Kaetzel, C.S., Hanson, R.W. and Davis, P.B. (1995) Gene transfer into the airway epithelium of animals by targeting the polymeric immunoglobulin receptor, J. Clin. Invest. 95: 493−502.
  49. Ferkol, T., Perales, J.C., Mularo, F. and Hanson, R.W. (1996) Receptor-mediated gene transfer into macrophages, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 93: 101−105.
  50. Ferrari, S., Moro, E., Pettenazzo, A., Behr, J.P., Zacchello, F. and Scarpa, M. (1997) ExGen 500 is an efficient vector for gene delivery to lung epithelial cells in vitro and in vivo, GeneTher. 4: 1100−1106.
  51. Fisher, K.J. and Wilson, J.M. (1994) Biochemical and functional analysis of an adenovirus-based ligand complex for gene transfer, Biochem. J. 299: 49−58.
  52. Fitzgerald, D.J., Padmanabhan, R., Pastan, I. and Willingham, M.C. (1983) Adenovirus-induced release of epidermal growth factor and pseudomonas toxin into the cytosol ofkb cells during receptor-mediated endocytosis, Cell, 32: 607−617.
  53. Fitzgerald, D.J., Trowbridge, I.S., Pastan, I. and Willingham, M.C. (1983) Enhancement of toxicity of antitransferrin receptor antibody-pseudomonas exotoxin conjugates by adenovirus, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 80: 4134−4138.
  54. Forsayeth, J.R. and Garcia, P.D. (1994) Adenovirus-mediated transfection of cultured cells, Biotechniques, 17: 354−6, 357−8.
  55. Fortunati, E., Bout, A., Zanta, M.A., Valerio, D. and Scarpa, M. (1996) In vitro and in vivo gene transfer to pulmonary cells mediated by cationic liposomes, Biochim. Biophys. Acta, 1306: 55−62.
  56. Gao, L., Wagner, E., Cotten, M., Agarwal, S., Harris, C., Romer, M., Miller, L., Hu, P.C. and Curiel, D. (1993) Direct in vivo gene transfer to airway epithelium employing adenovirus-polylysine-dna complexes, Hum. Gene Ther. 4: 17−24.
  57. Gao, X. and Huang, L. (1996) Potentiation of cationic liposome-mediated gene delivery by polycations, Biochemistry, 35: 1027−1036.
  58. Ginobbi, P., Geiser, T.A., Ombres, D. and Citro, G. (1997) Folic acid-polylysine carrier improves efficacy of c-myc antisense oligodeoxynucleotides on human melanoma (Ml4) cells, Anticancer Res. 17: 29−35.
  59. , L.R. (1992) Virus proteins that counteract host immune defenses, Cell (United. States),. Oct. 2. 71: 5−7.
  60. Goula, D., Benoist, C., Mantero, S., Merlo, G., Levi, G. and Demeneix, B.A. (1998) Polyethylenimine-based intravenous delivery of transgenes to mouse lung. Gene Ther. 5: 1291−1295.
  61. Goula, D., Remy, J.S., Erbacher, P., Wasowicz, M., Levi, G., Abdallah, B. and Demeneix, B.A. (1998) Size, diffusibility and transfection performance of linear PEI/DNA complexes in the mouse central nervous system, Gene Ther. 5: 712−717.
  62. Gould, S.G., Keller, G.A. and Subramani, S. (1987) Identification of a peroxisomal targeting signal at the carboxy terminus of firefly luciferase, J. Cell Biol. 105: 2923−2931.
  63. Greber, U.F., Webster, P., Weber, J. and Helenius, A. (1996) The role of the adenovirus protease on virus entry into cells, EMBO J. 15: 1766−1777.
  64. Greber, U.F., Willetts, M., Webster, P. and Helenius, A. (1993) Stepwise dismantling of adenovirus 2 during entry into cells, Cell, 75: 477−486.
  65. Guy, J., Drabek, D. and Antoniou, M. (1995) Delivery of dna into mammalian cells by receptor-mediated endocytosis and gene therapy, Mol. Biotechnol. 3: 237−248.
  66. Hansma, H.G., Golan, R., Hsieh, W" Lollo, C.P., Mullen Ley, P. and Kwoh, D. (1998) DNA condensation for gene therapy as monitored by atomic force microscopy, Nucleic Acids Res. 26: 2481−2487.
  67. Harris, C.E., Agarwal, S., Hu, P., Wagner, E. and Curiel, D.T. (1993) Receptor-mediated gene transfer to airway epithelial cells in primary culture, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 9: 441−447.
  68. Honda, M., Hu, P.C., Huang, C.H., Matsui, H. and Lemon, S.M. (1996) A replication-deficient adenovirus enhances liposome-mediated nucleic acid transfer into a stable cell line expressing T7 RNA polymerase, J. Virol. Methods, 58: 41−51.
  69. Houdebine, L.M., Djiane, J., Dusanter-Fourt, I., Martel, P., Kelly, P.A., Devinoy, E. and Servely, J.L. (1985) Hormonal action controlling mammary activity, J. Dairy. Sci. 68: 489−500.
  70. Huckett, B., Ariatti, M. and Hawtrey, A.O. (1990) Evidence for targeted gene transfer by receptor-mediated endocytosis. stable expression following insulin-directed entry of neo into hepg2 cells, Biochem. Pharmacol. 40: 253−263.
  71. Huckett, B., Gordhan, H., Hawtrey, R., Moodley, N., Ariatti, M. and Hawtrey, A. (1986) Binding of dna to albumin and transferrin modified by treatment with water-soluble carbodiimides, Biochem. Pharmacol. 35: 1249−1257.
  72. Jones, N. and Shenk, T. (1979) Isolation of adenovirus type 5 host range deletion mutants defective for transformation of rat embryo cells, Cell, 17: 683−689.
  73. Katayose, S. and Kataoka, K. (1998) Remarkable increase in nuclease resistance of plasmid DNA through supramolecular assembly with poly (ethylene glycol) -poly (L-lysine) block copolymer, J. Pharm. Sci. 87: 160−163.
  74. Keller, G.A., Gould, S., Deluca, M. and Subramani, S. (1987) Firefly luciferase is targeted to peroxisomes in mammalian cells, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 84: 3264−3268.
  75. Kerr, D.E., Liang, F., Bondioli, K.R., Zhao, H., Kreibich, G., Wall, R.J. and Sun, T.T. (1998) The bladder as a bioreactor: urothelium production and secretion of growth hormone into urine see comments., Nat. Biotechnol. 16: 75−79.
  76. Kircheis, R., Kichler, A., Wallner, G., Kursa, M., Ogris, M., Felzmann, T., Buchberger, M. and Wagner, E. (1997) Coupling of cell-binding ligands to polyethylenimine for targeted gene delivery, Gene Ther. 4: 409−418.
  77. Kircheis, R., Schuller, S., Brunner, S., Ogris, M., Heider, K.-H., Zauner, W. and Wagner, E. (1999) Polycation-based DNA complexes for tumor-targeted gene delivery in vivo. The Journal of Gene Medicine, 1: 111−120.
  78. Klemm, A.R., Young, D. and Lloyd, J.B. (1998) Effects of polyethyleneimine on endocytosis and lysosome stability, Biochem. Pharmacol. 56: 41−46.
  79. , K. (1995) Recombinant proteins for medical use: the attractions and challenges, Curr. Opin. Biotechnol. 6: 681−687.
  80. Laver, W.G., Younghusband, H.B. and Wrigley, N.G. (1971) Virology, 45: 598−614.
  81. Lee, R.J. and Huang, L. (1996) Folate-targeted, anionic liposome-entrapped polylysine-condensed dna for tumor cell-specific gene transfer, J. Biol. Chem. 271: 84 818 487.
  82. Li, P., Bellett, A.J. and Parish, C.R. (1984) The structural proteins of chick embryo lethal orphan virus (fowl adenovirus type 1), J. Gen. Virol. 65: 1803−1815.
  83. Limonta, J.M., Castro, F.O., Martinez, R., Puentes, P., Ramos, B., Aguilar, A., Lleonart, R.L. and de la Fuente, J. (1995) Transgenic rabbits as bioreactors for the production of human growth hormone, J. Biotechnol. 40: 49−58.
  84. Lozier, J.N., Thompson, A.R., Hu, P.C., Read, M., Brinkhous, K.M., High, K.A. and Curiel, D.T. (1994) Efficient transfection of primary cells in a canine hemophilia b model using adenovirus-polylysine-dna complexes, Hum. Gene Ther. 5: 313−322.
  85. Mahato, R.I., Takakura, Y. and Hashida, M. (1997) Nonviral vectors for in vivo gene delivery: physicochemical and pharmacokinetic considerations, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier. Syst. 14: 133−172.
  86. Martinez-Fong, D., Mullersman, J.E., Purchio, A.F., Armendariz-Borunda, J. and Martinez-Hernandez, A. (1994) Nonenzymatic glycosylation of poly-l-lysine: a new tool for targeted gene delivery, Hepatology, 20: 1602−1608.
  87. McKee, T.D., De Rome, M.E., Wu, G.Y. and Findeis, M.A. (1994) Preparation of asialoorosomucoid-polylysine conjugates, Bioconjug. Chem. 5: 306−311.
  88. , I. (1996) Endocytosis and molecular sorting, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 12: 575−625.
  89. Michael, S.I. and Curiel, D.T. (1994) Strategies to achieve targeted gene delivery via the receptor-mediated endocytosis pathway, Gene Ther. 1: 223−232.
  90. Midoux, P., Mendes, C., Legrand, A., Raimond, J., Mayer, R., Monsigny, M. and Roche, A.C. (1993) Specific gene transfer mediated by lactosylated poly-l-lysine into hepatoma cells, Nucleic Acids Res. 21: 871−878.
  91. Mislick, K.A. and Baldeschwieler, J.D. (1996) Evidence for the role of proteoglycans in cation-mediated gene transfer, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 93: 1 234 912 354.
  92. Mislick, K.A., Baldeschwieler, J.D., Kayyem, J.F. and Meade, T.J. (1995) Transfection of folate-polylysine DNA complexes: evidence for lysosomal delivery, Bioconjug. Chem. 6: 512−515.
  93. Monsigny, M., Roche, A.C., Midoux, P. and Mayer, R. (1994) Glycoconjugates as carriers for specific delivery of therapeutic drugs and genes, Advanced Drug Delivery Reviews, 14: 1−24.
  94. Novoa, I., Benavente, J., Cotten, M. and Carrasco, L. (1997) Permeabilization of mammalian cells to proteins: poliovirus 2A (pro) as a probe to analyze entry of proteins into cells, Exp. Cell Res. 232: 186−190.
  95. OConnell, B.C., Lillibridge, C.D., Ambudkar, I. and Kruse, D. (1998) Somatic gene transfer to salivary glands, Ann. N. Y. Acad. Sci. 842: 171−180.
  96. Ogris, M., Brunner, S., SchDller, S., Kircheis, R. and Wagner, E. (1999) PEGylated DNA/transferrin-PEI complexes: reduced interaction with blood components, extended circulation in blood and potential for systemic gene delivery, Gene Ther. 6: 595−605.
  97. Ogris, M., Steinlein, P., Kursa, M., Mechtler, K., Kircheis, R. and Wagner, E. (1998) The size of DNA/transferrin-PEI complexes is an important factor for gene expression in cultured cells. Gene Ther. 5: 1425−1433.
  98. Ohmori, N., Niidome, T., Wada, A., Hirayama, T., Hatakeyama, T. and Aoyagi, H. (1997) The enhancing effect of anionic alpha-helical peptide on cationic peptide-mediating transfection systems, Biochem. Biophys. Res. Commun. 235: 726−729.
  99. Otero, M.J. and Carrasco, L. (1987) Proteins are cointernalized with virion particles during early infection, Virology, 160: 75−80.
  100. Page, R.L., Butler, S.P., Subramanian, A., Gwazdauskas, F.C., Johnson, J.L. and Velander, W.H. (1995) Transgenesis in mice by cytoplasmic injection of polylysine/dna mixtures, Transgenic. Res. 4: 353−360.
  101. Perales, J.C., Ferkol, T., Beegen, H., Ratnoff, O.D. and Hanson, R.W. (1994) Gene transfer in vivo: sustained expression and regulation of genes introduced into the liver by receptor-targeted uptake, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 91: 4086−4090.
  102. Perales, J.C., Ferkol, T., Molas, M. and Hanson, R.W. (1994) An evaluation of receptor-mediated gene transfer using synthetic dna-ligand complexes, Eur. J. Biochem. 226: 255−266.
  103. Philipson, L., Lonberg-Holm, K. and Pettersson, U. (1968) Virus-receptor interaction in an adenovirus system. J. Virol. 2: 1064−1075.
  104. Plank, C., Mechtler, K., Szoka, F.C., Jr. and Wagner, E. (1996) Activation of the complement system by synthetic DNA complexes: a potential barrier for intravenous gene delivery, Hum. Gene Ther. 7: 1437−1446.
  105. Plank, C., Oberhauser, B., Mechtler, K., Koch, C. and Wagner, E. (1994) The influence of endosome-disruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like gene transfer systems, J. Biol. Chem. 269: 12 918−12 924.
  106. Plank, C., Zauner, W. and Wagner, E. (1998) Application of membrane-active peptides for drug and gene delivery across cellular membranes, Advanced Drug Delivery Reviews, 34: 21−35.
  107. Pollard, H., Remy, J.S., Loussouarn, G., Demolombe, S., Behr, J.P. and Escande, D. (1998) Polyethylenimine but not cationic lipids promotes transgene delivery to the nucleus in mammalian cells, J. Biol. Chem. 273: 7507−7511.
  108. Prchla, E., Plank, C., Wagner, E., Blaas, D. and Fuchs, R. (1995) Virus-mediated release of endosomal content in vitro: different behavior of adenovirus and rhino virus serotype 2, J. Cell Biol. 131: 111−123.
  109. Relloso, M. and Esponda, P. (1998) In vivo gene transfer to the mouse oviduct epithelium, Fertil. Steril. 70: 366−368.
  110. Rojanasakul, Y., Wang, L.Y., Malanga, C.J., Ma, J.K. and Liaw, J. (1994) Targeted gene delivery to alveolar macrophages via fc receptor-mediated endocytosis, Pharm. Res. 11: 1731−1736.
  111. Rosen, J.M., Li, S., Raught, B. and Hadsell, D. (1996) The mammary gland as a bioreactor: factors regulating the efficient expression of milk protein-based transgenes, Am. J. Clin. Nutr. 63: 627S-32S.
  112. Rosenkranz, A.A., Yachmenev, S.V., Jans, D.A., Serebryakova, N.V., Murav’ev, V.I., Peters, R. and Sobolev, A.S. (1992) Receptor-mediated endocytosis and nuclear transport of a transfecting dna construct, Exp. Cell Res. 199: 323−329.
  113. Ross, G.F., Bruno, M.D., Uyeda, M., Suzuki, K., Nagao, K., Whitsett, J.A. and Korfhagen, T.R. (1998) Enhanced reporter gene expression in cells transfected in the presence of DMI-2, an acid nuclease inhibitor. Gene Ther. 5: 1244−1250.
  114. Ross, G.F., Morris, R.E., Ciraolo, G., Huelsman, K., Bruno, M., Whitsett, J.A., Baatz, J.E. and Korfhagen, T.R. (1995) Surfactant protein a-polylysine conjugates for delivery of dna to airway cells in culture, Hum. Gene Ther. 6: 31−40.
  115. Schaffer, D.V. and Lauffenburger, D.A. (1998) Optimization of Cell Surface Binding Enhances Efficiency and Specificity of Molecular Conjugate Gene Delivery. J. Biol. Chem. 273: 28 004−28 009.
  116. , P. (1994) Mechanism of adenovirus-mediated endosome lysis: role of the intact adenovirus capsid structure, Biochem. Biophys. Res. Commun. 205: 1318−1324.
  117. , P. (1994) A simple and efficient method of protein delivery into cells using adenovirus, Biochem. Biophys. Res. Commun. 203: 582−587.
  118. , P. (1994) Adenovirus-dependent release of choline from plasma membrane vesicles at an acidic ph is mediated by the penton base protein, J. Virol. 68: 1204−1206.
  119. Seth, P., Brinkmann, U., Schwartz, G.N., Katayose, D., Gress, R., Pastan Ira and Cowan, K. (1996) Adenovirus-mediated gene transfer to human breast tumor cells: an approach for cancer gene therapy and bone marrow purging, Cancer Res. 56: 1346−1351.
  120. Seth, P., Fitzgerald, D.J., Willingham, M.C. and Pastan, I. (1984) Role of a low-ph environment in adenovirus enhancement of the toxicity of a pseudomonas exotoxin-epidermal growth factor conjugate, J. Virol. 51: 650−655.
  121. Seth, P., Rosenfeld, M., Higginbotham, J. and Crystal, R.G. (1994) Mechanism of enhancement of dna expression consequent to cointernalization of a replication-deficient adenovirus and unmodified plasmid dna, J. Virol. 68: 933−940.
  122. , L.W. (1992) Passive tumor targeting of soluble macromolecules and drug conjugates, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier. Syst. 9: 135−187.
  123. Smith, R.M. and Jarett, L. (1990) Partial characterization of mechanism of insulin accumulation in H35 hepatoma cell nuclei, Diabetes, 39: 683−689.
  124. Sobolev, A.S., Akhlynina, T.V., Yachmenev, S.V., Rosenkranz, A.A. and Severin, E.S. (1992) Internalizable insulin-bsa-chlorin e6 conjugate is a more effective photosensitizer than chlorin e6 alone, Biochem. Int. 26: 445−450.
  125. Sosnowski, B.A., Gonzalez, A.M., Chandler, L.A., Buechler, Y.J., Pierce, G.F. and Baird, A. (1996) Targeting DNA to cells with basic fibroblast growth factor (FGF2), J. Biol. Chem. 271: 33 647−33 653.
  126. Stankovics, J., Crane, A.M., Andrews, E., Wu, C.H., Wu, G.Y. and Ledley, F.D. (1994) Overexpression of human methylmalonyl coa mutase in mice after in vivo gene transfer with asialoglycoprotein/polylysine/dna complexes, Hum. GeneTher. 5: 1095−1104.
  127. Strydom, S., Van Jaarsveld, P., Van Helden, E., Ariatti, M. and Hawtrey, A. (1993) Studies on the transfer of dna into cells through use of avidin-polylysine conjugates complexed to biotinylated transferrin and dna, J. Drug Target. 1: 165−174.
  128. Szoka, F., Jr. and Papahadjopoulos, D. (1978) Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 75: 4194−4198.
  129. Taxman, D.J., Lee, E.S. and Wojchowski, D.M. (1993) Receptor-targeted transfection using stable maleimido-transferrin/thio-poly-l-lysine conjugates published erratum appears in anal biochem 1993 nov 1- 214(2):588.,^na/. Biochem. 213: 97−103.
  130. Thompson, J.F., Hayes, L.S. and Lloid, D.B. (1991) Modulation of firefly luciferase stability and impact on studies of gene regulation. Gene, 103: 171−177.
  131. Thurnher, M., Wagner, E., Clausen, H., Mechtler, K., Rusconi, S., Dinter, A., Birnstiel, M.L., Berger, E.G. and Cotten, M. (1994) Carbohydrate receptor-mediated gene transfer to human t leukaemic cells, Glycobiology. 4: 429−435.
  132. Trubetskoy, V.S., Torchilin, V.P., Kennel, S.J. and Huang, L. (1992) Use of n-terminal modified poly (l-lysine)-antibody conjugate as a carrier for targeted gene delivery in mouse lung endothelial cells, Bioconjug. Chem. 3: 323−327.
  133. Uherek, C., Fominaya, J. and Wels, W. (1998) A modular DNA carrier protein based on the structure of diphtheria toxin mediates target cell-specific gene delivery, J. Biol. Chem. 273: 8835−8841.
  134. Vitiello, L., Bockhold, K., Joshi, P.B. and Worton, R.G. (1998) Transfection of cultured myoblasts in high serum concentration with DODAC: DOPE liposomes, Gene Ther. 5: 1306−1313.
  135. Vitiello, L., Chonn, A., Wasserman, J.D., Duff, C. and Worton, R.G. (1996) Condensation of plasmid DNA with polylysine improves liposome-mediated gene transfer into established and primary muscle cells, Gene Ther. 3: 396−404.
  136. Wadhwa, M.S., Knoell, D.L., Young, A.P. and Rice, K.G. (1995) Targeted gene delivery with a low molecular weight glycopeptide carrier, Bioconjug. Chem. 6: 283−291.
  137. Wagner, E., Cotten, M., Foisner, R. and Birnstiel, M.L. (1991) Transferrin-polycation-dna complexes: the effect of polycations on the structure of the complex and dna delivery to cells, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 88: 4255−4259.
  138. Wall, R.J., Rexroad, C.E., Jr., Powell, A., Shamay, A., McKnight, R. and Hennighausen, L. (1996) Synthesis and secretion of the mouse whey acidic protein in transgenic sheep, Transgenic. Res. 5: 67−72.
  139. Wendelburg, B.J. and Vos, J. (1998) An enhanced EBNA1 variant with reduced IR3 domein for long-term episomal maintenance and transgene expression of oriP-based plasmids in human cells. Gene Ther. 5: 1389−1399.
  140. Wickham, T.J., Filardo, E.J., Cheresh, D.A. and Nemerow, G.R. (1994) Integrin alpha v beta 5 selectively promotes adenovirus mediated cell membrane permeabilization, J. Cell Biol. 127: 257−264.
  141. Wickham, T.J., Mathias, P., Cheresh, D.A. and Nemerow, G.R. (1993) Integrins alpha v beta 3 and alpha v beta 5 promote adenovirus internalization but not virus attachment, Cell, 73: 309−319.
  142. Winters, W.D. and Russell, W.C. (1971)/. Gen. Virol. 10: 181−184.
  143. Wolfert, M.A. and Seymour, L.W. (1996) Atomic force microscopic analysis of the influence of the molecular weight of poly (l)lysine on the size of polyelectrolyte complexes formed with dna, Gene Ther. 3: 269−273.
  144. Wolfert, M.A. and Seymour, L.W. (1998) Chloroquine and amphipathic peptide helices show synergistic transfection in vitro, Gene Ther. 5: 409−414.
  145. Wolff, J.A., Williams, P., Acsadi, G., Jiao, S., Jani, A. and Chong, W. (1991) Conditions affecting direct gene transfer into rodent muscle in vivo, Biotechniques, 11: 474 485.
  146. Wu, C.H. and Wu, G.Y. (1998) Targeted inhibition of hepatitis C virus-directed gene expression in human hepatoma cell lines, Gastroenterology, 114: 1304−1312.
  147. Wu, G.Y., Wilson, J.M., Shalaby, F., Grossman, M., Shafritz, D.A. and Wu, C.H. (1991) Receptor-mediated gene delivery in vivo. Partial correction of genetic analbuminemia in Nagase rats, J. Biol. Chem. 266: 14 338−14 342.
  148. Wu, G.Y. and Wu, C.H. (1987) Receptor-mediated in vitro gene transformation by a soluble dna carrier system published erratum appears in j biol chem 1988 jan 5- 263(1):588., J. Biol. Chem. 262: 4429−4432.
  149. Wu, G.Y. and Wu, C.H. (1988) Evidence for targeted gene delivery to hep g2 hepatoma cells in vitro, Biochemistry, 27: 887−892.
  150. Wu, G.Y. and Wu, C.H. (1988) Receptor-mediated gene delivery and expression in vivo, J. Biol. Chem. 263: 14 621−14 624.
  151. Xu, B., Wiehle, S., Roth, J.A. and Cristiano, R.J. (1998) The contribution of poly-L-lysine, epidermal growth factor and streptavidin to EGF/PLL/DNA polyplex formation. Gene Ther. 5: 1235−1243.
  152. , N.S. (1992) Gene transfer into mammalian somatic cells in vivo, Crit. Rev. Biotechnol. 12: 335−356.
  153. Yang, Y., Nunes, F.A., Berencsi, K., Furth, E.E., Gonczol, E. and Wilson, J.M. (1994) Cellular immunity to viral antigens limits el-deleted adenoviruses for gene therapy, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 91: 4407−4411.
  154. Yarns, S., Rosen, J.M., Cole, A.M. and Diamond, G. (1996) Production of active bovine tracheal antimicrobial peptide in milk of transgenic mice, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 93:14 118−14 121.
  155. Yin, W. and Cheng, P.W. (1994) Lectin conjugate-directed gene transfer to airway epithelial cells, Biochem. Biophys. Res. Commun. 205: 826−833.
  156. , A. (1985) Adenovirus-induced leakage of co-endocytosed macromolecules into the cytosol, Cell Struct. Funct. 10: 391−404.
  157. Yoshimura, K., Rosenfeld, M.A., Seth, P. and Crystal, R.G. (1993) Adenovirus-mediated augmentation of cell transfection with unmodified plasmid vectors, J. Biol. Chem. 268: 2300−2303.
  158. Zabner, J., Fasbender, A.J., Moninger, T., Poellinger, K.A. and Welsh, M.J. (1995) Cellular and molecular barriers to gene transfer by a cationic lipid, J. Biol. Chem. 270: 1 899 719 007.
  159. Zanta, M.A., Boussif, O., Adib, A. and Behr, J.P. (1997) In vitro gene delivery to hepatocytes with galactosylated polyethylenimine, Bioconjug. Chem. 8: 839−844.99
  160. Zauner, W., Blaas, D., Kuechler, E. and Wagner, E. (1995) Rhinovirus-mediated endosomal release of transfection complexes, J. Virol. 69: 1085−1092.
  161. Zauner, W., Kichler, A., Schmidt, W., Sinski, A. and Wagner, E. (1996) Glycerol enhancement of ligand-polylysine/DNA transfection, Biotechniques, 20: 905−913.
  162. Zhang, K., Lu, D., Xue, J., Huang, Y. and Huang, S. (1997) Construction of mammary gland-specific expression vectors for human clotting factor IX and its secretory expression in goat milk, Chin. J. Biotechnol. 13: 271−276.
  163. Ziady, A.G., Ferkol, T., Gerken, T., Dawson, D.V., Perlmutter, D.H. and Davis, P.B. (1998) Ligand substitution of receptor targeted DNA complexes affects gene transfer into hepatoma cells. Gene Ther. 5: 1685−1697.1001. Благодарности.
  164. Π’Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ°ΡŽ Π±Π»Π°Π³ΠΎΠ΄Π°Ρ€Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π½Π°ΡƒΡ‡Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ€ΡƒΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŽ — профСссору, Π΄ΠΎΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρƒ биологичСских Π½Π°ΡƒΠΊ АлСксандру Π‘Π΅Ρ€Π³Π΅Π΅Π²ΠΈΡ‡Ρƒ Π‘ΠΎΠ±ΠΎΠ»Π΅Π²Ρƒ Π·Π° ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π½Π°Π΄ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΎΠΉ Π² Π±ΠΈΠΎΡ„изичСской Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ Π΅Π³ΠΎ руководством.
  165. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ°ΡŽ Π±Π»Π°Π³ΠΎΠ΄Π°Ρ€Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌΡƒ Π½Π°ΡƒΡ‡Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ€ΡƒΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŽ ΠΊΠ°Π½Π΄ΠΈΠ΄Π°Ρ‚Ρƒ биологичСских Π½Π°ΡƒΠΊ ΠΠ½Π΄Ρ€Π΅ΡŽ АлСксандровичу Π ΠΎΠ·Π΅Π½ΠΊΡ€Π°Π½Ρ†Ρƒ Π·Π° ΡΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΡ‚Π½ΡƒΡŽ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρƒ, Π·Π° Π½Π΅ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠΌΡƒΡŽ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² ΠΏΠ»Π°Π½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ экспСримСнтов ΠΈ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹.
  166. ΠžΡ‡Π΅Π½ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈΠ·Π½Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Π° Π’Π»Π°Π΄ΠΈΠΌΠΈΡ€Ρƒ ΠΡ„Π°Π½Π°ΡΡŒΠ΅Π²ΠΈΡ‡Ρƒ Никитину Π·Π° ΡΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΡ‚Π½ΡƒΡŽ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρƒ с ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈ Π’Π°Ρ‚ΡŒΡΠ½Π΅ Π“Ρ€ΠΈΠ³ΠΎΡ€ΡŒΠ΅Π²Π½Π΅ КисСлСвой Π·Π° Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ всСм сотрудникам биофизичСской Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠΈ Π·Π° ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΊΡƒ.
Π—Π°ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒ Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΎΠΉ