Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Выделение, характеристика и трансплантация сперматогоний типа А хряка

Диссертация: Выделение, характеристика и трансплантация сперматогоний типа А хряка
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Единственным источником потенциально тотипотентных диплоидных клеток во взрослом организме млекопитающих являются стволовые клетки сперматогонии (СКС). Уникальное свойство стволовых клеток сперматогоний многократно самообновляться открывает широкие возможности реализации потенциала этих клеток в создании новых видов животных с измененным геномом. У половозрелых самцов популяция диплоидных… Читать ещё >

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Стволовые клетки сперматогонии у млекопитающих
    • 1. 2. Пролиферация и дифференцировка сперматогоний типа А
    • 1. 3. Факторы, стимулирующие пролиферацию и дифференцировку 21 сперматогоний
    • 1. 4. Сперматогенез у различных видов млекопитающих
    • 1. 5. Выделение стволовых клеток сперматогоний млекопитающих 28 и культивирование in vitro
    • 1. 6. Трансплантация СКС

Выделение, характеристика и трансплантация сперматогоний типа А хряка (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Благодаря активному развитию клеточной биологии и клеточной инженерии открыт перспективный путь к созданию животных со стабильной интеграцией и экспрессией рекомбинантной ДНК в геноме (трансгенные животные). Трансгенные животные могут использоваться как модели для изучения болезней человека и животных, в генной терапии, для улучшения физиологических свойств и продуктивности домашних животных (животные, обладающие общей генетической устойчивостью к различным заболеваниям и неблагоприятным факторам внешней среды, информационным иммунитетом к возбудителям основных эпизоотий, стресс-устойчивостью и т. д.), а также в качестве источников необходимых человеку фармакологических (эритропоэтин, интерферон, инсулин, альбумин, факторы свертывания крови и др.) и технических (химозин и др.) белков [1,2,6,29].

В настоящее время разработаны новые современные подходы получения трансгенных животных. Широко применяются такие методические приемы как: микроинъекция рекомбинантной ДНК в пронуклеус, использование трансгенной спермы в качестве вектора, получение зародышевых химер с помощью эмбриональных стволовых клеток (ЭСК), ретровирусная трансфекция эмбрионов [3,17,25,27,30,130]. Перенос генов в геном животных возможен на различных стадиях эмбрионального и постнатального развития организма [10,11].

Особенную актуальность в этом направлении приобретают методы клеточной инженерии, позволяющие получать культуры стволовых клеток. [147,155]. Стволовыми клетками принято считать клетки, способные самообновляться, т. е. неограниченно делиться на протяжении длительного времени, по крайней мере, в течение жизни организма. Из каждой стволовой клетки при делении образуются две дочерние, одна из которых способна самообновляться, а другая обладает определенной потенцией к дифференцировке. Стволовые клетки, дающие начало одному виду дифференцированных клеток называют унипотентными, двумбипотентными, нескольким видам в пределах одного тканевого вида (например, клеткам крови) — полипотентными. Стволовые клетки, обладающие неограниченными потенциями к цитодифференцировке, способные реализовать генетическую информацию ядер клеток, обеспечивая их дифференцировку, а также развитие до целого организма называют тотипотентными [27].

Единственным источником потенциально тотипотентных диплоидных клеток во взрослом организме млекопитающих являются стволовые клетки сперматогонии (СКС). Уникальное свойство стволовых клеток сперматогоний многократно самообновляться открывает широкие возможности реализации потенциала этих клеток в создании новых видов животных с измененным геномом. У половозрелых самцов популяция диплоидных стволовых клеток сперматогоний постоянно обновляется и производит потомство клеток, которое инициирует комплексный процесс дифференцировки, приводящий к появлению высоко специализированных половых клеток — сперматозоидов. Теоретически одна сперматогониальная стволовая клетка способна сформировать 4096 сперматид [48]. После оплодотворения, дополненные женскими гомологами, сперматозоиды участвуют в эмбриогенезе, и в итоге, в дифференцировке каждой клетки организма. В этом случае стволовые клетки сперматогонии могут считаться тотипотентными. И хотя женские ооциты, имеющиеся у половозрелых особей, и принимают генетическое участие в создании потомства, они не являются самообновляющимися — при рождении их имеется конечное количество, которое постоянно уменьшается в течение жизни самки. Поэтому стволовые клетки сперматогонии, по существу, являются единственным самообновляющимся типом клеток у половозрелого животного, способным обеспечить генетический вклад в получение следующего поколения [47].

В настоящее время ряд ученых из ведущих научно-исследовательских институтов мира занимаются изучением различных аспектов, связанных с выделением, культивированием, генетической трансформацией, трансплантацией стволовых клеток сперматогоний млекопитающих, в том числе сельскохозяйственных животных и человека [48,50,64,133]. Актуальность этих исследований заключается в том, что наряду с теоретическими изысканиями поднимаются такие важные практические задачи, как лечение бесплодия (например, после курсов химиои радиотерапии при лечении рака), регулирование рождаемости у людей, получение животных с улучшенными полезно-хозяйственными признаками и др. [133,21,22].

Пролиферация и дифференцировка сперматогоний являются комплексным процессом, который включает в себя многие регуляторные факторы и межклеточные взаимодействия, что создает большие трудности в изучении этих сложных процессов in vivo. В связи с этим выделение СКС из тестикул млекопитающих, манипуляции с ними in vitro и пересадка их в семенники реципиента открывают новые возможности в изучении сперматогенеза и проведении геномных манипуляций у млекопитающих, и представляют собой одно из перспективных направлений в клеточной биологии.

Ядра стволовых клеток являются ценным материалом для конструирования новых клеточных типов в процессе клонирования. Исследования по клонированию животных путем пересадки ядер развиваются очень интенсивно. Показана возможность клонирования крупного рогатого скота, овец и кроликов путем трансплантации ядер бластомеров в энуклеированные ооциты [14]. При этом исходным материалом служили 4−64-х клеточные эмбрионы. В настоящее время ведутся успешные попытки использования ППЗК в качестве доноров ядер. Так, в США в 1997 году впервые удалось получить клонированного теленка по кличке «Ген» [148]. Исходным материалом для клонирования послужили ядра ППЗК крупного рогатого скота, полученные из закладок гонад плода теленка в возрасте 30 суток.

Сперматогенные клетки — сперматогонии типа, А вполне могут служить источником ядер для реконструирования зигот с целью получения животных с заведомо известными признаками. Первой попыткой использования сперматогоний в качестве источника ядер для трансплантации в энуклеированную клетку, с целью определения их потенций, являются исследования, проведенные на лягушках [39]. На человеческих яйцеклетках показано развитие до стадии морулы после 72 часов культивирования реконструированных клеток, полученных путем трансплантации сперматогоний в энуклеированные созревшие ооциты на стадии метафазы II [160]. Актуальность исследований в данном направлении очевидна, т.к. уникальное свойство СКС — потенциальная тотипотентность дает возможность клонирования самцов млекопитающих с помощью трансплантации ядер сперматогоний, полученных из тестикул [143,142].

Очень перспективный подход для получения трансгенных животных посредством использования мужских стволовых клеток был предложен Бринстером и Авербаком [48]. Они разработали технику, с помощью которой возможна трансплантация клеток, выделенных из семенника донора, в мышиные семенные канальцы стерильных самцов реципиентов. В результате проведенных этими авторами исследований, была показана способность трансплантантов возобновлять нормальный сперматогенез у мышей и крыс.

В данном направлении рядом ученых из разных лабораторий ведутся активные исследования. В основном при изучении СКС используются лабораторные животные — мыши и крысы [133,47,93], однако в последнее время появились публикации, в которых объектами изучения являются СКС сельскохозяйственных животных [90,85].

Стволовые зародышевые клетки млекопитающих могут использоваться в качестве вектора для переноса рекомбинантной ДНК в организм животных. Модификации стволовых клеток сперматогоний до пересадки должны повлиять на развитие яиц, оплодотворенных сперматозоидами, полученными из трансформированных стволовых клеток. Возможность введения в стволовые клетки экзогенной ДНК имеет значение для широкого ряда экспериментальных работ, например для развития генной терапии и трансгенезиса [27].

Таким образом, в контексте выше изложенного, и в связи с тем, что данных по изучению СКС крупных сельскохозяйственных животных, в том числе свиней, недостаточно, направление исследований по изучению СКС свиньи является перспективным и актуальным для развития сельскохозяйственной биотехнологии.

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось выделение, характеристика и трансплантация стволовых клеток сперматогоний типа, А хряков. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

• изучить динамику сперматогенеза у местных помесных хряков в образцах фиксированных тканей;

• оптимизировать существующие методические приемы, позволяющие изолировать СКС типа, А из семенников хряка;

• подобрать оптимальные условия, влияющие на поддержание СКС в недифференцированной форме при краткосрочном культивировании и охарактеризовать СКС в культуре;

• оптимизировать схему трансплантации СКС свиней в семенники стерильных реципиентов;

• изучить возможность колонизации клетками донора семенных канальцев стерильного реципиента и возобновления в них сперматогенеза.

Научная новизна. Впервые изучена динамика сперматогенеза у местных помесных свиней и установлен возраст хрячков, при котором сбор СКС типа, А является максимальным.

Разработан эффективный и недорогой метод выделения стволовых клеток сперматогоний из семенников местных помесных хряков и предпринята попытка создания оптимальных условий для их культивирования. Изучена роль и проведен сравнительный анализ использования различных монослоев и ростовых факторов для поддержания СКС в культуре в недифференцированном виде.

Впервые, с учетом морфо-физиологических характеристик свиней, модифицирована и оптимизирована схема трансплантации донорских клеток в семенники стерильных реципиентов, предложенная ранее для мышей, и разработан метод обработки животных бусульфаном с целью выключения эндогенного сперматогенеза.

Показано на свиньях, что СКС донора возобновляют в семенных канальцах реципиента полноценный сперматогенез с выработкой зрелых сперматозоидов.

Практическая ценность работы. Полученные экспериментальные данные по выделению очищенной популяции СКС типа, А свиньи, проведении с ними манипуляций in vitro и пересадке их в семенники реципиента представляют практическую ценность в связи с эффективностью и низкой стоимостью разработанных методических приемов, что позволит в будущем использовать стволовые клетки сперматогонии типа А, обладающие уникальным свойствомсамообновлением в течение всей жизни животного, в качестве вектора для переноса рекомбинантной ДНК в геном реципиентов с целью получения животных с заведомо известными признаками.

Основные положения, выносимые на защиту: -влияние возраста хряков на получение обогащенной культуры СКС типа А;

— метод выделения и очистки стволовых клеток сперматогоний типа, А свиньи;

— характеристика стволовых клеток сперматогоний типа, А свиньи- -влияние ростовых факторов и монослоев фидерных клеток на поддержание СКС свиньи в культуре;

— схема обработки самцов свиней бусульфаном с целью подавления эндогенного сперматогенеза;

— потенции СКС свиней возобновлять сперматогенез в семенных канальцах хряков, характеризующихся половой стерильностью, после трансплантации в них донорских клеток.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на 2-ой Международной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», ВНИИСХБ, г. Москва, октябрь 2000гна международной конференции «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», ВНИИЖ, п. Дубровицы, ноябрь 2001 гна научно-практической конференции, п. Быково, июль 2001; на 7-ом мировом конгрессе генетиков.

7 th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production), Montpellier, France, 2002.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 4 научные работы.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 119 стр., содержит 5 табл., 29 рис. (в т.ч. 23 фотографии, 2диаграммы), состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы, список литературы.

Список литературы

включает 162 литературных источников, в т. ч. 129 на иностранном языке.

5. ВЫВОДЫ.

1. Изучена динамика сперматогенеза у 54 местных помесных хрячков: а) Показано, что после рождения и до 80 сут. в семенных канальцах присутствуют только клетки Сертоли и два вида сперматогоний типа А. Полноценный сперматогенез у местных помесных свиней наступает не ранее 119 суточного возраста. б) Впервые установлено, что возраст местных помесных хрячков в интервале 60−80 сут. является оптимальным для максимального сбора стволовых клеток сперматогоний типа А. в) Охарактеризованы 2 вида сперматогоний типа А. Первый тип клеток характеризуется темным крупным ядром и небольшим ободком цитоплазмы. Второй тип имеет светлое крупное ядро и более тонкий ободок цитоплазмы. Размеры обоих типов клеток находятся в пределах 2530 мкм.

2. Оптимизирована схема трансплантации стволовых клеток сперматогоний типа, А (ранее предложенная для мышей) с учетом морфо-физиологических характеристик свиней: а) показано, что трехкратная обработка животных-реципиентов бусульфаном позволяет разрушить стволовые клетки сперматогонии типа Аб) предложен метод введения стволовых клеток донора в средостение семенника животных-реципиентов, который обеспечивает равномерное распределение донорских клеток по семенным канальцам.

3. Последовательные механическая, а затем ферментативная обработки ткани семенника (коллагеназа, трипсин) позволяют выделить стволовые клетки сперматогонии типа А, расположенные на базальной мембране семенных канальцев. Дальнейшее инкубирование клеточной популяции в ростовой среде в течение 2−3 часов способствует очистке мужских стволовых клеток от других клеточных типов на 70%.

4. Установлено, что основной средой для культивирования стволовых клеток сперматогоний типа, А является среда, используемая для культивирования эмбриональных стволовых клеток (среда Игла в модификации Дюльбекко с 4,5 г/л глюкозы), с добавлением 15% сыворотки плода коров, 2 мМ альфа-глутамина, 0,1 мМ 2-меркаптоэтанола, 0,1 мМ заменимых аминокислот и 50 мкг/мл гентамицина.

5. Наличие фидерного слоя, представленного перевиваемыми эмбриональными фибробластами мыши (STO-клетки) или клетками Сертоли позволяет поддерживать СКС в недифференцированной форме в течение 7−10 сут.

6. Показано, что мужские стволовые клетки донора, трансплантированные в семенники стерильного реципиента, сохраняются в семенниках как минимум 29 сут. Более того, они возобновляют сперматогенез в семенных канальцах реципиента и приводят к формированию зрелых сперматозоидов.

7. Установлено, что бусульфан действует как временный контрацептив. В 9-ти месячном возрасте в семенниках реципиентов, обработанных бусульфаном, восстанавливается эндогенный сперматогенез.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Биотехнология клеток животных: в 2-х т. /Под ред. Спиера Р. Е., Гриффитса Дж.Б. М.: Агропромиздат. — 1989. — 480,503с.
  2. Г., Зиновьева Н. А., Эрнст J1.K. «Генные фермы» новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными. //Сельскохозяйственная биология. — 1993. — № 6. — С.3−27.
  3. К.Г. Микроинъекция генов в зиготы и эмбрионы. //Успехи современной генетики. 1985. — Т. 13. — С.75−88.
  4. С. Биология развития: в 3-х т. М.: Мир. — 1995.
  5. O.K. Генетическая трансформация соматических клеток. Л.: «Наука». 1989. — 350с.
  6. П.А. Совершенствование биотехнологических приемов получения трансгенных сельскохозяйственных животных. Автореф дис.канд. биол. наук. М. — 1992. — 20с.
  7. Данилова J1.B. Сперматогонии, сперматоциты, сперматиды //В кн.: Современные проблемы сперматогенеза. /М: Наука. 1982. — С.25−72.
  8. JI.B. Ультраструктурное исследование сперматогенеза. М: Наука. — 1978.
  9. А.П. Раннее развитие млекопитающих. Л.:Наука, Лен. Отд. -1988.-228 с.
  10. А.П., Городецкий С. И. Генетическая трансформация млекопитающих // Молекулярные механизмы генетических процессов. -М. 1985. -С.84−93.
  11. А.П., Городецкий С. И. Молекулярные и клеточные аспекты биотехнологии. Л.: Наука. — 1985. — С.84−93.
  12. О.И., Терских В. В., Полуновский В. А. Покоящиеся клетки. М.: Наука. — 1983. — 180с.
  13. В.К. Достижения современной биологической науки в области размножения с.-х. животных. М: Правда. — 1950. — 31с.
  14. М.М. Факторы, влияющие на развитие эмбриональных стволовых клеток крупного рогатого скота и мыши в системе in vitro и in vivo. Дис.канд. биол. наук. — М., 1994. — 114с.
  15. М.В. Справочник по ветеринарной хирургии. М: Колос. -1977.-255с.
  16. Э. Гистохимия. Москва. — 1962. — 963с.
  17. И.А. Получение, генетическая трансформация и использование эмбриональных стволовых клеточных линий. -Автореф. дис.канд. биол. наук. М., 1993. — 25с.
  18. Т.А. Выделение и характеристика примордиальныхзародышевых клеток свиньи. Дис.канд. биол. наук. — Дубровицы, 2001. 110с.
  19. С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции. -М.: Наука. 1985. -207с.
  20. С.С. Цикл сперматогенного эпителия и кинетика сперматогенеза у млекопитающих //Успехи современной биологии. -1967. Т.63. — С.135−153.
  21. B.C., Сухих Г. Т. Медицинская клеточная биология. М.: БЭБиМ. — 1998.-200с.
  22. А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир. — 2000. -592с.
  23. . Микроскопическая техника. Москва. — 1953. — 718с.
  24. Г. И. Микроскопическая техника. Москва. — 1946. — 328с.
  25. И., Фляйшманн М., Булла И, Брем Г. Использование эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) мыши для получения химерных животных //Цитология. 1996. — № 38. — С.1118−1123.
  26. И.П. Введение гена lacZ E.coli в эмбриональные стволовые клетки мыши D3 электропорацией //Докл. РАСХН. 1996. -№ 6. — С.36−37.
  27. И.П. Эмбриональные стволовые клетки в биологии: настоящее и будущее. Дубровицы. — 1999. — 95с.
  28. И.П., Приданцева Т. А., Сергеев Н. И., Эрнст Л .К. Выделение и очистка примордиальных половых клеток зародышей мышей //С.-х. биология. 2000. — № 2. — С. 119−121.
  29. А. Биотехнология: свершения и надежды. М.: Мир. — 1987. -412с.
  30. O.JI. Перенос генов в соматические и половые клетки. -Новосибирск. 1985. — 120с.
  31. И.И. Биология воспроизведения с.-х. животных. М: Знание. — 1969. — 56с.
  32. Ф.П., Тугизов Ш. М., Савченкова И. П. и др. Рекомбинантный поверхностный белок вируса гепатита В, экспонирующийиммунодоминанту мембранного белка вируса ВИЧ1 //ДАН. 1992. -Т.327(1). — С.172−175.
  33. Amann R.P. A critical review of methods for evaluation of spermatogenesis from seminal characteristics //J. Androl. 1981. — V.2. — P.37−58.
  34. Amann R.P. Detection of alterations in testicular and epididymal function in laboratory animals //Environ. Health Perspect. 1986. — V.70. — P. 149 158.
  35. Amann R.P. Sperm production rates //In: Johnson A.D., Gomes W.R., VanDemark N.L. (Eds.). The Testis. Academic Press, New York. 1970. -V.l. -P.433−482.
  36. Behr J.P. Cene transfer with synthetic cationic amphiphiles: Prospects for gene therapy //Bioconjugate Chemistry. 1994. — V.5. — P.382−389.
  37. A.R., Cavicchia J.C., Millette C.F., 0"Brien D.H., Bhatnagar Y.M., Dym M. Spermatogenic cells of the prepubertal mouse. Isolation and Morphological characterization //J. Cell boil. 1977. — V.74. — P.68−85.
  38. Berardino M., Hoffner M. Development and chromosomal constitution of nuclear transplants derived from male germ cells //J.of Exper. Zoology. -1976. V.176(1). — P.61−72.
  39. Berndtson W.E., Desjardins C. The cycle of the seminiferous epithelium and spermatogenesis in the bovine testis //Am. J. Anat. 1974. — V.140. -P.167−180.
  40. Besmer P., Snyder H.W., Murphy J.E., Hardy W.D., Parodi A. The Perodi-Irgens feline sarcoma virus have homologous oncogenes, but in different contents of the viral genome //J. Virol. 1983. — V.46. — P.606−613.
  41. Bonnerot C. et all. Methods in Enzymology. 1993. — V.225. — P.451.
  42. Bouffard G. Injection des couleurs de benzidine aux animaux normaux //Ann. Inst. Pasteur. 1906. — V.20. — P.539−552.
  43. R.L. & Avarbock M.R. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. — V.91. — P.11 303−11 307.
  44. Brinster R.L. and Zimmerman W. Spermatogenesis following male germ-cell transplantation //Developmental biology. 1994. — V.91. — P. l 129 811 302.
  45. Brinster R.L. et all. 1995.
  46. Brinster, R.L., Palmiter, R.D. Harvey Lect. 1986. — V.80. — P. 1−38.
  47. L.R. & Meistrich M.L. Mutat. Res. 1987. — V.176. — P.259−268.
  48. Capecchi M.R. High efficiency transformation by direct microinjection of DNA into cultured mammalian cells //Cell. 1980. — V.22(27). — P.9139−9143.
  49. Capecchi, R.L. Science. 1989. — V.244. — P. 1288−1292.
  50. Chabot В., Stephenson D.A., Chapman V.M., Besmer P., Bernstein A. The protooncogene c-kit encoding a transmembrane tyrosine kinase receptor maps to the mouse W locus //Nature. 1988. — V.335. — P.88−89.
  51. Chen С., Okayama H. High-efficiency transformation of mammalian cells by plasmid DNA //Mol. and Cell. Biol. 1987. — V.8(8). — P2745−2752.
  52. Clermont Y. Kinetics of spermatogenesis in mammals: Seminiferous epithelium cycle and spermatogonial renewal //Physiol. Rev. 1972. — V.52. — P.198−236.
  53. Clermont Y. The cycle of the seminiferous epithelium in man //Am. J. Anat. 1963. — V.112. -P.35−51.
  54. Clermont Y. Two classes of spermatogonial stem cells in thr monkey (Cercopithecus aethiops) //Am. J. Anat. 1969. — V.126. — P.57−72.
  55. Clermont Y., Bustos-Obregon E. Re-examination of spermatogonial reneval in the rat by means of seminiferous tubules mounted «in toto'» //Amer. J. Anat. 1968. — V.122. — P.237−248.
  56. Clermont Y., Hermo L. Spermatogonial stem cells and their behavior in the seminiferous epithelium of rats and monkeys //In: Stem cells of renewing cell populanions. /Cambridge: Acad. Press. 1976. — P.273−287.
  57. Clouthier D.E., Avarbock M.R., Maika S.D., Hammer R.L. Rat spermatogenesis in mouse testis //Nature. 1996. — V.381. — P.418−421.
  58. Courot M., Hochereau-de Reviers M.T., Ortavant R. Spermatogenesis //In:The testis (N.Y.). /Acad. Press. 1970. — V.l. — P.339−435.
  59. De Rooji D.G., Grootegoed J.A. Spermatogonial stem cells //Curr. Opin. Cell Biol. 1998. — V.10. — P.694−701.
  60. Dirami G., Ravindranath N., Pursel V., Dym M. Effects of ctem cell factor and granulocyte macrophage-colony stimulating factor on survival of porcine type A spermatogonia cultured in KSOM //Biol. Reprod. 1999. -V.61. -P.225−230.
  61. Dirk G. de Rooij. Proliferation and differentiation of spermatogonial stem cells //Reproduction. 2001. — V. 121. — P.347−354.
  62. Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L. Germ cell transplantation from large domestic animals into mouse testes //Molecular Reproduction and Development. 2000. — V.57(3). — P.270−279.
  63. Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L. Transplantation of germ cells from rabbits and dogs into mouse testes //Biol. Reprod. 1999. — V.61. -P.1331−1339.
  64. Dolci S., Pesce M., Felici M. de. Combined action of stem cell factor, leukemia inhibitory factor and cAMP on in vitro proliferation of mouse primordial germ cells //Mol. Reprod. Dev. 1993. — V.35 — P. — 134−139.
  65. Dym M., Clermont Y. Effects of x-rays on type A spermatogonia in the rat //Anat. Rec. 1967. — V.157 — P.238. Abstr.
  66. Dym M., Clermont Y. Role of the spermatogonia in the repair of the seminiferous epithelium following X-irradiation of the rat testis //Amer. J. Anat. 1970. — V.128. — P.265−282.
  67. Dym M., Jia M.-C., Dirami G., Price J.M. Expression of c-lcit receptor and its autophosphorylation in immature rat type A spermatogonia //Biology of reproduction. 1995 — V.52. — P.8−19.
  68. Dym.M., Fawcett D. Further observations on the numbers of spermatogonia, spermatocytes and spermatids connected by intercellular bridges in the mammalian testis //Biol. Reprod. 1971. — V.4. — P. 195−215.
  69. Eagle H., Piez К.A. J. Exp. Med. 1962. — V. l 16. — P.29.
  70. Ewing L.L., Davis J.C., Zirkin B.R. Int. Rev. Physiol. 1980. — V.22. -P.41−115.
  71. Fawcett D.W. Intercellular bridges //Exp. Cell. Rec. Suppl. 1961. — V.l. -P. 174−181.
  72. Fechheimer M., Boylan J.F., Parker S. Transfection of mammalian cells with plasmid DNA by scrape loading and sonication loading //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. — V.84. — P.8463−8467.
  73. Forster W., Neumann E. Gene transfer by electroporation //In: Electroporation and electrofusion in cell biology. /Press. New York and London. 1989. -P.299−318.
  74. Gerssler E.N., Ryan M.A., Housman D.E. The dominant-White Spoting (W) locus of the mouse encodes the c-kit protooncogene //Cell. 1988. -V.55. — P.185−192.
  75. Godin I., Deed R., Cooke J. et al. Effects of the steel gene product on mouse primordial germ cells in culture //Nature. 1991. — V.352. — P.807−809.
  76. Goldmann E.E. Die aussere and innere Sekretion des gesungen und kranken Organismus in Lichte der «vitalen Farbung» //Beitr. Klin. Chirurg. 1909. -B.64. — S. 192−265.
  77. Hannah-Alava A. Premeiotice studies of spermatogenesis //Adv. Genet. -1965. P.157−226.
  78. Higashi Т., Sasai H., Suzuki F. Hamster cell line suitable for transfection assay of transforming genes //Proc. Natl. Sci. 1990. — V.87. — P.2409−2413.
  79. Hochreau R. M.-T. de., Lincoln G.A. Seasonal variation in the red deer, Cervus elaphus //J. Reprod. Fertil. 1978. — V.54. — P.209−213.
  80. Honaramooz A., Megee S., Dobrinski I. Germ cells transplantation in pigs. -2001.
  81. Huckins C. Cell cycle properies of differentiating spermatogonia in adult Spraque-Dawley rats //Cell and Tissue Kinet. 1971. — V.4. — P. 139−154.
  82. Huckins C. The spermatogonial stem cell population in adult rats. I. Their morphology, proliferation and maturation //Anat. Rec. 1971. — V.169. -P.533−558.
  83. Huckins C., Oakberg E.T. Morphological and quantitative analysis of spermatogonia in mouse testis using whole mounted seminiferous tubules //In:The irradiated testis. /Anat. Rec. 1978. — V.192. — P.529−542.
  84. Hyttinen J.-M., Peura Т., Tolvanen M., Aalto J., Alhonen L., Sinervirta R., Halmekyto M. Bio/Technology. 1994. — V.12. — P.606−608.
  85. Izadyar F., Creemers L.B., Ouden K., Rooij D.G. Culture and transplantation of bovine spermatogonial stem cells. VII Inter. Congress of Andrology, Monreal, Canada. — 2001. — 15−19 June.
  86. Izadyar F., van Dissel-Emiliani F., van Pelt A., de Rooij D.G. Spermatogonial stem cell transplantation //Molecular and Cellular Endocrinology. 2000. — V.169. — P.21−26.
  87. Jaenisch, R. Science. 1988. — V.240. — P. 1468−1474.
  88. Jiang F.X. Behaviour of spermatogonia following recovery from busulfan treatment in the rat. //Anat. Embryol. (Berl.). 1998. — V. 198(1). — P.53−61.
  89. Johnson L. Review article: spermatogenesis and aging in the human //J.Androl. 1986. — V.7. — P.331−354.
  90. Johnson L. Spermatogenesis //In: Cups P.T. (Ed.). Reproduction in Domestic Animals /4th edn. Academic Press (New York). 1991. — P. 173 219.
  91. Johnson L., Lebovitz R.M., Samson W.K. Germ cell degeneration in normal and microwave-irradiated rats: potential sperm production rates at different developmental steps in spermatogenesis //Anat. Rec. 1984. -V.209. — P.501−507.
  92. Johnson L., Petty C.S., Neaves W.B. A new approach to quantification of spermatogenesis and its application to germinal cell attrition during human spermiogenesis //Biol. Reprod. 1981. — V.25. — P.217−226.
  93. Johnson L., Petty C.S., Porter J.C., Neaves W.B. Germ cell degeneration during postprophase of meiosis and serum concentrations of gonadotropins in young adult and older adult men //Biol. Reprod. 1984. — V.31. — P.779−784.
  94. Johnson L., Varner D.D., Roberts M.E., Smith T.L., Keillor G.E., Scrutchfield W.L. Efficiency of spermatogenesis: a comparative approach //Anim. Reprod. Sci. 2000. — V.60−61. — P.471−480.
  95. Johnson L., Wilker C.E., Cerelli J.S. Spermatogenesis in the bull //Tech. Conf. Artif. Insem. Reprod. 1994. — V.15. — P.9−27.
  96. Kennelly J.J., Foote R.H. Sampling boar testes to study spermatogenesis quantitatively and to predict sperm production //J.Anim. Sci. 1964. — V.23. — P.160 167.
  97. Keulen C.J.G., Rooij M.F. de. The recovery from various gradations of cell loss in the mouse seminiferous epithelium and its implications for thespermatogonia! cell renewal theory //Cell and tissue kinet. 1974. — V.7. -P.549−558.
  98. Kietsvenbaum A. Mammalian spermatogenesis in vivo and somatic cell lineages //Endocr. Rev. 1994. — V. 15. — P. 116−134.
  99. Klein T.M., Wolf E.D., Wu R. High velocity microprojectiles for delivering nuclei acids into living cells //Nature. 1987. — Y.327. — P.70−73.
  100. Leblond C.P., Clermont Y. Definition of the stages of the cycle of the seminiferous epithelium in the rat //Ann. Y. Acad. Sci. 1952. — V.52. -P.548−573.
  101. Mansour S.J., Matten W.T., Hermann A.S. Transformation of mammalian cells by constituvely active MAP kinase //Science. 1994. — V.265. — P.966−970.
  102. Marret C., Durand P. Culture of porcine spermatogonia: effects of purification of the germ cells, extracellular matrix and fetal calf serum on their survival and multiplication //Reprod. Nutr. Dev. 2000. — V.40(3). -P.305−319.
  103. Morena A.R., Boitani C., Pesce M., Felici M. de, Stefanini M. Isolation of highly purified type A spermatogonia from prepubertal rat testis //J. Androl. 1996. — V.17. -P.708−717.
  104. Morgan J.M., Morton H.J., Parker R.C. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. — 1950. -N.73.
  105. Nagano M., Avarbock M.R., Leonida E.B., Brinster C.I., Brinster R.L. Culture of mouse spermatogonial stem cells //Tissue Cell. 1998, — V.30. -P.389−397.
  106. Nagano M., McCarrey J.R., Brinster R.L. Primate spermatogonial stem cells colonize mouse testes//Biol, of Reprod. -2001. V.64. — P.1409−1416.
  107. Oakberg E.F. Spermatogonial stem cell reneval in the mouse //Anat. Rec. -1971. V.169. — P.515−532.
  108. Oakberg E.F., Huckins C. Spermatogonial stem cell renewal in the mouse as revealed by H3-thymidine labeling and irradiation //In: Stem cells of renewing cell populations. Ed. A.B. Cairnie et all. N.Y.etc. /Acad. Press. -1976. -P.287−302.
  109. Ogawa Т., Arechaga J.M., Avarbock M.R., Brinster R.L. Transplantation of testis germinal cells into mouse seminiferous tubules //Int. J. Dev. Biol. -1997. -V.41(l).-P.l 11−122.
  110. Pari G.A. Uber die verwandbarkeit vitaler Karmineinspritzungen fur die pathologische Anatomie //Frankfurt. Ztschr Pathol. 1910. — B.4. — S. l-20.
  111. Pelt A.M.M. van., Morena A.R., Lissel-Emiliani F.M.F. van., Boitani t, Gaemers I.C., Rooij D.G. de, Stefanini M. Isolation of the synchronized A spermatogonia from adult vitamin A-deficient rat testes //Biol. Reprod. -1996. V.55. -P.439−444.
  112. Potter H. Molecular genetic applications of electroporation //In: Electroporation & electrofusion in cell biology /Press. New York & London. 1989. -P.331−341.
  113. Pursel, V.G., Pinkert, C.A., Miller, K.F., Bolt, D.J., Campbell, R.G., Palmiter, R.D., Brinster, R.L., Hammer, R.E. Science. 1989. — V.244. -P.1281−1288.
  114. Rassoulzadegan M., Binetruy В., Gusin F. High frequency of gene transfer after fusion between bacteria and eukaryotic cells //Nature. 1982. — V.295.- P.257−259.
  115. Reis M.M., Tsai M.C., Schlegel P.N., Feliciano M., Raffaelo R., Rosenwaks Z., Palermo D. Xenogeneic transplantation of human spermatogonia //Zygote. 2000. — V.8. — P.97−105.
  116. Ribbert M. Die Abschidung intravenous injizierten gelosten Karmins in den Geweben //Ztschr. Allgem Physiol. 1904. — B.4. — S.201−214.
  117. Robertson E.J. Using embryonic stem cell to introduce mutations into the mouse germ line //Biol. Reprod. 1991. — V.44. — P.238−245.
  118. Romrell I. et al. Separation of mouse spermatogenic cells by sedimentation velocity. Morphological characterization //Developmental Biology. 1976.- V.49(l).-P.119−131.
  119. Rooij D.G. de, Grootegoed J.A. Spermatogonial stem cells //Curr. Opin. Cell Biol. 1998. — V. l0. — P.694−701.
  120. Rooij D.G. de. Transplantation of spermatogonial stem cells. 2002.
  121. Roosen-Runge E.C. The Process of spermatogenesis in Animals //Cembridge Univ. Press. 1977.
  122. Rose J.K., Buonocore L. and Whitt M.A. A new cationic liposome reagent mediating nearly quantitative transfection of animal cells //Biotechniques. -1991. V.10. -P.520−525.
  123. Rossi P., Dolci S., Albanesi C., Ricca R., Geremia R. Follicle-stimulating hormone induction of steel factor (SLF) mRNA in mouse Sertoli cells andstimulation of DNA synthesis in spermatogonia by soluble SLF //Dev. Biol. 1993. — V.155. -P.68−74.
  124. Rossi P., Marziali G., Albanesi C., Charlesworth A., Geremia R., Sorrentino V. A novel c-kit transcript, potentially encoding a truncated receptor, originates within a kit gene intron in mouse spermatids //Dev. Biol. 1992. — V.152. — P.203−207.
  125. Russel L.D., Ettlin R.A., Hikim A.P., Clegg E.D. Histological and Histopathological Evoluation of the Testis //Cache River Press, Gearwater, FL. 1990.-P. 1−40.
  126. Russell L.D., Franca L.R., Brinster R.L. Ultrastructural observations of spermatogenesis in mice resulting from transplantation of mouse spermatogonia//J. Androl. 1996. — V.17(6). — P.603−614.
  127. Ruysschaert J.-M., Ouahabi A., Willeaume V. A novel cationic amphiphile for transfection of mammalian cells //Biochem. and Bioph. Res. Comm. -1994. V.203(3). — P.1622−1628.
  128. Savchenkova I.P., Korgikova S.V., Kostereva N.V., Tchaban I.M., Ernst L.K. Culture and transplantation of spermatogonial stem cells 111 th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production. Montpellier, France. -2002. -P.836−840.
  129. Seidel G. Embryo transfer: the next 100 years //Theriogenology. 1991. -V.35(l). — P.171−180.
  130. Seidel G. Production of genetically identical sets of mammals: Cloning //J.Exp. Zool. 1983. — V.2. — P.228.
  131. Smithies, O. Trends Genet. 1993. — V.9. — P. 112−116.
  132. Soprano K.J. Use of cloned SV40 DNA fragments to study signals for cell proliferation //In: Recombinant DNA and Cell Proliferation. 1984. — P.4−6.
  133. Sorokin L.M., Morgan E.H., Yeoh G.C. et al. A method for infection of cultured myogenic cells with Rous sarcoma virus using polybrene //In vitro Cellular. Devel. Biol. 1989. — V.25(l). — P.63−68.
  134. Stewart C.L. Stem cells from primordial germ cells can reenter the germ line //Dev. Biol. 1994. — V.161. — P.626−628.
  135. Strelchenko N.S. Die Osnabrucker Schwarzbuntzucht. 1997. — V.3. — P.42.
  136. Swierstra E.E., Gebauer M.R., Pickett B.W. Reproductive physiology of the stallion: I. Spermatogenesis and testis composition //J. Reprod. Fertil. -1974. -V.40. -P.l 13−123.
  137. Tajima Y., Onoue H., Nishimune Y. Biologically active kit ligand growth factor by mouse Sertoli cells and is defective in Sli mutant mice //Development. 1991. — V. l 13. — P. 1031−1035.
  138. Takai T. and Ohmori H. DNA transfection of mouse lymphoid cells by the combination of DEAE-dextran-mediated DNA uptake and osmotic shock procedure //Bioch. and Biophs. Acta. 1990. — V. l048. — P. 105−109.
  139. Tan J.C., Nocka K., Ray P., Traktman P., Besmer P. The dominant W42 spoting phenotype results from a missence mutation in the c-kit receptor kinase //Science. 1990. — V.247. — P.209−212.
  140. Totzke F., Marme D., Hug H. Inducible expression of human phospholipase C-v2 and its activation by platelet-derived growth factor A-chain homodimer in transfected NIH3T3 fibroblasts //Eur. J. Biochem. 1992. -V.203. — P.633−639.
  141. Uckert W., Walther W. Retrovirus-mediated gene transfer in cancer therapy //Pharmac. Ther. 1994. — V.63. — P.323−247.
  142. Wheeler M.B. Development and validation of swine embryonic stem cells: a review //Reprod. Fertil. Dev. 1994. — V.6. — P.563−568.
  143. Wilmut I., Schnieke A.E., McWhir J. et all. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells //Nature. 1997. — V.385. — P.810−813.
  144. Wilmut, I., Hooper, M.L., Simons, J.P. J. Reprod. Fertil. 1991. — V.92. -P.245−279.
  145. Zandrum В., Shettles M.D. Diploid nuclear replacement in mature human ova with cleavage //Am J.Obstet. gyncol. 1979. — V.133. — P.222−224.
  146. Zelenin A.V., Titomirov A.V., Kolesnikov V.A. Genetic transformation of mouse cultured cells with help of high velocity mechanical DNA-injection //FEBS Letters. 1989. — V.244. — P.65−67.
  147. Zimmermann U., Riemann F., Pilwat G. Enzyme loading of electrically homogeneous human red blood cell ghosts prepared by dielectric breakdown //Biochim. Biophys. Acta. 1976. — V.436. — P.460−474.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!