Характеристика эякулята в оценке репродуктивных возможностей человека
Для оценки состояния мужской репродуктивной системы недостаточны сведения о количественном и качественном составе сперматозоидов. Целесообразно изучение показателей метаболизма в спермальной плазме и сперматозоидах. К числу перспективных направлений диагностики мужской фертильности относятся дополнительные исследования состояния хроматина сперматозоидов как носителя генетической информации… Читать ещё >
Содержание
- ГЛАВА 1. Обзор литературы
- 1. 1. Особенности метаболизма сперматозоидов на разных этапах сперматогенеза
- 1. 2. Роль спермальной плазмы в фертилизации эякулята
- ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования
- 2. 1. Характеристика обследованной группы
- 2. 2. Общеклиническое исследование эякулята
- 2. 3. Исследование количества и степени конденсации хроматина клеток эякулята методом лазерной проточной цитофлуориметрии
- 2. 4. Исследование показателей обмена спермальной плазмы и сперматозоидов
- 2. 5. Статистическая обработка результатов исследований
- ГЛАВА 3. Характеристика клеточного состава эякулята
- 3. 1. Сравнение показателей спермограммы у фертильных мужчин и обследованных по поводу бесплодия
- 3. 2. Содержание ДНК в клетках эякулята у мужчин с различной фер-тильностью
- ГЛАВА 4. Показатели метаболизма эякулята
- 4. 1. Показатели обмена в спермальной плазме и сперматозоидах фертильных доноров
- 4. 2. Метаболичекские характеристики спермальной плазмы у мужчин с различными нарушениями репродуктивной функции
- ГЛАВА 5. Взаимосвязи между характеристиками эякулята
- 5. 1. Корреляционные связи между показателями обмена спермальной плазмы и спермограммы
- 5. 2. Взаимосвязи между показателями количества и степени конденса
5.2. Взаимосвязи между показателями количества и степени конденсации хроматина и показателями обмена спермальной плазмы. 96 5.3.Оценка состояния хроматина сперматозоидов в зависимости от метаболических особенностей спермальной плазмы 104
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 108
ВЫВОДЫ 124 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 125
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Характеристика эякулята в оценке репродуктивных возможностей человека (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность исследования. В современных условиях при снижении рождаемости возможность иметь ребенка каждой семьей является важной как для общества в целом, так и для благополучия отдельного человека.
Известно что, около 15% супружеских пар страдает бесплодием, причем треть случаев приходится на мужское бесплодие (Nieslchlag Е. et al., 1997). Идиопатические нарушения функции гонад достигают 21% причин бесплодия у мужчин (Филатов О.С. с соавт., 1997). По наблюдениям ряда авторов, качество спермы за последние десятилетия падает, что заключается в уменьшении концентрации и подвижности сперматозоидов (Carlsen Е. et al., 1992; Jacques А., 1995).
Спермограмма является распространенным лабораторным исследованием состояния репродуктивной системы мужчин (Тиктинский О.Л., 1990; Пшеничникова Т. Я., 1991; Карпигценко А. И., 1998), однако существует большой межлабораторный разброс в получаемых результатах (Maison P.L., 1995), что снижает диагностическую ценность исследования (Barratt C.L., 1995).
Экспертами ВОЗ разработаны четкие стандарты для исследования эякулята (WHO, 1992), затрагивающие вопросы подготовки пациента, преданали-таческой подготовки пробы и референтные значения показателей спермо-граммы.
В литературе имеются сведения о влиянии биохимического состава спермальной плазмы на оплодотворяющую способность сперматозоидов (Николаев А.А. с соавт. 1992, 1997, 1998; Неймарк А. И. с соавт. 1998; Липатова Н. А., 1997, 1998; Lewin L.M. et al., 1993; Povoa H.J. et al., 1986; Garcia L.C. et al., 1992; Noguera J.A. et al., 1993; Rolf С. et al., 1998; Sidhu R.S. et al., 1998), однако спектр веществ, изученных в спермальной плазме ограничен.
Исследования генетического материала сперматозоидов методически недостаточно разработаны, что делает данные трудно сопоставимыми (Меле5 щенко А.Б. с соавт., 1991; Филатов М. В. с соавт., 1999; Ег^Ь Е. е! а1., 1993; Вгибу Ь. ег а!., 1996; Наскег-К1от и.В. ег а1., 1999).
Сведения о биохимическом составе эякулята и состоянии хроматина сперматозоидов носят фрагментарный характер, что не позволяет использовать их для оценки оплодотворяющей способности спермы и судить о причинах расстройства гаметогенной функции гонад у значительного числа инфер-тильных мужчин.
Цель настоящего исследования заключается в изучении метаболических и морфологических показателей спермы у мужчин с бесплодием.
Задачи исследования.
1. Изучить клеточный состав эякулята с оценкой количества сперматозоидов, их двигательной способности и морфологических особенностей.
2. Провести изучение соотношения клеток спермы по плоидности и качеству хроматина.
3. Определить некоторые параметры углеводного, белкового обменов в сперматозоидах и провести сравнительную оценку показателей метаболизма в сперматозоидах и спермальной плазме.
4. Провести корреляционный анализ между отдельными показателями обмена в сперматозоидах, спермальной плазме и морфологическими, функциональными характеристиками сперматозоидов.
5. Проследить и выявить закономерности взаимоотношений между качеством и количеством хроматина в клетках сперматогенеза различной степени зрелости и метаболическими характеристиками спермальной плазмы.
Научная новизна. Новым явилось исследование генетического материала сперматозоидов у фертильных и инфертильных мужчин модифицированным методом лазерной проточной цитофлуориметрии. При этом у мужчин с бесплодием обнаружены существенные отклонения в распределении и степени конденсации хроматина в сперматозоидах, имеющие корреляционную 6 связь с концентрацией сперматозоидов в эякуляте, что отражает глубину нарушений сперматогенеза.
Впервые изучен метаболический статус сперматозоидов по определению в них содержания глюкозы, общего белка, альбумина, мочевины, креати-нина, активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, у-глютамилтрансферазы, креатинкиназы, щелочной фосфатазы, холинэстеразы, а-амилазы.
Получены новые сведения о составе спермальной жидкости. Проведен сравнительный анализ состояния обмена в спермальной плазме и мужских гаметах. Обнаружены корреляционные связи между отдельными параметрами метаболизма, а также морфо-функциональными характеристиками сперматозоидов, их концентрацией.
Установлено, что при этиологически различных заболеваниях, приведших к бесплодию, характерным является снижение содержания кальция в спермальной плазме, увеличение вариабельности активности ферментов (креатинкиназы, холинэстеразы, щелочной фосфатазы, аспартатаминотрансферазы) и изменение формы распределения показателей, в связи с чем использованы непараметрические методы статистической обработки.
Научно-практическая значимость. Предложен новый алгоритм лабораторной диагностики мужской инфертильности. Помимо детальной спермо-граммы он включает анализ распределения и степени конденсации хроматина в сперматозоидах для оценки полноценности их генетического материала с помощью модифицированной методики лазерной проточной цитофлуоримет-рии. Для оценки выраженности обменных нарушений в самих сперматозоидах отработана методика их разрушения с помощью детергента тритона Х-100. Для выявления метаболических изменений в спермальной плазме адаптированы методики ее пред аналитической подготовки. 7.
Выделены лабораторные синдромы для оценки тяжести и прогноза мужского бесплодия, а именно:
•сочетание сниженной концентрации сперматозоидов в эякуляте с изменением их морфологии и низкой подвижностью;
•появление сперматозоидов с измененным содержанием хроматина и недостаточной его конденсацией, увеличение доли незрелых сперматозоидов, а также сперматозоидов с низким содержанием ДНК;
•значительные отклонения уровней активности ферментов и снижение концентрации кальция в спермальной плазме.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Для оценки состояния мужской репродуктивной системы недостаточны сведения о количественном и качественном составе сперматозоидов. Целесообразно изучение показателей метаболизма в спермальной плазме и сперматозоидах. К числу перспективных направлений диагностики мужской фертильности относятся дополнительные исследования состояния хроматина сперматозоидов как носителя генетической информации и компонентов семенной плазмы, отражающих состояние сперматои спермио-генеза.
2. Сравнительная оценка метаболизма сперматозоидов и спермальной плазмы, выявившая более высокий уровень в сперматозоидах общего белка, альбумина, активностей ферментов а-амилазы и более низкий уровень мочевины, креатинина, глюкозы, активностей ферментов: креатинкиназы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, у-глютамилтрасферазы. Активность лактатдегидрогеназы и холинэстеразы в сперматозоидах и спермальной плазме практически одинаковые.
3. Наличие существенных взаимосвязей между показателями метаболизма спермальной плазмы и функциональными, морфологическими характеристиками сперматозоидов. 8.
4. Характер специфических метаболических сдвигов в спермальной плазме при различной картине спермограммы у инфертильных мужчин.
5. Изменение распределения хроматина в клетках эякулята, снижение конденсации хроматина, уменьшение концентрации мужских гамет, снижение концентрации общего белка, креатинина и снижение активности щелочной фосфатазы как проявления нарушения сперматогенеза.
Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены на научно-практической конференции, посвященной 5-летию Самарского диагностического центра (Самара, 1995), научно-практической конференции «Современные диагностические технологии на службе здравоохранения» (Омск, 1998), научно-практической конференции «Факультету последипломной подготовки СамГУ — 15 лет» (Самара, 1998), научно-практической конференции, посвященной 75-летию КВД (Самара, 1999), научно-практической конференции: «Самарскому государственному медицинскому университету 80 лет» (Самара, 1999), на заседании кафедры биологической и клинической химии совместно с Самарским отделением биохимического общества (Самара, 1999).
Публикации по теме диссертации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.
Структура и объём работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на 145 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 рисунками и содержит 28 таблиц. Библиография включает 190 источников, из которых 22 отечественных и 168 зарубежных авторов.
ВЫВОДЫ.
1. По данным спермограммы мужчин с бесплодием концентрация сперматозоидов и пределах нормы — у 68%, снижена — у 24%, свыше 200 млн/мл — в 8% случаев.
2. Содержание хроматина в клетках эякулята, степень его конденсации колеблются 15 пределах нормы у 48% мужчин с инфертильностью. При бесплодии встречаются нарушения конденсации хроматина сперматозоидов и появление дополнительных пиков на гистограмме распределения ДНК клеток спермы.
3. Сравнительная оценка показателей метаболизма в сперматозоидах и спермальной плазме показала, что содержание общего белка, альбумина, активность а-амилазы в сперматозоидах выше, чем в спермальной плазметогда как содержание мочевины, креатинина, глюкозы, активность ферментов: креа-тинкиназы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, у-глютамилтрансферазы ниже в сперматозоидах, чем в спермальной плазме. Активность лактатдегидрогеназы и холинэстеразы в сперматозоидах и спермальной плазме практически одинаковые.
4. Активность лактатдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы спермальной плазмы связаны положительной коррелятивной связью с концентрацией сперматозоидов.
5. Двигательная способность сперматозоидов имеет положительную корреляционную связь с содержанием альбумина и креатинина спермальной плазмы у фертильных доноров, при бесплодии эта связь отсутствует.
6. И вменения морфологии головок сперматозоидов сочетаются с отклонениями в метаболизме спермальной плазмы у мужчин с бесплодием, а именно: снижением концентрации креатинина, активности щелочной фосфатазы и холинэстеразы спермальной плазмы.
7. Эффективность диагностики инфертильности у мужчин при нормальном количестве сперматозоидов базируется на определении характера распределения хроматина в сперматозоидах и оценке содержания белка, кальция, активности лактатдегидрогеназы, у-глютамилтрансферазы, аспартатаминотранс-феразы в спермальной плазме.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
1. Диагностическими критериями в оценки тяжести и прогноза мужского бесплодия являются следующие изменения характеристик эякулята:
• сочетание сниженной концентрации сперматозоидов в эякуляте с изменением морфологии их головок, шеек, хвостов и низкой подвижностью;
• обнаружение сперматозоидов с измененным содержанием хроматина и недостаточной его конденсацией, увеличение доли незрелых сперматозоидов, а также сперматозоидов с низким содержанием ДНК;
• значительные отклонения уровней активности ферментов лактатдегидрогеназы, креатинкиназы, у-глутамилтрансферазы, аспартатаминотранс-феразы и концентрации кальция в спермальной плазме.
2. Для оптимизации диагностики различных форм мужской инфертильности в целях выработки патогенетически обоснованной тактики лечения и оценки возможности использования собственного генетического материала для экстракорпорального оплодотворения предлагается:
• детальное изучение спермограммы для выявления неблагоприятных признаков: снижения концентрации сперматозоидов, подвижности и доли морфологически полноценных сперматозоидов;
• анализ распределения и степени конденсации хроматина в сперматозоидах для оценки полноценности их генетического материала с помощью проточной цитометрии ДНК клеток эякулята;
• изучение метаболических показателей спермальной плазмы: уровня общего белка, креатин и на, кальция, активностей лактатдегидрогеназы, аспартатаминотрансферазы, у-глутамилтрансферазы, изменение которых сочетаются со снижением оплодотворяющей способности сперматозоидов.
Список литературы
- Активность ферментов спермоплазмы в эякулятах различной фертиль-ности / A.A. Николоаев, Д. Л. Луцкий, В. А. Бочановский, Л. В. Ложкина // Урол. нефрол. 1997. — N5. — С.35 — 39.
- Артифексов С.Б. Андрологические аспекты бесплодного брака // Урол. нефрол. 1996. — N4. — С.39−41.
- Биология развития млекопитающих. Методы: Пер с англ./ Под ред. М. Манк. М.: Мир. 1990. 406 с.
- Гласс Дж., Стенли Дж. Статистические методы в педагогике и психологии (пер. с англ. Л. И. Хайрусовой под ред. Ю.П. Адлера). М.: Прогресс, 1976.-496 с.
- Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. Л.: Медицина, 1978. — 296 с.
- Евдокимов В.В., Фыонг В. Т., Орлова Е. В., Ерасова В. И. Антигены эякулята при патологических процессах в репродуктивной системе и нарушениях сперматогенеза // Материалы IV Всесоюзного съезда урологов. Москва, 1990. — С. 361.
- Кендалл М. Методы ранговой корреляции. М.: Статистика, 1974.168с.
- Липатова H.A., Раков С. С., Морозова В. Т. Белковые маркеры спермоплазмы в лабораторной диагностике бесплодия при воспалительных и невоспалительных заболеваниях мужской репродуктивной системы // Клиническая лабораторная диагностика. 1997.- № 5. — С.40 -41.
- Липатова H.A., Раков С. С., Морозова В. Т. Исследование белков спермоплазмы у больных с воспалительными заболеваниями мужской репродуктивной системы // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. — № 9. -С.40.128
- Ю.Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии / Под ред. А. И. Карпищенко. Санкт-Петербург: Интермедика, 1998. — 408 с.
- П.Мелещенко А. Б., Кравцов A. JL, Ледванов М. Ю. Проточная цитоф-люориметрия сперматозоидов человека// Лабораторное дело. 1991. — N2. — С. 25 -27.
- Неймарк А.И., Фидркин A.B., Алиев Р. Т. Изменение уровня энзимов спермы у мужчин с бесплодием // Урол. нефрол. 1998. — № 2. — С.44 — 45.
- Николаев A.A., Луцкий Д. Л., Ложкина Л. В. Белковый спектр эякуля-тов различной фертильности // Урол. нефрол. 1992. — № 2. — С.48 — 51.
- И.Николаев A.A., Луцкий Д. Л., Николаева H.H. Обмен железа и неге-миновых ферропротеинов в эякулятах различной фертильности // Урол. нефрол., 1998 № 5. — С.27 — 31.
- Пашков A.B. Ультрамикрометод определения фруктозы в сперме // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. — N9. — С.38.
- Пчелкина З.М., Фыонг И. Т., Евдокимов В. В. Определение слюнос-пермального глобулина при нарушениях сперматогенеза // Материалы IV Всесоюзного симпозиума с международным участием «Иммунология репродукции» .- Киев, 1990.-С. 81.
- Пшеничникова Т.Я. Бесплодие в браке. М. Медицина. 1991. 320 с.
- Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике. Под ред. М. А. Базарновой. К.: Выща школа, 1988. — 318 с.
- Руководство по андрологии / Под ред. О. Л. Тиктинского. Л.: Медицина, 1990.-416 с.
- Сексопатология: Справочник / Под ред. Г. С. Васильченко. М.: Медицина, 1990. — 576с.
- Татаринов Ю.С., Олиференко Г. А., Петрунин Д. Д. Альфа 2- микроглобулин фертильности // Успехи совр. биологии. 1985. — Т. 100, вып. 3. — С.129 465 472.
- Afzelius B. A. Genetical and ultrastructural aspects of the immotile-cilia syndrome // Am. J. Hum. Genet. -1981. Y. 33. — P. 852−864.
- Afzelius B. A., Eliasson R. Male and female infertility problems in the immotile-cilia syndrome // Eur. J. Respir. Dis. Suppl. 1983. — V. 127. — P. 144−147.
- Ahmad K., Naz R. K. Effects of human antisperm antibodies on development of preimplantation embryos // Arch. Androl. 1992. — V.29. — P.9−20.
- Aitken R.J., Clarkson J.S. Significance of reactive oxygen species and antioxidants in defining the efficacy of sperm preparation techniques // Journal of An-drology. 1988. V. 9. — N6. — P.367−376.
- Alkaline phosphatase in human semen: an investigation using enzyme inhibitors and gel electrophoresis / L.M. Lewin, R. Golan, Y. Soffer et al. // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1993. -N12. — P.811−814.
- J.S.Armstrong, M. Rajasekaran, W.J.Hellstrom, S.C. Sikka // J. Androl. 1998. -V.19, N4. — P.412−419.
- Apparent doubling in the frequency of undescended testes in England and Wales / C. P. Chilvers, M.C. Forman, D. Fogelman, K. Wadsworth // Lancet. -1984. N2. — P. 330−332.
- Ascorbic acid protects against endogenous oxidative DNA damage in human sperm / C.G. Fraga, P.A. Motchnik, M.K. Shigenaga et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences. 1991. — V.88. — P. 11 003−11 006.
- Ballachey B.E., Hohenboken W.D., Evenson D.P. Sperm head morphology and nuclear chromatin structure evaluated by flow cytometry in a diallel cross in mice // Can. J. Genet. Cytol. 1986. — V.28. — P.954−966.
- Barratt C.L.R. On the accuracy and clinical value of semen laboratory tests // Hum. Reprod. 1995. — N 10. — P. 250−252.
- Buitrago J.M., Diez L.C., Battaner E. Human semen aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase activity in male fertility studies // Andrologia.1981. V. 13, N4. P. 335−341.
- Buonaguidi A., Mondina R., Polvani F. Prospectives of the study of seminal fluid in the diagnosis of infertility // J. Biol. Chem. 1996. — V.271. — P.32 159−32 167.
- Calvin H. I., Bedford J. M. Formation of disulfide bonds in the nucleus and accessory structures of mammalian spermatozoa during maturation in the epididymis // J. Reprod. Fertil. 1971. V. 13. -P.65−75.
- Characterization of a sperm-specific monoclonal antibody and isolation of 95-kilodalton fertilization antigen-2 from human sperm / R.K. Naz, C. Morte, V. Garcia-Framis et al. //Biol. Reprod. 1993. — V.49. — P. 1236−1244.
- Cicero T.J., Bell R.D. Ethanol induced reductions in testicular steroidogenesis: Major differences between in vivo and in vitro approaches // Steroids.1982.-V. 40. -N5.-P. 561−568.131
- Correlation of sperm motility with mitochondrial enzymatic activities / E. Ruiz-Pesini, C. Diez, A.C. Lapena, et al. // Clin. Chem. 1998. — V.44, N8. — P. 16 161 620.
- Creatine kinase activity in human spermatozoa and seminal plasma lacks predictive value for male fertility in in vitro fertilization / C. Rolf, H.M. Behre, T.G. Cooper et al. // Fertil. Steril. 1998. — V.69, N4. — P.727−734.
- Dadoune J.P. The nuclear status of human sperm cells // Micron 1995. -V. 26 -N4. P. 323−345.
- Daltero S., Badre F. Cannabinoids in mice: effects on fertility and spermatogenesis // Science. 1982. — V. 216, P. 315−316.
- Daltero S., Bartke A., Mayfield D. D9-tetrahydrocannabinol increases plasma testosterone concentration in male mice // Science. -1981. -V. 213. P. 581 583.
- Darzynkiewicz Z., Crissman H. Methods in cell biology // Flow Cytometry. University of California, 1990. V.33.
- Decline in Semen Quality among Fertile Men in Paris during the Past 20 Years / J. Auger, J.M. Kunstmann, F. Czyglik, P. Jouannet // New Engl. J. Med. -1995. -V. 332, N. 5. P. 281−285.
- Demonstration of antispermatozoal antibodies in varicocele related infertility with an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) / J. Golomb, N. Vardi-non, Z.T. Homonnai et al. // Fertil. Steril. 1986. — V. 45. P. 397 -401.
- DNA flow cytometry of left and right testes in normospermic patients affected by left varicocele / G. Bonanni, A. Calcagno, G. Mammana et al. // Hum. Reprod. 1997. -Nl. — P. 64−67.132
- DNA organization in human spermatozoa / J.G. Barone, J. De Lara, K.B. Cummings, W.S. Ward//J. Androl. 1994. — V.15, N2. — P. 139−144.
- Drudy L., McCaffrey M., Mallon E. Spermatozoal DNA flow cytometry and recurrent miscarriage // Arch. Androl. 1996. — V.37, N3. -P.143−147.
- Dubin L., Amelar R.D. Etiologic factors in 1294 consecutive cases of male infertility// Fertil. Steril. 1971. — Y. 22. — P. 469.
- Effect of lipid peroxidation on beating frequency of human sperm tail / C.Y. Hong, M.F. Lee, L.J. Lai, C.P. Wang // Andrologia. 1994. — V.26, P.61−65.
- Eliasson R., Virji N. LDH-C4 in human seminal plasma and its relationship to testicular function. II. Clinical aspects // Int. J. Androl. 1985. —N1 — P. 201 214.
- Engh E., Scholberg A., Clausen O.P. DNA flow cytometry of sperm from normozoospermic men in barren couples and men of proven fertility. Int. J. Fertil. Menopausal Stud. 1993. — Y.38, N5. — P. 305−310.
- Enzyme and hormonal markers in the differential diagnosis of human azoospermia / L.C. Garcia Diez, P.F. Esteban Ruiz, E. Villar // Arch. Androl. 1992. -V. 28, N3. — P. 181−194.
- Evenson D.P., Baer R.K., Jost L.K. Flow cytometric analysis of rodent epididymal spermatozoal chromatin condensation and loss of free sulfhydryl groups // Mol. Reprod. Dev. 1989. — V. 1. — N4. — P.283−288.
- Evidence for decreasing quality of semen during past 50 years / E. Carlsen, A. Giwercman, N. Keiding, N.E. Skakkebaek // B.M.J 1992. — N9. — P.609−613.
- Experience with the determination of LDH-X in seminal plasma as diagnostic and prognostic factor in varicocele / A. Buonaguidi, M. Grasso, C. Lania et al. // Arch. Esp. Urol. 1993. — V. 46, N1. — P. 35−39.
- Farghali H., Williams D.S., Gavaler J. Effect of short-term ethanol feeding on rat testes as assessed by 31P NMR spectroscopy, 1H NMR imaging, and biochemical methods //Alcohol. Clin. Exp. Res. 1991. — N15. — P. 1018−1023.
- Forejtek P., Navratil S. Relation between aspartate aminotransferase (AST) activity in the seminal fluid and indicators of boar ejaculate quality // Vet. Med. (Praha) 1984. — V.29. — N4. — P. 217−222.
- Fraser L. R., Mclntyre K. Calcium channel antagonists modulate the acro-some reaction but not capacitation in mouse spermatozoa // J. Reprod. Fertil. 1989 — V. 86. — P. 223−233.
- Fraser L.R. Fertilization promoting peptide: an important regulator of sperm function in vivo? // Rev. Reprod. 1998. — N3. — P. 151−154.
- Gagnon C., Iwasaki, A., Lamirande, E.D. Reactive oxygen species and human spermatozoa // Annals of the New York Academy of Sciences. 1991. -V.637. — P. 436−444.
- Garner D.L., Johnson L.A. Viability assessment of mammalian sperm using SYBR-14 and propidium iodide // Biol. Reprod. 1995. — V.53, N2. — P.276−284.
- Garner D.L., Thomas C.A., Allen C.H. Effect of semen dilution on bovine sperm viability as determined by dual-DNA staining and flow cytometry // J. An-drol. 1997. -V.18, N3. — P.324−331.
- Gender-specific glycosylation of human glycodelin affects its contraceptive activity / H.R. Morris, A. Dell, R.L. Easton et al. // Minerva Ginecol. 1991. -V.43, N11. -P.499−503.
- Gershbein L.L., Thielen D.R. Enzymatic and electrolytic profiles of human semen // Prostate. 1988. -V.12, N3. — P. 263−269.
- Glander H.J., Kratzsch J., Weisbrich C. Insulin-like growth factor-I and alpha.2-macroglobulin in seminal plasma correlate with semen quality // Hum. Reprod. 1996. — V.ll. -Nil. — P.2454−2460.134
- Glucose in human semen/ H. J. Povoa, J.J. Bastos, M.E. Silva et al. // Biomed. Biochim. Acta. 1986. — V.45, N5. — P.685−686.
- Glycodelin from seminal plasma is a differentially glycosylated form of contraceptive glycodelin-A / H. Koistinen, R. Koistinen, A. Dell et al. // Mol. Hum. Reprod. 1996. — V.2, N10. — P.759−765.
- Gonzales G.F., Garcia-Hjarles M.A., Guitierrez R. The secretor activity of seminal vesicles and its relationship with sperm motility: effects of infections in the male reproductive tract // Int. J. Androl. 1989. — N 12. — P. 286−294.
- Gonzales G.F., Kortebani G., Mazzolli A.B. Hyperviscosity and hypo-function of the seminal vesicles // Arch. Androl. 1993. — V. 30. — N1. — P.63−68.
- Gopalkrishnan K., Hinduja I.N., Kumar T.C. Volume of semen as a parameter of its quality // Indian J. Med. Res. 1992. — V. 96. — P.361−365.
- Gopalkrishnan K., Padwal V., D’Souza S., Shah R. Severe asthenozoo-spermia: a structural and functional study // Int. J.Androl. 1995. — V.18. — N1. -P.67−74.
- Hacker-Klom U.B., Gohde W., Nieschlag E. DNA flow cytometry of human semen //Hum. Reprod. 1999. — V.14. — N10. — P.2506−2512.
- Halliwell B. Reactive oxygen species in living systems: source, biochemistry, and role in human diseases // Amer. J. Med. 1991. — V.9. — P. 14−22.
- Haugan T.B., Grotmol T. PH of human semen // Int. J. Androl. 1998. -N2. — P. 105 — 108.
- Hershlag A., Cooper G. W., Benoff S. Pregnancy following discontinuation of a calcium channel blocker in the male partner // Hum. Reprod. 1995 -N10. -P. 599−606.
- Huaijin C., Junyan Z., Naiguan C. Prostatic fluid and sperm examination: 106 cases. Preliminary study on infertility // Acta. Urol. Belg. 1998. — V. 66, N1. -P. 19−21.
- Hull M.G.R. Infertility treatment: relative effectiveness of conventional135and assisted conception methods // Hum. Reprod. 1992. — N7. — 785−796.
- Human male infertility may be due to a decrease of protamine P2 content of sperm chromatin / I.A. Belokopitova, E.I. Kostyleva, A.N. Tomilin, V.I. Vorobev // Mol. Reprod. Dev. 1993. -V34. — P.53−57.
- Jager S., Wijchman J., Kremer J. Studies on the decondensation of human, mouse, and bull sperm nuclei by heparin and other polyanions // J. Exp. Zool. -1990. V.256, N3. — P.315−322.
- Javed A. A., Naz R. K. Human cleavage signal-1 protein: Molecular cloning, transcription and immunological analysis of in vitro translated protein // Gene.- 1992. V.112. — P. 205−211.
- Jeulin C., Lewin L.M. Role of free L-carnitine and acetyl-L-carnitine in post-gonadal maturation of mammalian spermatozoa // Hum. Reprod. Update.1 361 996. -N2. -P.87−102.
- Jones R.C., Murdoch R.N. Regulation of the motility and metabolism of spermatozoa for storage in the epididymis of eutherian and marsupial mammals // Reprod. Fertil. Dev. 1996. — V.8. — N4. — P.553−568.
- Keltimlidis K., Papadimas J., Bontis J. LDH isoenzymes in semen of infertile men // Arch. Androl. 1989. — V.22, N1. — P. 77−84.
- Kulikauskas V., Blaustein D., Ablin R.J. Cigarette smoking and its possible effects on sperm // Fertil. Steril. 1985. — V. 44 — P. 526−528.
- Kumar G.P. Lipid phase transitions and a possible lipid-protein lattice structure as an activity regulator in maturing spermatozoa. // Biochem. Mol. Biol. Int. 1993.-V.29, N6. — P.1029−1038.
- Kung A.W., Ho P.C., Wang C. Seminal leucocyte subpopulations and sperm function in fertile and infertile Chinese men // Int. J. Androl. 1993.- V. 16.-N3. — P. 189- 194.
- OO.Labby D.H. / Current obstetric and gynaecologic diagnosis and treatment //Lang. California, 1982. — P. 486−501.
- Lactic dehydrogenase-C4 activity in seminal plasma and male infertility / J.A. Noguera Velasco, I. Tovar Zapata, P. Martinez Hernandez et al. // Fertil. Steril. 1993. -V. 60, N2. — P. 331−335.
- Laudat A., Foucault P., Palluel A.M. Relationship between seminal LDH-C4 and spermatozoa with acrosome anomalies // Clin. Chim. Acta. 1997. — V. 265, N2. — P. 219−224.
- Leiva S., Loyola M., Agar A.M. Evaluation of DNA/protein status and nuclear maturity of human sperm // Cytobios. 1994. V.78. — P.7−18.
- Leyton L., Saling P. 94 kD sperm proteins bind ZP3 and serve as tyrosine kinase substrates in response to zona binding// Cell. 1989. — V.57. — P. 1123−1130.
- Liu D. Y., Baker H. W. inhibition of acrosin activity with a trypsin inhibitor blocks human sperm penetration of the zona pellucida // Biol. Reprod. -1993. N48.-P. 340−348.
- MacLeod J. Seminal Cytology in the presence of varicocele // Fertil. Steril. 1965. — V.16. — P.735 -740.
- MacLeod J. Further observations on the role of varicocele in human male infertility// Fertil. Steril. 1969. — V. 20. — P. 545 — 548.
- Male reproductive tract sensitivity to ethanol: A critical overview /R.A. Anderson, B.R. Willis, C. Oswald, L.J.D. Zaneveld // Pharmacol. Biochem. Behaviour. 1983. -V.18. — P. 305−310.
- Male reproductive toxity of lead in animals and human. ASCLEPIOS study group / P. Apostoli, P. Kiss, S. Porra et al. // Occup. Environ. Med. 1998. -V.55, № 6-P. 364−374.
- Matson P.L. External quality assessment for semen analysis and sperm antibody detection: results of a pilot scheme // Hum. Reprod. 1995. N10. — P. 620 625.
- Maxwell W.M., Welch G.R., Johnson L.A. Viability and membrane integrity of spermatozoa after dilution and flow cytometric sorting in the presence or absence of seminal plasma // Reprod. Fertil. Dev. -1996. N8. — P. l 165−1178.
- McLean D.J., Jones L.G., Froman D.P. Reduced glucose transport in138sperm from roosters (Gallus domesticus) with heritable subfertility // Biol. Reprod. -1997. V.57, N4. — P.791−795.
- Measurement of seminal LDH-X and transferrin in normal and infertile men / C. Orlando, R. Casano, A.L. Caldini et al. // J. Androl. 1988. -N3. — P. 220−223.
- Mendelson J.H., Mello N.K., Ellignbee E.J. Effects of acute alcohol intake on pituitary-gonadal hormones in normal human males // J. Pharmacol. Exp. Therap. 1976. — V. 202. — P. 676−682.
- Moilanen J., Hovatta O., Lindroth L. Vitamin E levels in seminal plasma can be elevated by oral administration of vitamin E in subfertile men // Int. J. Androl. 1993. — V.16. -P.165−166.
- Mortimer D. Practical Laboratory Andrology // Oxford University Press. -New York, 1994. 120 p.
- Mortimer D. The male factor in infertility. Part I. Semen analisis // Curr. Probl. Obstet. Gynecol. Fertil. 1985. — N 8. — P.3−87.
- Mortimer D., Bramley T.A. Glutamic-oxalacetic transaminase leakage from human spermatozoa as an indicator of cryodamage // Arch. Androl. 1981. -N6. — P. 337−341.
- Mortimer D., Johnson A.V., Long-Simpson L.K. Glutamic-oxaloacetic transaminase isozymes in human seminal plasma and sperm extracts // Int. J. Fertil. -1988. V.33, N4. — P. 291−295.
- Mortimer S.T., Swan M.A., Mortimer D. Effect of seminal plasma on ca-pacitation and hyperactivation in human spermatozoa // Hum. Reprod. 1998. — N8. — P.2139−2146.
- Moser W, Pratt W. National Center for Health Statistics: fecundity and infertility in the United States, 1965−1988. Advance data from vital and health statistics. No. 192. Hyattsville, Md.: Public Health Service, 1990. P.121−126.
- Mundy A.J., Ryder T.A., Edmonds D.K. Asthenozoospermia and the hu139man sperm mid-piece // Hum. Reprod. 1995. — V.10, N1. — P. 116−119.
- Nakamura M., Okinaga S., Arai K. Studies of metabolism of round spermatids: glucose as unfavorable substrate // Biol. Reprod. 1986. — V.35, N4. -P.927−935.
- Naz R. K. Effects of antisperm antibodies on early cleavage of fertilized ova//Biol. Reprod. 1992. — V.46. — P.130−139.
- Naz R. K., Brazil C., Overstreet J. Effects of antibodies to sperm surface fertilization antigen-1 on human sperm-zona pellucida interaction // Fertil. Steril. -1992. V.57. — P.1304−1310.
- Naz R. K., Sacco A. G., Yurewicz E. C. Human spermatozoal FA-1 binds with ZP3 of procine zona pellucida // J. Reprod. Immunol. 1991. — V.20. — P. 43−58.
- Neischlag E., Behre H. Andrology: Male reproductive health fnd disfunction. Springer. Berlin 1997.
- Organization of SCP1 protein molecules within synaptonemal complexes of the rat / K. Schmekel, R.L. Meuwissen, A.J. Dietrich et al. // Exp. Cell Research. 1996.-V. 226.-P. 20−30.
- Oscillations in intracellular free calcium induced by spermatozoa in human oocytes at fertilization / C.T. Taylor, Y. M. Lawrence, C.R. Kingsland et al. // Hum. Reprod. 1993. — N8. — P.2174−2179.
- Palmblad J., Mossberg B., Afzelius B. A. Ultrastructural, cellular, and clinical features of the immotile cilia syndrome // Annu. Rev. Med. — 1984. — V.35. -P. 481−492.
- Patel S.M., Skandhan K.P., Mehta Y.B. Seminal plasma fructose and glucose in normal and pathological conditions // Acta Eur Fertil. 1988. — N6. — P.329−332.
- Pedron N. Cholinesterase activity of seminal plasma and human spermatozoa in normal and infertile subjects // Arch. Androl. 1983. — V.10, N3. — P. 249−251.140
- Perreault S. D., Wolff, R.A., Zirkin, B. R. The role of disulfide bond reduction during mammalian «sperm decondensation in vivo // Devel. Biol. 1984. -V.125. — P.181 — 186.
- Perreault S.D., Barbee R.R., Elstein K.H. Interspecies differences in the stability of mammalian sperm nuclei assessed in vivo by sperm microinjection and in vitro by flow cytometry // Biol. Reprod. 1988. — V.39. — P. 157−167.
- Perreault, S. D., Barbee R. R., Slott V. L. Importance of glutathione in the acquisition and maintainance of sperm nuclear decondensing activity in maturing hamster oocytes//Devel. Biol. 1988. — V.125. — P. 181 — 186.
- Population study of causes, treatment and outcome of infertility / M.G.R. Hull, C.M.A. Glazener, N.J. Kelly et al. // Br. Med.J. 1985. P. 1693−1697.
- Presence of endogenous nicks in DNA of ejaculated human spermatozoa and its relationship to chromomycin A3 accessibility / G.C. Manicardi, P.G. Bian-chi, S. Pantano et al. // Biol. Reprod. 1995. — V.52, N4. — P.864−867.
- Purification of an acrosomal antigen recognized by a monoclonal antibody and antifertility effects on isoimmune serum / M.S. Liu, Y. Yang, J. Pan et al. // Int. J. Androl. 1989. — N12. — P.451- 463.
- Raber N.M., Barloge R. DNA Flow Cytometry of Human Solid Tumors // Flow Cytometry and Sorting. 2nd ed, New York: Wiley-Liss, Inc, 1990. P. 745 — 754.141
- Recombinant human zona pellucida protein ZP3 produced by Chinese hamster ovary cells induces the human sperm acrosome reaction and promotes sperm-egg fusion / M. Duin, J. E. Polman, I. T. De Breet et al. // Biol. Reprod. -1994. -V.51. P.607−617.
- Relationship between abnormal sperm chromatin packing and IVF results / M.V. Filatov, E.V. Semenova, O.A. Vorob’eva et al. // Mol. Hum. Reprod. 1999. — N9. — P.825−830.
- Relationship between creatine kinase levels and clinical diagnosis of infertility / R.S. Sidhu, J. Hallak, R.K. Sharma et al. // J. Assist. Reprod. Genet. -1998. V.15, N4. — P.188−192.
- Riley R.S., Mahin E.J. DNA analisis // Flow Cytometry. Clinical applications. ASCP National Workshop N9072. ASCP National Meeting, Washington, D.C. 1989. — P. 63 -108.
- Rodriguez H., Ohanian C., Bustos-Obregon E. Nuclear chromatin decondensation of spermatozoa in vitro: a method for evaluating the fertilizing ability of ovine semen // Int. J. Androl. 1985. — V.8. — N2. — P.147−158.
- Rodriguez H., Ohanian C., Bustos-Obregon E. Nuclear chromatin decondensation of spermatozoa in vitro: a method for evaluating the fertilizing ability of ovine semen // Int. J. Androl. 1985. — N2. — P.147−158.
- Sakkas D., Manicardi G., Bianchi P.G. Relationship between the presence of endogenous nicks and sperm chromatin packaging in maturing and fertilizing mouse spermatozoa//Biol. Reprod. 1995.-V.52, N5. — P.1149−1155.
- Saypol D.C. Varicocele//J. Androl. 1981. — N 2. — P. 61 — 65.
- Schoysmn R., Gerris J. Twelve-year-up study of pregnancy rates in 1291 couples wiht idiopathically impathically impaired male fertility // Acta Eur. Fertil. -1983.-N14.-P. 51−56.
- Shapiro H.M. Practical Flow Cytometry: parameters and probes. Second edition. New York: AlanLiss, 1988. P. 133 — 164.142
- Sidhu R.S., Sharma R.K., Agarwal A. Relationship between creatine kinase activity and semen characteristics in subfertile men // Int. J. Fertil. Womens Med. 1998. — V. 43. — N4. — P. 192−197.
- Sikka S., Rajasekaran M., Hellstorm W. Role of oxidative stress and antioxidants in male infertility // J. Androl. 1995. — N16. — P. 464 — 468.
- Sperm capacitation in humans is transient and correlates with chemotactic responsiveness to follicular factors / A. Cohen-Dayag, I. Tur-Kaspa, J. Dor et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. 1995. — V.92. — P. l 1039−11 043.
- Sperm creatine kinase activity in normospermic and oligozospermic Hungarian men / A. Gergely, J. Szollosi, G. Falkai et al. // J. Assist. Reprod. Genet. -1999. V.16, N1,-P. 35−40.
- Sperm motility and AFP content in seminal hyperviscosity / G.R. Men-deluk, M.J. Munuce, C. Carizza et al. // Arch Androl. 1997. -V.39, N3. — P.223−227.
- Speroff L., Glass R.H., Kase N.G. Clinical Gynecologic Endocrinology and Infertility. Williams & Wilkins, Baltimore, 1989. 345 p.
- Stewart B.H. Varicocele in infertility: incidence and results of surgical therapy // J. Urol. 1974. — V. l 12 — P. 222 -228.
- Structural analysis of the oligosaccharides derived from glycodelin, a human glycoprotein with potent immunosuppressive and contraceptive activities / A. Dell, H.R. Morris, R.L. Easton et al. // J. Biol. Chem. 1995. V. 270, N41. — P. 24 116−24 126.
- Studies on the origin of redox enzymes in seminal plasma and their relationship with results of in-vitro fertilization / C.H. Yeung, T.G. Cooper, M. De143
- Geyter et al. // Mol. Hum. Reprod. 1998. — N9. — P. 835−839.
- Tesarik J. Appropriate timing of the acrosome reaction is a major requirement for the fertilizing spermatozoon // Hum. Reprod. 1989. — N4. — P. 957 961.
- Tesarik J. Oocyte activation after intracytoplasmic injection of mature and immature sperm cells. Hum. Reprod. — 1998. — N13. — Suppl. 1 — P.117−127.
- Tesarik J., Sousa M., Testart J. Human oocyteactivation after intracytoplasmic sperm injection // Hum. Reprod. 1994. — N9 — P.5 11−518.
- The effect of calcium ion channel blockers on sperm fertilization potential / S.G. Benoff, W. Cooper, I. Hurley et al. // Fertil. Steril. 1994. — V. — 62. — P. 606 617.
- The removal of morfologically abnormal sperm forms by phagocytes: a positive role for seminal leukocytes? / M.J. Tomlinson, A. White, C.L. Barratt et al. // Hum. Reprod. 1992. — N4. — P. 517−522.
- The routine assessment of sperm motility at room temperature and 37 °C / A.G. Birks, H. Izzard, D.R. Morroll et al. // Int. J. Androl. 1994. — V. 17, P. 289 291.
- Thiele J.J., Freisleben H.J., Fuchs J Ascorbic acid and urate in human seminal plasma: determination and interrelationships with chemiluminescence in washed semen//Hum. Repr. 1995. V. 10, N1. — P. 110−115.
- Total antioxidant capacity of seminal plasma is different in fertile and infertile men / S. Lewis, P.M. Boyle, K.A. McKinney // Fertility and Sterility. 1995. V.64, N4. — P. 868−870.
- Treatment of human spermatozoa with seminal plasma inhibits protein tyrosine phosphorylation / C.N. Tomes, R. Carballada, D.F. Moses et al. // Mol. Hum. Reprod. 1998. — V.4,N1.-P.17−25.
- Tyler J.P., Crockett N.G., Driscoll G.L. Studies of human seminal para-netries with frequent ejaculationl. Clinical characteristics // Clin. Reprod. Fertil.1 441 982. -N 1. P.273−285.
- Urch U. A., Wardrip N. J., Hedrick J. L. Proteolysis of the zona pellucida by acrosin: the nature of the hydrolysis products // J. Exp. Zool. -1985. V. 236. — P. 239−243.
- Viability assessment of turkey sperm using fluorescent staining and flow cytometry / A.M. Donoghue, D.L. Garner, D.J. Donoghue, L.A. Johnson // Poult. Sci. 1995. — V.74, N7. — P.1191−1200.
- Virji N. LDH-C4 in human seminal plasma and its relationship to testicular function. I. Methodological aspects // Int. J. Androl. 1985. — N1. — P. 193 200.
- Virji N., Eliasson R. LDH-C4 in human seminal plasma and testicular function. III. Relationship to other semen variables // Int. J. Androl. 1985. — N10. -P. 376−384.
- Ward W. S., Coffey D. S. DNA packaging and organization in the mammalian spermatozoa: comparison with somatic cells // Biol. Reprod. 1991. — V.44. -P.569 — 574.
- Ward W.S. Deoxyribonucleic acid loop domain tertiary structure in mammalian spermatozoa // Biol. Reprod. 1993. — V.48. — P. 1193 — 1201.
- Watanabe Y., Okuda M. Ultrastructural study of immotile cilia syndrome // Rhinology. 1984. — V. 22. — P. 193−199.
- Weissenberg R., Bella R., Yossefi S. Changes during puberty in chromatin condensation, morphology and fertilizing ability of epididymal spermatozoa of the golden hamster // Andrologia. 1995. — V.27, N6. — P.341−344.
- WHO Laboratory mannual for the examination of Human semen and semen-cervical mucus interaction. Cabridge University Press, 1987. — 55 p.
- WHO Laboratory manual for the examination of Human semen and semen-cervical mucus interaction.3ld ed. The Press Syndicate of the University of Cambridge, 1992. 60 p.
- Wittmaack F.M., Shapiro S.S. Longitudinal study of semen quality in145
- Wisconsin men over one decade // Wis. Med. J. 1992. -№ 91. — P. 477 — 479.
- Yen S.C., Jaffe R.B. Reproductive Endocrinology. W.B. Saunders Company, Philadelphia, 1991. — 560 p.
- Zalata A., Hafez T., Comhaire F. Evaluation of the role of reactive oxygen species in male infertility // Hum. Reprod. 1995. — V.10, N6. — P. 1444−1451.
- Zinc, magnesium and calcium in human seminal fluid: relations to other semen parameters and fertility / M.B. Sorensen, I.A. Bergdahl, N. Henrik et al. // Mol. Hum. Reprod. 1999. — N4. — P.331−337.
- Zirkin B. R., Perreault S. D., Naish S.J. Formation and function of the pronucleus during mammalian fertilization // In The Molecular Biology of Fertilization. Academic Press, San Diego, 1989. — P.91 — 114.