Результаты, обсуждения. 
Особенности а-амилаз

разведения.

Показания ФЭК, л = 670нм.

масса прогидролизованного крахмала, г (среднее значение).

активность.

среднее арифметическое.

k.

0,805/ 0,815.

1: 30 000.

0,202.

0,75 062.

1: 30 000.

0,211.

0,73 951.

разведения.

Показания ФЭК, л = 670нм.

масса прогидролизованного крахмала, г.

активность.

среднее арифметическое.

k.

0,827 / 0,818.

1: 40 000.

0,125.

0,84 812.

1: 40 000.

0,119.

0,85 541.

1: 60 000.

0,215.

0,73 876.

1: 60 000.

0,208.

0,74 727.

разведения.

Показания ФЭК, л = 670нм.

масса прогидролизованного крахмала, г.

активность.

среднее арифметическое.

k.

0,736 / 0,87.

1: 80 000.

0,27.

0,66 376.

1: 80 000.

0,32.

0,60 149.

1: 100 000.

0,365.

0,54 545.

1: 100 000.

0,373.

0,53 549.

1: 120 000.

0,410.

0,48 941.

1: 120 000.

0,414.

0,48 443.

разведения.

Показания ФЭК, л = 670нм.

масса прогидролизованного крахмала, г.

активность.

среднее арифметическое.

k.

0,779 / 0,747.

1: 60 000.

0,285.

0,62 647.

1: 60 000.

0,269.

Берут две пробирки, наливают в каждую по 10 мл раствора крахмала (субстрата) и ставят в термостат или водяную баню с температурой (70 ± 0,2°С) на 5−10 минут, затем не вынимая пробирок из термостата наливают в первую 10 мл дистиллированной воды (контрольная пробирка), во вторую 10 мл рабочего раствора анализируемого продукта (опытная). Смеси быстро перемешивают в термостате в течение 10 мин.

Затем из каждой пробирки отбирают по 0,1 мл раствора, переносят в колбы с предварительно налитыми 10 мл рабочего раствора йода. Содержимое колб перемешивают, полученные растворы получают следующую окраску: контрольный раствор — синий цвет, опытный — фиолетовый различной интенсивности в зависимости от количества непрогидролизированного крахмала, через 5−10минут после смешивания определяют оптическую плотность растворов фотоэлектрическим колориметром в диапазоне длин волн 630−670 нм в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм контрольным раствором является дистиллированная вода[4].

Обработка результатов:

Массу прогидролизированного крахмала (m) в граммах вычисляют по формуле:

m = (D1 — D2) х 0,1: D1.

D1 — оптическая плотность контрольного раствора.

D2 — оптическая плотность опытного раствора.

0,1 — масса крахмала взятая для анализа, в граммах Если масса прогидролизированного крахмала меньше 0,02 г или больше 0,07 г анализ повторяют, подбирая другое разведение.

Амилолитическую активность (АС) в единицах на грамм (ед/г) для препаратов бактериального происхождения вычисляют по формуле:

АС = (5,885 х m + 0,1 671) х 1000: m1.

m — масса прогидролизованного крахмала в граммах.

m1 — масса ферментного препарата, содержащаяся в 5 мл рабочего раствора, в миллиграммах.

• 5,885 — коэффициент расчетного уравнения, полученный при математической обработке экспериментальных данных зависимости массы прогидролизированного крахмала от массы фермента, взятого для анализа в пересчете на 1 час действия фермента.
• 0,1 671 — коэффициент расчетного уравнения, полученный при математической обработке экспериментальных данных зависимости массы прогидролизированного крахмала от массы фермента, взятого для анализа в пересчете на 1 час действия фермента.

За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое результатов определения активностей, полученныхпри анализе двух параллельных навесок препарата, отностительное допустимое расхождение между которыми не должно превышать 5%. Результат округляют до первого значения десятичного знака. Предел возможных значений относительной погрешности измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 составляет 5%.

Результаты анализа:

Таблица 11. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН 3,0.

Таблица 12. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН=4,0.

Таблица 13. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН=5,0.

Таблица 14. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН=6,0.

Таблица 15. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН=7,0.

Таблица 16. Активность б-амилазы при температуре 70° С. рН=8,0.

В результате проведенных экспериментов было выяснено, что ферментный препарат Ликвозим Супра обладает более широким диапазоном значений рН, при которых происходит активное расщепление крахмала, чем ферментный препарат Фунгамил, что очень важно для повышения технологичности процессов переработки крахмалсодержащего сырья. Высокая термостабильность и большая устойчивость к изменению рН способствует снижению расхода ферментных препаратов для разжижения крахмала зернового сырья в спиртовом производстве.