Патоморфологическая диагностика поражений, вызываемых условно-патогенными грибами

Выявление условно-патогенных грибов в тканях и мазках-отпечатках

Основу гистологической диагностики заболеваний, вызванных УПГ, составляет выявление возбудителя в тканях хозяина — его отсутствие, даже при наличии характерных тканевых реакций, лишает диагноз микотического поражения необходимой достоверности. Вместе с тем, гистологическое исследование, как способ выявления возбудителя, существенно уступает культуральному и для этих целей не должно его подменять. Это обстоятельство служит важнейшим ограничением эффективности прижизненной гистологической диагностики, так как вследствие малого объема биоптата обнаружение грибов не всегда возможно, особенно при их низких концентрациях в тканях. В связи с известной очаговостью микотического процесса важную роль играет и прицельность биопсии. Указанное ограничение имеет меньшее значение при изучении секционного материала. При фиксации и проводке ткани слизистых оболочек следует стараться сохранить рыхлые наложения на поверхности эпителия, в которых элементы гриба встречаются сравнительно часто. Разрушение таких наложений может приводить к гиподиагностике поверхностных форм микозов.

Материал заключается в парафин; для точной диагностики целесообразно приготовление криостатных срезов. В последнем случае готовятся мелкие тканевые блоки, которые быстро замораживаются в жидком азоте или изооктане, охлажденном жидким азотом. Расправленные срезы фиксируются спиртовыми растворами в течение 3−5 мин. Окраска идентична для парафиновых и криостатных срезов. В связи с тем, что многие УПГ на препаратах, окрашенных стандартными гистологическими методами, окрашиваются слабо или совсем не обнаруживаются, требуется использование элективных методов. Ценным дополнением к элективным гистологическим методам выявления грибов в тканях служат иммунофлуоресцентный метод и методы с использованием флуорохромов, однако, отсутствие" стандартных антисывороток и наличие перекрестных реакций ограничивает их применение в диагностике микозов.

Идентификация возбудителей в тканях на гистологических и цитологических препаратах производится с учетом их характерных признаков. Для некоторых УПГ наличие и соотношение отдельных морфологических вариантов может иметь большое диагностическое значение. Так, при кандидозе обнаружение ростковых трубок и тем более псевдомицелия даже на поверхности Тканей обычно указывает на инвазивный характер роста гриба. Обнаружение только бластоспор на поверхности эпителия при полном отсутствии филаментации скорее свидетельствуют в пользу сапрофитизма грибов. Часто встречающиеся почкующиеся дрожжевые клетки могут указывать на активное состояние грибов и на определенную вероятность инвазии, что, однако, требует дополнительного подтверждения.

Выявление плодовых тел, достаточно редко встречающихся пои аспергиллезе, пенициллезе и зигомикозе, являются несомненным указанием на рост возбудителя в условиях хорошей аэрации, что может иметь диагностическое значение при оценке расположения микотического очага в легком. Необходимо учитывать, что наряду с активными жизнеспособными грибными клетками, встречаются старые, дегенерирующие формы и элементы, разрушающиеся вследствие взаимодействия с тканями хозяина. Этим объясняется относительное разнообразие форм, размеров и тинкториальных свойств, клеток гриба, в особенности, в старых очагах.