Вторая частная микробиология

МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ микроорганизм микроб инфекционный заболевание Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний проводится по следующим направлениям: 1) обнаружение возбудителя заболевания в патологическом материале; 2) обнаружение специфических антител в сыворотке крови больного (серологическая диагностика); 3) выявление у больного повышенной чувствительности к возбудителю с помощью аллергических проб.

Обнаружение и идентификацию возбудителя заболевания проводят, используя микроскопический, микробиологический и биологический методы.

Микроскопический метод используется для обнаружения возбудителя непосредственно в патологическом материале. Может применяться как самостоятельный метод в отношении некоторых микроорганизмов с характерной морфологией. С помощью микроскопического метода можно сделать заключение при обнаружении гонококков в гное, менингококков в спинномозговой жидкости, палочек туберкулеза, а также простейших: плазмодиев малярии, лейшманий, дизентерийной амебы. Микроскопия применяется как обязательный этап исследования при микробиологическом методе.

Микробиологический метод применяется для выделения чистой культуры микробов и их идентификации по ряду признаков: морфологии, способности окрашиваться красителями (тинкториальные свойства), характеру роста на питательных средах (культуральные свойства), ферментации углеводов, белков и других веществ (биохимические свойства) и по антигенной структуре. Для эпидемиологического анализа проводят внутривидовую идентификацию — определение серовара, фа-говара, биовара. С целью назначения рациональной антибиотикоте-рапии определяют чувствительность выделенной культуры к антибиотикам.

Для экспресс-диагностики применяют РИФ со специфическими сыворотками. Метод позволяет выявить возбудителя в исследуемом материале в течение нескольких часов.

В последнее время для идентификации микробов применяют методы, основанные на исследовании состава ДНК. Для этого существует несколько методов.

• 1) Определение процентного соотношения гуанин + цитозин/ аденин + тимин (Г+Ц/А+Т) (см. главу 4).
• 2) Определение последовательности нуклеотидов в ДНК микроба. С этой целью путем нагревания вызывают разделение ДНК на две нити, добавляют ДНК-зонд — участок известной ДНК, меченный радиоактивной меткой, или ферментом, или биотином. ДНК-зонд присоединяется к одной из нитей исследуемой ДНК, если он комплементарен, то есть соответствует ей. Присоединение обнаруживается по наличию метки.
• 3) Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить количество исследуемой ДНК с помощью фермента полимеразы и таким образом обнаружить даже небольшие количества ДНК.

Биологический метод заключается в заражении животных исследуемым материалом с последующим выделением чистой культуры или в обнаружении токсина и определения его вида и типа.

Серологические методы направлены на выявление специфических антител в сыворотке крови пациента. Для этого используют реакции иммунитета. С целью выявления динамики нарастания титра антител исследуют парные сыворотки, полученные от пациента в начале болезни и через 1−3 недели.

Аллергический метод применяется для выявления повышенной чувствительности к возбудителю путем постановки внутрикожных проб с аллергеном.

Взятие материала на исследование и пересылка его в лабораторию. Результат микробиологического исследования во многом зависит от правильного взятия и пересылки материала в лабораторию. Выбор материала зависит от характера заболевания и локализации патологического процесса. Исследуют мокроту, гной, испражнения, мочу, кровь и др. Материал следует брать до лечения антибиотиками, в достаточном количестве, в стерильную посуду, с соблюдением приемов, обеспечивающих стерильность. Посуда и инструменты для взятия материала не должны содержать следов дезинфицирующих веществ. Испражнения собирают в стерильные картонные тарелки; используют также судна, обработанные дезинфицирующим раствором и тщательно промытые горячей водой. Мочу берут стерильным катетером. Рвотные массы собирают в стерильные банки, мокроту в стерильные банки с пробкой или в чашки Петри. Гнойное отделяемое ран берут стерильным ватным тампоном или исследуют тампоны, извлеченные из ран при перевязках. Соскобы со слизистых оболочек зева и носа — стерильным ватным тампоном на проволоке.

Специальные приемы используются при коклюше (метод кашле-вых пластинок), при исследовании на менингококковое носительство (носоглоточный тампон).

Материал для исследования на неспорообразующие анаэробы при взятии и пересылке тщательно оберегают от соприкосновения с воздухом.

Кровь для посева берут с соблюдением правил асептики, предварительно протерев кожу 70% спиртом, стерильным шприцем из локтевой вены в количестве 5−10 мл и сразу же засевают во флакон с жидкой питательной средой, количество которой должно быть в 10 раз дырка эпидермальный и S. saprophyticus — сапрофитный стафиркокк. Заболевания чаще вызывают золотистые, реже — эпидермальные, еще реже — сапрофитные стафилококки.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Стафилококки имеют шаровидную форму, в чистой культуре располагаются в виде гроздьев винограда, в мазках из гноя располагаютсяя поодиночке, попарно, небольшими скоплениями (цветная вклейка рис. 25). Факультативные анаэробы, лучше растут в аэробных условиях, при рН 7,2−7,8, на простых питательных средах. Оптимальная температура для роста 37^оС.

В жидких питательных средах образуют равномерное помутнение, на плотных средах образуют гладкие, выпуклые, блестящие, с ровными краями колонии. Благодаря образованию пигмента колонии могут быть золотистого, палевого, лимонно-желтого, белого цвета. Пигментообразование лучше всего выражено на средах с добавлением молока. Стафилококки могут размножаться на средах с большим количеством (8−10%) хлорида натрия, поэтому солевые среды применяются в качестве элективных: молочно-солевой агар, желточно-солевой агар.

Стафилококки сбраживают углеводы с образованием кислоты без газа, обладают протеолитическими свойствами. S. aureus отличаются от двух других видов тем, что продуцируют фермент, вызывающий свертывание плазмы крови (плазмокоагулазу), ферментируют маннит в анаэробных условиях, продуцируют токсины и ферменты патогенности (табл. 4).

Наличие пигмента не является таксономическим признаком.

Антигены. Стафилококки содержат целый ряд полисахаридных и белковых антигенов. Классификация по антигенной структуре не получила практического применения.

Фаговары. По чувствительности к типовым бактериофагам стафилококки делятся на фаговары. Фаготипирование проводится с помощью международного набора бактериофагов.

Токсинообразование. Патогенные стафилококки продуцируют экзотоксины. Гемолизины вызывают гемолиз эритроцитов разных видов животных и человека. Основным из них является альфа-гемолизин, на основе которого приготовлен стафилококковый анатоксин. Стафилококки, продуцирующие гемолизин, образуют на кровяном агаре колонии, окруженные бесцветной зоной гемолиза. Лейкоцидины разрушают лейкоциты. Эксфолиатины вызывают пузырчатку новорожденных, отслойку эпителия кожи с образованием пузырей, «синдром ошпаренной кожи». Обнаружен токсин, вызывающий токсический шок (ТТШ). Энтеротоксины, вызывающие пищевую интоксикацию, в отличие от других экзотоксинов, термостабильны, не разрушаются при кипячении.

Ферменты, обладающие патогенным действием: гиалуронидаза, лецитиназа, плазмокоагулаза.

Стафилококки, устойчивые к пенициллину и другим b-лактамным антибиотикам, продуцируют b-лактамазу.

ях, при постоянной циркуляции стафилококков среди больных могут формироваться так называемые «госпитальные» стафилококки определенных фаготипов, высоковирулентные, обладающие множественной лекарственной устойчивостью, нечувствительные к дезинфицирующим средствам. Особенно большое значение в возникновении внутрибольничных инфекций имеют стафилококки, устойчивые к пенициллину, метициллину.

Заболевания у человека. Стафилококковые заболевания чаще возникают в результате заражения извне, реже — как эндогенная инфекция.

Стафилококки, главным образом, S. epidermidis, являются представителями нормальной микрофлоры кожи человека, дыхательных путей и пищеварительного тракта.

У здоровых людей довольно часто встречается носительство S. aureus, главным образом, на слизистой оболочке носа. Установлено, что только небольшая часть людей постоянно свободна от золотистого стафилококка. У большинства они обнаруживаются периодически, часть людей являются постоянными бактерионосителями. Имеется категория носителей, у которых постоянно и в большом количестве обитают S. aureus с признаками «госпитальных» штаммов. Такие носители, особенно среди медицинского персонала, а также больные со стафилококковыми заболеваниями, являются основным источником стафилококковых инфекций в больницах.

Инфекция передается, главным образом, контактным путем или через воздух.

Стафилококки вызывают разнообразные гнойно-воспалительные заболевания: гнойничковые поражения кожи и подкожной клетчатки, ангины, отиты, пневмонии, уретриты, холециститы, энтероколиты, сепсис и т. д. Особенно велика их роль в акушерской практике и в хирургии. Стафилококки нередко являются причиной гнойно-воспалительных заболеваний у новорожденных, маститов у рожениц, гнойных послеоперационных осложнений, постинъекционных абсцессов. Возбудителями чаще всего являются S. aureus.

S. epidermidis вызывает заболевания такие, как инфекционный эндокардит и другие, главным образом, у ослабленных больных, в отделениях интенсивной терапии, где заражение может происходить через системы для внутрисосудистых вливаний, различные катетеры из полимерных соединений.

S. saprophyticus являются частой причиной острых инфекций мочевыводящих путей у молодых женщин.

Особое место занимают пищевые интоксикации, возникающие в результате употребления в пищу продуктов (чаще всего молочных и сладких блюд), в которых произошло размножение стафилококков и накопление энтеротоксина. Этот токсин термоустойчив, и даже после термической обработки продукты, содержащие энтеротоксин, могут вызвать пищевое отравление.

Стафилококки могут явиться причиной токсического шока. Впервые вспышка этого синдрома возникла в США в 1983 году, у женщин, пользующихся во время менструации гигроскопичными гигиеническими тампонами. У заболевших наблюдалось повышение температуры тела, гиперемия слизистых оболочек, боли в мышцах, кожная сыпь с шелушением, падение кровяного давления. Заболевание возникало только при использовании тампонов, выпускаемых одной из фирм. было установлено, что случаи токсического шока возникали вследствие ряда причин: тампоны содержали карбоксиметилцеллюлозу с глюкозой и соединениями натрия, обладали сунерадсорбирующимп свойствами, поэтому чрезмерно высушивали слизистую оболочку и травмировали ее; при инфицировании стафилококками происходило их быстрое размножение в благоприятной среде, чему способствовало присутствие натрия в составе тампона. После запрета на продажу продукции этой фирмы вспышка прекратилась. В дальнейшем токсический шок наблюдался у хирургических больных, особенно при использовании гигроскопичных перевязочных материалов определенных сортов.

Было установлено, что токсический шок вызывают стафилококки, продуцирующие экзотоксин, названный токсином токсического шока (ТТШ).

Иммунитет. Человек обладает в некоторой степени врожденной устойчивостью к стафилококкам благодаря защитным свойствам кожи, фагоцитозу, наличию нормальных антител.

После перенесенного заболевания иммунитет непродолжительный. Характерна склонность к рецидивам. Восприимчивость к стафилококковой инфекции возрастает при травмах, диабете, действии ионизирующих излучений.

Стафилококковые заболевания не относятся к острозаразным, больных лечат не в клиниках инфекционных болезней, а в других отделениях больниц.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются гной, слизь из зева и носа, мокрота, кровь, испражнения, моча; при пищевых отравлениях — рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты.

Микроскопия мазка из исследуемого материала позволяет обнаружить грамположительные кокки и отметить их количество. Для выделения чистой культуры производят посевы на элективные для стафилококка среды (молочно-солевой или желточно-солевой агар) и среды для стрептококка (кровяной агар). В случае, если выделена чистая культура стафилококка, определяют видовую принадлежность по признакам: плазмокоагулаза, анаэробное сбраживание и аэробное окисление глюкозы и маннита, гемолиз на кровяном агаре, наличие лецити-назы, ДНК-азы. Определяют чувствительность к антибиотикам. В целях эпидемиологического анализа проводят фаготипирование.

При пищевых отравлениях определяют наличие энтеротоксина в пищевом продукте с помощью специфических антисывороток или биопробы на котятах.

Профилактические и лечебные препараты. Стафилококковый анатоксин нативный, применяется для активной иммунизации с целью лечения при хронических заболеваниях. Стафилококковый анатоксин очищенный адсорбированный прменяется, главным образом, для профилактики.

Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый содержит стафилококковый антитоксин, приготовлен из крови доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином. Применяется для создания пассивного иммунитета с целью лечения.

Стафилококковый антифагин (вакцина) — для создания активного иммунитета с целью лечения.

Стафилококковый бактериофаг жидкий. Применяется наружно, внутрикожно, внутримышечно для лечения.

Стрептококки.

Стрептококки впервые были обнаружены Т. Бильротом в 1874 г. при рожистом воспалении и Л. Пастером в 1879 г. при гнойных заболеваниях и сепсисе. Выделены в чистой культуре Ф. Розенбахом в 1894 г.

В медицине наиболее важное значение имеют: Streptococcus pyogenes (пиогенный стрептококк), S. pneumoniae (пневмококк), S. faecalis (энтерококк).

Пиогенные (гноеродные) стрептококки

Морофология, культуральные, биохимические свойства. Клетки стрептококков имеют шаровидную или овальную форму, размеры 0,5−1 мкм. Располагаются цепочками. Спор не образуют, жгутиков не имеют, в организме иногда образуют микрокапсулу, грамположительны (цветная вклейка рис. 26).

Факультативные анаэробы. На простых питательных средах растут плохо. Культивируют в сахарном бульоне и на кровяном агаре, при рН 7,2−7,6, оптимальная температура роста для них 37 °C.

В сахарном бульоне образуют придонный и пристеночный рост, оставляя среду прозрачной, на плотных средах растут в виде мелких точечных колоний.

По характеру роста на кровяном агаре различают стрептококки: р-гемолитические, образующие вокруг колоний бесцветную зону полного гемолиза; альфа-гемолитические, окруженные зеленоватой зоной вследствие превращения гемоглобина в метгемоглобин; гамма-стрептококки — не-гемолитические.

Антигены. По полисахаридному С-антигену клеточной стенки стрептококки разделяют на 20 серологических групп, обозначаемых латинскими буквами от, А до V. Заболевания человека чаще вызывают стрептококки группы А. Внутри серогрупп стрептококки разделяют на серовары по белковым антигенам М, Р и Т. Серовары обозначают цифрами.

Антигенами являются также экзотоксины и ферменты, выделяемые стрептококками.

Токсинообразование, факторы патогенности. Стрептококки продуцируют несколько экзотоксинов. 1) Гемолизины (стрептолизины): О-стрептолизин — белок, антиген, но антитела к нему не обладают защитным действием; S-стрептолизин — небелковый токсин, не является антигеном, повреждает лейкоциты. 2) Эритрогенин, А — скарлатинозный, термолабильный, вызывает явления, характерные для начального этапа скарлатины. Продукцию этого токсина кодирует профаг (геном умеренного фага). Токсин белковой природы, антиген. Эритрогенпн, А стрептококков всех сероваров одинаков в антигенном отношении. Антитела к нему (антитоксины) обладают защитными свойствами. 3) Эритрогенин S, термостабильный — аллерген, вызывает реакцию гиперчувствительности замедленного типа.

Ферменты, оказывающие патогенное действие: гпалуронидаза способоствует распространению в организме; стрептокнназа (фибринолизин) разрушает фибрин, выпадающий в очаге воспаления, и таким образом способствует генерализации процесса. Ферменты являются антигенами.

На поверхности клеток стрептококков имеется М-протеин. обладающий антифагоцитарным действием.

Устойчивость. В окружающей среде стрептококки менее устойчивы, чем стафилококки. На различных предметах, в пыли они сохраняются в течение нескольких дней, но утрачивают патогенность. Низкие температуры переносят хорошо. При 56 °C погибают через 30 минут. Дезинфицирующие средства в обычных концентрациях убивают стрептококки в течение 15 минут.

Заболевания у человека. Во внешней среде стрептококки встречаются реже, чем стафилококки. В организме здорового человека стрептококки обнаруживаются в полости рта, в верхних дыхательных путях, на коже, в кишечнике. Заболевания могут возникать в результате аутоинфекции, особенно у людей с ослабленным иммунитетом, или при заражении извне (экзогенная инфекция). Источником заражения являются больные люди и бактерионосители, путь заражения — воздушно-капельный или контактный.

Стрептококки вызывают разнообразные заболевания. Это ангина, хронический тонзиллит, рожистое воспаление кожи, скарлатина, гнойные поражения кожи и подкожной клетчатки, нефрит, ревматизм, гнойный отит, септический процесс. Стрептококки могут быть причиной вторичной инфекции при гриппе, кори, коклюше, дифтерии, при острых респираторных вирусных инфекциях. Не было обнаружено различий между стрептококками, вызывающими такие разные по клинической картине заболевания. Только в отношении скарлатины известно, что эту болезнь вызывают стрептококки группы А, продуцирующие эритрогенин.

Иммунитет. Невосприимчивость после перенесенных стрептококковых заболеваний (кроме скарлатины) очень слабая. Во время болезни образуются антитела, но защитного значения они не имеют, так как антитоксический иммунитет (антитела против эритрогенина А) защищает только от скарлатины, а антимикробный иммунитет (против белка М) является типоспецифическим. Напротив, у людей, перенесших стрептококковую инфекцию, развивается повышенная чувствительность к возбудителю и в результате — склонность к рецидивам и повторным стрептококковым заболеваниям: повторные ангины, рожистое воспаление, хронический тонзиллит, нефрит, ревматизм. В развитии ревматизма имеют значение явления аутоиммунитета — образование антител к собственным тканям организма. Имеет значение также сохранение в организме L-форм стрептококков.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат слизь из зева, гной, кровь, мокрота, моча и другие материалы в зависимости от локализации патологического процесса. Исследуемый материал засевают в сахарный бульон и на кровяной агар. Дальнейший ход исследования заключается в выделении чистой культуры и определении вида по морфологии, характеру роста, по гемолизу на кровяном агаре. Определение серогруппы проводится с помощью реакции преципитации.

Серологические исследования проводятся при ревматизме. Определяют титр антител (анти-О-стрептолизина, антигиалуронидазы) в динамике для диагностики и для контроля за эффективностью лечения.

Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики, в том числе пенициллин, к которому стрептококки группы, А не приобретают устойчивости. К сульфаниламидным препаратам устойчивость может развиваться. Для предупреждения перехода в хроническую форму заболеваний необходимо полностью проводить курс антибиотикотерапии. За детьми, перенесшими повторные ангины, устанавливается наблюдение для профилактики ревматизма.

Скарлатинозный стрептококк

Возбудитель скарлатины — (3-гемолитический стрептококк любого серовара, продуцирующий эритрогенины.

Скарлатина отличается от других стрептококковых инфекций по патогенезу и по механизму иммунитета. Заболевание протекает циклически. На первом этапе проявляется действие эритрогенина, А (ангина, интоксикация, мелкоточечная сыпь). На втором этапе оказывают действие сами стрептококки (гнойный лимфаденит, мастоидит, отит), так как антимикробный иммунитет мало выражен. Позже проявляется роль аллергических реакций, поэтому возможно развитие гломерулонефрита, артериитов, поражение сердца.

Иммунитет. В отличие от других стрептококковых инфекций, после перенесенной скарлатины остается прочный антитоксический иммунитет. Но антимикробный иммунитет типоспецифпчен и слабо выражен, поэтому не предохраняет переболевшего скарлатиной от других стрептококковых заболеваний.

Пневмококки

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Пневмококки (Streptococcus pneumoniae) имеют вытянутую форму, напоминающую пламя свечи или ланцет. Располагаются попарно (диплококки), острыми концами в разные стороны. Каждая пара окружена капсулой. Пневмококки не образуют спор и Ж1 утиков. Грамположительны (цветная вклейка рис. 27).

На простых питательных средах не растут, на кровяном агаре образуют мелкие колонии с зеленоватой зоной вокруг. В отличие от пио-генных стрептококков расщепляют инулин и растворяются в желчи.

Антигены. Пневмококки имеют капсульный антиген, М-белок, расположенный под капсулой, и полисахаридный антиген клеточной стенки. По капсульному антигену пневмококки разделяют на 84 серовара.

Факторы патогенности. Пневмококки образуют ферменты, участвующие в патогенезе заболеваний: гиалуронидазу, фибринолизин, ге-мотоксин, лейкоцидин. М-белок участвует в адгезии пневмококков к клеткам, капсула создает устойчивость к фагоцитозу.

Устойчивость. Во внешней среде пневмококки неустойчивы. При 60^оС погибают через 10 минут, чувствительны к дезинфицирующим веществам, но в высушенной мокроте могут сохраняться долго.

Заболевания у человека. Пневмококки вызывают у человека крупозную пневмонию. Они могут также вызвать генерализованные формы инфекции: менингит, сепсис. В то же время пневмококки являются обитателями слизистой оболочки верхних дыхательных путей здоровых людей и при снижении сопротивляемости организма (застойные явления в легких, снижение их защитной функции) могут вызвать пневмонию. Заболевания возникают и при заражении извне, воздушно-капельным путем. Источником инфекции могут быть больные и носители. Возникновению пневмонии способствует переохлаждение, перенесение гриппа и другие неблагоприятные факторы.

Иммунитет. У многих людей имеется неспецифическая резистентность к пневмококковой инфекции. После перенесенного заболевания иммунитет слабый, кратковременный, типоспецифический, Часто наблюдаются случаи повторной пневмонии вследствие повышенной чувствительности к возбудителю.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются мокрота, кровь, спинномозговая жидкость. Материал надо доставлять в лабораторию немедленно, так как пневмококк быстро погибает. Обнаружение в мазках грамположительных ланцетовидных диплококков, окруженных капсулой, позволяет предположить наличие пневмококков. Чистую культуру можно выделить путем посева на кровяной агар, но при этом помехой могут оказаться посторонние микробы. Эффективным методом является заражение белых мышей внутрибрюшинно, что приводит к развитию у них сепсиса. Из посевов крови можно выделить чистую культуру пневмококка.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Для предупреждения эндогенной инфекции у пациентов, которые должны подолгу лежать, а также у больных, получающих гормональную или лучевую терапию, проводится иммуностимулирующая терапия.

Для лечения больных пневмонией применяют пенициллин, макролидные антибиотики.

Энтерококки

Энтерококки (Streptococcus faecalis) — кокки слегка вытянутой формы, располагаются цепочками. Способны размножаться в средах с 6,5% хлорида натрия, 40% желчи, при рН 9,6−10,2. Устойчивы к кристал-лвиолету, пенициллину, неомицину. Это используется для создания элективных сред.

Энтерококки устойчивы к действию факторов внешней среды. При 60 °C погибают только через 30 минут.

Обладают гемолитическими и протеолитическими свойствами. Могут размножаться в пищевых продуктах даже при комнатной температуре и вызывать пищевую токсикоинфекцию.

Энтерококки — условно-патогенные микробы, обитают в кишечнике; могут быть причиной гнойно-воспалительных процессов, чаще в смешанных инфекциях с кишечной палочкой, протеем, стафилококкаи. Энтерококки, свежевыделенные от больных, продуцируют ферменты патогенности: коагулазу, гиалуронидазу, ДНК-азу, фибринолизин, протеиназу. При пересевах эта способность утрачивается.

Менингококки

Менингококки — Neisseria meningitidis — впервые описал Л. Вексель-баум в 1887 г.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Менингококки имеют бобовидную форму или вид кофейных зерен, размером 0,6−1 мкм, располагаются парами, причем вогнутые стороны обращены друг к другу. Грамотрицательны (цветная вклейка рис. 30). В организме образуют микрокансулу, которую утрачивают при росте на питательных средах.

На простых питательных средах не растут, их культивируют на средах с добавлением сыворотки крови. Оптимум роста 37 °C. Аэробы. Биохимически малоактивны.

Антигены. По капсульному антигену менингококки делятся на 8 серологических групп: А, В, С, D, X, Y, Z, W-135. Эпидемические вспышки чаще связаны с менингококками группы А.

Факторы патогенности. Менингококки не продуцируют экзотоксина. Содержат эндотоксин в клеточной стенке. С помощью фимбрий происходит прикрепление (адгезия) менингококков к поверхности эпителиальных клеток.

Устойчивость. Во внешней среде менингококки неустойчивы, погибают при высушивании, при 50 °C гибнут в течение 5 минут, дезинфицирующие вещества убивают их немедленно. Не переносят низких температур, погибают даже при комнатной температуре, поэтому при транспортировке материал надо оберегать от охлаждения.

Заболевание у человека. Источником инфекции является человекбольной или носитель, механизм передачи — воздушно-капельный. Заражение происходит только при тесном и длительном общении: в казарме, общежитии, школе, детском саду. Попав на слизистую оболочку носоглотки, менингококки прикрепляются к клеткам эпителия, размножаются.

Менингококковая инфекция проявляется у человека в разных формах.

• 1) Носительство — протекает бессимптомно.
• 2) Назофарингит — воспаление в месте внедрения возбудителя.
• 3) Эпидемический цереброспинальный менингит — гнойное воспаление мозговых оболочек, вызванное менингококками, проникшими из носоглотки по лимфатическим и кровеносным сосудам.
• 4) Менингококцемия — в случае преодоления защитного барьера слизистых оболочек менингококки проникают в кровь, происходит массовая гибель возбудителя с освобождением эндотоксина, что приводит к интоксикации.

Иммунитет. Большинство людей обладают врожденным иммунитетом к менингококковой инфекции и после заражения становятся носителями. Стойкий иммунитет формируется и после перенесенного заболевания, и в результате носительства.

Лабораторная диагностика при исследовании на носительство и при назофарингите материалом служит слизь из носоглотки, при менингите — спинномозговая жидкость, при менингококцемии — кровь. При обнаружении в мазках из спинномозговой жидкости грамотрицательных бобовидных диплококков, расположенных внутри лейкоцитов, выдают ориентировочный ответ. Выделенные чистые культуры дифференцируют от сходных по морфологии непатогенных нейссерий, обитающих на слизистой оболочке носоглотки.

При менингите в спинномозговой жидкости можно обнаружить ме-нингококковые антигены с помощью реакции преципитации или ИФА.

Профилактические и лечебные препараты. Для специфической профилактики применяют химическую вакцину из полисахаридных антигенов серогрупп, А и С. Для лечения применяют антибиотики (пенициллин, левомицетин) и сульфаниламидные препараты.

Гонококки

Neisseria gonorrhoeae впервые были обнаружены в 1879 г. А. Ней-ссером.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Гонококки по форме сходны с менингококками, бобовидные диплококки. Гра-мотрицательны (цветная вклейка рис. 28). В патологическом материале вокруг гонококков образуется слизистое капсулоподобное вещество. Спор и жгутиков гонококки не образуют.

Гонококки чрезвычайно требовательны к питательным средам и к условиям культивирования. Питательная среда должна содержать человеческий белок (сыворотку крови или асцитическую жидкость) и должна быть влажной. Температура при культивировании должна быть 37 °C.

Биохимические свойства гонококков слабо выражены.

Антигены. Антигенная структура гонококков изменчива, серологическое типирование не применяется.

Факторы патогенности. Гонококки не образуют экзотоксина. При разрушении клеток выделяется эндотоксин. С помощью фимбрий осуществляется прикрепление (адгезия) гонококков к поверхности эпителиальных клеток.

Устойчивость. Гонококки во внешней среде малоустойчивы, не переносят высыхания, охлаждения, гибнут даже при комнатной температуре, Чувствительны и к повышению температуры — погибают при 40 °C. Но в гное, во влажной среде (полотенца, салфетки) могут сохраняться в течение суток. Погибают в растворе азотнокислого серебра 1:10 000, фенола 1%, биглюконата хлоргексидина 0,05%. Чувствительны к пенициллину, тетрациклину, эритромицину, но приобретают устойчивость к ним.

Заболевания у человека. Гонококки вызывают гонорею — гнойное воспаление слизистых оболочек мочеполовых органов и бленнореюгнойное воспаление конъюнктивы глаза. Возможна гонококковая инфекция с локализацией в прямой кишке и в зеве.

Гонореей болеет только человек. Источник инфекции — больной человек, механизм передачи — контактный, половой, реже — непрямой контакт (через предметы). Входными воротами для гонококков служит эпителий уретры, шейки матки. Распространяясь по слизистой оболочке, вызывает гнойное воспаление: острый уретрит, цервицит. У мужчин в процесс вовлекаются семенные пузырьки, простата, у женщин, помимо матки, также маточные трубы, яичники. Могут возникнуть осложнения: артрит, эндокардит, менингит, септикопиемия.

Бленнорея новорожденных возникает при прохождении родовых путей матери, больной гонореей. Болезнь опасна: может привести к слепоте.

Иммунитет. У человека нет врожденного иммунитета к гонорее. Перенесенное заболевание не создает невосприимчивости. Переболевший гонореей может вновь заболеть в результате реинфекцин. В течение болезни образуются антитела, но они не обладают защитными свойствами. Клеточный иммунитет не формируется.

Лабораторная диагностика. Микробиологические исследования необходимы во всех случаях, для того, чтобы отличить гонорею от хла-мидиозов и уретритов иной этиологии. При острой гонорее лабораторный диагноз может быть поставлен бактериоскопическим методом. Для исследования у мужчин берут отделяемое уретры, у женщинотделяемое уретры и шейки матки. Мазки из исследуемого материала окрашивают метиленовой синью и по Граму. Обнаружение бобовидных грамотрицательных диплококков, расположенных внутри лейкоцитов, позволяет ставить лабораторный диагноз. Однако под действием лекарственных средств и при хроническом течении болезни гонококки могут изменяться: встречаются грамположительные кокки, крупные шары, мелкие зерна. При отсутствии в мазках типичных гонококков проводится бактериологическое исследование — выделение чистой культуры и идентификация.

При хронической гонорее проводят серологическую диагностику — обнаружение специфических антител с помощью РСК или РНГА.

Профилактические и лечебные препараты. Препарата для плановой иммунизации нет. Для индивидуальной профилактики в порядке экстренной меры рекомендовано использовать 0,05% раствор биглюконата хлоргексидина, который выпускается во флаконах с пипеткой под названием «кожный дигитан». Для предупреждения бленнореи детям сразу после рождения на конъюнктиву глаза накапывают раствор пенициллина, альбуцида или другого антимикробпого препарата.

Для лечения больных гонореей применяют антибиотики, к которым чувствителен гонококк. Эффективный препарат — азитромицин (сумамед).

При хронической гонорее применяют убитую гонококковую вакцину, которая вводится внутрикожно или внутримышечно, дозируется в млн. микробных клеток.

СЕМЕЙСТВО КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ Семейство кишечных бактерий (Enlerobacteriaceae) — энтеро-бактерии. Это короткие палочки от 1 до 5 мкм в длину, диаметром 0,4−0,8 мкм. Они не образуют спор, одни из них подвижны, другие не образуют жгутиков. Видимой при микроскопии капсулы они не имеют, но в организме некоторые из них окружены капсуловидным слизистым веществом. Грамотрицательны.

Хорошо растут на простых питательных средах. Факультативные анаэробы.

Среди энтеробактерий есть непатогенные, условно-патогенные, обитающие в кишечнике и патогенные, вызывающие, главным образом, кишечные заболевания. Предполагают, что родоначальником энтеробактерий была кишечная палочка, от которой в процессе эволюционного развития произошли виды, приспособившиеся к паразитическому существованию.

Заболевания человека наиболее часто вызывают представители родов: Bscherichia, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Proteus, Yersinia.

Ферментативная активность лучше всего выражена у менее патогенных видов этого семейства (кишечная палочка) и снижается по мере возрастания патогенности (шигеллы, иерсинии). Определение сахар о литических и протеолитических свойств используется для идентификации (установления вида) (табл. 5).

Энтеробактерии имеют О-антиген (соматический), К-антиген (капсульный), подвижные бактерии имеют Н-антиген (жгутиковый). Изучение антигенной структуры применяется для определения видов и серологических вариантов энтеробактерий.

Таблица 5.

Ферментативные свойства кишечных бактерий.

Условные, обозначения: «К» — кислота; «КГ» — кислота и газ; «+» — наличие, «-» — отсутствие, «±» — встречаются разные варианты.

Эшерихии

Род Escherichia назван в честь немецкого ученого Т. Эшериха, который в 1885 г. выделил из фекалий человека и описал кишечную палочку — Escherichia coli. В этот род входят условно-патогенные кишечные палочки, являющиеся постоянными обитателями кишечника человека и животных, а также патогенные для человека варианты, в том числе энтеропатогенные.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Эшерихии представляют собой короткие толстые палочки, в препаратах располагаются беспорядочно. Спор не образуют, некоторые варианты образуют в организме микрокапсулу. Есть варианты подвижные (перит-рихи), есть неподвижные. Грамотрицательны (цветная вклейка рис. 29).

Факультативные анаэробы, растут на простых питательных средах при рН 7,2−7,8, оптимум для роста 37 °C. Штаммы Е. coli, выделенные от человека и теплокровных животных, развиваются и при 43−45°С, а кишечные палочки рыб и холоднокровных животных при такой температуре не размножаются. Это различие используют для определения санитарного состояния воды, так как только обнаружение Е. coli теплокровных свидетельствует о фекальном загрязнении.

На дифференциально-диагностических средах Эндо, Левина, Плос-кирева кишечные палочки образуют окрашенные колонии, так как разлагают лактозу. Они обладают выраженными сахаролитически-ми свойствами: ферментируют с образованием кислоты и газа лактозу, глюкозу и другие углеводы (табл. 5) и протеолитическими свойствами — разлагают белки до индола и сероводорода. Желатин не разжижают. Некоторые варианты разлагают сахарозу.

Антигены. Кишечные палочки имеют О-антиген, который является основным для установления серовара, в частности, при диагностике кишечных эшерихиозов. К-антиген — это общее обозначение всех поверхностных антигенов, среди которых есть термолабильные и термостабильные. У возбудителей кишечных эшерихпозов это термолабильный В-антиген. Он расположен более поверхностно, чем О-антиген, поэтому для выявления О-антигена в лаборатории разрушают В-антиген путем кипячения исследуемой культуры. Н-антигены имеются у подвижных вариантов кишечной палочки, при типировании не определяются. Антигенную структуру штаммов эшерихиий записывают в виде формулы, например, Е. coli О111: К58:Н12.

Устойчивость. В воде, в почве кишечные палочки месяцами остаются живыми. При 60 °C погибают через 15 минут, при кипячениинемедленно. Чувствительны к дезинфицирующим веществам.

Значение Е. coli для человека. 1) Кишечная палочка — представитель нормальной микрофлоры толстой кишки, приносит пользу как антагонист патогенных бактерий и грибов, принимает участие в синтезе витаминов. 2) Е. coli является санитарно-показательным микроорганизмом для определения фекального загрязнения воды, пищевых продуктов, оборудования пищеблоков, рук и спецодежды медицинского первсонала и т. д. Е coh при этом расценивается не как возбудитель заболевания, а как показатель загрязнения выделениями человека, которые могут содержать возбудителей кишечных заболеваний 3) Кишечные палочки как условно-патогенные микроорганизмы у людей с ослабленным иммунитетом могут вызвать гнойно-воспалительные процессы за пределами желудочно-кишечного гракта пиелиты, циститы, холециститы У пациентов с выраженным иммунодефицитом может развиться коли-сепснс Гнойное воспаление ран, постинъекционные абсцессы могут возникнуть в результате заражения извне Кишечные палочки вызывают пищевые гоксикоинфекции при накоплении в большом количестве в пищевом продукте 4) Энтеропатогенные кишечные палочки вызывают инфекционные острые кишечные заболеванияэшерихиозы Они возникают как экзогенные инфекции Источником являются больные люди или бактерионосители, механизм зараженияфекально-оральный Болеют чаще дети, главным образом в возрасте до 2 лет Среди возбудителей эшерихиозов различают энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП), энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИК11), энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП), энтерогемолитические кишечные палочки (ЭГКП) (табл 6) Они различаются по антигенной структуре, по возрасту больных и по характеру заболе вания Энтерогемолйт ические кишечные палочки (ЭГКП), обнаруженные в последнее время, вызывают геморрагический колит и гемолитическую уремию Эти возбуди! ел и вырабатывают Шига-подобный токсин, который адсорбируется энтеральными клетками и вызывает токсине-мию Описаны вспышки тяжелопротекающих пищевых токсикоинфек-ций, вызванных Е coh 0157, среди детей Кроме того, еще выделена провизорная группа энтероадгерентных Е coh РАКП).

Иммунтет. Устойчивость к эшсрихиозам у детей раннею возраста создается бифидум-флорои кишечника и антителами грудного материнского молока После перенесенного заболевания иммунитет слабо выражен, возможны повторные случаи.

Лабораторная диагностика основана на выделении чистой культуры возбудителя и определения вида и серовара При гнойно-воспалительных заболеваниях исследуемым материалом служат моча, желчь, гной из ран и из полости абсцесса, при сепсисе — кровь, при пищевых токсикоинфекциях — рвотные Массы, промывные воды желудка, пищевые продукты Выделенные чистые культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам При острых кишечных инфекциях исследуют испражнения Посевы производят на дифференциально-диагностические среды, обычно на среду Эндо Из выросших изолированных колоний кишечной палочки отбирают те, которые агглютинируются диагностическими ОВ-сыворотками. Пересевают их на скошенный агар, выделяют чистую культуру и затем определяют серовар в развернутой реакции агглютинации с живой культурой (В-агглютинация) и прогретой кипячением культурой (О-агглютинация).

Профилактика и лечение. Профилактика эшерихиозов — это, в первую очередь, соблюдение правил личной гигиены. Это выполнение санитарно-гигиенических правил в родильных домах, молочных кухнях, в детских садах, в стационарах, на предприятиях пищевой промышленности и общественного питания, постоянный надзор за качеством пищевых продуктов и воды.

Для лечения эшерихиозов применяют препараты из микробов-антагонистов: бифидумбактерин, лактобактерин. Кишечные палочки чувствительны к антибиотикам (левомицетин, тетрациклин, полимик-син), к нитрофурановым препаратам. Но эффективность лечения снижается из-за распространения лекарственноустойчивых эшерихий, приобретающих устойчивость путем передачи R-плазмид.

Сальмонеллы

Род Salmonella получил свое название в честь американского ученого Д. Салмона, описавшего в 1885 г. первого из представителей этого рода.

К роду сальмонелл относятся: 1) возбудители брюшного тифа, паратифов, А и В; 2) сальмонеллы — возбудители гастроэнтеритов (сальмонеллезов).

Сальмонеллы — возбудители брюшного тифа и паратифов

Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi был впервые обнаружен в 1880 г. К. Эбертом в органах людей, погибших от брюшного тифа. Позже у больных, у которых наблюдалась клиническая картина брюшного тифа, были обнаружены палочки, по биохимическим и серологическим свойствам отличающиеся от палочки брюшного тифа. Они были названы Г. Шоттмюллером палочками паратифа, А и В. Современные их названия: Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi В (schottmuelleri).

Морфология, кулыуральные, биохимические свойства. Сальмонеллы брюшного тифа и паратифов — это короткие палочки с закругленными концами, в среднем 1−2 мкм длиной. Все они подвижны (перитрихи), спор и капсул не образуют. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых питательных средах, при рН 7,2−7,4, оптимум роста при 37 °C. Элективной средой для них являются среды, содержащие желчь, которая препятствует росту кишечных палочек и других бактерий.

Ферментативные свойства сальмонелл используются для определения вида (табл. 5). В отличие от эшерихий, сальмонеллы не сбражи-вают лактозу и сахарозу, сбраживают глюкозу и маннит, причем палочка брюшного тифа только до кислоты, а паратифозные палочкидо кислоты и газа. Палочка паратифа А, в отличие от палочки паратифа В, не образует сероводорода.

Антигены. Сальмонеллы содержат О-антигены, Н-антигены и К-антиген. Идентификация проводится по антигенной структуре в соответствии с классификацией, разработанной Кауфманом и Уайтом (табл. 7). По этой схеме все сальмонеллы по О-антигенам разделены на группы: А, В, С, D, Е и т. д. каждая группа имеет специфический О-антиген (например, в группе D — это О9). Некоторые группы имеют общие О-антигены (например, группы А, В и D имеют общий антиген 012). S. typhi, ее вирулентные штаммы, содержат Vi-антиген, который располагается более поверхностно, чем О-антиген. У Н-антигенов сальмонелл различают I и II фазу. По I (специфической) фазе внутри групп сальмонеллы делятся на виды.

Пользуясь схемой Кауфмана-Уайта, определяют виды сальмонелл: с помощью монорецепторных О-сывороток определяют группу, к которой принадлежит выделенная культура сальмонелл, с помощью Н-сывороток определяют вид.

Факторы патогенности. Сальмонеллы не продуцируют экзотоксина, содержат эндотоксин, который выделяется при их разрушении. Патогенность их связана также со способностью проникать в клетки и размножаться в них (инвазивность).

Устойчивость. Возбудители тифо-паратифозных инфекций относительно устойчивы во внешней среде. В воде открытых водоемов, в в почве, куда они попадают с испражнениями людей, они могут сохраняться в течение 1 -3 месяцев, на овощах и фруктах 5−10 дней, во льдудо 2 месяцев. При 50 °C погибают в течение часа, при 100 °C — немедленно. Дезинфицирующие вещества убивают их в течение нескольких минут.

Заболевания у человека. Брюшным тифом болеет только человек. Источником заражения являются больные люди и бактерионоси-тели. Механизм заражения фекально-оральный. Возбудители проникают через рот, попадают в тонкий кишечник, размножаются в лимфоидных тканях тонкого кишечника. Это происходит в инкубационном периоде, который длится в среднем 10−14 дней. Затем бактерии проникают в кровь, наступает бактериемия — начало заболевания. С током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в печень, селезенку, почки, костный мозг. Бактерии разрушаются, выделяется эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Попадая из печени в желчный пузырь, возбудители находят здесь благоприятные условия для размножения и вместе с желчью на третьей неделе заболевания вновь поступают в кишечник, в лимфатические образования. В результате повторного заноса бактерий в уже сенсибилизированные лимфатические ткани развивается воспаление аллергического характера, приводящее к некрозу и образованию язв. Это может привести к опасным последствиям: кровотечению из язв и прободению кишечника. Сальмонеллы в это время выводятся из организма с испражнениями и мочой.

У некоторых больных возбудители могут обнаруживаться в испражнениях и моче после выздоровления в течение нескольких месяцев, а иногда и лет. Бактерии сохраняются у них в желчном пузыре, откуда время от времени попадают в кишечник и выделяются с испражнениями, а у некоторых носителей — через почки выделяются с мочой.

Бактерионосители представляют опасность для окружающих как возможный источник инфекции.

Иммунитет. Во время болезни вырабатываются антитела, титр которых нарастает со второй недели болезни. Антитела способствуют лизису бактерий, усилению фагоцитоза. Определение антител используется для диагностики. Возникновение рецидивов болезни и бактерионосительства объясняется недостаточностью иммунитета.

Лабораторная диагностика. На первой неделе заболевания берут кровь для выделения гемокультуры. С соблюдением правил асептики из локтевой вены берут кровь в количестве 10 мл, засевают в 100 мл желчного бульона, направляют в лабораторию. Выделенную чистую культуру (гемокультуру) идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам и антигенной структуре, определяют фа-говар.

Начиная с третьей недели заболевания, возбудителя выделяют из испражнений, мочи, желчи.

В сыворотке крови определяют антитела, титр которых нарастает к концу первой — началу второй недели заболевания. Ставят реакцию агглютинации по Видалю, РИГА с эритроцитарными диагностикумами, ИФА.

Для выявления бактерионосительства исследуют с целью обнаружения возбудителя испражнения, мочу, желчь; с целью обнаружения Vi-антигена ставят РИГА с эритроцитарным Vi-диапюстикумом. Используют аллергическую кожную пробу с Vi-тифином (Vi-антиге-ном).

Профилактические и лечебные препараты. Массовой вакцинации не проводится, так как заболеваемость носит спорадический характер. Существуют химическая брюшнотифозная вакцина, содержащая О-антиген (применяется по показаниям). Лицам, которые были в контакте с больным, назначают брюшнотифозный бактериофаг. Из антибиотиков чаще всего применяют левомицетин.

Сальмонеллы — возбудители острых гастроэптероколитов

Сальмонеллы чаще всего вызывают пищевые токсикоинфекции. В последнее время описаны внутрибольничные сальмонеллезы, возбудители которых являются «госпитальные» штаммы сальмонелл.

Сальмонеллы — возбудители пищевых токеикоинфекций

Пищевые токсикоинфекции — это острые кишечные заболевания, возникающие в результате употребления пищи, обсемененной сальмонеллами. Возбудителями являются нетифозные сальмонеллы. По схеме Кауфмана-Уайта известно около 700 сероваров, вызывающих гастроэнтероколит, чаще всего это S. typhimurium, S. enterilidis, S. heidelberg, S. choleraesuis, S. anatum, S, infantis. Они относительно устойчивы к действию внешних факторов и способны размножаться в пищевых продуктах. Соление и копчение не убивает их. Большинство патогенных для человека сальмонелл вызывают заболевания у животных (домашние животные и птицы, грызуны).

Заболевание у человека. Чаще всего заболевание связано с употреблением в пищу мяса крупного рогатого скота, кур и яиц. Мясо может быть инфицировано при жизни больного животного или после убоя, при разделке туши, хранении мяса и приготовлении и хранении готовых блюд. Чаще всего это мясные, молочные продукты, а также кондитерские изделия, содержащие яйца, не подвергнутые термической обработке.

Для возникновения заболевания имеет значение количество сальмонелл, которые попали с пищей в желудок. При массовой их гибели освобождается эндотоксин, который попадает в кровь и вызывает интоксикацию уже через несколько часов после приема пищи. В некоторых случаях сальмонеллы проникают в кровь, вызывая кратковременную бактериемию.

Развитие болезни связано с действием самих возбудителей и их эндотоксина, то есть это токсикоинфекция. Основные симптомы: боли в животе, тошнота, рвота, частый жидкий стул, озноб, повышение температуры тела. Заболевание продолжается не более 4−5 дней. Возбудители быстро исчезают из крови и кишечника. Лица в окружении больного не заражаются.

Иммунитет. В крови больных и реконвалесцентов обнаруживаются антитела, и это можно использовать для диагностики. После перенесения заболевания невосприимчивости не создается.

Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом служат рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, моча, кровь, остатки пищи, которую употребляли заболевшие. Проводятся бактериологические исследования, выделенную чистую культуру идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам и по антигенной структуре в соответствии со схемой Кауфмана-Уайта с помощью монорецепторных сывороток.

В сыворотке крови определяют антитела с помощью реакции агглютинации с возбудителем, выделенным из исследуемых материалов и со стандартными диагностикумами, а также РИГА с эритроцитарными диагностикумами. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в парных сыворотках крови, взятых в первый день заболевания и на второй неделе.

Сальмонеллы — возбудители внутриболъничпых инфекций

Возбудителями внутриболытичного сальмонеллеза являются «госпитальные» штаммы сальмонелл, чаще всего Salmonella typhimurium. В отличие от «диких» (природных) штаммов тех же видов, они не вызывают гибели мышей при заражении через рот, но более патогенны для человека, и обладают множественной лекарственной устойчивостью благодаря наличию R-плазмид. «Госпитальные» штаммы обнаружены также среди S. enteritidis.

Заболевание у человека. Источником инфекции являются больные люди. Распространение внутрибольничных сальмонеллел происходит контактно-бытовым, воздушно-пылевым и пищевым путем.

Проявления болезни разнообразны: бессимптомные бактерионосительство, легкие формы, тяжелые кишечные расстройства с интоксикацией, бактериемией, иногда с септическими осложнениями. Особенно тяжело протекает болезнь у детей раннего возраста.

Лабораторная диагностика. Исследуются испражнения, кровь. Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам, антигенной структуре.

Профилактика и лечение. Необходимо соблюдение санитарно-гигиенического режима в лечебных учреждениях, на предприятиях общественного питания; выявление носителей сальмонелл и санация их. С целью экстренной профилактики внутрибольничной инфекции назначают поливалентный сальмонеллезный бактериофаг детям, контактировавшим с больными и носителями, а также матерям.

Антибактериальные препараты (левомицетин, ампициллин) применяют для лечения больных генерализованными формами сальмонеллеза.

Шигеллы

Возбудителями дизентерир (шигеллеза) являются несколько видов бактерий, объединенных в род Shigella. Одного из них, впервые обнаружил в 1891 г. русский врач А. Григорьев и изучил во время эпидемии в Японии в 1898 г. Шига. Впоследствии были выделены и описаны другие виды шигелл. По современной классификации к роду Shigella относятся 4 группы, соответственно 4 вида. Все виды, кроме S. sonnei, разделены на серовары, S. flexneri — еще на подсеровары (табл. 8).

В последние десятилетия дизентерию чаще всего вызывают шигеллы Флекснера и Зонне, реже шигеллы Бойда. S. dysenteriae (Григорьева-Шига) в России не встречается.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Шигеллы представляют собой короткие грамотрицательные палочки, они не образуют спор и капсул, в отличие от сальмонелл не имеют жгутиков.

Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах, оптимум температуры 37 °C, рН 6,8−7,2. По биохимическим свойствам различаются (табл. 5) Сбраживают глюкозу, лактозу в первые сутки не ферментируют (шигеллы Зонне — через несколько суток), ман-нит ферментируют все виды, кроме S. dysenteriae.

Антигены. Шигеллы содержат О-антигены, некоторые серовары имеют К-антиген. Среди О-антигенов есть специфические и групповые.

Токсинообразование. Экзотоксин, обладающий нейротропным действием, продуцируют S. dysenteriae, и этот вид вызывает заболевание в наиболее тяжелой форме. Все шигеллы содержат термостабильный эндотоксин.

Устойчивость. Наиболее устойчивы во внешней среде S. sonnei. Кипячение убивает шигеллы немедленно, при 60 °C они гибнут через 10−20 минут, но встречаются термоустойчивые S. sonnei, погибающие только при 70оС в течение 10 минут, то есть способные выжить при пастеризации молока. В воде, почве, в пищевых продуктах, на предметах, в посуде шигеллы сохраняются жизнеспособными в течение одной-двух недель. S. sonnei могут размножаться в молоке. В кишечнике мух и на их лапках шигеллы выживают в течение 2−3 дней. Перелетая с нечистот и отбросов на пищевые продукты, мухи могут переносить возбудителей.

В то же время шигеллы очень нестойки в пробах фекалий, так как погибают под влиянием микробов-антагонистов и кислой реакции среды. Поэтому пробы, взятые для исследования, надо сразу же засевать на питательную среду.

Заболевание у человека. Источником инфекции является человекбольной или носитель. Механизм передачи фекально-оральный. Заражение происходит через рот. Инкубационный период длится от 2 до 7 дней.

Возбудитель проникает в клетки эпителия слизистой оболочки толстой кишки и размножается в них. Это приводит к воспалению (колиту) и образованию язв. Основные симптомы: повышение температуры тела, боли внизу живота, рвота, частый стул, в тяжелых случаях примесь в стуле слизи и крови; характерный признак — тенезмы (ложные болезненные позывы). Болезнь длится 8−10 дней. Больные с легкими формами заболевания часто не обращаются за квалифицированной помощью, занимаясь самолечением. Недолеченная дизентерия может переходить в хроническую форму.

Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет нестойкий. Во время заболевания образуются антитела, обнаружение которых имеет диагностическое значение.

Лабораторная диагностика. Материалом для бактериологического исследования являются испражнения (faeces). Пробу следует брать до начала антибактериальной терапии, посев производить сразу же или помещать пробу в консервирующую жидкость (30% глицерина и 70% буферного раствора) не более, чем на один день. Для посева отбирать комочки слизи. Количество шигелл в пробе может быть очень скудным, поэтому посев производится на элективную среду Плоскирева или на среду обогащения — селенитовую.

Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам и в реакции аглютинации с адсорбированными видовыми сыворотками. Определяют чувствительность к антибиотикам. Шигеллы относятся к числу бактерий, быстро приобретающих устойчивость к антибиотикам, в большинстве случаев связанную с R-плазмидами. Кроме того, антигены шигелл выявляют в фекалиях с помощью ИФА.

С целью диагностики используют серологические реакции: агглютинации, РИГА. Антитела появляются на второй-третьей неделе заболевания.

Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. В очагах заболеваемости используют дизентерийный бактериофаг.

Лечение антибиотиками следует проводить с учетом чувствительности к ним возбудителей. Применяют левомицетин, тетрациклин; эффективны нитрофурановые препараты, поливалентный бактериофаг. При хронической дизентерии применяют вакцинотерапию с помощью химической вакцины, вводимой через рот.

Клебсиеллы

Род Klebsiella получил свое название в честь немецкого ученого Э. Клебса. Среди представителей этого рода: Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenae, Klebsiella rhinoscleromatis.

Морфология, культуральные свойства. Клебсиеллы — короткие, толстые палочки. В препарате располагаются поодиночке, парами и короткими цепочками Жгутиков не имеют, спор ие образуют. Характерным признаком клебсиелл является образование капсул как в организме, так и на питательных средах.

Растут на простых питательных средах, на плотных средах образуют слизистые колонии. Дифференциация их проводится по биохимическим признакам.

Антигены. Клебсиеллы содержат липополисахаридные О-антигены и полисахаридные капсульные антигены, на основе которых проводится серотипирование. Некоторые антигены являются общими с антигенами эшерихий и сальмонелл.

Патогенность связана у клебсиелл с наличием капсулы, препятствующей фагоцитозу, и эндотоксинов.

Устойчивость. Клебсиеллы устойчивы во внешней среде, длительно сохраняются в воде, на предметах, в молочных продуктах могут размножаться при комнатной температуре и в холодильнике. Погибают при кипячении и при действии дезинфицирующих веществ.

Заболевания у человека. Клебсиеллы пневмонии вызывают воспаление легких (бронхопневмонию), иногда также сепсис, цистит, острые кишечные инфекции; часто встречаются при смешанных инфекциях.

Клебсиеллы озены являются возбудителями хронического забо левания верхних дыхательных путей с выделением вязкого секрета и образованием корочек, издающих зловонный запах. Заболевание заразительно, передается воздушно-капельным путем.

Клебсиеллы риносклеромы вызывают хронический воспалительный процесс слизистых оболочек верхних дыхательных путей, с образованием узелков (гранулем).

Иммунитет. В течение заболеваний образуются антитела, но они не обеспечивают невосприимчивости. Хроническое течение заболевания связано с развитием ГЧЗТ.

Лабораторная диагностика. Исследуемые материалы: при пневмонии — мокрота, при озене — слизь из зева, носа, трахеи, при риносклероме — кусочки тканей из гранулем. Исследование основано на выделении чистых культур и идентификации по морфологии, культуральным, биохимическим свойствам и определении серовара.

Ставится РСК для обнаружения антител в сыворотке крови больных.

Лечебные препараты. Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики (стрептомицин, левомицетин, неомицин, тетрациклин), препараты сурьмы.

Протеи

Среди бактерий рода Proteus возбудителями пищевых токсикоинфекций и гнойно-воспалительных процессов могут быть Proteus vulgaris и Proteus mirabilis.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Протеи — полиморфные палочки, короткие, длинные, нитевидные, спор и капсул не образуют, имеют жгутики, расположенные перитрихиально. Грам отрицательны.

Хорошо растут на простых питательных средах. Для протеев характерен «ползучий» рост в виде голубоватого налета на плотных питательных средах, который образуют роящиеся Н-формы. Штаммы, потерявшие жгутики и способность к роению, образуют колонии с ровными краями (О-формы). При посеве по методу Шукевича в конденсационную воду на дне пробирки со скошенным агаром протей быстро покрывает всю его поверхность.

Протеи обладают хорошо выраженными протеолитическими свойствами: разжижают желатин и свернутую сыворотку, свертывают молоко, расщепляют мочевину, образуют сероводород, индол, аммиак. Ферментируют многие углеводы.

Антигены. Протеи имеют О-антигены и Н-антигены, часть из них общие с другими энтеробактериями.

Токсинообразование. Экзотоксина не продуцируют, содержат липополисахаридный эндотоксин клеточной стенки.

Устойчивость и распространение. Бактерии рода Proteus широко распространены во внешней среде. Они встречаются в почве, воде, в кишечнике человека и животных. Участвуют в процессах гниения, размножаясь в отбросах, содержащих органические вещества.

Заболевания у человека. Протеи — условно-патогенные микробы. Могут вызывать у человека гнойно-воспалительные заболевания: нагноение ран, отит, перитонит, пиелонефрит, цистит. При употреблении в пищу продуктов, содержащих большое количество этих бактерий, возникает пищевая токсикоинфекция. P. mirabilis вызывает гнойно-воспалительные заболевания мочевыводящей системы. Они могут возникнуть в результате заноса бактерий с урологическими инструментами. У новорожденных попадание протея в пупочную ранку приводит к септическому процессу.

Лабораторная диагностика. Исследуемыми материалами служат, в зависимости от заболевания, гной, моча, рвотные массы, пищевые продукты. Используется метод посева по Шукевичу. выделенные чистые культуры идентифицируют по культуральным и биохимическим свойствам и по реакции агглютинации.

Лечебные препараты. Применяют коли-протейный бактериофаг, на-лидиксовую кислоту, антибиотики.

Иерсинии

Среди бактерий, относящихся к роду Yersinia, заболевания у человека вызывают Yersinia peslis (возбудитель чумы), Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica.

Иерсинии чумы

Yersinia pestis был открыт в 1894 г. А. Иерсеном и С. Китазато во время эпидемии чумы в Гонконге.

Морфология, культу-ральные, биохимические свойства. Y. pestis — грамотрицательные небольшие овоидной формы палочки величиной 1−2 мкм, неподвижные. Спор не образуют, имеют капсулу. В мазках из патологического материала окрашиваются метиленовой синькой наиболее интенсивно по концам — биполярно (рис. 31). При размножении на плотных питательных средах имеют вид удлиненных палочек.

Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах при температуре 28 °C, могут расти при более низких температурах (до +5°С), что можно использовать при выделении чистой культуры. В жидких питательных средах палочки чумы образуют пленку на поверхности и отходящие от нее вниз нити, похожие на сталактиты, и осадок в виде хлопьев. На плотной питательной среде образуют колонии, напоминающие «кружевной платочек» — с плотным центром и фестончатыми краями. Такие R-формы колоний образуют вирулентные штаммы, а S-формы — невирулентные. Характерные культуральные свойства иерсиний чумы используются при идентификации.

Сбраживают углеводы с образованием кислоты. Протеолитическая активность выражена слабо (табл. 9).

Антигены. Палочки чумы содержат соматический термостабильный антиген, общий с другими иерсиниями, а также антиген, общий с эритроцитами людей О-группы. Вирулентные штаммы имеют капсульный термолабильный антиген, с которым связана иммуногенность возбудителя.

Факторы патогенности. Палочки чумы образуют токсические вещества, которые содержатся в теле бактерии и в капсуле и обладают свойствами экзои эндотоксина. Вирулентность обусловлена также поверхностно расположенными веществами, обладающими антифагоцитарной активностью, и ферментами: гиалуронидазой, фибринолизином, гемолизинами, плазмокоагулазой.

Устойчивость. Во внешней среде могут длительно сохраняться, хорошо переносят низкие температуры, в замороженных трупах, блохах — год и более, в молоке — 3 месяца. При кипячении погибают в течение 1 минуты. Чувствительны к дезинфицирующим веществам. Прямой солнечный свет убивает их в течение 2−3 часов.

Заболевания у человека. Основной резервуар иерсиний чумы в природе — грызуны (суслики, тарбаганы, крысы и др.). Чума — зоонозное заболевание. Источником инфекции для человека являются животные и человек. От животных заражение происходит трансмиссивным путем — при укусе зараженной блохой, контактным путем. При этом микроб проникает через кожу. От человека, больного легочной чумой, возбудитель передается через воздух. Клиническая форма чумы зависит от входных ворот инфекции. Бубонная форма развивается при проникновении возбудителя через кожу с последующим поражением реги-онарных лимфатических узлов, которые увеличиваясь, превращаются в бубоны. Отсюда возбудители могут распространяться по лимфатическим или кровеносным сосудам, вызывать поражение других лимфоузлов, привести к развитию септической формы, вторичной легочной пневмонии.

При заражении через воздух развивается первичная легочная чума. При всех формах чумы патологический процесс поражает все органы и системы.

Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет стойкий.

Лабораторная диагностика. Чума — особо опасная инфекция. Все исследования проводятся в специальных режимных лабораториях, подготовленным персоналом Материалом для исследования служат содержимое бубона, мокрота, кровь, испражнения, кусочки органов умерших, трупов животных Если при бактериоскопии мазков из материала обнаруживаются грамотрицательные овоидные биполярно окрашенные палочки, ставится предварительный диагноз Окончательный диагноз ставится на основании выделения чистой культуры и ее идентификации, но морфологии, культуральным, биохимическим, антигенным свойствам, по чувствитечьности к чумному бактериофагу По этим признакам дифференцируют их от других видов иерсиний Ставят биологическую пробу на морских свинках Используется также РИФ В материалах из загнивших трупов животных возможно обнаружение чумного антигена с помощью реакции преципитации.

Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика проводится по эпидемическим показаниям, живой чумной вакциной, содержащей штамм EV.

Из лечебных средств эффективны стрептомицин, тетрациклины Иерсиний псевдотуберкулеза

Yersmm pseudotuberculosis — возбудитель псевдотуберкулеза — открыт Л Малассе и Р Виньялем в 1883 г Вызывает заболевания, характеризующиеся образованием в органах узелков, внешне сходных с туберкулезными Одна из форм псевдотуберкулеза, наблюдавшаяся во Владивостоке, описана как «дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка» .

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Грамотрицательные коккобактерии, не образуют спор, имеют жгутики и капсулу Факультативные анаэробы, хорошо размножаются на простых питательных средах Важным для эпидемиологии заболевания свойством возбудителей является их психрофильность Оптимальная температура размножения 20−28°С, размножаются также и при 0 — +4°С Ферментируют рамнозу, мочевину (табл 9).

Антигены. Содержат О-соматический и Н-жгутиковый антигены Серовары и подсеровары различают по Ои Н-атигенам.

Факторы патогенноеги. Иерсиний псевдотуберкулеза содержат эндотоксин, освобождающийся при их гибели Некоторые серовары продуцируют экзотоксины.

Устойчивость. Во внешней среде устойчивы Будучи психрофилами, могут накапливаться в больших количествах в пищевых продуктах, хранящихся длительное время в холодильнике При кипячении погибают через несколько секунд, чувствительны к дезинфицирующим веществам.

Заболевания у человека. Источником инфекции являются грызуны Заражение людей происходит алиментарным путем Факторами передачи чаще всего бывают овощные блюда (салаты, винегреты) и молочные продукты.

Обозначения: «+» — наличие признака, «-» — отсутствие признака, «±» — признак непостоянен ные продукты, не подвергшиеся термической обработке. Имеет значение и водный путь передачи.

Возбудители попадают в организм человека через рот. Преодолев защитный барьер желудка, попадают в тонкий кишечник, в результате развивается гастроэнтерит. Проникновение возбудителей в мезентериальные узлы приводит к развитию лимфаденита с признаками раздражения брюшины и образованием инфильтрата (псевдотуберкулезный аппендицит). При прорыве иерсиний в кровь возникают генерализованные формы с поражением суставов, с проявлениями скарлатиноподобной лихорадки.

Иммунитет. В течение болезни обнаруживаются антитела, но они не обладают протективным действием.

Лабораторная диагностика вследствие большого разнообразия проявлений заболевания имеет решающее значение. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, фекалии и рвотные массы. Культивирование возбудителей и выделение чистой культуры проводится при оптимальной для них температуре. Чистую культуру дифференцируют от других иерсиний по биохимическим свойствам. Для серологической диагностики исследуют парные сыворотки, взятые в начале и на третьей неделе болезни, в реакции агглютинации и РНГА.

Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяется левомицетин и другие антибиотики, нитрофурановые препараты.

Возбудитель кишечного иерсиниоза

Yersinia enterocolitica описан в 1939 г. Дж. Шлейфстейн и М. Колеман. Рапространение иерсиниоза во многих странах мира наблюдается с конца 60-х годов.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Y. enterocolitica представляет собой грамотрицательные полиморфные палочки, спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики.

Психрофилы, культивируются при 20−26°С, могут размножаться при более низких температурах. При 37 °C теряют подвижность. Растут на простых питательных средах. По ферментативным свойствам более активны, чем другие иерсиний (табл. 9). Различают 5 биохимических вариантов Y. enterocolitica.

Антигены. Имеют Ои Н-антигены. По О-антигенам разделяются на серовары.

Токсинообразование. Содержат эндотоксин, который выделяется при разрушении бактериальных клеток. Некоторые штаммы продуцируют экзотоксин. В организме проявляют способность к адге-зии, внутриклеточному размножению, к инвазии (последняя выражена в меньшей степени, чем у иерсиний псевдотуберкулеза).

Устойчивость. Устойчивы к низким температурам. При температуре бытового холодильника (4−8°С) способны длительно сохраняться и размножаться на овощах, фруктах и в молоке. При кипячении погибают через несколько секунд. Чувствительны к дезинфицирующим средствам.

Заболевания у человека. Y. enterocolitica широко распространены в природе. Источником инфекции являются грызуны и домашние животные. Вместе с тем, возбудители могут размножаться и во внешней среде как сапрофиты. Поэтому иерсиниоз можно отнести к сапрозоонозам.

Основной путь заражения — алиментарный. Факторами передачи являются инфицированные мясные продукты, овощи, молоко, вода.

Проникнув через рот и преодолев защитный барьер желудка, попадают в кишечник, вызывая воспаление подвздошной кишки, мезентериальных лимфоузлов, иногда и червеобразного отростка и слепой кишки. Развивается интоксикация и аллергическое состояние. Если возбудители проникают в кровь, возникает бактериемия и генерализованные формы болезни.

Иммунитет. В течение болезни обнаруживаются антитела к возбудителю, но иммунитет не является прочным.

Лабораторная диагностика. Материалами для бактериологического исследования служат смыв из носоглотки, кровь, моча, спинномозговая жидкость, удаленный червеобразный отросток. В оптимальных для возбудителя температурных условиях выделяют чистую культуру, идентифицируют по морфологии и ферментативным свойствам, определяют серовар.

Серологическая диагностика проводится с парными сыворотками с помощью реакции агглютинации, РНГА, ИФА.

Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют левомицетин и другие антибиотики, бисептол, нитрофурановые препараты.

ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН Холерный вибрион Vibrio cholerae впервые выделил из испражнений больных и трупов погибших от холеры и изучил Р. Кох в 1882 г. в Египте. В 1906 г. Ф. Готшлих на карантинной станции Эль Тор в Египте выделил из фекалий паломника вибрион, сходный с вибрионом Коха. Этиологическая роль Vibrio eltor была признана в 1962 г. по решению ВОЗ.

Таким образом, признано существование двух биоваров: V. cholerae и V. eltor.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Холерные вибрионы имеют форму тонкой изогнутой палочки, напоминающей запятую, длиной 2−4 мкм, грамотрицательны, не образуют спор и капсулы, имеют один жгутик (монотрих), очень подвижны (рис. 32).

Очень неприхотливы к питательным средам. Хорошо растут на простых питательных средах щелочной реакции (рН 8,5−9,0), оптимальная температура для их роста 37 °C. Элективной средой для них является щелочная пептонная вода и щелочной агар. Характерной особенностью холерных вибрионов является быстрый рост. Будучи аэробами, они в щелочной пептонной воде через 3−4 часа образуют пленку на поверхности среды. На плотной среде растут в виде прозрачных голубоватых колоний.

Холерные вибрионы проявляют ферментативную активность: разжижают желатин, образуют индол, быстро расщепляют крахмал, расщепляют до кислоты маынозу и сахарозу, не расщепляют арабинозу (I группа Хайберга), что является тестом для дифференциации их от других вибрионов.

Антигены. Вибрионы имеют О-антигены и Н-ан-тигены. Дифференциация видов проводится по О-антигену (всего их известно 139). Холерные вибрионы — Vibrio cholerae и Vibrio eltor относятся к 01. Между собой они не различаются по антигенной структуре. Антиген О1 состоит из компонентов А, В и С. По этим компонентам холерные вибрионы делят на серовары: серовар Огава содержит компоненты, А и В, Инаба — А и С, Гикошима — А, В и С. В 1992 г. в Мадрасе (Индия), а затем в других странах Азии, наблюдались массовые заболевания холерой, вызванные холерным вибрионом, имеющим антиген не О1, а О139. Это новый вид Vibrio cholerae О139Bengal (Бенгальский).

Существуют вибрионы, сходные с холерными, по не агглютинирующиеся О-сывороткой. Их назвали неагглютинирующиеся вибрионы (НАГ'и). НАГ’и выделяются от бальных диареей и от здоровых людей, вызывают гастроэнтериты, которые могут сопровождаться интоксикацией.

Факторы патогешюсти. Холерные вибрионы продуцируют экзотоксин, который носит название «холероген». Под действием холерогена в тонкой кишке происходит потеря воды и ионов натрия, калия и хлора. Они обладают также способностью к адгезии. Лишены инвазивности — не проникают ни в клетки, ни в кровь.

Устойчивость. Вибрионы чувствительны к высокой температуре: при 60 °C погибают через 5 минут, при кипячении — немедленно. Быстро погибают при высушивании и действии света. Низкие температуры переносят хорошо, во льду сохраняются в течение нескольких дней. В пищевых продуктах, воде, почве, испражнениях выживают от нескольких суток до нескольких недель. Очень чувствительны вибрионы к кислотам, даже слабой концентрации. В растворе 1:10 000 соляной и серной кислот они погибают в течение нескольких секунд. Дезинфицирующие вещества в обычных концентрациях убивают их в течение нескольких минут. Vibrio eltor, по сравнению с Vibrio cholerae, более устойчив к действию различных внешних факторов.

Заболевания у человека. Холера — антропонозная инфекция. Источником инфекции являются больные люди и носители. Механизм передачи — фекально-оральный, чаще всего холера передается водным путем, реже пищевым и контактно-бытовым. Инкубационный период при холере от нескольких часов до 5 суток.

Попав через рот в желудок, холерные вибрионы могут погибнуть под действием кислого желудочного сока. При пониженной кислотности риск развития заболевания выше. Преодолев желудочный барьер, вибрионы проникают в тонкий кишечник, прикрепляются к эпителию, размножаются. Выделяющийся холероген вызывает нарушение водно-солевого обмена — потерю воды и солей. Клинически это проявляется обильной диареей,.

Иммунитет. В течение заболевания образуются антитоксины и аптимикробные антитела. Защитную роль играют секреторные IgA, препятствующие адгезии холерных вибрионов на клетках эпителия тонкой кишки.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат испражнения и рвотные массы, при вскрытии трупов — отрезок тонкой кишки. Исследуют также воду, пищевые продукты, а также содержимое кишечника здоровых людей на носительство.

Исследования проводятся в лаборатории особо опасных инфекций. При взятии и пересылке необходимо соблюдать меры, обеспечивающие безопасность.

Микробиологическое исследование имеет значение для лечения и должно проводиться возможно в наиболее краткие сроки. Микроскопия мазка из исследуемого материала носит предварительный характер. Первый ориентировочный ответ можно получить при постановке РИФ.

Через 5−6 часов в посевах на жидких питательных средах исследуют пленку на поверхности среды, определяют морфологию, подвижность, ставят реакцию агглютинации со специфической сывороткой. Выдают первый предварительный ответ.

Через 10−12 часов изучают колония на плотных питательных средах, выдают второй предварительный ответ.

Окончательный ответ выдается после выделения и изучения чистой культуры. Идентификацию культуры проводят на основании морфологии, подвижности, агглютинации специфическими сыворотками, изучения биохимических свойств. Для дифференциации Vibrio eltor от Vibrio cholerae используется его способность расти в питательной среде с полимиксином, агглютинировать куриные эритроциты, лизирфваться специфическим бактериофагом.

Профилактические и лечебные препараты. Для лечения наиболее важным является восполнение дефицита воды и электролитов с помощью солевых растворов. Применение тетрациклина дополняет лечение и позволяет уменьшить объем вводимых солевых растворов. Для специфической профилактики существуют вакцины: 1) кор-пускулярная убитая; 2) холероген-анатоксин; 3) ассоциированная вакцина (холероген-анатоксин + О-антиген).

КАМПИЛОБАКТЕРЫ К роду Campylobacter (греч. campylo — изогнутая) относятся патогенные для человека виды: С. jejuni, С. fetus, С. coli, С. pylori (Helicobacter pylori).

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Кампилобактерии — тонкие, длиной до 5 мкм, изогнутые по оси грамотрицательные палочки, напоминающие крылья летящей чайки. Спор и капсул не образуют. Жгутики, расположенные на одном конце или на обоих концах клетки, создают характерные винтообразные движения.

Кампилобактеры — микроаэрофилы, то есть растут при пониженной концентрации кислорода (5−8%). Оптимум рН=7,0, температурный оптимум для роста С. jejuni и С. coli равен 42−43°С, для С. fetus и Н. pylori 37 °C. Для культивирования применяется среда, содержащая аминокислоты, кровь, активированный уголь. Могут культивироваться на среде, предназначенной для бруцелл. Элективные среды для кампило-бактеров содержат полимиксин, линкомицин или триметоприм. Растут медленно, колонии появляются через двое-трое суток.

Биохимически мало активны, углеводы не расщепляют, энергию получают путем расщепления аминокислот.

Антигены. Содержат Ои Н-антигены, видоспецифические.

Факторы пагогенности. Патогенность кампилобактерий связана с адгезивностью, инвазивностыо, продукцией энтеротоксина. сходного с холерогеном.

Устойчивость. Во внешней среде — в испражнениях больных, в воде кампилобактерий сохраняются в течение недели, в замороженном мясе — несколько месяцев, на различных предметах при комнатной температуре — до двух недель. Чувствительны к дезинфицирующим веществам, к высокой температуре, при кипячении погибают. Устойчивы к действию желудочного сока и желчи, что позволяет им преодолевать желудочный барьер и сохраняться в желчном пузыре.

Заболевания у человека. Кампшюбактериозы — зоонозные заболевания. Источником инфекции являются животные, главным образом домашние и сельскохозяйственные. От человека человеку заболевание передается очень редко. У животных инфекционный процесс протекает или бессимптомно, или в виде кишечных заболеваний, спонтанного аборта. Возбудители выделяются у них с испражнениями, мочой, молоком.

Механизм передачи инфекции — фекально-оральный, пути передачи — водный и пищевой, при употреблении мяса и молока больных животных, возможно заражение при уходе за больными животными.

Кампилобактерий проникают в организм обычно через рот, реже через поврежденную кожу. Возможно заражение плода через плаценту.

С. jejuni, С. coli вызывают энтерит, гастроэнтерит, энтероколит, С. fetus у ослабленных людей могут вызвать менингит, энцефалит, эндокардит, перитонит и др.

II. pylori участвует в развитии гастрита и язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Лабораюрная диагностика. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные массы, кровь, пунктат из суставов, ликвор, биоптат со слизистой оболочки желудка. Исследуют мазки, окрашенные по Граму, биоптат — гематоксилином и эозином.

Выделяют чистую культуру и идентифицируют.

Применяют серологический метод — обнаружение антител в парных сыворотках с помощью РСК, РНГА.

Лечебные препараты. Эритромицин, гентамицин, метронидазол, фуразолидон, при желудочном заболевании — Де-нол.

ГЕМОФИЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ Гемофильные бактерии — это разнородная группа мелких грамотрициательных аэробных неспорообразующих неподвижных палочек, которые требуют для культивирования среды, содержащие кровь. Некоторые бактерии из этой группы входят в состав нормальной микрофлоры слизистых оболочек, другие имеют существенное значение в патологии человека: Haemophilus influenzae, Bordetella pertussis.

Haemophilus influenzae

Палочка инфлюэнцы была обнаружена в мокроте больных во время пандемии гриппа М. И. Афанасьевым, выделена и изучена в 1822 г. Р. Пфейффером и С. Китазато. Ошибочно ее считали возбудителем гриппа, в дальнейшем было установлено, что палочка инфлюэнцы сопутствует заболеванию гриппом и вызывает воспалительные процессы.

Н. influenzae — грамотрицательные мелкие, иногда кокковидные палочки, неподвижные, в организме образуют капсулу. Требовательны к питательным средам, растут на средах с гретой кровью. Вблизи других микробов, например стафилококков, образуют более крупные колонии.

Содержат О-антиген, инкапсулированные варианты имеют капсульный антиген, по которому их можно типировать. Не продуцируют экзотоксин, патогенность их связана с капсулой и эндотоксином.

Во внешней среде нестойки, погибают при 60 °C. Чувствительны к дезинфицирующим средствам.

Палочки инфлюэнцы обнаруживаются на слизистых оболочках верхних дыхательных путей и бронхов. Вызывают вторичные инфекции при гриппе и других заболеваниях. Может происходить заражение извне, в результате передачи воздушно-капельным путем.

Палочки инфлюэнцы являются возбудителями острых гнойно-воспалительных процессов, таких как назофарингит, воспаление среднего уха у детей, менингит, пневмония. У грудных детей иногда развивается ларинготрахеит с резким отеком надгортанника, что требует быстрого выполнения трахеостомии для предупреждения гибели ребенка.

Микробиологический диагноз ставят путем выделения чистой культуры из мокроты, слизи из носа, гноя, крови, ликвора и дифференциации ее от других гемофильных бактерий.

У детей до 3 месяцев имеется пассивный иммунитет, переданный им от матери. Чаще всего менингит, вызванный палочками инфлюэнцы, встречается у детей от 6 месяцев до 3 лет. У взрослых людей появляются антитела, предохраняющие от инфекции.

Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики и сульфаниламиды. Некоторые штаммы продуцируют бета-лактамазу и поэтому нечувствительны к пенициллину и ампициллину.

Бордетеллы коклюша

Bordetella pertussis был выделен Ж. Борде и О. Жангу в 1906 г. от больного ребенка.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Бордетеллы коклюша — короткие грамотрицательные палочки, неподвижны, спор не образуют. Имеют тонкую капсулу.

Строгий аэроб, оптимальная температура для роста 37 °C. Требователен к питательным средам, хорошо растет на картофельно-глицериновом агаре с добавлением сыворотки крови или на казе-иново-угольном агаре (КУА). Ферментативная активность у палочек коклюша выражена очень слабо.

Антигены. Антигенная структура бордетелл сложна. Выявлены антигены, общие для всех бордетелл, антигены, специфичные только для Bordetella pertussis и антигены, по которым определяют серо-вары внутри этого вида.

Факторы патогенности. Основной фактор патогенности — токсин, состоящий из термолабильной и термостабильной фракций. Кроме того, бордетеллы коклюша содержат сенсибилизирующий фактор и фактор, стимулирующий лимфоциты.

Устойчивость. Во внешней среде палочки коклюша неустойчивы. Прямой солнечный свет убивает их через 1−2 часа, УФ-лучи — через несколько минут. При 56 °C они погибают через 20−30 минут. Чувствительны к дезинфицирующим веществам.

Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек, который заразен в катаральном периоде и в течение 1−1,5 месяцев. Передача происходит воздушно-капельным путем при непосредственном общении с больным, так как возбудитель рассеивается вокруг больного не более чем на 2−2,5 м и малоустойчив во внешней среде. Возбудитель попадает в организм через верхние дыхательные пути, вызывает воспаление. Внутрь клеток не проникает. Коклюшный токсин вызывает раздражение слизистой оболочки дыхательных путей, что ведет к возникновению кашля. Токсин всасывается в кровь и действует на дыхательный центр, вызывает его возбуждение, которое может распространяться на рвотный центр.

Инкубационный период при коклюше равен 3−15 дням. В течение болезни различают три периода: катаральный, спазматического кашля и разрешения. У привитых вакциной детей болезнь протекает в легкой (стертой) форме.

Иммунитет. После перенесения заболевания образуется прочный иммунитет. В течение болезни образуются антитела, которые определяются в реакции агглютинации и РСК.

Лабораторная диагностика заключается в посеве исследуемого материала, выделении чистой культуры, ее идентификации. Материалом для исследования служит слизь из носоглотки, которую берут заглоточным тампоном. При наличии характерного кашля используют метод «кашлевых пластинок»: во время приступов кашля чашку с питательной средой держат вертикально у рта ребенка на расстоянии 5−10 см в течение нескольких секунд. Идентификация выделенных культур и дифференциация от паракоклюшных бактерий проводится по кульгуральным, биохимическим и антигенным свойствам Для подтверждения диагноза используется серологическое исследование реакция агглютинации РСК, PНГA.

Лечебные и профилактические препараты, Дла создания активною иммунитета применяется АКДС и АКДС-м адсорбированная коклюшно-дифтериино-столбнячная вакцина, в которой коклюшный компонент представлен убитыми бордетеллами коклюша Для лечения применяют противококлюшный иммуноглобулин и ангибиотики.

Другие бактерии группы Haemophilus

Bordetclla parapertussis — могут вызывать заболевания сходные с коклюшем, хотя они отличаются ог кишечных В. pertussis по биологическим свойствам.

Haemophiius parainfluen/ae — сходны с H. influenzae и являются обитателями дыхательных путей человека Обнаружены при инфекционном эндокардите.

Haemophilus ducreyi — возбудитечь мягкого шанкра (болезнь передающаяся половым путем) СИНЕГНОЙНАЯ ПАЛОЧКА Синегнойная палочка — Pseudomonas aeruginosa — относится к роду Pseudomonas. К этому роду относят также Pseudomonas mallei — возбудитель сапа и Pseudomonas pseudomallei возбудитель мелиоидоза.

Pseudomonas aeruginosa впервые описана Л Люкке в 1862 г Является условно-патогенным микроорганизмом. В постеднее время роль этою микроба в возникновении гнойно-воспалительных процессов возросла.

Морфология, культуральные свойства. Р aeruginosa — грамотрицательная палочка прямая или cлегкa изогнутая, длиной до 3 мкм, подвижная — имеет один или два полярно расположенных жгутика. Спор не образует. Слизистое вещество на поверхноси клеток выполняет роль капсулы.

Aэpoб. Растет на обычных питательных средах. Характерным при знаком Р aeruginosa является образование пигмента и ароматических веществ вследствие чего питательные среды при росте микроба окра шиваются в снне-зсленый цвет и издают запах жасмина.

Сахаролитическая активность у синегнойной палочки слабо выражена, она ферментирует только глюкозу. Протеолитическая активность высокая разжижает желатин и свернутую сыворотку свертывает молоко Многие штаммы продуцируют бактериоцины (пиоцины).

Антигены. Синептонная палочка имеет Ои Н-антшены по ко-юрым их разделяют на типы.

Факторы патогенности. К ним относятся экзотоксин А, гемолизины лейкоцидин, и ферменты — коагулаза эластаза Капсулоподобное слизистое вещество защищает микроб от фагоцитоза Липополисахарид клеточной стенки обладает свойствами эндотоксина.

Устойчивость. Синегнойная палочка обитает в почве, в воде, на растениях, долго сохраняется на предметах, медицинских инструментах При кипячении погибает сразу, при 60 °C — через 15 минут Чувствительна к дезинфицирующим веществам Обладает природной устойчивостью к ряду антибиотиков.

Заболевания у человека. Синегнойная палочка относится к условно-патогенным гноеродным бактериям Она вызывает гнойно-воспалительный процесс при инфицировании ран, чаще всего ожоговых, а также отиты, пневмонию, пищевые отравления, сепсис, часто в ассоциации с другими микробами Инфекция возникает чаще у лиц с ослабленным иммунитетом Синегнойная палочка — один из главных возбудителей внутрибольничной инфекции В условиях клиники распространены «госпитальные» штаммы этого микроба — высокоустойчивые к антибактериальным средствам и дезинфектантам.

Лабораторная диагностика. С целью диагностики из исследуемого материала выделяют чистую культуру и идентифицируют по морфологии, культуральным признакам и биохимическим свойствам Определяют чувствительность к антибиотикам При санитарно-микробиологических исследованиях выявляют синегнойную палочку как один из показателей микробного загрязнения Профилактические и лечебные препараты. Для создания активного иммунитета существует вакцина Для лечения применяют антибиотики с учетом чувствительности к ним возбудителя карбенициллин, гентамицин и др, а также гетерологичный иммуноглобулин, иммунную плазму, пиопммуноген.

ЛЕГИОНЕЛЛЫ Впервые заболевание, названное позже легионеллезом, наблюдалось в 1976 г среди участников съезда американских легионеров в Филадельфии Заболел 221 человек, умерло 34 В 1977 г Д МайкДейц и Шепард описали неизвестный ранее микроорганизм, названный Legionella pncumophilla В настоящее время известно 9 видов, относящихся к роду Legionella.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Легионеллы — грамотрицательные палочки 2−3 мкм в длину, встречаются нитевидные формы Характерная морфологическая особенность — заостренные концы палочки Спор и капсул не образуют, имеют жгутики (рис 33).

Аэробы, растут в присутствии 5% диоксида углерода, культивируются на угольно-дрожжевом агаре в виде колоний с коричневым пигментом, диффундирующим в среду Культивируются также в куриных эмбрионах и в культуре клеток Биохимически мало активны Некоторые штаммы способны флюоресцировать в УФ-лучах.

Факторы патогенности — термостабильный эндотоксин, у некоторых штаммов обнаружен экзотоксин.

Устойчивость. Легионеллы размножаются во внешней среде — в почве, в воде, особенно в теплой (25−30°С), то есть являются сапрофитами. Чувствительны к дезинфицирующим веществам. Устойчивы к пенициллинам.

Заболевание у человека. Легионеллез относят к сапронозньш инфекциям. Считают, что источником инфекции являются объекты внешней среды. Путь передачи — воздушно-капельный. Факторы передачи: вода в виде атрозоля, почва в виде пыли. В системах кондиционирования воздуха, в душевых создаются условия для накопления достаточно большого количества возбудителей, чтобы вызвать заболевание у человека. Легионеллез часто возникает как внутрибольничная инфекция, особенно в специализированных клиниках, отделениях реанимации, центрах гемодиализа. Заболевают преимущественно пожилые люди, курильщики, алкоголики, наркоманы, лица с иммунодефицитами. Чаще болеют мужчины.

Входными воротами инфекции являются дыхательные пути. Возбудители могут проникать в кровь, вызывая бактериемию.

Инкубационный период длится от 2 до 10 суток. Клинические формы легионеллеза: 1) болезнь легионеров, протекающая как тяжелая пневмония; 2) острое респираторное заболевание без пневмонии — болезнь Понтиак (наблюдалась в 1968 г. в г. Понтиак, США); 3) острое лихорадочное заболевание с сыпью — лихорадка Форт-Брагг. При тяжелом течении легионеллеза возможен инфекционно-токсическнй шок со смертельным исходом.

Иммунитет видоспецифичен, механизм его клеточный.

Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом является плев;

ральная жидкость, мокрота, кровь. Применяют РИФ для обнаружения возбудителя непосредственно в исследуемом материале. Бактериологический метод сложен и применяется в специализированных лабораториях. Серологический метод применяется широко. В парных сыворотках обнаруживают нарастание титра антител на 2−3-й неделе заболевания.

Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют эритромицин, рпфампицин.

БРУЦЕЛЛЫ Род Brucella получил свое название в честь английского ученого Д. Брюса, который в 1886 г. выделил возбудителя из селезенки умершего человека. К роду Brucella относятся виды: Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis и др.

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Бруцеллыграмотрицательные мелкие, длиной до 1,5 мкм, палочки овоидной формы. Не образуют спор, не имеют жгутиков и капсулы. Под влиянием антибиотиков превращаются в L-формы.

Аэробы. В. abortus растут в присутствии 5−10% диоксида углерода. Требовательны к питательным средам, их культивируют на специальных средах. Выделенные из организма бруцеллы растут медленно, рост обнаруживается через 1−3 недели, в последующих пересевах растут быстрее.

Биохимическая активность невысокая. Дифференциация видов основана на способности продуцировать сероводород и расти в присутствии фуксина и тионина.

Антигены. Бруцеллы содержат поверхностные Yi-антигены и ви-доспецифические соматические антигены, А и М: у В. melitensis преобладает М-антиген, у В. abortus и В. suis — А-антиген.

Факторы патогенности. Бруцеллы содержат эндотоксин и продуцируют фактор инвазивности — фермент гиалуронидазу.

Устойчивость. Бруцеллы устойчивы к низким температурам, сохраняются в замороженном мясе до 5 месяцев, в брынзе — до 4 месяцев. К высокой температуре чувствительны: при кипячении погибают сразу, при 60 °C — за 30 минут, то есть пастеризация молока их убивает. К дезинфицирующим средствам бруцеллы чувствительны.

Заболевание у человека. Бруцеллез — зоонозная инфекция. В. melitensis вызывает заболевания коз и овец, В. abortus — крупного рогатого скота, В. suis — свиней. Характерный признак бруцеллеза у животных — инфекционный аборт. Инфицированными оказываются выделения животных, молоко и молочные продукты. В России основной источник бруцеллеза — овцы, реже — коровы. Больные люди не являются источником инфекции.

Человек чаще всего заражается алиментарным путем; возбудители могут проникать также через кожу и слизистые оболочки. Инкубационный период длится 1−3 недели. В развитии заболевания играет роль эндотоксин бруцелл, их инвазивность, а также сенсибилизация организма. Клиническая картина очень разнообразна: длительная лихорадка, повышенная потливость, поражение суставов, нервной, сердечно-сосудистой систем. Течение обычно затяжное и хроническое.

Иммунитет. В течение болезни формируется нестерильный иммунитет. Освобождение организма от возбудителей происходит путем фагоцитоза. Аллергическое состояние (ГЧЗТ) возникает в первые дни болезни и сохраняется затем долго.

Лабораторная диагностика. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, моча, испражнения, иногда — ликвор. Бактериологические исследования проводятся в лаборатории особо опасных инфекций. Посевы выдерживают в течение месяца, периодически производят высевы. Идентификацию культуры проводят по морфологии, потребности в диоксиде углерода для роста, наличию роста на средах, содержащих фуксин и тионин, наличию Ми А-антнгенов, чувствительности к фагу, окислению аминокислот.

Применяют серологическую диагностику с помощью реакции агглютинации Райта и Хеддльсона, PНГА, РОК, а также аллергическую пробу Бюрне.

Профилактические и лечебные препараты. Основная роль в профилактике принадлежит сашггарно-гигиеническим мероприятиям. По эпидемическим показаниям применяют живую бруцеллезную вакцину, Для лечения используют антибиотики (левомицетин, рифамицин, тетрациклин, доксициклин, стрептомицин), при хроническом бруцеллезеубитую вакцину.

БАКТЕРИИ ТУЛЯРЕМИИ Возбудителя туляремии (Francisella tularcnsis) впервые выделили в 1910;1912 гг. американские бактериологи Г. Мак Кой и Ш. Чепин от больных сусликов и подробно изучил Э. Френсис в местности Туляре (Калифорния), откуда произошло название болезни и возбудителя.

Морфология, культуральные свойства. Возбудитель туляремии представляет собой мелкие кокковидные, размером до 0,5 мкм, грамотрицательные палочки, жгутиков не имеет, спор не образует, вокруг бактерий образуется тонкий слизистый кансулоподобный слой.

Факультативные анаэробы. Па простых питательных средах не растут, их культивируют на средах с добавлением яичного желтка, на сахарно-кровяном агаре с добавлением цистсина. Ферментативная активность слабая.

Патогенность связана с эндотоксином и инвазивностыо.

Устойчивость. Длительно сохраняется во внешней среде, особенно при низкой температуре. При кипячении погибает сразу, при 60 °C гибнет через 20 минут. Чувствителен к дезинфицирующим среяствям.

Заболевание у человека. Туляремия — зоонозное заболевание. Источником инфекции являются грызуны. Человек высоковосприимчив к туляремии. Характерно разнообразие механизмов передачи возбудителя. Заражение происходит при укусе инфицированными клещами, комарами, слепнями, при прямом контакте с больными животными или их трупами, через зараженную воду и пищевые продукты, при вдыхании воздуха с пылью, зараженными выделениями грызунов или при попадании инфицированных частичек пыли на слизистую оболочку глаз. От человека человеку возбудитель не передается Инкубационный период составляет 3−7 дней.

В зависимости от путей проникновения возбудителя в организм развивается та или иная форма туляремии: бубонная, язвенно-бубонная, глазо-бубоныая, ангинозно-бубонная, абдоминальная, легочная, гене-рализованная.

Иммунитет. После перенесенного заболевания остается стойкий иммунитет и состояние повышенной чувствительности к возбудителю (ГЧЗТ).

Лабораторная диагностика. Бактериологические исследования проводятся в лаборатории особо опасных инфекций. Материалом для исследования служат пунктат из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, слизь из зева, мокрота, кровь. В первичном посеве материала на питательные среды роста не получается, поэтому вначале производят заражение животных (мышей или морских свинок), а затем из их органов делают мазки-отпечатки и посев на питательную среду.

Серологическим методом, реакцией агглютинации или РИГА выявляют антитела в сыворотке крови со 2-й недели болезни.

Аллергическая проба с тулярином положительна уже с 3−5-го дня заболевания.

Профилактические и лечебные препараты. Для создания активного иммунитета по эпидемическим показаниям применяют живую туляремийную вакцину, полученную отечественными учеными Н. А Гайским и Б. Я Эльбертом. Вакцина высокоэффективна, вводится однократно накожно.

Для лечения применяют стрептомицин, тетрациклин, хлорамфеникол.

БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

Возбудитель сибирской язвы Bacillus anthracis открыт в 1849 г. А. Поллендером, выделен и изучен Р. Кохом в 1876 г.