Определение вида крови
Для определения вида крови чаще всего пользуются реакцией белковой преципитации (Чистовича-Уленгута). В реакции преципитации участвуют два компонента: вытяжка из пятна крови и иммунная сыворотка, преципитирующая определенный вид белка. Сущность реакции заключается в том, что при взаимодействии раствора белка, полученного в вытяжке из пятна крови, со специально приготовленной для обнаружения… Читать ещё >
Определение вида крови (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Проведение такого исследования, с одной стороны, диктуется обстоятельствами происшествия, когда в процессе расследования возникают версии о происхождении крови на предметах не только от человека, но и от птиц, млекопитающих, рыб, а с другой — определяется дальнейшим исследованием групповой принадлежности крови в следах, которое нельзя проводить без установления вида крови.
Для определения вида крови чаще всего пользуются реакцией белковой преципитации (Чистовича-Уленгута). В реакции преципитации участвуют два компонента: вытяжка из пятна крови и иммунная сыворотка, преципитирующая определенный вид белка. Сущность реакции заключается в том, что при взаимодействии раствора белка, полученного в вытяжке из пятна крови, со специально приготовленной для обнаружения данного белка сывороткой, образуется осадок преципитат. Выпускаются сыворотки, осаждающие белок человека, рогатого скота (крупного, мелкого), лошади, свиньи, кошки, собаки, птицы. Следует иметь в виду, что могут быть приготовлены сыворотки, осаждающие белки и других животных.
Кроме основного опыта с вытяжкой из пятна крови, ставят контрольные опыты, в том числе и с вытяжками из предмета вне пятен крови, поскольку белок человека может присутствовать на предметах (чаще всего на одежде) и не только с кровью (например, выделения из носа, пот, моча и т. п.). В подобных случаях невозможно определить вид крови. Если положительный результат с сывороткой на белок человека не был получен, эксперт обязан ставить реакцию преципитации с сыворотками, изготовленными на белки различного вида животных, до получения положительного результата. При отрицательном результате с использованием вышеуказанных сывороток показано проведение пробы Геллера с концентрированной азотной кислотой, определяющей наличие белка в вытяжках (чувствительна до разведений 1:1 000).
В настоящее время для определения видовой принадлежности крови используют реакции преципитации в агаровом геле, встречного иммуноэлектрофореза, иммунофлюоресценции.
Реакция преципитации в геле была предложена О. Ouchterlony (1949). Ее принцип состоит в следующем: в агаре в две лунки помещают антиген и антитело, они диффундируют друг в друга, и в месте контакта образуется полоса преципитации.
Встречный иммуноэлектрофорез (электропреципитация) впервые был предложен Bussardom (1959). Сущность реакции заключается в следующем: глобулиновые фракции сывороток, содержащие антитела, направляются от «+» к «-», а антигены от «-» к «+». Таким образом, двигаясь навстречу друг другу, они образуют полосу преципитации. Данная реакция может быть проведена как в агаровом геле, так и на пленках ацетатцеллюлозы.
РИФ реакция иммунофлюоресценценции была предложена в 1942 г. Coons и соавторами. Она основана на люминесценции антител, меченных различными флюорохромами, при этом антитела вступают в контакт с антигенами на поверхности объектов исследования. Используется непрямая реакция иммунофлюоресценции, состоящая из двух этапов:
- • контакт антигена с нефлюоресцирующей сывороткой;
- • обработка объекта исследования люминесцирующей сывороткой.
После установления принадлежности крови человеку определяют ее группу.