Доклинические исследования

Известно, что эндотелиновая система сердца тесно связана с NO-синтазной системой. Ингибиторы NO-синтазы могут изменять эффекты ЕТ-1 на сердце, а доноры NO оказывают антиаритмогенное действие на миокард. Однако ряд вопросов, связанных с изучением взаимодействия этих систем и их роли в развитии аритмии, изучены не достаточно. Известно также, что подходы к антиаритмической фармакотерапии в клинической практике за последние 10−15 лет претерпели радикальные изменения. Автономная нервная система принимает непосредственное участие в развитии данного типа аритмии. Причём, блокада парасимпатической нервной системы приводит к снижению вариабельности ЧСС и аритмии на ЕТ-1 главным образом за счёт устранения последствий блокады эндогенного оксида азота. Тогда как блокада симпатической нервной системы подавляет аритмогенность собственно ЕТ-1.

6. Доклинические исследования тромболитического препарата фортелизин

В настоящее время инфаркт миокарда продолжает оставаться одной из наиболее важных проблем отечественного здравоохранения. Тромболитическая терапия остается методом выбора лечения больных инфарктом миокарда.

Фортелизин — это иновационный отечественный препарат, разработанный фармацевтической компанией «Супра

Ген" для лечения больныхс острым инфарктом миокарда.

Для внедрения препарата Фортелизин в широкую отечественную клиническую практику необходимо было провести его доклиническое изучение в соответствии с действующим законодательством РФ.

Доклинические исследования:

Доклиническое (токсикологическое) изучение отечественного фибринселективного тромболитического препарата Фортелизин®, проведенное в соответствии с действующим законодательством РФ и требованиями, изложенными в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2005), показало, что препарат является малотоксичным при однократном внутрибрюшинном введении мышам линии BALB/C и внутривенном введении кроликам. Установлено, что однократное внутрибрюшинное введение мышам линии BALB/C препарата Фортелизин® в диапазоне испытанных доз 1250−28 750 мг/кг не вызывает каких-либо признаков интоксикации и гибели животных.

Дальнейшее увеличение доз Фортелизина® ограничивалось максимально допустимым объемом жидкости при данном способе однократного введения мышам. Высшая из испытанных на мышах доза препарата 28 750 мг/кг более чем в 216 000 раз превышала высшую терапевтическую дозу, рекомендованную для человека (10 мг на человека, или 0,133 мкг/кг). При этом не выявлено существенных половых различий в чувствительности мышей линии BALB/с для человека (10 мг на человека, или 0,133 мкг/кг). При этом не выявлено существенных половых различий в чувствительности мышей линии BALB/с к токсическому действию препарата.

Субстанция препарата Фортелизин® при однократном внутривенном введении кроликам в дозе 5,2 мг/кг (40-кратная высшая терапевтическая доза для человека) хорошо переносилась животными и не вызывала токсических проявлений. Изучение токсичности препарата Фортелизин® в условиях субхронических экспериментов проводилось на кроликах при ежедневном в течение 2 недель внутривенном введении субстанции препарата в дозе 2,66 и 1,33 мкг/кг в готовой лекарственной форме (стерильный лиофилизированный порошок по 10 мг во флаконах). Испытанные в субхронических опытах на кроликах дозы препарата превышали высшую терапевтическую дозу для человека в 10 и 20 раз. Как показали проведенные исследования, Фортелизин® в испытанных дозах 2,66 мг/кг (субстанция) и 1,33 мкг/кг (готовая лекарственная форма) в 2-недельных субхронических опытах на кроликах хорошо переносится животными и не влияет на гематологические показатели, функциональное состояние основных органов и систем организма подопытных животных (по данным использованных биохимических тестов и ЭКГ).

Отсутствие токсических повреждений внутренних органов и местнораздражающего действия, связанных с введением препарата Фортелизин®, подтверждено результатами патоморфологических исследований, проведенных после окончания субхронических экспериментов. При оценке мутагенности Фортелизина® изучена способность препарата вызывать генные мутации у индикаторных штаммов бактерий в тесте Эймса, вызывать хромосомные аберрации в клетках костного мозга млекопитающих и влиять на количество доминантных летальных мутаций в зародышевых клетках мышей. В результате проведенных исследований установлено, что Фортелизин® не обладает мутагенными свойствами. В испытанной дозе 2,66 мкг/кг (20-кратная высшая терапевтическая доза, рекомендованная для человека) при ежедневном внутрибрюшинном введении беременным крысам с 1-го по 19-й день гестации Фортелизин® не влиял на прибавку массы тела беременных крыс, продолжительность беременности, количество желтых тел, мест имплантации, массу тела эмбрионов, их краниокаудальный размер, показатели преди постимплантационной гибели плодов, а также постнатальное развитие крысят.

В испытанной дозе 2,66 мкг/кг Фортелизин® не вызывал каких-либо уродств и пороков развития эмбрионов. При 2-кратном в неделю в течение 10 недель внутрибрюшинном введении препарата Фортелизин в дозе 2,66 мг/кг крысам-самцам линии Вистар и при ежедневном в течение 2 недель введении крысам-самкам не установлено влияния препарата на репродуктивную функцию животных. При изучении аллергизирующих свойств препарата Фортелизин® на морских свинках установлено, что при 5-кратном внутрибрюшинном введении в сенсибилизирующих дозах 0,665 и 1,33 мкг/кг и внутрибрюшинном введении разрешающей дозы препарата (1,33 мкг/кг) на 14-й и 21-й дни после сенсибилизации Фортелизин® не вызывает анафилактического шока.

Препарат в испытанных дозах и схемах сенсибилизации не оказывает аллергизирующего действия в реакции гиперчувствительности замедленного типа на морских свинках и в реакции подколенного узла у мышей. В испытанных дозах 2,66 и 1,33 мкг/кг (20- и 10- кратные высшие терапевтические дозы, рекомендованные для человека) Фортелизин® не влияет на число антителобразующих и ядросодержащих клеток в селезенке мышей, а также на реакцию гиперчувствительности замедленного типа у мышей. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии влияния Фортелизина® на гуморальный и клеточный иммунитет, а следовательно об отсутствии у препарата иммунотоксичности.

Результаты проведенного доклинического (токсикологического) изучения препарата Фортел зин® позволило рекомендовать его для клинических исследований у больных с острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST на ЭКГ. После проведения экспертизы материалов доклинического изучения препарата Фортелизин® было получено разрешение Росздравнадзора на проведение его клинического исследования в рамках I-II фазы.

7. Ошибки доклинических исследований

При экспертизе результатов сравнительного токсикологического исследования воспроизведённых препаратов отмечаются случаи существенного расхождения параметров токсичности одних и тех же препаратов в отчетах от разных производителей. При этом нередко отсутствует достаточно подробное описание условий эксперимента, характеристик экспериментальных животных и тестируемого вещества (экспериментальной формы препарата), обоснование выбора доз и анализ полученных результатов с учетом параметров токсичности препарата по литературным данным. Несмотря на то, что определенные количественные колебания токсичности обусловлены допустимой погрешностью эксперимента при изменении характеристик тест-объекта и исследуемого вещества, существенные расхождения результатов могут свидетельствовать как о некорректном проведении эксперимента, так и об отсутствии контроля качества тестируемого вещества или неадекватном выборе исследуемых доз.

Методологические недостатки не позволяют сделать однозначного заключения об идентичности токсических свойств разработанного препарата и его аналога, зарегистрированного в РФ. Причиной этого часто является серьезный дефект дизайна исследования — использование в эксперименте нетоксичных доз, что противоречит методологическим принципам токсикологических исследований. Фактически, в эксперименте не выявляются токсические эффекты, и, следовательно, отсутствует возможность сравнения их параметров. В подобных случаях заключение токсикологической экспертизы может содержать указание о возможном различии переносимости препаратов в клинике, что следует рассматривать как токсикологическое основание для рассмотреня вопроса о целесообразности проведения предрегистрационных клинических исследований воспроизведенного препарата.

Вывод:

Информативность сравнительных токсикологических исследований и корректность выводов о токсичности воспроизведенных препаратов зависит от адекватности выбора исследуемых доз, в которых препараты должны вызывать регистрируемые токсические эффекты Адекватный выбор препарата сравнения для оценки токсикологических свойств нового воспроизведенного препарата позволит объективно идентичность профиля его безопасности и гарантировать выход на фармацевтический рынок лекарственных средств высокого качества.

Для оценки корректности проведенных исследований и исключения методологической погрешности, влияющей на параметры токсичности, необходимы тщательное документирование в отчете условий эксперимента, характеристик тест-объекта и тестируемого вещества, а также анализ полученных результатов с учетом литературных данных [11].

Заключение

Протоколы на серию продукции и упаковку серии продукции.

Для каждой серии или части серии продукции должны составляться протокол на серию продукции и протоколы на упаковку, которые хранятся в установленном порядке.

Протокол на серию должен быть составлен в соответствии с промышленным регламентом и технологическими инструкциями. В протоколе должен быть указан номер произведенной серии продукции.

Протоколы на упаковку серии продукции должны быть основаны на действующих инструкциях по упаковке. В протоколах указываются номер серии и количество нерасфасованной продукции, подлежащей упаковке, а также номер серии и планируемое количество готовой продукции.

Перед началом любого технологического процесса или любой упаковочной операции необходимо проверить и оформить протокол о том, что оборудование и рабочее место находятся в чистом состоянии, не содержат остатков предыдущего продукта, документации и материалов, не относящихся к данному процессу, и готовы к использованию.

Протоколы на упаковку серии продукции оформляются документально одновременно с выполнением соответствующей операции. Протокол на упаковку серии продукции подписывается лицом, ответственным за упаковку, с указанием даты.

Инструкции и протоколы по приемке серии продукции, отбору проб и проведению испытаний.

Приемка. Приемка каждой серии каждого вида поставляемых исходных, упаковочных и печатных материалов ведется в соответствии с письменной инструкцией. По результатам приемки составляется протокол.

Отбор проб. В инструкциях по отбору проб должны быть указаны лица, уполномоченные на проведение этих операций, используемые методики и оборудование, количество отбираемых материалов и меры предосторожности, исключающие загрязнение или ухудшение качества продукции.

Проведение испытаний. Должны быть разработаны и утверждены методики испытаний материалов и продукции на различных этапах производства с указанием используемых методов и оборудования. Результаты испытаний оформляются в виде протокола.

Внедрение правил отвечает не только интересам потребителей лекарственных средств, но и создает преимущества для производителя, а именно возрастает привлекательность предприятия для инвесторов, существенно сокращаются затраты по отзывам и переработке, резко возрастает экспортный потенциал.

Таким образом, переход российских фармацевтических предприятий на производство в соответствии с международными требованиями, несомненно, придаст отечественным лекарствам статус конкурентоспособных препаратов, и будет способствовать повышению обеспеченности населения и учреждений здравоохранения качественными и высокоэффективными лекарственными препаратами.

Список литературы

Федеральный закон Российской Федерации от 22.

06.1998 г. № 86-ФЗ «О лекарственных средствах»;

Федеральный закон от 22.

08.2004 г. N 122-ФЗ «О внесении изменений в законодательные акты Российской Федерации и признании утратившими силу некоторых законодательных актов Российской Федерации в связи с принятием Федеральных законов «О внесении изменений и дополнений в Федеральный закон «Об общих принципах организации законодательных (представительных) и исполнительных органов государственной власти субъектов Российской Федерации» и «Об общих принципах организации местного самоуправления в Российской Федерации»;

ГОСТ Р 52 249−2009 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств»;

ГОСТ Р 52 537−2006 «Производство лекарственных средств. Система обеспечения качества. Общие требования»;

ОСТ 91 500.

05.0007−2003 «Правила отпуска (реализации) лекарственных средств в аптечных организациях. Основные положения»;

ОСТ 91 500.

05.0005−2002 «Правила оптовой торговли лекарственными средствами. Основные положения»;

Астафьева, Л. И. Внедрение Правил GMP / Л. И. Астафьева // Технология чистоты. — 2012. — № 2. — 13−14.

Младенцев А. Л. Внедрение стандартов GMP как фактор повышения конкурентоспособности российских предприятий / А. Л. Младенцев // Фармацевтическая промышленность. — 2006. — № 5. — 26−27.

Мешковский А. О национальной лекарственной политике / А. Мешковский // Фармацевтическая промышленность. — 2006. — № 4. — 9−18.

Макаров О. В. Прогноз устойчивого развития фармацевтической отрасли / О. В. Макаров, С. В. Никулина, Н. В.

Пятигорская // Фармацевтическая промышленность. — 2006. — № 6. — 65−68.

Иммел Б. Краткая история создания правил GMP в фармацевтической промышленности / Б. Иммел // Фармацевтическая промышленность. — 2011. — № 3. — 30−33.

12.Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармацевтических веществ./ Р. У Хабриева// Москва 2005 г.