Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Исследование состояния популяции Scenedesmus quadricauda методом микрокультуры в норме и при интоксикации

Диссертация: Исследование состояния популяции Scenedesmus quadricauda методом микрокультуры в норме и при интоксикации
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

По мере роста культуры и перехода ее в стационарную фазу доля покоящихся клеток в ней возрастает. При этом при пересадке ценобия в камеру количество среды и света, приходящееся на один ценобий, увеличивается, однако, это не приводит к усилению размножения. Это свидетельствует о том, что торможение процессов деления клеток в этот момент связано не с автозатенением, а с какими-то метаболическими… Читать ещё >

Содержание

  • 1. 0. Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1. Методы исследования состояния популяций водорослей в норме и при экстремальных воздействиях
    • 1. 1. Интегральные методы
      • 1. 1. 1. Определение общей численность клеток и анализ полученных результатов
      • 1. 1. 2. Интегральные методы оценки состояния культуры водоросли по люминесценции и флуоресценции хлорофилла
    • 1. 2. Методы изучения гетерогенности популяции
      • 1. 2. 1. Основные подходы к объяснению гетерогенности популяции микроводорослей
      • 1. 2. 2. Изучение морфологических характеристик отдельных клеток
      • 1. 2. 3. Изучение размерной гетерогенности культур микроводорослей
      • 1. 2. 4. Изучение флуоресцентных характеристик отдельных клеток
      • 1. 2. 5. Изучение полярных характеристик клеток
      • 1. 2. 6. Дифференциальное окрашивание и плазмолитический методы
      • 1. 2. 7. Методы микро и макроколоний (методы подращивания)
      • 1. 2. 8. Технические методы отбора отдельных клеток
  • 2. Водоросли, как тест — объект при оценках качества водной среды
  • II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • 1. Объект исследования
  • 2. Техника культивирования
  • 3. Исследуемые показатели
  • III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
  • 1. Разработка метода раздельного культивирования ценобиев водоросли
  • Scenedesmus quadricauda
    • 1. 1. Развитие культур водоросли Scenedesmus quadricauda
    • 1. 2. Получение микрокультур водорослей
    • 1. 3. Сопоставление развития макро- и микрокультур
  • 2. Исследование гетерогенности лабораторной популяции водоросли Scenedesmus qtiadricauda по выживаемости и способности клеток к делению
    • 2. 1. Исследование методом микрокультур фракционного состава макрокультур в разные периоды роста
    • 2. 2. Оценка наследуемости структуры микрокультур
    • 2. 3. Исследование флуоресценции хлорофилла водорослей
    • 2. 4. Исследование линейных размеров клеток водорослей
  • 3. Исследование влияния хлорида меди на выживаемость и размножение Scenedesmus quadricauda
    • 3. 1. Влияние внесения меди на лаг-фазе роста макрокультуры
    • 3. 2. Влияние внесения меди на экспоненциальной фазе роста макрокультуры
    • 3. 3. Влияние внесения меди на стационарной фазе роста макрокультуры
    • 3. 4. Влияние меди на флуоресценцию хлорофилла водорослей
    • 3. 5. Влияние меди на линейные размеры клеток водорослей
  • 4. Определение времени лизиса отмирающих клеток Scenedesmus quadricauda и оценка влияния на скорость процесса присутствия токсиканта

    • Исследование состояния популяции Scenedesmus quadricauda методом микрокультуры в норме и при интоксикации (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

    Токсичные вещества оказывают влияние на самые разные компоненты водных биоценозов: бактерии, водоросли, простейшие, ракообразные, моллюски, рыбы и др. При этом их влияние сказывается как на уровне отдельного организма или клетки, так и на уровне всей популяции и экосистемы вцелом.

    Удобным объектом изучения влияния токсичных веществ на популяционном уровне являются культуры микроводорослей. Главным образом, это связано с коротким жизненным циклом отдельных клеток, что позволяет в ходе одного опыта проследить влияние неблагоприятного фактора на нескольких поколений. Кроме того, высокая численность клеток в опыте позволяет получать массовый материал для статистических сравнений.

    Особый интерес к процессам, происходящим в популяции культивируемых одноклеточных организмов, появился в 50-х годах прошлого века, когда были опубликованы работы, в которых популяцию (в первую очередь, микроорганизмов) стали рассматривать как единую систему со многими разнообразными связямисистему, которая нередко ведет себя как целостный организм. В частности, в работах Иерусалимского И. Д. (1952) отмечается, что популяции микроорганизмов даже в пределах лабораторных культур характеризуются:

    1) фенотипической гетерогенностью составляющих ее клеток как основой для дифференциации клеток по социальным ролям- 2) наличием внутри популяции (например, колонии микроорганизмов) в той или иной мере обособленных микроколоний- 3) целостностью популяции в процессе развития, наличием у нее интегральных свойств, отсутствующих у индивидуальных клеток- 4) способностью популяции влиять на характеристики окружающей среды при достаточной плотности клеток в ней.

    Многочисленные работы по колониальной организации микроорганизмов свидетельствуют о морфологической и физиологической гетерогенности входящих в её состав клеток (Олескин, 2001). Так в популяции микроорганизмов отмечают наличие активно делящихся, покоящихся и спонтанно автолизирующихся клеток (Уголев, 1987). Особенно четким разделение клеток на эти группы становится в стационарной фазе роста (Ждан-Пушкина, Хасанова, 1991). Гетерогенность (разнородность) клеток в популяции обеспечивает устойчивость культуры к меняющимся внешним условиям (Greenberg, 2003).

    По сравнению с микроорганизмами культуры водорослей изучены слабее, но имеющиеся данные позволяют предположить наличие сложных связей и в их популяциях.

    Так в культурах водорослей предполагается появление резерва покоящихся клеток, обеспечивающего выживание популяции в целом при неблагоприятном воздействии (Гапочка, 1981; Саакян, 1987). Кроме того, у водорослей была обнаружена программируемая клеточная смерть, ранее описываемая только у микроорганизмов (Segovia, 2003). Этот феномен является ярким примером социального контроля, когда в интересах популяции в целом происходит гибель отдельных клеток.

    Другим примером сложности процессов, происходящих в популяции микроводорослей, является наличие у них сложной коммуникативной системы. Информация между клетками культуры может передаваться с помощью различных химических агентов, на уровне метаболитоввыделяемых клетками в среду (Кажлаева, Плеханов, Максимова, 1991) — путем контактного ингибирования (Costas et al, 1993). Одним из средств передачи информации может являться кальций, входящий в состав оболочки клетки (Sanders, Brownlee, Harper, 1999). Установлена возможность передачи информации из поколения в поколение путем записи ее в клеточную мембрану (Costas, Rodas. Lopez, 1991).

    Вместе с тем, малоизученными остаются вопросы о роли гетерогенности культуры в процессах ее роста и развития. Не известно, какая часть клеток в популяции участвует в процессах размножения.

    Целью настоящей работы являлась исследование структурных перестроек модельной популяции водоросли Scenedesmtis quadricaiida в норме и при токсическом воздействии.

    Задачами работы служило следующее:

    1. Разработка метода раздельного культивирования ценобиев водоросли Scenedesmtis quadricaiida и наблюдения за микрокультурами;

    2. Исследование гетерогенности лабораторной популяции водорослей по выживаемости и способности отдельных клеток к делению;

    3. Изучение влияния токсического воздействия на выживаемость и размножение водорослей в лабораторных популяциях;

    4. Определение временив лизиса отмирающих клеток водорослей и оценка влияния на скорость лизиса присутствия токсиканта.

    I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

    выводы.

    1. Прием раздельного культивирования клеток водоросли Scenedesmus quadricauda, называемый нами методом микрокультур, позволил оценить жизнеспособность и активность клеток в макрокультуре водоросли. В частности в культуре удалось определить относительное и абсолютное число размножающихся, покоящихся и погибающих клеток.

    2. Основную часть культуры составляли клетки, находящиеся в покоящемся состоянии, особенно увеличивалась их численность в стационарной фазе роста культуры.

    3. В контроле доля размножающихся клеток была сравнительно невелика, их абсолютное количество возрастало первые недели, достигая максимума к 18 суткам, с последующим снижением, в результате чего уровни размножающихся и погибающих клеток становились близкими. Фракция погибающих клеток была меньше фракции размножающихся в период с 5 по 20 сутки. Изменение скорости прироста числа клеток в ходе развития культуры происходило за счет изменения показателей рождаемости на фоне относительно постоянной смертности.

    4. Внесение меди на лаг — фазе и фазе экспоненциального роста оказывало угнетающее воздействие на общую численность клеток, в целом усиливающееся с увеличением концентрацией токсиканта. При внесении меди на стационарной фазе роста эффект угнетения отмечался при концентрациях меди 0,1 и 1,0 мгСи/л. При средних концентрациях- 0,001 и 0,01 мгСи/л, напротив, происходила стимуляция процессов размножения, так что снижения общей численности клеток в культуре не происходило.

    5. Наиболее сильное влияние на фракционный состав культур медь оказывала при внесении ее на экспоненциальной фазе, когда в популяции был велик процент более чувствительных размножающихся клеток. В начале эксперимента при всех концентрациях здесь происходила полная остановка процессов размножения и некоторое усиление процессов отмирания и только через 2 недели было отмечено некоторое восстановление культуры.

    6. При внесении меди на лаг-фазе и фазе стационарного роста хлорид меди, главным образом, оказывал угнетающее воздействие на процессы размножения клеток, а начиная с концентрации 0,001 мгСи/л происходило еще и увеличение смертности клеток.

    7. Время лизиса клеток в контроле оказалось малым по сравнению с длительностью жизненного цикла клеток (2−3 часа), а при добавлении меди в концентрации 1,0 мгСи/л возрастало до 3−6 суток. Таким образом, высокие концентрации токсиканта вызывали накопление мертвых клеток в культуре, а высокая доля мертвых клеток в макрокультуре, определенная с помощью люминесцентных методов, была связана не только с возрастанием смертности клеток, но и с замедлением процессов их лизиса.

    ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    .

    Проведенные исследования продемонстрировали важную роль покоящихся клеток в жизни популяции Scencdcsmus quadricauda. Оказалось, что в разные моменты существования культуры их доля составляет от 40 до 80%. Таким образом, рост и развитие культуры определяются достаточно небольшим количеством клеток ответственных за размножение, остальная же часть только поддерживает существование популяции. В отличие от бактерий и синезеленых водорослей, где покоящиеся клетки являются особыми устойчивыми формами с пониженной физиологической активностью и служат, главным образом, для выживания при наступлении неблагоприятных условий, у Scenedesmus quadricauda покоящиеся клетки достаточно активно фотосинтезируют. Это позволяет предположить, что их существование в культуре не связано исключительно с задачей выживания, а необходимо для развития культуры в нормальных условиях.

    По мере роста культуры и перехода ее в стационарную фазу доля покоящихся клеток в ней возрастает. При этом при пересадке ценобия в камеру количество среды и света, приходящееся на один ценобий, увеличивается, однако, это не приводит к усилению размножения. Это свидетельствует о том, что торможение процессов деления клеток в этот момент связано не с автозатенением, а с какими-то метаболическими процессами в самих клетках или накоплением метаболитов в среде. Следует отметить, что в опытах с микроколониями хлореллы (Аникеева, Ваулина, Шевченко, 1964), где при переносе клеток на агар полностью снималось влияние накопленных в среде метаболитов, доля покоящихся клеток не превышала 5%. Это может являться косвенным свидетельством важной роли веществ, накапливаемых в среде, в переходе клеток к состоянию покоя.

    Покоящиеся клетки не являются глубоко законсервированной системой. При слабых неблагоприятных воздействиях, когда возможность восстановление культуры зависит от скорости нарастания численности клеток в ней, они способны перейти к размножению. Примером такой ситуации может служить двукратное увеличение доли размножающихся клеток по сравнению с контролем в стационарной фазе при внесении средних концентраций хлорида меди (0,001 и 0,01 мгСи/л).

    Существование культуры и ее рост при небольшой доле размножающихся клеток возможны только на фоне медленно текущих процессов отмирания. В экспериментах было продемонстрировано, что в контроле количество отмирающих клеток не превышает 10% в сутки (в периоды активного роста культуры около этот показатель опускается до 3%).

    Метод микрокультур позволил разделить и рассмотреть отдельно три процесса, которые определяют общую численность клеток в культуре в конкретный момент времени: размножение, отмирание и лизис отмерших клеток.

    Оказалось, что в контроле смертность клеток остается примерно на одном уровне в ходе всего роста культуры. Это означает, что главным процессом, определяющим динамику развития популяции, является размножение, а изменение скорости прироста популяции связано с изменениями в процессах рождаемости. В стационарной фазе, когда рост культуры замедляется, происходит ослабление процессов размножения, а не усиление гибели клеток.

    Возможность раздельного рассмотрения процессов размножения и отмирания клеток особо важна при оценках токсичности загрязняющих веществ. Дело в том, что угнетение культуры и более низкая численность клеток по сравнению с контролем может быть связана, как с усилением процесса гибели клеток, так и с подавлением размножения.

    Исследования показали, что первой реакцией культуры на токсикант является, обычно, снижение доли размножающихся клеток и их переход в покоящееся состояние. И лишь при усилении уровня токсического воздействия происходит возрастание смертности клеток. В опытах с длительной экспозицией показано, что при восстановлении культуры, в первую очередь, также происходит снижение смертности клеток и лишь при низких концентрациях токсичных веществ идет некоторое восстановление процессов размножения. Это свидетельствует о том, что размножение является наиболее чувствительным к неблагоприятным воздействиям процессом. Вероятно, именно с этим связана более низкая устойчивость культуры в фазе экспоненциального роста, отмеченная в наших экспериментах, когда процесс размножения в момент внесения токсиканта шел наиболее активно.

    При оценке смертности клеток в культуре встает вопрос о времени лизиса отмерших клеток. Дело в том, что количество погибших клеток, оцениваемое с помощью люминесцентной микроскопии, зависит от того за какой период проходит их разрушение. При условии высокой скорости лизиса (порядка нескольких часов), которое наблюдается в контроле и при низких дозах хлорида меди, процессы отмирания и разрушения клеток оказываются сбалансированными и доля мертвых клеток остается на одном невысоком уровне. При замедлении лизиса в присутствии высоких доз хлорида меди (1 мгСи/л) количество погибших клеток в культуре постоянно возрастает, достигая к концу эксперимента 65% от общей численности клеток. При этом реальная смертность клеток в культуре не увеличивается, и к концу эксперимента соответствует контрольным значениям. Причиной замедления лизиса может быть ингибирование процесса автолизиса, так и угнетение активности сопутствующей микрофлоры, обеспечивающей утилизацию погибших клеток.

    Таким образом, метод микрокультур позволил рассмотреть популяционные процессы связанные с гибелью и размножением клеток в процессе роста культуры в норме и при воздействии хлорида меди.

    Показать весь текст

    Список литературы

    1. Апь-Сальман И.М. (1988). Исследование влияния Zn, Cd, Со и сульфатного засоления на зеленые водоросли. -Дисс.. канд. биол. наук. М.- 74с.
    2. В.М. (1975). Род Chlorella. Морфология, систематика, принципы классификации. Л.: Наука. — 110 с.
    3. И.Д., Ваулина Э. Н., Шевченко В. А. (1964). Действие УФ лучей на хлореллу// Радиобиология. 4, N 6, — С. 883—892.
    4. В.И., Дмитриева А. Г., Филенко О. Ф., Чжао Цзюнь (1996). Влияние бихромата калия на динамику культуры и размеры клеток Scenedesmus quadricauda (Тиф.) в различные сезоны года// Альгология. 6, N 1.- С. 26—35.
    5. С.В., Санин М. В., Эйнор Л. О. (1992). Пестициды и их воздействие на водные экосистемы: Обзорная информация. М.: ВНИИТЭИагропром. 48 с.
    6. Г. К., Киристаева Н. М. (1977). Токсичность соединений меди для Chlorella pirenoidosa// Гидробиолог, журнал. 13, N 4.- С. 92—94.
    7. Т.А. Динамика биомассы и функциональные характеристики морских планктонных водорослей при воздействии кадмия. Дисс.. канд. биол. наук. М. -106с.
    8. В.Н., Сидько Ф. Я., Тренкенису А. П. (1980) Энергетика фотосинтезтирующей культуры микроводорослей. Новосибирск: Наука. 136 с.
    9. М., Харпер Дж., Таундсенд К. (1989). Экология. Особи, популяции и сообщества (в 2-х томах).- М.: Мир.-. 477 с.
    10. А.И. (1997). К вопросу о факторах, влияющих на токсичность сернокислой меди для Dunaliella vulgaris// Альгология. 7, N 3.- С. 251—261.
    11. Л.П., Величко И. М., Щербань Э. П. (1987). Пресноводный планктон в токсической среде.- Киев.: Наукова думка.- 180 с.
    12. И.Р., Маторин Д. Н., Венедиктов П. С. (1988). Метод биотестирования природных вод по замедленной флуоресценции микроводорослей//Методы биотестирования вод. Черноголовка. С.23—26.
    13. Т.В. (1988). Токсико-генетическая оценка качества водной среды с использованием альготестов (на хлорелле). Дисс.. канд. биол. наук, — Одесса.- 149с.
    14. Т.В., Веселовский В. А., Власенко В. В. (1990). Вариабильность как тест перехода клетки в состояние стресса в условиях интоксикации// Физиология растений. 37, N 4.- С. 733—738.
    15. В.А. (1990). Структурно-функциональные изменения мембран растительной клетки при адаптации к повреждающим воздействиям. Дисс.. докт. биол. наук.- М.- 155с.
    16. В.А., Веселова Т. В. (1990). Люминесценция растений.- М.: Наука.- 201с.
    17. В.А., Веселова Т. В., Дмитриева А. Г., Маренков B.C. (1987) Биотестирование природных вод при помощи полевого портативного флуориметра//Методы биоиндикации и биотестирования природных вод.-Л.:Гидрометеоиздат.- С.58−63.
    18. М.Г., Семененко В. Е. (1962). Интенсивная культура одноклеточных водорослей.- М.: Изд-во АН СССР.- 59 с.
    19. Водоросли. Справочник (1989)/Вассер С.П., Кондратьева Н. В., Масюк Н. П. и др.- Киев: Наукова думка.- 608 с.
    20. О.В., Рудакова Е. Е. (2001). Влияние спектрального состава света на морфогенез коккоидных зеленых водорослей (Chlorophyta)// Альгология. 11, N2.-С. 165—175.
    21. Jl.Д. (1981). Об адаптации водорослей.- М.: Изд-во МГУ.- 80 с.
    22. Л. Д. (1994). Популяционные аспекты устойчивости цианобактерий и микроводорослей к токсичечкому фактору. Дисс.. докт. биол. наук, — М.- 155с.
    23. Л.М. (1974) Специфика морфологических изменений некоторых водорослей в процессе их роста и развития в синхронных культурах. Автореф. дисс.. канд. биол. наук.- М.- 21с.
    24. Н.Я., Малиновский О. В. (1980). Go-фаза в клеточном цикл/Надежность клеток и тканей, — Киев: Наукова думка.- С.99—106.
    25. В.К. (1976) Зеленые водоросли.- Минск: Изд-во БГУ.- 80 с.
    26. С.В. (1952). Применение метода люминесцентной микроскопии для распознания живых и мертвых клеток водорослей// Труды ин-та микробиологии АН СССР. вып. 2.- С. 64—78.
    27. С.В. (1956). Техника применения метода люминесцентной микроскопии для гидробиологических исследований// Жизнь пресных вод СССР.- М.-Л.:Изд-во АН СССР.- 101 с.
    28. С.В., Герасименко Л. М., Пушева М. А. (1980). Роль нуклеопептидов в клеточном делении водорослей.-. М.: Наука.- 198 с.
    29. Д.М. (1983). Надежность растительных систем.- Киев: Наукова думка.- 365 с.
    30. И.Н. (1977). Гетерогенность образовательных тканей высших растений и ее роль в радиочувствительности/Системы надежности кпетки.-Киев.: Наукова думка.- С. 118—136.
    31. А.Г. (1988). Метод биотестирования по определению живых и мертвых клеток водорослей с помощью люминесцентной микроскопии//Методы биотестирования вод. Черноголовка. С.85—89.
    32. Ждан-Пушкина С.М., Хасанова JI.A. (1991). Некоторые аспекты роста культур микроорганизмов.- Уфа.- 126 с.
    33. С.П. (1997). Исследование связи между замедленной флуоресценцией и продукционными характеристиками морских микроводорослей. Автореф. дисс.. канд. биол. наук.- М.- 24 с.
    34. Иерусалимский И.Д.(1952)Физиология развития чистых бактериальных культур. Дисс.. докт. биол. наук.- М.- 74с
    35. Ицзюнь Чжао (1994). Влияние изменяющихся токсических нагрузок на структурно-функциональные характеристики водоросли Scenedesmus quadricauda в культуре. Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 74с.
    36. Т.Ф., Плеханов С. Е., Максимова И. В. (1991) Зависимость внеклеточной продукции водорослей от физиологического состояния клеток// Биологические науки. 11.- С. 101—105.
    37. В.И. (1972). Исследование альгицидного действия комплексных соединений меди. Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 124с.
    38. В.И. (1988). Метод определения хронической токсичности сточных вод с использованием зеленых водорослей//Методы биотестирования вод. Черноголовка. С.89—94.
    39. Кирпичникова Н.А.(1972). Изучение закономерности отмирания клеток в культурах синезеленых водорослей// Методы изучения и практического использования почвенных водорослей. Киров, — С. 157−163.
    40. Н.П. (1984). Количественные характеристики роста зеленых водорослей// Гидробиолог, журнал. 20, N 6.- С. 50—53.
    41. В.Ш. (1958). Формы инактивации дрожжевых клеток ионизирующей радиацикй// Биофизика. 3, N 2.- С. 206—213.
    42. Л.А. (1971) Экологическая физиология планктонных водорослей.-Киев: Наукова думка, — 111с.
    43. Н.Л. (1983). Экологические и физиологические характеристики водной растительности при токсических воздействиях. Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 74с.
    44. Методическое руководство по биотестированию воды РД 118−02−90 (1991) М.
    45. Мур Д.В., Рамамурти- С. (1987). Тяжелые металлы в природных водах,-М.: Мир 286 с.
    46. Н.Н. (1991). Асинхронное ядерное и клеточное деление у одноклеточных зеленых водорослей родов Scenedesmus и Chlorella. Дисс.. докт. биол. наук.-София .- 145с.
    47. М.А. (1992). Формирование фазности динамики токсического эффекта веществ на водные организмы. Дисс.. канд. биол. наук.- М,-117с.
    48. А.В. (2001). Экологически важные свойства популяции микроорганизмов//Соросовский образовательный журнал. 7, N 8.- С. 26—35.
    49. М.Н., Жцанникова Е. Н., Максимова И. В. (1965). Определение живых и мертвых клеток в культурах протококковых водорослей// Микробиология. 34, N 6.- С. 26—35.
    50. С.И. (2003). Состояние растительных организмов в природных условиях и окислительное повреждение фотосинтетического аппарата. Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 56с.
    51. С.И., Лебедева Г. В., Ризниченко Г. Ю. (1991). Связь функциональной структуры популяции одноклеточных водорослей с ее динамикой/ЯТроблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем.- JL: Гидрометеоиздат. т. 13.- С.280—298.
    52. И.Н. (1983). Культивирование микроорганизмов в переменных условиях.- М.: Наука.- 104 с.
    53. В.Ю. (2000). Структурно-функциональные характеристики модельной популяции Scenedesmus quadricauda при интоксикации. Дисс.. канд. биол. наук, — М, — 135с.
    54. Н.П. (1970). Эффект малых доз ионизирующих излучений в популяциях хлореллы.- Дисс.. канд. биол. наук. М.- 137 с.
    55. А.Б. (2000). Биофизические методы в экологическом мониторинге// Соросовский Образовательный Журнал. 6, N 4.- С. 7—13.
    56. Д.Л. (1987). Изучение структуры и динамики популяции водоросли Chlorella vulgaris по состоянию фотосинтетического аппарата одиночных клеток. Дисс.. канд. биол. наук.-М .- 120с.
    57. Л. А. (1975) Методика лабораторного культивирования водорослей//Методы физиолого-биохимического исследования водорослей в гидробиологической практике (1975) .- Киев: Наукова думка.- С.5—19.
    58. Л.А., Марценюк П. П. (1973). О количественной регистрации интенсивности флуоресценции микроскопических препаратов// Труды всес. совещ. по почв, водоророслям.- Киев.- С. 30—35.
    59. Уголев А.М.(1987). Естественные технологии биологических систем.- Л.: Наука.- С.181−183.
    60. В.И. (1966). Экология и физиология питания пресноводных водорослей.- М.: МГУ.- 122 с.
    61. Р. П. Дробецкая И.В. (2000). Влияние антагонизма серы и селена на рост и биохимические показатели спирулины// Экология моря. 54.- С. 50—56.
    62. В.Г., Илларионова В. И., Юнасова Т. Н. (1971). Вопросы стандартизации методик при проведении токсикологических исследований/Методики биологических исследований по водной токсикологии.- М.: Наука.-С. 181−183.
    63. В.Г., Капков В. И. (1971) Культивирование зеленых водорослей и использование их в токсикологическом эксперименте//Методики биологических исследований по водной токсикологии.-М.: Наука.-С.219—231.
    64. В.Г., Капков В. М., Рухадзе Е. Г. и др. (1975). Токсичность медьсодержащих соединений для водорослей// Гидробиолог, журнал. 11, N 5.- С. 49—56.
    65. JI.H. (1973). Анализ физиологических характеристик популяции микроводорослей на основе жизненного цикла и возрастного распределения клеток// Физиология растений. 20, N 3.- С. 532—538.
    66. Цоглин J1.H. (1996). Циклы развития клеток и физиологические свойства популяций микроводорослей. Дисс.. докт. биол. наук.- М.- 77с.
    67. JI.H., Клячко-Гурвич Г.Л. (1980). Изменение функциональной активности хлоропласта в клеточном цикле хлореллы// Физиология растений. 27, N 6.- С. 1172—1179.
    68. Ю.К. (1979). Изучение функционирования системы первичных реакций фотосинтеза в течение цикла деления хлореллы. Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 133с.
    69. С.С., Пястолова О. А., Добринская Л. А., Рункова Г. Г. (1976) Эффект группы в популяциях водных животных и химическая экология.- М.: Наука.-152 с.
    70. О.Б. Влияние абиотичексих факторов водной среды на устойчивость микроводорослей и цианобактерий к токсическим воздействиям металлов Дисс.. канд. биол. наук.- М.- 116с.
    71. В.А. (1979). Радиационная генетика одноклеточных водорослей.- М.: Наука, — 252 с.
    72. Т.А., Белостоцкая Г. В., Филатов М. В. (1980). Типы гибели и выживания клеток млекопитающих в культуре после ионизирующего облучения в различных дозах//Надежность клеток и тканей.-Киев:Наукова думка.- 212 с.
    73. Г. (1987). Общая микробиология.- М.: Мир.-566-С.
    74. Экологическая физиология морских планктонных водорослей (в условиях культур) (1971) .- К.: Наукова думка.- 206 с.
    75. M.S., Issa А. А. (2000). Effect of the manganese and calcium deficiency on the growth and the oxygen exchange of Scenedesmus intermedius cultured for successive generations// Folia Microbiol (Prana). 45, N 4. P. 353—358.
    76. F. (1937) Colonial formation of unicellular green algae under various light conditions. Washington: Smithsonian institute. 17 p.
    77. P., Hemmingsen V., Nyholm N. (1995). A miniscale algal toxicity test// Chemoshere. 30, N 11. P. 2103—2115.
    78. T.P. (1984). The effect of environmental contaminants on aquatic algae//Algae as ecological indicators. Akademic Press. Ink. London Ltd. 434 P
    79. M.G., Gorbi G., Ricci A. (1995). Chromium-indiced sexual reproduction gives rise to a Cr-tolerance progeny in Scenedesmus acutus// Ecotoxicol. And Environ. Safety. 32, N 1. P. 12—19.
    80. Costas E., Aguilera A., Gonzales S.(1993). Contact inhibition also a control for cell proliferation of unicellular algae?//The gistol. Bulltein. 184, N 1. P. 1—5.
    81. Costas E., Rodas V. Lopez (1991). Persistence of cell division synchrony in spirogira insignis (Gamophyceae): membrane proteoglycans transmitting synchronizing information throughout generations//Chronobiol Int. 1. P. 85—92.
    82. D. J. (2000). The generation and modification of cell polarity// Journal of Experimental Botany. 51, N 346. P. 831—838.
    83. A., Sleep J. (1980). Cooper inhibition of carbon fixation in coastal phytoplankton assambladdes// J. mar. biol. 60. P. 841—850.
    84. P.F., Traynor F.R. (1989). Low cell density: the unifying principle for unicell development in Scenedesmus (Chlorophyceae)// Brit. Phycol. J. 24, N 3. -P. 271—283.
    85. Elert E. Voln, Frank A. (1999). Colony formation in Scenedesmus: grazer-mediated release and chemical features of the infochemical// Journal of the plankton research. 21, P. 789—804.
    86. Ch. E., Illmer P., Schinner F. (2000). Changes of cell size distribution during the batch culture of Arthrobacter strain PI/1−95// Antonie van Leeuwenhoek. 77, N 4. P. 329—335.
    87. Forester P.L.(1977). Cooper exclussion as a mechanism of heavy metal tolerance in a green alga// Nature. 269, N 22. P. 322—323.
    88. A., Bumbalova A., Havranek E. (1999) Ecotoxicological effects and uptake of metalsin freshwater alga Scenedesmus quadricauda// Chemosphere. 387. P. 12—16.
    89. Franklin N.M., Stauber J.L., Apte S. C (2002). Effect of initial cell density on the bioavailability and toxicity of cooper in microalgal bioassays// Environ. Toxicol. Chem. 21, N 4. P. 741—751.
    90. G.R., Reichle C. (2000). Living cells in opto-electrical cages// Trends Anal. Chem. 19, N 6. P. 402-^09.
    91. E. D., Walker J. D., Flowers T. J. (2003) Single cell measurements of the contributions of cytosomic Na and К to salt tolerance// Plant physyology preview. 131. P. 676—683.
    92. P. E. (2003) Bacterial communication and group behavior//J. Clin. Invest. 112. — P. 1288— 1290.
    93. F. (1974). The morphologycal variability of Scenedesmus pannonicus Hortob. In culture//Arch. Hydrobiol.Suppl. 11, N 2. P. 130—139.
    94. R.M. (2000). Micropipette aspiration of living cells// J. Biomech. Eng. 33, N 1. P. 15—22.
    95. Hornung U., Hans Von Witsch, Andreas Mung (1980) Cadmium toxicity on the green alga Coelastrum proboscideum (Bohlin) depending on developmental stage of cells//Adv. Biotechnol. Proc. 6th Int Ferment. Symp. London P. 12— 16.
    96. R., Siegel D.A. (1989). Microphotometric characterization and detrital absorbtion properties in the Sargasso Sea// Limnol. Oceanogr. 34, N 8. P. 1706—1726.
    97. Kaftan D., Meszaros Т., Whitmarsh J. and Nedbal L. (1999). Characterization of photosystem II activity and heterogenity during the cell cycle of the green alga Scenedesmus quadricauda// Plant. Physiol. 120, N 2. P. 433—442.
    98. К., Seger H. (1994). Free, conjugated and bound polyamines during the cell cycle in the synhronized cultures of Scenedesmus obliquus//Z. Naturforsch. 49, N 3^. P. 181—185.
    99. D.L., Kloareg В., Quatrano R.S. (1998). Cell wall is required for fixation of the embryonic axis in Fucus zygotes// Science. 239. P. 187—194.
    100. Long В. M., Jones G. J., Orr P. T. (2002). Cellular microcystin content in N-limited microcystis aruginosa can be predicted from growth rate// Appl and Environ. Microbiol. 67, N 1. — P. 278—288.
    101. M., Beekman W. (2002). Extractable substanes (anionic surfactants) from membrana filters induce morphological changes in the green algae Scenedesmus obliquus (Chlopophyceae)// Environ. Toxicol. Chem. 21, N 6. P. 1213—1218.
    102. Lurling M., Donk E. Van (1999). Grazer-induced colony formation in scenedesmus acutus (chlorophyceae): ecomorph expression at different temperatures// Journal of Phycology. 35, N 6. P. 1120—1125.
    103. Massey R.Z., Mattony P.H.T. (1965). New techniques for mass assays of physiological characteristics of unicellular algae// Appl. Microbiol. 13, N 5. P. 439—458.
    104. Mc.Auley P. (1985). The cell cycle of symbiotic Chlorella. The relation between host feeding and algal cell growth and division// J. Cell. Sci. 77, — P. 225—239.
    105. Michalski A, Yashin A (2002). Detection of hormesis effect in longevity: simulation approach for heterogeneous population// Math Biosci. 175, N 1. P. 57—56.
    106. Nakamura H (1963). Biological Knowledges on species of Chlorella and Scenedesmus// Tokyo: Kyoritsu Women’s University. 43 P.
    107. M., Mohn F. (2002). Use of Chlophyll fluorecence in metall stress research: a case study with the green microalga Scenedesmus// Ecotoxycology and Environmental Safety. 55, N 1. P. 64—69.
    108. S.P., Orive M. E. (1995) Evolutionary consequences of mutation and selection within an Individual//Genetics. 141, P. 1173—1187.
    109. A.B. (1974). A restriction point for control of normal animal cell proliferation// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 71, P. 1286—1290.
    110. Pena-Castro JM, Martinez-Jeronimo F, Esparza-Garcia F, Canizares-Villanueva RO (2004). Phenotypic plasticity in Scenedesmus incrassatulus (Chlorophyceae) in response to heavy metals stress// Chemosphere. 57, N 11. P. 1629—1636.
    111. M. J., Porter S.M. (1989). Detemination of the cross-section absorbtion coefficient of the individual phytoplankton cells by analitical flow cytometry// Limnol. Oceanogr. 34, N 8. P. 1727—1738.
    112. Pickett-Heaps (1975). Green algae: structure, reproduction and evolution in selected genera. Sinuaer Associates, Inc., Massachusetts. 112 p.
    113. Pirson A., Lorenzen H (1966). Sinchronized dividing algae// Ann. Rev. Plant Physiol. 17. P. 439—458.
    114. S., Yasukawa Т., Matsue T. (2001) Dielectrophoretic manipulation of a single chlorella cell with dual-microdisk electrode// Bioelectrochemistry. 54, N 1. P. 33—37.
    115. R.S., Shaw S.L. (1997). Role of the cell wall in the determination of cell polarity and the plane of cell division in Fucus embryos// Trends in Plant Science. 2. P. 15—21.
    116. J.A. (1986). Plasticity in algae// Symp Soc Exp Biol. 40. P. 347—372.
    117. G., Lebedeva G., Pogosyan S. (1996). Fluorescence induction curves registered from individual microalgae cenobium in the process of population growth// Photosynthesis researh. 49. P. 151—157.
    118. Sanders D., Brownlee G., Harper J. H. Communicating with calcium//Plant cell. 11. P. 691—706.
    119. Segovia M., Liti Haromaty, Berges J. A. (2003) Cell death in the unicellular chlorophyte Dunaliella tertiolecta. A hypothesis on the evolution of apoptosisin highter plantsand metazoans//Plant physiol. 132. P. 99—105.
    120. H. (1970). Characterization of synchronus cultyre of Scenedesmus obliquus, its potential photosynthetic capasity and its photosynthetic quotient during the life cycle// Planta. 90, P. 243—266.
    121. Setlik J., Berkova E., Doucha J., Kubin S., Vcndlova J. and Zachleder J. (1972). The coupling of synthetic and reproduction processes in Scenedesmus quadricauda// Algol Stud. 7. P. 172—213.
    122. S.A., Bards S.A. (1980). Growth response of Scenedesmus to differenr concentration of cooper, cadmium, nikel, zink and lead// Environ. Int. 4, N 5−6. -P. 431—434.
    123. G.M. (1914). The cell structure and colony formation in Scenedesmus// Arch. Protistenk. 32, N. P. 278—297.
    124. E.A., Mayfield C.I., Wong P.T., Silverberg B.A. (1977). Effect of naturally occuring apatites on growth and morphology of algae// Can J. Microbiol. 23, N 9. P. 1188—1196.
    125. Steenbergen C.L.M (1975). Light-dependent morphogenesis of unicellular stages in synchronized culture of Scenedesmus quadricauda (Тиф.) Breb.// Acta. Bot. Neerl. 24, N 516. P. 391—396.
    126. Steenbergen C.L.M. (1978). Р1еотофЫ5т of Scenedesmus quadricauda (Тиф.) Breb. (Chlorophycea) in sinhronized cultures// Mitt. Internat Verein. Limnol. 21, N. P. 216—223.
    127. D., Svendsen E. (1998). Endothelial cell injury in human saphenous veins after manipulation and tweezer grasping// J. Cardiovasc. Surg. 29, N 4. P. 464—469.
    128. Swale E.M.F. (1967). A clone of Scenedesmus with Chodatella-stages// Brit. Phycol. Bull. 3, N 2. P. 281—293.
    129. F.R. (1964). The effect of composition of the medium on moфhology in Scenedesmus//Can. J. Bot. 42. P. 515—518.
    130. F.R. (1969). Scenedesmus moфhogenesis. Trace element and spine formation//J. Phycol. 5. 185—190.
    131. F.R. (1971) Development of form in Scenedesmus/Parker B. and Brown R.//Contributions in Phycology. Lawrence, Cansas: Alen Press. P. 81—92.
    132. F. R. (1992). Сус1отофЬо5{з in Scenedesmus armatus (Chlorophyta): an ordered sequence of есотофЬ development// Journal of Phycology. 28, N 4. -P. 553—556.
    133. Trainor F.R., Cain J.R. and Shubert L.E. (1976). Morphology and nutrion of the colonial gren alga Scenedesmus: 80 years later// Bot. Revv. 42, N 1. P. 5—25.
    134. D., Park S.K., Lalanne E. (1998). Asymmetric division and cell-fate in developing pollen// Trends in Plant Science. 3. P. 305—310.
    135. C.S., Phinney D.A. (1985). Spectral fluorescence: an ataxonomic tool for studying the structure of phytoplankton population// J. Plankt. Res. 7.617—632.
    136. C.S., Phinney D.A. (1989). A bridge between ocean potics and microbial ecology// Limnol. Oceanogr. 34, N 8. P. 1694—1705.
    Заполнить форму текущей работой

    Заказал и сдал!