Разработка биотехнологии концентратов галактоолигосахаридов из лактозосодержащего сырья

Одним из возможных путей улучшения здоровья человека является укрепление внутренней среды организма, повышение его сопротивляемости и адаптационных возможностей, профилактика и предупреждение болезней. Всему этому способствует употребление функциональных продуктов. Они находятся на границе между обычной пищей, удовлетворяющей потребность в нутриентах, и фармацевтической продукцией.

Интерес к функциональным продуктам, которые оказывают регулирующее действие на организм в целом или на отдельные органы и способны заменить многие лекарственные препараты, стремительно растет во всем мире [33, 43]. При этом особое внимание уделяется вопросам создания, поддержания и восстановления нормальной кишечной микрофлоры, играющей огромную роль в сохранении здоровья человека. С этой целью применяют пробиотики (живые микроорганизмы, которые оказывают благотворный эффект на здоровье человека, в большей степени реализующийся в желудочно-кишечном тракте), пребиотики (пищевые вещества, избирательно стимулирующие рост и биологическую активность представителей защитной микрофлоры кишечника) или синбиотики (комплексы прои пребиотиков) [15]. Применение пребиотиков и продуктов функционального питания, не содержащих пробиотиков, может самостоятельно обеспечивать пробиотический эффект для организма. При этом необходимо учесть, что по оценке специалистов затраты на производство и хранение пребиотиков ниже, чем аналогичные затраты для пробиотиков [60].

Япония стала первой страной, в которой были внедрены функциональные продукты и функциональные ингредиенты. Основная группа функциональных ингредиентов — олигосахариды [119]. Среди 12 классов олигосахаридов к галактоолигосахаридам (ГОС) проявляется большой практический интерес в связи с их высокой селективностью (стимулируют большинство изученных штаммов бифидобактерий) и промышленной применимостью процесса, синтеза этих олигосахаридов из лактозы с использованием препаратов р-галактозидазы [ 13].

В молочной промышленности в качестве побочного продукта при производстве сыра, творога и казеина образуется значительное количество молочной сыворотки. Производство больших объемовсыворотки и сывороточных пермеатов в последниетри десятилетия обусловило проведение значительного количества исследований в области создания продуктов на основе лактозы. Кроме прямого ее использования, в. виде молочного сахара, можно также проводить модификацию1 — ферментативную или химическую: Ферментативные превращения лактозы основаны на реакциях, катализируемых Р-галактозидазами, или лактазами, причем наиболее изучен гидролиз до моносахаридов — глюкозы и. галактозы.

Гидролиз лактозы — развитая ферментативная технология. Однако она имеет ограниченный? коммерческий успех, с несколькимиудачнымипопыткамиее реализовать на локальном уровне, но: не в глобальном масштабе. Это? можно объяснить тем, что исследования гидролиза лактозы были в большеш степени вызваны, необходимостью! переработки молочной сыворотки, чем потребностью соответствовать критериям развитого и успешного продукта. Преимущества*. которые дает гидролиз лактозы (повышение сладости, растворимости и перевариваемости людьми с лактазной недостаточностью), преодолевают проблемы, связанные с присутствием лактозы во многих пищевых системах. Но онине дают конечным потребителям каких-либо особых преимуществ, которые были бы связаны только с лактозой [117].

Однако р-галактозидазы катализируют не толькореакцию гидролиза лактозы, но также реакции. трансгалактозилирования, приводящие к образованию галактоолигосахаридов. В связи с изучением гидролиза лактозы и его применения в молочной промышленности проводились исследования и ГОС — всегда присутствующих в небольших количествах продуктов реакции. Часто их описывали как нежелательные побочные продукты, поскольку они обладали низкой растворимостью, низкой сладостью и плохой перевариваемостью. Но позже было показано, что ГОС обладают пребиотическими свойствами, и с 80-х годов прошлого столетия активно ведутся разработки по получению этого класса олигосахаридов-пребиотиков. Экономически целесообразным источником получения таких олигосахаридных препаратов является лактоза молочной сыворотки.

Большой вклад в изучение свойств и разработку технологии галактоолигосахаридов внесли зарубежные и отечественные ученые: Wallenfels К., Pazur J. H., Smart J. В., Mutai M., Kan T., Matsumoto К., Tanaka T., Prenosil J. E., Gibson J. R., Rastall R. A., Onishi N., Данилов M. Б., Хамагаева И. С. и др.

Разработки по получению ГОС из концентрированных растворов лактозы с использованием ß—галактозидазы появились более двух десятилетий назад, однако регулирование pH реакционного раствора во всех предложенных ранее технологиях проводилось реагентным методом. Перспективным направлением совершенствования технологии является использование для синтеза ГОС электроактивированных водных растворов лактозы или электроактивированного пермеата молочной сыворотки.

Электрохимическая активация является эффективным и сравнительно легко управляемым способом активации жидких сред. А главное, она является экологически чистым методом регулирования физико-химических свойств жидкостей, поскольку не сопровождается вводом в исходное сырье каких-либо дополнительных химических веществ. Ее целью является уменьшение или полное исключение расхода химических реагентов в технологических процессах, снижение загрязненности отработанных растворов, повышение качества целевых продуктов, сокращение времени, повышение эффективности и в целом упрощение технологии [42].

Актуальность данной работы обусловлена не только практической применимостью препаратов ГОС в пищевой промышленности и кормопроизводстве, технологии БАД и медицине, их биологической ценностью, лечебными и пребиотическими свойствами, но и необходимостью комплексной переработки лактозосодержащего сырья.

С учетом вышеизложенного, целью диссертационной работы является изучение закономерностей ферментативного трансгалактозилирования лактозы и разработка биотехнологии концентратов галактоолигосахаридов с использованием электрохимической активации лактозосодержащего сырья.

На защиту выносятся следующие основные положения и результаты работы:

— теоретическое обоснование выбора направления исследований и целесообразности разработки биотехнологии концентратов галактоолигосахаридов из электроактивированных растворов лактозы и пермеата молочной сыворотки;

— результаты сравнительных исследований эффективности синтеза галактоолигосахаридов различными ферментными препаратами (3-галактозидазрезультаты экспериментальных исследований и анализ закономерностей процессов трансгалактозилирования лактозы в растворах лактозы и пермеате молочной сыворотки;

— математические модели и оптимизированные технологические параметры синтеза галактоолигосахаридов в лактозосодержащем сырьебиотехнология концентратов галактоолигосахаридов из лактозосодержащего сырья и предложения аппаратурного оформления процесса их производства;

— результаты исследований состава и свойств полученных концентратов галактоолигосахаридов;

— анализ экономической эффективности и безопасности разработанной технологии.

1. А. с. 1 078 935 СССР, МКИ С 14 В 3/11. Способ гидролиза крахмала Текст. / Н. Д. Лукин, Н. Г. Гудюк, Е. К. Коптелова [и др.]. — заявл. 04.07.1981 — опубл. 05.07.1982.

2. А. с. 1 279 235 СССР, МКИ3 С 12 С 1/00. Способ производства солода Текст. / К. А. Калунянц, Т. В. Филатова, А. И. Садова [и др.]. — заявл. 14.03.1984 — опубл. 29.12.1984.

3. Анцыпович, И. С. Охрана труда на предприятиях мясной и молочной промышленности Текст. / И. С. Анцыпович. — М.: Легкая и пищевая промышленность, 1985. — 112 с.

4. Бахир, В. М. Механизм изменения реакционной способности активированных веществ Текст. / В. М. Бахир, П. А. Кирпичников, А. Г. Лиакумович [и др.]. // Изв. АН УзССР, сер. техн. наук. 1982. — № 4. — С. 70−75.

5. Бахир, В. М. Регулирование физико-химических свойств технологических водных растворов униполярным электрохимическим воздействием и опыт его практического применения Текст.: автореф. дисс. .к.т.н. / В. М. Бахир. Казань, 1984. — 16 с.

6. Бахир, В. М. Физическая природа явлений активации веществ Текст. / В. М. Бахир, А. Г. Лиакумович, П. А. Кирпичников [и др.]. // Изв. АН УзССР, сер. техн. наук. 1983. — № 1. — С. 60 — 64.

7. Беляев, В. В. Справочник по охране труда в мясной и молочной промышленности Текст. / В. В. Беляев [и др.]. М.: Пищевая промышленность, 1976. —384 с.

8. Большаков, А. С. Технологические свойства активированной воды Текст. / А. С. Большаков, Л. А. Сарычева, А. А. Борисенко // Изв. вузов. Пищевая технология. 1992. — № 2. — С. 56 — 58.

9. Варданян, А. Г. Разработка технологии концентратов гидролизованной лактозы на основе пермеата молочной сыворотки Текст.: дисс.. к.т.н. / А. Г. Варданян. Ставрополь, 2009. — 118 с.

10. Микробные ферменты и биотехнология Текст. / под. ред. И. М. Грачевой. — М.: Агропромиздат, 1986 — 320 с.

11. Полянский, К. К. Кристаллизация лактозы: физико-химические основы Текст. / К. К. Полянский, А. Г. Шестов. Воронеж: изд-во ВГУ, 1995. 184 с.

12. Русанова, Л. А. Бактерицидные свойства электроактивированных водных растворов Текст. / Л. А. Русанова, Г. И. Касьянов // Тезисы докладов 4-ого Международного Симпозиума «Экология человека: пищевые технологии и продукты». — 1995. С. 295.

13. Синельников, Б. М. Лактоза и ее производные Текст. / Б. М. Синельников, А. Г. Храмцов, И. А. Евдокимов, С. А. Рябцева, А. В. Серовпод общ. ред. Академика РАСХН А. Г. Храмцова. СПб.: Изд-во Профессия, 2007. — 768 с.

14. Системы анализа рисков и определение критических контрольных точек НАССР/ХАССП. Государственные стандарты США и России. М.: Феникс, 2003. — 542 с.

15. Соколов, А. В. Производство и применение продуктов электролиза воды Текст. / А. В. Соколов, С. П. Замана // Вестник РАСХН. — 1992.-№ 2.-С. 45−46.

16. Степанова, Е. Г. Технологические эффекты процесса экстрагирования сахара с применением ЭАЖС Текст. / Е. Г. Степанова, Е. П. Кошевой // Известия вузов. Пищевая технология. 1992. — № 3 — 4. -С. 55−57.

17. Технологический регламент регулирования кислотности молока и жидких молочных продуктов методом униполярной электроактивации Текст. Ташкент: Научно-производственное объединение «Конструктор», научно-производственная фирма «ЭСПЕРО», 1991. — 92 с.

18. Тихомирова, Н. А. Технология продуктов функционального питания Текст. / Н. А. Тихомирова. М.: ООО «Франтера», 2002. — 213 с.

19. Хамагаева, И. С. Теоретическое обоснование и разработка технологии кисломолочных продуктов на основе использования ß—галактозидазы и бифидобактерий Текст.: дисс.. д.т.н. / И. С. Хамагаева. — Москва, 1989.-456 с.

20. Храмцов, А. Г. Безотходная технология в молочной промышленности Текст. / А. Г. Храмцов, П. Г. Нестеренко. — М.: Агропромиздат, 1989. 279 с.

21. Храмцов, А. Г. Молочный сахар Текст. / А. Г. Храмцов. — М.: Агропромиздат, 1987. — 224 с.

22. Храмцов, А. Г. Научно-технические основы криотехнологии молочных продуктов Текст. / А. Г. Храмцов, А. И. Казначеев. Ставрополь: СтГТУ, 1994.-68 с.

23. Храмцов, А. Г. Научно-технические основы электрофизических методов обработки молочного белково-углеводного сырья Текст. / А. Г. Храмцов, И. А. Евдокимов, С. А. Рябцева [и др.]. — Ставрополь: СтГТУ, 1999. 120 с.

24. Храмцов, А. Г. Технология продуктов из вторичного молочного сырья Текст.: учебное пособие / А. Г. Храмцов [и др.] СПб.: ГИОРД, 2009. — 424 с.

25. Храмцов, А. Г. Технология продуктов из молочной сыворотки Текст.: учебное пособие. / А. Г. Храмцов, П. Г. Нестеренко. — М.: ДеЛи принт, 2004. 587 с.

26. Червецов, В. В. Интенсификация процессов кристаллизации при производстве молочных продуктов Текст. / В. В. Червецов, А. И. Гнездилова. — М.: Типография Россельхозакадемии, 2011. — 196 с.

27. Шаманаева, Е. А. Электрохимическая активация как способ безреагентного регулирования свойств жидких пищевых сред Текст. :учебное пособие / Е. А. Шаманаева, А. А. Борисенко, Л. А. Борисенко, Н. В. Судакова. — Ставрополь: СевКав ГТУ, 2007. — 144 с.

28. Шаманова, Г. П. Микробиологические и технологические аспекты производства продуктов функционального питания Текст. / Г. П. Шаманова // Молочная промышленность. — 1997. — № 5. — С. 5 6.

29. Шахнович, Л. Л. Vivinal® GOS пребиотические волокна для обогащения продуктов питания Текст. / Л. Л. Шахнович // Пищевая промышленность. — 2006. — № 9. — С. 60 — 61.

30. Шепелева, Е. В. Пример разработки плана ХАССП для производства кефира Текст. / Е. В. Шепелева, А. Л. Тетерук, Е. В. Митасева, И. С. Райдна // Молочная промышленность. — 2006. № 12. — С. 15 — 22.

31. Шестов, А. Г. Мутаротация, растворение и кристаллизация лактозы Текст. / А. Г. Шестов, К. К. Полянский. Известия вузов. Пищевая технология. — 1978. — № 3. — С. 48 — 56.

32. Штокман, Е. А. Очистка воздуха на предприятиях пищевой промышленности Текст. / Е. А. Штокман. — М.: Пищевая промышленность, 1977.-304 с.

33. Adamczak, М. Enzymatyczna synteza galactooligosacharydow i laktulozy w permeacie po ultrafiltracji serwatki Text. / M. Adamczak, W. Bernadski // ZYWNOSC. Nauka. Technologia. Jakosc. 2008. — № 6 (61). -P. 105−117.

34. Affertsholt, T. Future for the whey products market from a whey processor’s perspective // 5'th International Whey Conference. — Paris. 2008. — 31 p.

35. Aronson, M. Transgalactosidation during lactose hydrolysis Text. / M. Aronson // Archives of Biochemistry and Biophysics. — 1952. № 39. -P. 370−378.

36. Benno, Y. Effects of raffinose intake on human faecal microflora Text. / Y. Benno, 1С. Endo, N. Shiragami et al. // Bifidobact. Microflora. 1987. -V. 6, № 2.-P. 59−63.

37. Bouhnik, Y. Administration of transgalacto-oligosaccharides increases fecal bifidobacteria and modifies colonic fermentation metabolism in healthy humans Text. / Y. Bouhnik, B. Flourie, et al. // Journal of Nutrition. 1997. -№ 127.-P. 444−448.

38. Dey-Chyi, S. Production of galactooligosaccharides by ?-galactosidase immobilized on glutaraldehyde-treated chitosan beads Text. / S. Dey-Chyi // Biotechnology Techniques. 1998. — № 4. — P. 273 — 276.

39. Dias, L. G. UV spectrophotometry method for the monitoring of galacto-oligosaccharides production Text. / L. G. Dias, A. C. Veloso // Food Chemistry. 2009. — № 113. — P. 246 — 252.

40. Eun-Su, A. Galacto-oligosaccharide production by a thermostable recombinant ?-galactosidase from Thermotoga maritime Text. / A. Eun-Su // World Journal of Microbiology and Biotechnology. 2005. — № 5. -P. 759−764.

41. European Patent № 263 700, C12N1/38- C12P19/00- C12P19/14- C12R1/69 et al. Method for producing oligosaccharides Text. / Kobayashi Y., KanT., TerashimaT.- pat. 13.04.1988.

42. European Patent № 266 177, C12P19/00- C12N1/38- C12P19/14. Method for producing oligosaccharides Text. / Kan T.- Kobayashi Y.- pat. 04.05.1988.

43. European Patent № 272 095, C12P19/18. Method for producing galactooligosaccharide Text. / Matsumoto K., et al.- pat. 22.06.1988.

44. European Patent № 2 252 699 (A2) C12P19/00- C12P19/14. Production of high purity galactooligosaccharides Text. / A. Kashinath, M. Palamalai, S. Rengarajanpat. 24.11.2010.

45. Gibson, G. R. Dietary modulation of the human colonic micro-biota: introducing the concept of prebiotics Text. / G. R. Gibson, M. B. Roberfroid // Journal of Nutrition. 1995. -№ 125. — P. 1401 — 1412.

46. Gibson, G. R. Prebiotics: development and application Text. / G. R. Gibson, R. A. Rastall. Chichester: John Wiley & Sons, 2006. — 249 p.

47. Hernandez, O. Comparison of fractionation techniques to obtain prebiotic galactooligosaccharides Text. / O. Hernandez, A. I. Ruiz-Matute, A. Olano // International Dairy Journal. 2009. — № 19. — P. 531 — 536.

48. Humana. Детское питание из Германии // http://www.humana.ru.

49. International Patent WO 1996/6 924, A23C 9/123, C12N 1/20, C12N 9/38, C12P 19/14. Preparation of galacto-oligosaccharide and beta-galactosidase enriched products fermented using Streptococcus thermophilus Text. / Blareau A., et alpat. 07.03.1996.

50. International Patent WO 2001/90 317, C12N 9/38. Beta-galactosidase isolated from a Bifidobacterium Text. / Jorgensen F., Hansen О. С., Stougaard P.- pat. 29.11.2001.

51. International Patent WO 2005/3 329 Al, C12N 1/20. Novel galactooligosaccharide composition and the preparation thereof Text. / Wynne A., et al.- pat. 13.01.2005.

52. International Patent WO 2007/54 459, C12P 19/14. Process for the production of oligosaccharides Text. / Goulas A., Tzortzis G.- pat. 18.05.2007.

53. International Patent WO 2007/110 619, C12N5/10- C12N9/38- C12N15/63- C12N5/10- C12N9/38- C12N15/63. Beta-galactosidase with transgalactosylating activity Text. / Tzortzis G., Goulas A., Goulas Т.- pat. 04.10.2007.

54. International Patent WO 2008/37 839, C12P 19/04, A23C 9/12, C12P 19/12, A23C 13/16. Method for producing products containing galactooligosaccharides and use thereof Text. / Sibakov Т., Kajander K., Harju M.- pat. 03.04.2008.

55. International Patent WO 2008/132 115, C07H 3/06, A23 L 1/29, C08B 37/00. Process for preparing a galactooligosaccharides powder Text. / Salvado S. R., et al.- pat. 06.11.2008.

56. Isabel del-Val, M. Biphasic aqueous media containing polyethylene glycol for the enzymatic synthesis of oligosaccharides from lactose Text. /M. Isabel del-Val, C. Otero // Enzyme and Microbial Technology. 2003. — № 33. — P. 118−126.

57. Japan Patent № 10 201 472, C12N9/40- C12P19/44- C12R1/465. Production of alpha-galactosidase and galactooligosaccharide Text. / Fujimoto H., Ajisaka K.- pat. 04.08.1998.

58. Japan Patent № 1 051 094, C07H3/06- C12P19/14. Production of galactooligosaccharide Text. / Matsuno R., Nakanishi K., Ozalci A.- pat.2702.1989.

59. Japan Patent № 11 018 763, C12N9/38- C12P19/14- C12N9/38- C12R1/09. Modification of beta-galactosidase Text. / Matsumoto K., Ikeda M., OoedaK., et alpat. 26.01.1999.

60. Japan Patent № 1 168 234, A23C9/12- A23C9/152- C12N9/38 et al. Production of galactooligosaccharide-containing processed milk Text. / ICobayashi Y., Suga T., Terajima T.- pat. 03.07.1989.

61. Japan Patent № 2 000 041 693, C12N9/38- C12P19/14- C12R1/01- C12N9/38. Production of galactooligosaccharide Text. / Hayasawa H., Takase M., Okogi S.- pat. 15.02.2000.

62. Japan Patent № 2 003 274 991, C12P19/14. Method for producing galactooligosaccharide Text. / Fujii T., Fujii N.- pat. 30.09.2003.

63. Japan Patent № 2 100 693, C12P19/04- C12P19/00- C12P19/18- C12P19/24 et al. Production of galactooligosaccharide Text. / Matsumoto K., ICobyashi Y., Suga T.- pat. 12.04.1990.

64. Japan Patent № 2 195 894, C12P19/44. Production of galactooligosaccharide Text. / Takeshi O., Masaaki I, Rikako Y.- pat. 02.08.1990.

65. Japan Patent № 2 203 782, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide-containing koji Text. / Shigenori U., Yoshio U., Yoshitami O.- pat. 13.08.1990.

66. Japan Patent № 2 207 796, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide using enzyme Text. / Ikumasa O., Kenzo Y.- pat.1708.1990.

67. Japan Patent № 2 209 884, C07H3/06- C12P19/00- C12P19/14. Production of galactooligosaccharide Text. / Sulcuri T., Yanagidaira S., Shukke S.- pat. 21.08.1890.

68. JapanPatent № 2 215 392, C07H3/06- C12N1/38- C12P19/14. Production of galactooligosaccharide Text. / Matsumoto K., Kobyashi Y., Suga T.- pat. 28.08.1990.

69. Japan Patent № 2 295 994, C07H1/08- C07H3/06- C08B37/00- C12P19/00. Production of galactooligosaccharide Text. / Naoki T., Kazuhiko O.- pat. 06.12.1990.

70. Japan Patent № 3 076 578, C12N11/02- C12N11/00- C12N11/02. Immobilized yeast fungal cell Text. / Hideki Y., Munehiko D., Hiroshi N.- pat. 02.04.1991.

71. Japan Patent № 3 244 382, C12P19/14- C12N1/20- C12N9/42- C12R1/07. Galactanase and microorganism capable of producing the same Text. / TsumuraK., Akiba A., Horikoshi K.- pat. 31.10.1991.

72. Japan Patent № 4 023 984, C12P19/14- C12N1/20- C12N9/42. Exo-beta-1,4-galactanase and use thereof Text. / Nakano H., Takenishi S., Ajisaka K., et alpat. 28.01.1992.

73. Japan Patent № 4 030 744, A23C9/13- C12P19/041. Skimmed milk containing galactooligosaccharide and its preparation Text. / Shukke S., Yanagidaira S., Kobayashi T.- pat. 03.02.1992.

74. Japan Patent № 4 144 691, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide and gluconic acid Text. / Ilcuo K., Ikumasa O., Akihiro Y.- pat. 19.05.1992.

75. Japan Patent № 60 251 896, C07H3/06- C12P19/00- C12R1/645. Preparation-of galactooligosaccharide Text. / Osamu O., Aldra T., Koutarou O., Shiyuuichi O.- pat. 12.12.1985.

76. Japan Patent № 61 271 999, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide Text. / Osamu O., et al.- pat. 02.12.1986.

77. Japan Patent № 62 130 695, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide Text. / Osamu O., Kotaro O., Nobuko T.- pat. 12.06.1987.

78. Japan Patent № 62 208 293, C12N1/38- C12P19/00- C12P19/04. Production of multiplication growth factor of mold of bifidobacterium Text. / Keisuke M., et alpat. 12.09.1987.

79. Japan Patent № 7 222 594, C12P19/00. Production of galactooligosaccharide Text. / Takazo S.- pat. 22.08.1995.

80. Japan Patent № 7 236 480, C12N9/38- C12R1/645- C12N9/38. New. beta-galactosidase and its production Text. / Onishi I., Tanaka T.- pat. 12.09.1995.

81. Japan Patent № 8 256 680, A23C9/12- A23C9/18- A23C9/12- A23C9/00.1 New food material and its production Text. / Takaine M., Goto T., Aiuchi M.- pat. 08.10.1996.

82. Japan Patent № 9 107 962, C12N9/42- C12N1/20- C12P19/14- C12R1/07. Galactanase S-2 and Bacillus SP S-2 producing the same Text. / Tsumura K., Akiba A., Horikoshi K.- pat. 28.04.1997.

83. Japan Patent № 9 117 297, C12P19/18- C12N9/38- C12N9/38- C12R1/80- C12N9/38- C12R1/125. Production of galactooligosaccharide Text. / Fujimoto H., AjisakaK.- pat. 06.05.1997.

84. Japan Patent № 9 121 853, C12N9/42- C12N1/20- C12P19/14- C12R1/07. Galactanase S-39 and Bacillus SP S-39 capable of producing the same Text. / Tsumura K., Akiba’A., Horikoshi K.- pat. 13.05.1997.

85. Japan Patent № 9 238 696, C12P19/18. Production of saccharide composition’containing 3'galactooligosaccharide Text. / Kimura K., Watanabe Y., Matsumoto K.", et alpat. 16.09.1997.

86. Japan-Patent № 9 301 987, A23L2/52. Galactooligosaccharide sulfate, its production and use Text. / Yukihiro O., et alpat. 25.11.1997.

87. Korean Patent № 20 040 033 748, C12P19/04- C12P19/00. Method for synthesis of galactooligosaccharide using Thermus caldophilus GK24 ?-glycosidase Text. / Choi J., Kwon W., Oh E.- pat 28.04.2004.

88. Korean Patent № 9 603 643, C12P19/00. Preparation process of galacto oligosaccharide Text. / Man-Jin I., et alpat. 21.03.1996.

89. Maugard, T. Microwave-assisted synthesis of galacto-oligosaccharides from lactose with immobilized p-galactosidase from Kluyveromyces lactis Text. / T. Maugard, D. Gaunt, M. D. Legoy // Biotechnology letters. 2003. — № 25. — P. 623 — 629.

90. Nakakuki, T. Development of functional oligosaccharides in Japan Text. / T. Nakakuki // Trends in Glycoscience and Glycotechnology. — 2003. — № 82.-P. 57−64.

91. Pat. 204 493 France, 7 C 12 P 19/14, C 07 H 3/06. Procede de production en continu de galacto oligosaccharides Text. / Sawatzki G.- pat. 17.10.2003.

92. Pazur, J. H. The enzymatic conversion of lactose into galactosyl oligosaccharides Text. / J. H. Pazur // Science. 1953. — № 117. — P. 355 — 356.

93. Playne, M. J. Commercially available oligosaccharides Text. / M. J. Playne, R. Crittenden // Bulletin of IDF. 1996. — № 313. — P. 25 — 30.

94. Playne, M. J. Galacto-oligosaccharides and other products derived from lactose Text. / M. J. Playne, R. G. Crittenden // Advanced Dairy Chemistry. -2009.-P. 15−26.

95. Prenosil, J. E. Formation of oligosaccharides during enzymatic lactose hydrolysis and their importance in a whey hydrolysis process Text. / J. E. Prenosil, E. Stuker, J. R. Burne // Biotechnol. Bioeng. 1987. — Y. 30, № 9. -P. 1026- 1031.

96. Probiotic Dairy Products Text. / Edited by A. Y. Tamime. Wiley-Blackwell: Society of dairy tech., 2006. — 256 p.

97. Roberts, C. H. Concentration effects in the enzymatic conversion of lactose to oligosaccharides Text. / C. H. Roberts, D. J. Pettinati // J. Agric. Food Chem. 1957. — № 5. — P. 35 — 39.

98. Schaafsma, G. Lactose and lactose derivatives as bioactive ingredients in human nutrition Text. / G. Schaafsma // International Dairy Journal. 2008. — № 18.-P. 458−465.

99. Scholz-Ahrens, K. E. Effects of prebiotics on mineral metabolism Text. / K. E. Scholz-Ahrens, G. Schaafsma // American Journal of Clinical Nutrition. 2001. — № 73. — P. 459 — 464.

100. Smart, J. B. Effect of whey compounds on the rate of crystallization and solubility of a-lactose Text. / J. B. Smart // NZ J. Dairy Sei. Technol. 1988. -№ 23.-P. 275−289.

101. Smart, J. B. Transferase reactions of ?-galactosidases — new product opportunities Text. / J. B. Smart // Bulletin of the IDF. 1993. — № 289. -P. 33 -39.

102. Tanaka, T. Effect of administration TOS and B. breve 4006 on the human fecal flora Text. / T. Tanaka, H. Ta Rayama, M. Morotomi et al. // Bifidobact. Microflora. 1983. -V. 2, № 1. — P. 17 -24.

103. Timmermans, E. Lactose derivatives: functions and applications Text. / E. Timmermans // Whey — Proceedings of the 2-nd International Whey Conference. Chicago. — 1997. — P. 12 — 23.

104. U. S. Patent № 4 435 389, A61K 031/71- C12P 019/04. Composition for promoting growth of bifidobacteria Text. / Mutai M.- Terashima T.- Takahashi T., et alpat. 06.03.1984.

105. U. S. Patent № 4 873 229, C12P 19/00. Galacto-oligosaccharide containing feed Text. /Deya A., et al. Japan. Prior. 12.12.1985; pat. 10.10.1989.

106. U. S. Patent № 4 895 801, C12P 019/04. Method for producing oligosaccharides Text. / Kan T., et al.- pat. 23.01.1990.

107. U. S. Patent № 4 957 860, C12P 019/04. Method for producing oligosaccharide Text. / Kan O., et al.- pat. 18.09.1990.

108. U. S. Patent № 5 032 509, D23C 009/12. Method of preparing galactooligosaccharide Text. / Matsumoto K., et al.- pat. 16.07.1991.

109. U. S. Patent № 5 149 640, C12P 019/02. Method for producing galactose transfer products Text. / Onishi O., et alpat. 22.09.1992.

110. U. S. Patent № 5 294 546, C12P 19/00. Method for production of a growth factor for Bifidobacterium sp. Text. / Dombou O., et alpat. 15.03.1994.

111. U. S. Patent № 5 378 833, C07H 3/06. Method for preparing galacto-oligosaccharides Text. / Katta Y., et alpat. 03.01.1995.

112. U. S. Patent № 5 578 584, A61K 31/715. Feed containing galacto-oligosaccharides for domestic fowls Text. / Katta Y., Wakahayashi S.- pat. 26.11.1996.

113. U. S. Patent № 6 555 348, C12P 019/44- C12N 009/10- C12N 009/26- A23C 019/00- A23C 017/00. Enzyme isolated from a Bifidobacterium Text. / Jorgensen F., Hansen O. C., Stougaard P.- pat. 29.04.03.

114. Van Dokkum, W. Tolerantie voor galacto-oligosaccharide bij de mens Text. / W. Van Dokkum // Nutrition and Food Research. 1995. — V. 95, № 371. — P. 24−27.

115. Van Loo, J. Functional food properties of non-digestible oligosaccharides: a consensus report from the ENDO project Text. / J. Van Loo, J. Cummings, N. Delzenne et al. // British Journal of Nutrition. 1999. — № 81. -P. 121−132.

116. Vasiljeyic, T. Oligosaccharide production and proteolysis during lactose hydrolysis using crude cellular extracts from lactis acid bacteria Text. / T. Vasiljevic, P. Jelen // EDP Sciences. 2003. — № 83. — P. 453 — 467.

117. Wallenfels, K. Enzymatische Synthese von Oligosacchariden auf Disacchariden Text. / K. Wallenfels // Naturwissenschaften. 1951. -№ 38. — P. 306−308.

118. Wanarska, M. Thermostable Pyrococcus woesei ?-D-galactosidase — high level expression, purification and biochemical properties Text. / M. Wanarska, J. Kur, R. Pladzyk, M. Turkiewicz // Acta Biochimica Polonica. -2005. № 4.-P. 781 -787.

119. Welcome to Domo. Your partner for nutritional supporting life // http://www.domo.nl.

120. Yun, J. W. Fructooligosaccharides — Occurrences, Preparation, and Applications Text. / J. W. Yun et al. // Enzyme and Microbial Technol. — 1996. — № 19.-P. 107−117.