Диагностика. 
Классическая чума свиней. 
Особенности проявления и специфическая профилактика

Диагноз на КЧС ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений с обязательным подтверждением лабораторными исследованиями, а в сложных случаях — ставят биопробу на животных.

Из эпизоотологических данных при КЧС учитывают восприимчивость к этой болезни всех возрастных групп cвиней, пород и линий независимо от времени года. Обращают внимание на возможный завоз в хозяйство вирусоносителей или необезвреженных боенских отходов, высокую заболеваемость (90−100%) и летальность (80−100%) свиней. Устанавливают благополучие хозяйства по КЧС в прошлом, полноту и эффективность проводимых мероприятий по профилактике КЧС. При этом анализируют схему специфической профилактики КЧС и других инфекционных болезней этого вида животных в хозяйстве, продолжительность и условия хранения используемой вакцины, уровень иммунного статуса вакцинированных свиней, условия их содержания и кормления, другие вопросы, касающиеся общей и специфической профилактики заболевания. Учитывают заболеваемость и падеж диких и принадлежащих населению свиней, с клиническим проявлением и патологоанатомическими изменениями, характерными для этого заболевания.

При постановке клинического диагноза нужно учитывать, что болезнь может вызываться различными серовариантами вируса КЧС: А, В и С.

Из клинических признаков при острой форме КЧС наиболее характерными являются: лихорадка постоянного типа, резкое угнетение, отказ от корма, шаткая походка, конъюнктивит, геморрагический синдром (точечные или пятнистые кровоизлияния в коже, в области спины, живота, шеи, бедер, груди, ушей). Имеет место быстрое распространение заболевания среди поголовья разного возраста при высоком уровне смертности (до 100%) через 1−2 недели после проявления клинических симптомов.

В отличие от острой формы чумы свиней практически невозможно поставить клинический диагноз в случаях подострой, хронической или поздно установившейся формы чумы свиней из-за сильной изменчивости клинических и патологоанатомических признаков. Подострое и хроническое течение характеризуется менее выраженными клиническими признаками, чем при остром течении, появлением симптомов поражения органов пищеварения или дыхания и лихорадки ремитирующего типа.

Наиболее характерным гематологическим изменением при КЧС является лейкопения, а также отсутствие лечебного эффекта при использовании антибиотиков.

Для септической формы (острое течение) при постановке патологоанатомического диагноза характерными патологоанатомическими признаками являются: геморрагический диатез, геморрагический лимфаденит с мраморным рисунком поверхности их разреза, инфаркты в селезенке, зернистая дистрофия печени, почек, миокарда, острый катаральный или крупозно-геморрагический гастроэнтерит, катарально-гнойный конъюнктивит и общая анемия. При гистоисследовании головного и спинного мозга обнаруживают во всех его отделах негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит.

При осложнении КЧС пастереллезом и гемофилезной плевропневмонией (подострое течение) обнаруживают крупозную или крупозно-геморрагическую пневмонию, фибринозный плеврит и перикардит, а при чуме, осложненной сальмонеллезом (хроническое течение) — очаговое дифтеритическое воспаление солитарных фолликулов ободочной и слепой кишок с образованием круглых пуговчатых струпьев (чумные бутоны).

При возникновении подозрения на чуму предварительный диагноз должен быть подтвержден соответствующими результатами лабораторной диагностики, включающей вирусологические исследования — выделение и идентификацию возбудителя методами:

иммунофлюоресценции — исследуют мазки-отпечатки миндалин и других органов павших и убитых животных, а также криосрезы тканей. МФА отличается относительной специфичностью и быстротой выполнения. Однако во избежание неточностей при использовании этого метода следует иметь в виду, что иммунофлюоресцирующая специфическая сыворотка должна иметь высокие титры антител, она должна быть моновалентной, полученной от свиней, не обработанных другими антигенами; патматериал для исследования должен быть отобран не позже 2−3 ч. после смерти животного, фиксирован в ацетоне или замораживанием и сразу же отправлен на исследование.

Существенным недостатком метода иммунофлюоресценции является то, что вакцинный вирус сохраняется в организме иммунизированных свиней до 15 дней после вакцинации и методом флюоресцентного анализа не дифференцируется от полевого вируса. В организме же толерантных поросят, полученных от вакцинированных супоросных свиноматок (особенно в 10-кратной дозе), вакцинный штамм может персистировать в течение всей жизни животных.

Полимеразная цепная реакция предназначена для обнаружения вируса классической чумы свиней. В основе метода лежит многократное повторение циклов денатурации ДНК (после получения из вирусной РНК фрагментов ДНК) в исследуемой пробе при температуре плюс 94єС, гибридизации (отжига) с исследуемой ДНК специфических олигонуклеотидных затравок (праймеров) при температуре плюс 60 °C и синтез с них комплементарных цепей ДНК с помощью термостабильной ДНК полимеразы при температуре плюс 72 °C. С помощью данной тест-системы вирус КЧС может быть обнаружен в инфицированных культурах клеток и патматериале от больных и павших животных (кровь, селезенка, сердце, печень) в течение от 8 до 24 часов.

Относительно эффективным при выявлении вируса классической чумы свиней является также метод иммуноферментного анализа и цитохимический вариант иммуноферментного анализа (ЦВИА).

Для обнаружения вируса КЧС в патологическом материале могут использоваться РНГА, РДП, иммуноэлектроосмофорез (ИЭОФ) и другие.

Серо — и ретроспективная диагностика КЧС в последние годы базируется на использовании преимущественно трех серологических реакций: реакция нейтрализации флюоресцирующих микробляшек (РНФБ); реакции непрямой ИФ и непрямой вариант твердофазного ИФА.

Выделение вируса из патматериала производится заражением культуры клеток ПК-15 (перевиваемая линия клеток почки поросенка). Вирулентные штаммы ВКЧС в этой культуре активно репродуцируются при плюс 39−40°С, образуя большие флюоресцирующие участки клеток. Вакцинные штаммы в культуре ПК-15 размножаются медленно при плюс 33−34°С, образуя небольшие флюоресцирующие участки клеток.

Идентификация вируса КЧС проводится методами МФА, ИФА, ПЦР или нейтрализации флюоресцирующих микробляшек. Последний метод используется также для дифференциации эпизоотических и вакцинных штаммов вируса. Срок исследований — 15 дней.

В лабораторию для исследований следует направлять кусочки селезенки, миндалин, заглоточных, подчелюстных и брыжеечных лимфоузлов почек, легких, пробы крови и костного мозга из грудной кости, отобранные в первые 2 часа после гибели или убоя больных животных. Материал отбирают в стерильную посуду и доставляют в термосе со льдом. От новорожденных поросят (до приема молозива) берут кровь (1−2 мл) помещают в пенициллиновые флаконы, которые хранят и транспортируют для исследования в замороженном виде. Если пробы крови берут от нескольких безмолозивных поросят, то они должны быть из разных пометов. Материал для исследования направляют с сопроводительным письмом, в котором указывают эпизоотическое состояние хозяйства, отмеченные симптомы болезни, патологоанатомические изменения.

Для гистоисследования в лабораторию посылают кусочки полушарий головного мозга, продолговатого мозга, четверохолмия, спинного мозга. Кусочки указанных органов (1−2×1×1 см) помещают в стеклянные банки с 10%-ным водным раствором формалина. Объем консерванта берут в 10 раз больше, чем объем взятого патматериала.

Данная схема лабораторных исследований на КЧС принята во всех европейских странах.

В настоящее время диагностикумы готовятся на основе моноклональных антител, что позволяет дифференцировать не только эпизоотические и вакцинные штаммы вируса, но и близкородственные пестивирусы.

На основании изучения эпитопного профиля 18 штаммов ВКЧС с использованием МАт к трем пестивирусам (ВКЧС, BflKFC и ПЮ) был выявлен у 4 штаммов нетипичный для ВКЧС профиль и высказана гипотеза, что свиньи чувствительны не только к пестивирусам КРС и овец, но и другим вирусам чумы, хозяин которых еще не установлен [63].

С помощью вируснейтрализующих МАт было установлено, что ответственным за индукцию протективного иммунного ответа против КЧС является оболочечный гликопротеин gp55 [70, 71]. С ним же связана и нейтрализация инфекционности вируса антителами.

В отдельных случаях прибегают к постановке биопробы, которая является относительно не дорогим, но исключительно достоверным методом диагностики.

В каждом отдельном случае на проведение биопробы необходимо иметь разрешение Главного управления ветеринарии Республики Беларусь. Биопроба должна проводиться под методическим руководством Республиканской ветеринарной лаборатории в условиях, исключающих возможность рассеивания возбудителя. Подтверждение диагноза биопробой можно получить лишь через 30 суток и более, после установления сероконверсии у переболевших поросят [25].

В отдельных случаях биологическая проба при диагностике КЧС является решающей. Однако условий для ее постановки в Республике Беларусь нет из-за отсутствия свиней неиммунных к классической чуме.

Диагноз на КЧС следует считать установленным при выделении вируса из патологического материала в культуре клеток и его идентификации или положительной биопробе.

При диагностике КЧС во всех сомнительных случаях надо исключить (или подтвердить) такие болезни как африканская чума свиней, рожа, сальмонеллез, пастереллез, листериоз, болезнь Ауески, ТГС, болезнь Тешена, дизентерию, отравления протекающие с признаками геморрагического диатеза.

Лечение неэффективно, больных КЧС свиней немедленно убивают. В случае выздоровления больные КЧС свиньи остаются вирусоносителями в течение 1 года и более [32, 31, 22, 46, 7, 50, 51, 52, 8,48, 9, 42, 15, 58, 53, 23, 30, 25, 35, 33, 10, 34].