Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Изучение взаимодействия генотипов растения и бактерии при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Создание генетически модифицированного растения подразумевает связь между процессом собственно трансформации и последующей регенерации целого растения. Как и для большинства видов этот процесс генотип-зависим (Лутова 2003, Wordragen et al., 1993). Кроме того, эффективность получения трансгенного растения от конкретного генотипа зависит от сочетания множества факторов. Ранее, в работах нашей… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • Получение растений, устойчивых к колорадскому жуку на основе трансформации геном ВТ bacillus thuringiensis
    • 1. 1. Биологические особенности Bacillus thuringiensis
    • 1. 2. Доменная организация эндотоксинов
    • 1. 3. Механизм действия эндотоксинов Bacillus thuringiensis
    • 1. 4. Применение культуры в. thuringiensis в качестве инсектицида
    • 1. 5. КЛОНИРОВАНИЕ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА, КОДИРУЮЩЕГО ТОКСИН В. thuringiensis
    • 1. 6. Изучение функциональной роли cc-спиралей
    • 1. 7. Генная инженерия генов токсинов в. thuringiensis
    • 1. 8. Введение cry генов в геном растений
    • 1. 9. Придание устойчивости растениям посредством бактериального гена изопентенил-трансферазы (ipt)
    • 1. 10. Гены хозяйской специфичности агробактерий
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Материал
    • 2. 2. Методы
  • Агробактериальная трансформация в оптимальных для регенерации условиях
    • 2. 2. 1. Поддержание растительного материала
    • 2. 2. 2. Подбор сред для регенерации и характеристика сортов картофеля по регенерационной способности
    • 2. 2. 3. Получение трансгенных растений картофеля
    • 2. 2. 4. Выделение растительной ДНК
    • 2. 2. 5. Выделение ДНК агробактерий
    • 2. 2. 6. Полимеразная цепная реакция
      • 2. 2. 7. 0. ценка устойчивости картофеля к колорадскому картофельному жуку
      • 2. 2. 8. Статистическая обработка результатов
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Характеристика сортов картофеля in vitro по регенерационной способности
      • 3. 1. 1. Морфофизиологическая характеристика каллусов in vitro
      • 3. 1. 2. Регенерация побегов на клубневых эксплантах in vitro
    • 3. 2. Получение трансгенных растений картофеля с генами Вт и ipt
    • 3. 3. Анализ трансгенных линий картофеля с генами Вт и ipt на устойчивость к колорадскому картофельному жуку

Изучение взаимодействия генотипов растения и бактерии при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Разработка эффективных методов регенерации, изучение процессов морфогенеза in vitro особенно необходимо для важнейших сельскохозяйственных культур. Это обусловлено тем, что данные процессы лежат в основе фактически всех современных биотехнологических методовбудь то клональное микроразмножение, оздоровление посадочного материала, клеточная селекция или трансформация. Ранее в литературе многократно У обсуждался вопрос об зависимости процессов регенерации in vitro от генотипа .

Показано также, что и интенсивность трансформации определяется генотипом растения и зависит от штамма бактерии, с помощью которого осуществлен этот процесс. Однако работы по зависимости трансформация — генотип — штамм бактерии были выполнены в основном с использованием разнообразных штаммов агробактерий дикого типа. В настоящее время, когда в мировой практике стоит проблема получения трансгенных растений, устойчивых к абиотическим и биотическим факторам среды, все еще остаются нерешенными вопросы о роли сорта и коммерческих штаммов, во всем их многообразии, в эффективности трансформации. Хорошо известно, что в результате трансформации даже в пределах одной пары сорт — штамм можно получить широкий круг изменчивости, как результат случайного встраивания Т-ДНК в геном растения. Поэтому, для получения трансгенного растения с заданными свойствами необходимо иметь большое число трансгенных растений, среди которых возможно провести направленный отбор.

Все выше сказанное указывает на необходимость, проведения исследований направленных на выявление причин, определяющих эффективность трансформации, к которым в первую очередь следует отнести подбор генотипа растения, штамма бактерии (вектора), а также условий, таких как питательная среда, тип экспланта.

Целью работы явилось — изучение взаимодействия: генотипа растения и штамма бактерии, при получения растений, устойчивых к вредителям' посредством трансформации генами Bt токсина (Bacillus thuringiensis) и ipt (Agrobacterium tumefaciens). В задачи работы входило:

1. Изучение внутривидововой изменчивости по способности к регенерации in vitro среди сортов рекомендованных к возделыванию в Ленинградской области и выявление условий при которых этот процесс максимально выражен.

2. Изучение изменчивости по интенсивности трансформации сортов картофеля в зависимости от штамма бактерии.

3. Получение коллекции трансгенных растений картофеля, на основе сортов, рекомендованных к возделыванию в условиях Ленинградской области, несущих бактериальные гены npt II, ipt, Bt.

4. Анализ форм из коллекции трансгенных растений картофеля по устойчивости к колорадскому картофельному жуку.

ВЫВОДЫ.

Таким образом, в ходе работы полученны следующие результаты:

1) Описаны и классифицированы типы каллусов, возникающие при развитии клубневых эксплантов картофеля на синтетической питательной среде МС с различными фитогормональными добавками.

2) Выявлена зависимость между типом каллуса, развивающегося на зкспланте, и регенерационным потенциалом у различных сортов. Предложено использовать данный признак для раннего прогнозирования и отбора генотипов с высокой регенерационной способностью.

3) Среди проанализированных сортов картофеля выявлена изменчивость по регенерационной способности и показана ее зависимость от состава фитогормонов в питательной среде и типа экспланта.

4) Показана зависимость между интенсивностью трансформации и штаммом агробактерии использованным для трансформации.

5) Подтверждена гипотеза о том, что генотипы с высокой регенерационной способностью обладают высокой способностью к трансформации.

6) Получена коллекция трансгенных растений, содержащих бактериальный ген Bt из Bacillus thuringiensis, и ген из Agrobacterium tumefaciens — ipt, кодирующий ключевой фермент биосинтеза цитокининов — изопентенилфосфотрансферазу.

7) Подтверждено, что мероприятия по трансгенозу гена Bt повышают уровень полевой устойчивости картофеля к колорадскому жуку независимо от уровня исходной устойчивости сорта.

Показано, что трансгеноз гена ipt, кодирующего ключевой фермент биосинтеза цитокининов — изопентенилфосфотрансферазу, не приводит к повышению полевой устойчивости исходных сортов к колорадскому жуку.

Среди трансгенных растений не выявлено изменений фенотипа по сравнению с исходными сортовыми формами.

Заключение

.

Менее чем за 300 лет своей Российской истории картофель прошел путь от насильственного внедрения в начале XVIII века и до нашего времени, когда картофель стал важнейшей стратегической агрокультурой. Широкое распространение картофеля в мире и в России обусловлено его удивительными питательными свойствами клубней, содержащими углеводы, витамины и незаменимые аминокислоты. Картофель относится к культурам легко возделываемым и характеризуется высокой адаптационной способностью к широкому спектру природных условий. Однако, картофелькультура, в значительной степени подверженная поражению различными патогенами: грибами, бактериями, вирусами. Среди вредителей картофеля на первом месте по вредоносности стоит колорадский картофельный жук: впервые появившись на полях нашей страны около 50-ти лет назад, он распространился на площади около 3 млн.га. Жуки и личинки повреждают листья картофеля, а при массовом заражении уничтожают всю надземную часть растения. Потеря урожая может достигать 90% в зависимости от сорта. Сегодня к арсеналу традиционных методов борьбы добавлены и новые биотехнологические методы, основанные на достижениях клеточной и генной инженерии.

Картофель наряду с табаком был одним из первых растений, подвергшихся генетической трансформации с применением почвенных бактерий Agrobacterium tumefaciens. С большей или меньшей эффективностью картофель удалось регенерировать, подвергая трансформации клубневые диски (Shermann, Bevan, 1988) или молодые листья. Однако спектр генотипов (сортов), на которых велись работы, был ограничен несколькими легко трансформируемыми сортами (Davis, 1996).

За время, прошедшее с момента получения первых трансгенных растений картофеля (1986), уже опубликовано более ста работ, основной целью которых была оптимизация процесса генетической трансформации. Чем можно объяснить такой неослабевающий интерес к модификации казалось бы уже налаженного метода? Это связано с тем, что спектр успешно трансформируемых сортов картофеля ограничен. В основном это сорта американской селекции Russet Burbanc, Atlantic, Superior и голландской селекции — Desirec.

Создание генетически модифицированного растения подразумевает связь между процессом собственно трансформации и последующей регенерации целого растения. Как и для большинства видов этот процесс генотип-зависим (Лутова 2003, Wordragen et al., 1993). Кроме того, эффективность получения трансгенного растения от конкретного генотипа зависит от сочетания множества факторов. Ранее, в работах нашей лаборатории (Лутова и др. 1998) уже была выявлена зависимость эффективности трансформации для ряда объектов от сочетания генотип — штамм, а также от условий культивирования. От исследователя, намеревающегося получить новую генетически модифицированную форму, требуется учитывать и оптимизировать сумму параметров. В решении данной проблемы возможны два подхода: если необходимо трансформировать один или максимум два сорта, то возможен подбор оптимальных условий трансформации — регенерации под каждый сорт. Если же стоит задача трансформировать несколько сортов, то правильнее разработать универсальную для многих сортов систему трансформациирегенерации. Усилия нашей работы были направлены с одной стороны на поиск генотипов (сортов) с максимальной способностью к трансформациирегенерации, а с другой стороны подбор унифицированных подходов для. целого ряда сортов, районированных в условиях Ленинградской области. Анализируя сорта картофеля отечественной селекции по способности к регенерации нам удалось выявить и описать новый признак «тип каллуса», развивающийся на клубневых эксплантах. Сорта значительно различались по способности формировать тот или иной тип каллуса. Наиболее значимым для нас оказалось, что интенсивность регенерации побегов зависит от типа каллуса. Например, на каллусах типа «наплыв» никогда не образуются растения — регенеранты, а на каллусе типа «сфероид» этот процесс происходит достаточно эффективно. Таким образом, регенерационный потенциал сорта можно определить на ранних этапах культивирования эксплантов и по признаку «тип каллуса», как маркерному, отобрать интенсивно — регенерирующие генотипы. Итак, признак «тип каллуса» можно использовать для раннего прогнозирования и отбора генотипов для трансформации и последующей регенерации. Следует обратить внимание на то, что тип каллуса определяется не только генотипом, но и содержанием фитогормонов в питательной среде. Это значит, что изменяя условия культивирования (состав фитогормонов) можно индуцировать каллус определенного типа для последующей успешной регенерации.

В экспериментах на различных сортах картофеля мы подтвердили, полученные ранее данные о связи процессов регенерации и трансформации (Лутова и др. 1998, Глик, Пастернак, 2002). Сорта характеризующиеся высокой регенерационной способностью также хорошо трансформируются, так как клетки компетентные к регенерации компетентны и к трансформации. Нашла подтверждение и высказанная нами ранее гипотеза о зависимости эффективности трансформации от штамма агробактерии. Новым явилось то, что в данном исследовании для трансформации мы использовали не штаммы дикого типа, а векторные конструкции.

Показать весь текст

Список литературы

  1. .В. Сортовые ресурсы и передовой опыт семеноводства картофеля, — Москва, 2000 г., — 150 с.
  2. В. Влияние продолжительности дня и качества корма на биологию колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say // Колорадский жук и меры борьбы с ним. Т. 2. М., 1958. С. 129−135.
  3. ., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. под ред. Н. К. Янковского М.: Мир, 2002. — 589с., ил.
  4. Государственный реестр селекционных достижений, допущенных киспользованию. Сорта растений (Официальное издание), Москва, 2003 г.
  5. В.Н. Биология колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say и его значение как вредителя картофеля в Калининградской области: Автореф. дис.канд. биол. наук. JL, 1964. 23 с.
  6. М.Д. Возможный ареал распространения и сроки развития колорадского жука в Европейской части СССР // Труды ВИЗРа. 1967. Т.27. С. 68−74.
  7. Л.А. Биотехнология высших растений. — СПб: Изд-во С.-Петерб. Ун-та, 2003. 228 с.
  8. JI.A., Павлова З. Б., Иванова М. М. Агробактериальная трансформация как способ изменения гормонального метаболизма у высших растений.// Генетика,-1998.-Т.34,№ 2.-С. 165−182.
  9. Г. И. Экологическое обоснование прогноза численности, вредоносности колорадского жука и меры борьбы с ним на Северном Кавказе: Автореф. дис. канд. биол. наук. Л., 1982. 25 с.
  10. Методические рекомендации по изучению и оценке форм картофеля на устойчивость к колорадскому жуку. Д.: ВИЗР, 1993
  11. А.Х. Сезонное развитие насекомых и возможность их расселения // Издательство С.-Петербургского университета 1999. С. 117−121.
  12. В.А., Пивень Н. М., Глеба Ю. Ю., Сытник К. М. Соматическая гибридизация пасленовых. Киев: Наук. Думка, 1985.-132 с.
  13. Р.С. Терморегуляция в классе насекомых // Вопросы экологической физиологии насекомых. М., 1987. С.5−46.
  14. И.Д., Вилкова Н. А., Фасулати С. Р., Иващенко J1.C. Методические рекомендации по изучению и оценке форм картофеля на устойчивость к колорадскому жуку. М.-1993- 48с.
  15. .В. Колорадский картофельный жук и меры борьбы с ним. // Гос. изд. сельхоз. лит. М., 1950. 64 с.
  16. Adams L.F., Mathewes S., O’Hara P., Petersen A., Gurtler H. Elucidation of the mechanism of CrylHA overproduction in a mutagenized strain of Bacillus thuringiensis var. tenebrionis.// Mol Microbiol.-1994-V. 14, № 2.- P.381−389.
  17. Akiyoshi D.E., Regier D.A., Gordon M.P. Cytokinin production by Agrobacterium and Pseudomonas spp.//J. Bacterid.- 1987- V. 169, N.9.-p. 4242−4248.
  18. Akiyoshi D.E., Regier D.A., Jen G., Gordon M.P. Cloning and nucleotide sequence of the tzs gene from Agrobacterium tumefaciens strain T37.//Nucleic Acids Res. 1985 V. 13, N.8- p. 2773−2788.
  19. Alonso J. M, Stepanova A.N. T-DNA mutagenesis in Arabidopsis.// Methods Mol Biol., — 2003.-V.236, P. 177−188.
  20. Ananda Kumar P., Sharma R.P., Malik V.S. The insecticidal proteins of Bacillus thuringiensis.//Adv. Appl. Microbiol.,-1996.-V.42, P. 1−43.
  21. Ananda Kumar P., Sharma R.P., Malik V.S. The insecticidal proteins of Bacillus thuringiensis.!/ Adv. Appl. Microbiol. -1996- V.42, P. 1 -43.
  22. Ankenbauer R.G., Best E.A., Palanca C.A.,'Nester E.W. Mutants of the Agrobacterium tumefaciens virA gene exhibiting acetosyringone-independent expression of the virregulon.//Mol. Plant-Microbe Interact. 1991- V. 4, N.4.- p. 400−406.
  23. Baum J. A., Kakefuda M., Gawron-Burke C. Engineering Bacillus thuringiensis bioinsecticides with an indigenous site-specific recombination system. // Appl Environ Microbiol. 1996 -Vol. 62, №. 12, P. 4367373.
  24. Baum J.A., Malvar T. Regulation of insecticidal crystal protein in Bacillus thuringiensis. // Mol. Microbiol., — 1995.-V.18, P 1−12.
  25. Beijersbergen A.G.M., Smeth S.J., Hooykaas P.J.J., Localization and topology of VirB proteins of Agrobacterium tumefaciens.//Plasmid. -1994-V.32N.2-p.212−218.
  26. Bosch D., Schipper В., van der Kleij H., de Maagd R.A., Stiekema W.J. Recombinant Bacillus thuringiensis crystal proteins with new properties: possibilities for resistance management.//Bio. Technology.,-1994.-V.12, P.915−918.
  27. Buchholz W.G., Thomashow M.F. Host range encoded by the Agrobacterium tumefaciens tumor-inducing plasmid pTiAg63 can be expanded by modification of its T-DNA oncogene complement.// J. Bacteriol. -1984- V. 160, N.l.- p. 327−332.
  28. Bundock P., den Dulk-Ras A., Beijersbergen A., Hooykaas P.J.J. Trans-kingdom T-DNA transfer from Agrobacterium tumefaciens to Saccharomyces cerevisiae. EMBO J. -1995- V. 14, N.13.- p. 3206−3214.
  29. Cangelosi G.A., Ankenbauer R.G., Nester E.W. Sugars induce the Agrobacterium virulence genes through a periplasmic binding protein and a transmembrane signal protein. Proc. Natl. Acad. Sci. -1990- V. 87, N.17.- p. 6708−6712.
  30. Charles Т., Nester E.W. A chromosomally encoded two-component sensory transduction system is required for virulence of Agrobacterium tumefaciens.// J. Bacteriol. -1993- V. 175, N.20.- p. 6614−6625.
  31. Cheng X. et. al. Agrobacterium-transformed rice plants expressing synthetic cry IA (b) and crylA© genes are highly toxic to striped stem borer and yellow stem borer. -1989.- Proc. Natl. Acad. Sci., — V.95, № 6-P.2767−2772.
  32. Citovsky V., Zupan J., Warnick D., Zambryski P. Nuclear localization of Agrobacterium VirE2 protein in plant cells.// Science. -1992- V. 256, N.5065.-p. 1802−1805.
  33. Close T.J., Rogowsky P.M., Kado C.I., Winans S.C., Yanofsky M.F., Nester E.W. Dual control of Agrobacterium tumefaciens Ti plasmid virulence genes.// J. Bacteriol. -1987- V. 169, N. 11.- p. 5113−5118.
  34. Cooley M.B., D’Souza M.R., Kado C.I. The virC and virD operons of the Agrobacterium Ti plasmid are regulated by the ros chromosomal gene: analysis of the cloned ros gene. J. Bacteriol. -1991- V. 173, N.8.- p. 2608−2616.
  35. Crickmore N., Nicholls C., Earp D.J., Hodgman T.C., Ellar D.J. The construction of Bacillus thuringiensis strains expressing novel entomocidal 5-endotoxin combinations.//Biochem. J.-1990- V.270, P133−136.
  36. Davis H.V. Recent development in our knowledge of potato transgenic biology.//Potato research.-1996-V.39,P411−427.
  37. Dasgupta I., Hull R., Eastop S., Poggi-Pollini C, Blakebrough M., Boulton М.1., Davies J.W. Rice tungro bacilliform virus DNA independently infects rice after Agrobacterium-mediated transfer.//J. Gen. Virol. -1991- V. 72(Pt 6), p. 1215−1221.
  38. De Vos G.D., Zambryski P. Expression of Agrobacterium nopaline-specific VirDl, VirD2, and VirCl proteins and their requirement for T-strand production inE. coli. Mol.// Plant-Microbe Interact. -1989- V. 2, N.2.- p. 43−52.
  39. Delannay X. et al. Field performance of transgenic tomato plants expressing the Bacillus thuringiensis var. Kurstaki insect control protein.// Bio.Technology.-1989- V.7, P.1265−1269.
  40. Dellaporta S.L. et al (1983) Molecular Biology of Plants: A laboratory Course Manual. P.36−37
  41. Deng W., Gordon M.P., Nester E.W. Sequence and distribution of IS1312: evidence for horizontal DNA transfer from Rhizobium meliloti to Agrobacterium tumefaciens.//J. Bacteriol. -1995a- V. 177, N.9.- p. 2554−2559.
  42. Deng W., Pu X.A., Goodman R.N., Gordon M.P., Nester E.W. T-DNA genes responsible for inducing a necrotic response on grape vines.// Mol. Plant-Microbe Interact. -1995b- V. 8, N.4.- p. 538−548.
  43. Doty S.L., Yu M.C., Lundin J.I., Heath J.D., Nester E.W. Mutational analysis of the input domain of the VirA protein of Agrobacterium tumefaciens.// J. Bacteriol. -1996- V.178, N.4 p. 961−970.
  44. Douglas C, Halperin W., Gordon M.P., Nester E.W. Specific attachment of Agrobacterium tumefaciens to bamboo cells in suspension cultures.// J. Bacteriol. -1985- V. 161, N.2- p. 764−766.
  45. Douglas C, Halperin W., Nester E.W. Agrobacterium tumefaciens mutants affected in attachment to plant cells.// J. Bacteriol. -1982- V. 152, N.3- p. 1265−1275.
  46. D’Souza-Ault M., Cooley M., Kado C.I. Analysis of the Ros repressor of Agrobacterium virC and virD operons: molecular intercommunication between plasmid and chromosomal genes.// J. Bacteriol. -1993- V. 175, N. l 1- p. 3486−3490.
  47. Fullner K.J., Lara J. C, Nester E.W. Pilus assembly by Agrobacterium T-DNA transfer genes.// Science. -1996- V. 273, N.5278-p. 1107−1109. Gardner R.C., Knauf V.C. (1986) Science. V. 231, p. 725−727.
  48. Gonzalez J.M. Brown B.J., Carlton B.C.Transfer of Bacillus thuringiensis plasmids coding for delta-endotoxin among strains of B. thuringiensis and B.cereus. -1982.- Proc. Natl. Acad. Sci., — V.79,№ 22, P.6951−6955.
  49. Gray J., Wang J., Gelvin S. Mutation of the miaA gene of Agrobacterium tumefaciens results in reduced vir gene expression.// J. Bacteriol. -1992- V. 174, N.4- p. 1086−109S.
  50. Grimsley N. Hohn В., Ramos C, Kado C, Rogowsky P. DNA transfer from Agrobacterium to Zea mays or Brassica by agroinfection is dependent on bacterial virulence functions.// Mol. Gen. Genet. -1989- V. 217, N.2−3 p. 309−316.
  51. Grochulski P., Masson L., Borisova S., Pusztai-Carey M., Schwartz J.-L., Brousseau R., Cygler M. Bacillus thuringiensis CrylAa insecticidal toxin: crystal structure and channel formation.// Journal of Molecular Biology., — 1995.-V.254, P. 447−464.
  52. Guerchicoff A., Cluse D. A., Rubinstein C. P., The Bacillus thuringiensis cyt Genes for Hemolytic Endotoxins. // Applied and environmental microbiology.-2001 V. 67, № 3.-P. 1090−1096.
  53. Hamada S.E., Farrand S.K. Diversity among B6 strains of Agrobacterium tumefaciens.//J. Bacteriol. -1980- V. 144, N.3- p. 732−743.
  54. Held G.A., Bulla L.A., Ferrari E., Hoch J., Aronson A.I., Minnich S.A. Cloning and localization of the lepidopteran protoxin gene of Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki. Proc.// Natl. Acad. Sci.,-1982 V.79, P.6065−6069.
  55. Herra G., Snyman S.J., Thomson J.A. Construction of a bioinsecticidal strain of Pseudomonas fluorescens active the sugarcane borer, Eldana saccharina. il Appl. Environ. Microbiol.-1994- V.60, P.682−690.
  56. Hiei Y., Ohta S., Komari Т., Kumashiro T. Efficient transformation of rice (Oryza sativa L.) mediated by Agrobacterium and sequence analysis of the boundaries of the T-DNA.// Plant J. -1994- V. 6, N.2- p. 271−282.
  57. Hille J., van Kan J., Schilperoort R. Trans-Acting virulence functions of the octopine Ti plasmid from Agrobacterium tumefaciens.// J. Bacteriol. —1984-V. 158, N.2- p. 754−756.
  58. Hirooka Т., Rogowsky P.M., Kado C.I. Characterization of the virE locus of Agrobacterium tumefaciens plasmid pTiC58.//J. Bacteriol. -1987- V. 169, N.4- p. 1529−1536.
  59. Hofmann C., Luthy P. Binding and activity of Bacillus thuringiensis delta-endotoxin to invertebrate cells.// Arch. Microbiology.-1986.- V.146, P.7−11.
  60. Hofmann C., Luthy P., Hutter R., Pliska V. Binding of the delta-endotoxin from Bacillus thuringiensis to brush-border membrane membrane vesicles of the cabbage butterfly (Pieris brassicae).// European Journal of Biochemistry.-1988.-V.173, P.85−91.
  61. Hood E.E., Helmer G.L., Fraley R.T., Chilton M.D. The hypervirulence of Agrobacterium tumefaciens A281 is encoded in a region of pTiBo542 outside of T-DNA.// J Bacteriol. -1986- V.168, N.3-p.l291−1301.
  62. Hooykaas P.J.J., Schilperoort R.A. In: B. Lugtenberg (ed.) Recognition in microbe-plant symbiotic and pathogenic interactions. Springer-Verlag, Berlin, -1986-pp. 189−202.
  63. Hooykaas-Van Siogtercn G.M.S., Hooykaas P.J.J., Schilperoort R. A Expression of Ti plasmid genes in monocotyledonous plants infected with Agrobacterium tumefaciens.// Biotechnology. -1984- V.1992 N.24- p.382−383.
  64. Horsch R.B., Klee H.J., Stachel S. Winans S.C., Nester E.W., Rogers S.G., Fraley R.T. Analysis of Agrobacterium tumefaciens virulence mutants in leaf discs.//Proc. Natl. Acad. Set-1986-V. 83, N.3- p. 2571−2575.
  65. Huang M.L.W., Cangelosi G.A., Halperin W., Nester E.W. A chromosomal Agrobacterium tumefaciens gene required for effective plant signal transduction.//J. Bacteriol. -1990- V. 172, N.4- p. 1814−1822.
  66. Ihara H., Kuroda E., Wadano A., Himeno M. Specific toxicity of d-endotoxins from Bacillus thuringiensis to Bombyx mori.// Bioscience, Biotechnology, Вiochemistry.-1993V.57, P. 200−204.
  67. Ishida Y., Saito H., Ohta S., Hiei Y., Komari Т., Kumashiro T. High efficiency transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens.//Nature Biotechnology. -1996- V. 14, N.6- p. 745−750.
  68. Jarchow E., Grimsley N.H., Hohn B. virF, the host-range-determining virulence gene of Agrobacterium tumefaciens, affects T-DNA transfer to Zea mays.//Proc. Natl. Acad. Sci. -1991- V. 88, N.23- p. 10 426−10 430.
  69. Jin S., Komari Т., Gordon M.P., Nester E.W. Genes responsible for the supervirulence phenotype of Agrobacterium tumefaciens A281.// J. Bacteriol. -1987- V.169, N. l0- p. 4417−4425.
  70. Jin S., Song Y.N., Deng W., Gordon M.P., Nester E.W. The regulatory VirA protein of Agrobacterium tumefaciens does not function at elevated temperatures.//J. Bacteriol. -1993a- V. 175, N.21-p. 6830−6835.
  71. Jin S., Song Y.N., Pan S.Q., Nester E.W. Characterization of a virG mutation that confers constitutive virulence gene expression in Agrobacterium.// Mol. Microbiol. -1993b- V. 7, N.4- p. 555−562.
  72. John M.C., Amasino R.M. Expression of an Agrobacterium Ti plasmid gene involved in cytokinin biosynthesis is regulated by virulence loci and induced by plant phenolic compounds.// J. Bacteriol, -1988- V. 170, N.2- p. 790−795.
  73. Kado C.I. Promiscuous DNA transfer system of Agrobacterium tumefaciens: role of the virB operon in sex pilus assembly and synthesis.// Mol. Microbiol. — 1994- V. 12, N. l p. 17−22.
  74. Kalogeraki V.S., Winans S.C. The octopine-type Ti plasmid pTiA6 of Agrobacterium tumefaciens contains a gene homologous to the chromosomal virulence gene acvB.// J. Bacteriol. -1995- V. 177, N.4- p. 892−897.
  75. Kang H.W., Wirawan I.G.P., Kojima M. (1994) Biosci. Biotech. Biochem. V. 58, p. 2024−2032.
  76. A. (1992) In: Balows K. et al. (ed.). The prokaryotcs, 2 edition, Vol. III. Springer-Verlag, Berlin, p. 2214−2235.
  77. Kim HS. Comparative study of the frequency, flagellar serotype, crystal shape, toxicity, and cry gene contents of Bacillus thuringiensisfrom three environments.//Curr Microbiol., — 2000.- V.41,№ 4-P.250−256.
  78. Knauf V.C., Panagopoulos C.G., Nester E.W. Comparison of Ti plasmids from three different biotypes of Agrobacterium tumefaciens isolated from grapevines//J Bacteriol. 1983. — V.153, N3.- P. 1535−42.
  79. Kovacs L.G., Pueppke S.G. Mapping and genetic organization of pTiChry5, a novel Ti plasmid from a highly virulent Agrobacterium tumefaciens strain.// Mol Gen Genet. 1994 — V. 242, N.3. — P.327−36.
  80. Lee Y.W., Jin S., Sim W.S., Nester E.W. Genetic evidence for direct sensing of phenolic compounds by the VirA protein of Agrobacterium tumefaciens.//Proc Natl Acad Sci USA.- 1995.- V.92, N. 26. P. 1 224 512 249.
  81. Lereclus D., Agaisse H., Gominet M., Chaufaux J. Overproduction of encapsulated insecticidal crystal proteins in a Bacillus thuringiensis spoOA mutant.// Bio. Technology.-1995.-V.13, P.67−71.
  82. Li H.Q., Sautter C, Potryjtus 1., Puonti-Kaerlas J. Genetic transformation of cassava (Manihot esculenta Crantz).//Nat Biotechnol. 1996 V. 14, N. 6. P. 736−740.
  83. Lippincott B.B., Lippincott J.A. Bacterial attachment to a specific wound site as an essential stage in tumor initiation by Agrobacterium tumefaciens.//J Bacteriol. 1969. — V. 97, N.2. — P.620−628.
  84. Maliga P. Plastid engineering bears fruit.// Nat Biotechnol.-2001 V.19, № 9-P.826−827
  85. Mantis N., Winans S.C. Mantis N., Winans S. C The chromosomal response regulatory gene chvl of Agrobacterium tumefaciens complements an Escherichiacoli phoB mutation and is required for virulence.// J. Bacteriol. -1993- V. 175, N20.- p. 6626−6636.
  86. Masson L, Tabashnik B.E., Liu Y.B., Brousseau R, Schwartz J.L. Helix of the Bacillus thuringiensis CrylAa toxin lines the lumen of the ion channel.// Journal of Biological Chemistyr.- 1999.- V.274, № 45.-P.31 996−2000.
  87. Matthysse A.G. Schizophrenic thought disorder: a model-theoretic perspective. Schizophr Bull. J. Bacteriol. -1987- V. 169, N.l.- p. 313−323.
  88. Ondrey M., Macas J., Kostrica P., Potato transgenosis by T-DNA morphoregulatory genes //Rostlina vyroba 1993. — 39(11), — P. 1065 — 1074.
  89. Orth P., Zalunin I.A., Gasparov V.S., Chestukhina G.G., Stepanov V.M.// Journal of Protein Chemistry. -1995.- V.14, P. 241−249.
  90. Otten L, Canaday J., Gerard J.C., Fournier P., Crouzet P., Paulus F. Evolution of agrobacteria and their Ti plasmids~a review.//Mol. Plant-Microbe Interact. -1992- V. 5, N.4.-p. 279−287.
  91. Pan S.Q., Jin S.G., Boulton М.1., Hawes M., Gordon M.P., Nester E.W. An Agrobacterium virulence factor encoded by a Ti plasmid gene or a chromosomal gene is required for T-DNA transfer into plants.//Mol. Microbiol. -1995-V. 17, N.2.-p. 259−269.
  92. Panagopoulos C.G., Psallidas P.G., AJivazatos A.S. -1978- In: Proc. 4-th Int. Conf. Planl Pathol. Bacteria, Angers, France, p. 221−228.
  93. Panagopoulos C.G., Psallidas P.O. Characteristics of Greek Isolates of Agrobacterium tumefaciens (E. F. Smith & Townsend) Conn.// J. Appl. Bacterioi. -1973- V. 36, N.2.- p. 233−240.
  94. Peralta E.G., Ream W. T-DNA border sequences required for crown gall tumorigenesis.//Proc Natl Acad Sci -1985- V.82,N.15.-p.5112−5116.
  95. Plant genetic transformation and gene expression. A laboratory manual. 1988./ J. Draper, R. Scott, P. Armitage, R. Walden Blackwell Scientific publications.
  96. Powell G.K., Hommes N.G., Kuo J., Castle L.A., Morris R.O. Inducible expression of cytokinin biosynthesis in Agrobacterium tumefaciens by plant phenolics.// Mol Plant Microbe Interact. -1988- V. l, N.6-p.235−242.
  97. Schnepf H.E., Whiteley H.R. Cloning and expression of the Bacillus thuringiensis crystal protein gene in Escherichia coli. ll Proc. Natl. Acad. Sci.,-1981-V.78, P.2893−2897.
  98. Sherman S., Bewan M.W. A rapid transformation method for Solanum tuberosum using binary Agrobacterium tumefaciens vectors.// Plant cell Reports.-1998-., V.7., P. 13−16.
  99. Smigocki A., Neal J.W. Jr., McCanna I., Douglass L. Cytokinin-mediated insect resistance in Nicotiana plants transformed with the ipt gene.// Plant Mol Biol.-1993-V.2, Р.325−335.
  100. Sriram R., Kamdar H., Jayaraman K. Identification of the peptides of the crystals of Bacillus thuringiensis var israelensis involved in the mosquito larvicidal activity.//Biochem Biophys Res Commun., — 1985.-V.132, № 1-P. 19−27.
  101. Thomashow M.F., Karlinsey J.E., Marks J.R., Hurlbert R.E. Identification of a new virulence locus in Agrobacterium tumefaciens that affectspolysaccharide composition and plant cell attachment.// J. Bacteriol. -1987- V.169,N.7.- p. 3209−3216.
  102. Tzfira T, Frankman LR, Vaidya M, Citovsky V. Site-specific integration of Agrobacterium tumefaciens T-DNA via double-stranded intermediates.// Plant Physiol.,-2003.-V.133, № 3.-P. 1011−1023.
  103. Van Rie J., McGaughey H., Johnson D.E., Barnett B.D., Van Mellaert H. Mechanism of insect resistance of the microbial insecticide Bacillus thuringiensis Л Science.,-1990 V.247, P.72−74.
  104. Wordragen M.F., Honee G., Dons H.S. Insect-resistant chrysanthemum calluses by introduction of a Bacillus thuringiensis crystal protein gene.//Transgenic Res. -1993- V.2, N3-P.170−180.
  105. Winans S.C., Kerstetter R.A. Nester E.W. Transcriptional regulation of the virA and virG genes of Agrobacterium tumefaciens.//J. Bacteriol. -1988- V.170,N.9.- p. 4047−4054.
  106. Yanofsky M., Montoya A., Knauf V., Lowe В., Gordon M., Nester E. Limited-host-range plasmid of Agrobacterium tumefaciens: molecular and genetic analyses of transferred DNA.// J. Bacteriol. -1985- V. 163, N.l.- p. 341−348.
Заполнить форму текущей работой