Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на клетки крови животных in vivo и in vitro

Диссертация: Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на клетки крови животных in vivo и in vitro
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Известно, что в организме насекомого дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 разобщает процессы окислительного фосфорилирования и дыхания (Heimpel, 1977; Faust, 1984; Aronson et al., 1986; Gill et al., 1992; Himeno et al., 1985; Каменек, 1998). Попадая в организм животного, дельта-эндотоксин может всасываться в кишечнике и взаимодействовать с элементами крови. При длительном… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 как продуцент дельта-эндотоксина
    • 1. 2. Области применения Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z
    • 1. 3. Лейкоциты периферической крови
      • 1. 3. 1. Бактерицидные системы нейтрофилов
      • 1. 3. 2. Лимфоциты
      • 1. 3. 3. Моноциты
      • 1. 3. 4. Нейтрофилъные лейкоциты
      • 1. 3. 5. Эозинофилъные лейкоциты
      • 1. 3. 6. Лейкоцитарная формула
    • 1. 4. Роль перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты при интоксикациях
    • 1. 5. Аланинаминотрасфераза и аспартатаминотрансфераза как показатель повреждения тканей организма
    • 1. 6. Токсичность дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 для теплокровных животных
  • СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований
  • ГЛАВА 3. Результаты и их обсуждение
    • 3. 1. Выделение дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z
    • 3. 2. Влияние дельта-эндотоксина на кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные системы нейтрофилов in vitro
    • 3. 3. Действие in vivo дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на лимфоциты крови лабораторных мышей
    • 3. 4. Действие in vivo дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Zна субпопуляционный состав нейтрофилов
    • 3. 5. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo на кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные системы нейтрофилов крови лабораторных мышей
    • 3. 6. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность трансаминаз, лактатдегидрогеназы в сыворотке крови лабораторных мышей
    • 3. 7. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Zна показатели системы ПОЛ-антиоксидант в сыворотке крови мышей

Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на клетки крови животных in vivo и in vitro (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

Изучение метаболитов микроорганизмов является актуальным направлением в прикладной микробиологии. Особый интерес представляют исследования токсинов бактерий, особенностей их патогенетического действия на организм человека и животных и возможности практического использования в производстве медико-биологических препаратов (Монастырский, 2003; Новожилов, 2003). Энтомопатогенные препараты на основе спорово-кристаллических комплексов Bacillus thuringiensis широко используются для защиты сельскохозяйственных растений (Харвуд, 1992). В настоящее время до 9095% мирового рынка биоинсектицидов занимают препараты на основе Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 проявляет активность в отношении насекомых благодаря способности связываться с чувствительными рецепторами на цитоплазматических мембранах клеток кишечного эпителия, а затем проникать в них, формируя каналы-поры (Hodgman & Ellar, 1990; Smith & Ellar, 1994). Также этот дельта-эндотоксин проявляет активность в отношении ряда микроорганизмов, в том числе и фитопатогенных (Егоров, Юдина, Баранов, 1990; Юдина, Милько, Егоров, 1996). Уникальная избирательность взаимодействия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 с мембранами клеток насекомых дает возможность использовать его для защиты агроценозов и лесных массивов от листогрызущих насекомых-вредителей (Иванова, 2005).

В России в настоящее время используются разнообразные препараты на основе В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 лепидоцид-50, дипел, битоксибациллин (для защиты деревьев, кустарников, овощей и лекарственных трав против бабочек), новодор, поражающий колорадского жука на посадках картофеля, томатов, баклажанов (Иванова, 2004). Разработаны так же новые препараты на основе очищенного от спор и других балластных веществ и предварительно активированного эндотоксина Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 (Каменек 1998; 2005).

В этой связи особую актуальность приобретает вопрос токсичности этих препаратов для разных видов животных.

Существуют данные о безвредности дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 для млекопитающих, основанные на изучении его прямой токсичности (Хеймпел, 1976; Киль и др., 2002). Однако в литературных источниках отсутствуют биохимические исследования крови под действием дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на лабораторных животных.

Известно, что в организме насекомого дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 разобщает процессы окислительного фосфорилирования и дыхания (Heimpel, 1977; Faust, 1984; Aronson et al., 1986; Gill et al., 1992; Himeno et al., 1985; Каменек, 1998). Попадая в организм животного, дельта-эндотоксин может всасываться в кишечнике и взаимодействовать с элементами крови. При длительном воздействии токсических веществ в концентрациях, не вызывающих внешне обнаруживаемого эффекта, могут выявляться скрытые изменения ряда биохимических показателей системы крови, которая является чувствительным индикатором, отражающим состояние организма в целом.

Для оценки действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на организм теплокровных животных необходимо исследовать изменение биохимических процессов, в частности активности ферментов аспартатаминотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансферазы (АлАТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ), активности миелопероксидазы и лизосомально-катионных белков нейтрофилов, что может служить показателем развития и интенсивности воспалительных процессов (Голиков 1986; Релева, 2007).

Таким образом, актуальной на настоящий момент является оценка действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на состояние организма животного, что дает возможность охарактеризовать безопасность применения препаратов на его основе.

Цель настоящего исследования — изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на клетки крови лабораторных мышей в условиях in vivo и in vitro.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro на активность кислородзависимых и кислороднезависимых бактерицидных систем нейтрофилов лабораторных животных.

2. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro на содержание и жизнеспособность эритроцитов периферической крови мышей.

3. Установить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на количественный состав форменных элементов крови (лейкоцитов, эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов) и значение лейкоцитарного индекса интоксикации лабораторных мышей.

4. Оценить действие дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность ферментов в сыворотке крови лабораторных мышей в условиях in vivo.

5. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность процессов перекисного окисления липидов и ферментативного звена антиоксидантной защиты (каталазы) в крови лабораторных мышей in vivo.

Научная новизна. Впервые проведена оценка воздействия различных доз дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на механизмы киллинга в нейтрофилах лабораторных мышей, процентное содержание форменных элементов крови, жизнеспособность эритроцитов, активность ферментов в сыворотке крови, соотношение антиоксидантной системы.

Впервые установлена способность дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в очень высоких дозах (1000- 500- 250 мг на кг массы животного) in vivo угнетать активность ферментов лизосом (миелопероксидазы, лизосомальных катионных белков), характеризующих кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные процессы в нейтрофилах/ в дозе 50 мг на кг массы животного — стимулировать активность миелопероксидазы, лизосомально-катионных белков, а также увеличивать количество моноцитов и лимфоцитов. В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозе 25 мг/кг вызывал активацию механизма киллинга периферической крови животных in vivo.

Впервые показано отсутствие влияния сравнительно низких доз дельта-эндотоксина на активность ферментов ЛДГ, АсАТ, АлАТ и антиоксидантную систему сыворотки крови экспериментальных животных.

Практическая значимость работы. Полученные данные вносят вклад в понимание механизма патогенетического действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на организм животного. Результаты работы позволяют дать рекомендации по обеспечению безопасности при производстве биоинсектицидов, содержащих дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52. Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций по микробиологии, биотехнологии, биохимии, проведении лабораторно-практических занятий и написании курсовых и дипломных работ в Ульяновском государственном университете.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 не влияет в условиях in vitro на активность миелопероксидазы, катионных белков, фагоцитарной активности нейтрофилов и на содержание жизнеспособных эритроцитов.

2. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo в очень высоких дозах 1000- 500- 250 мг/кг массы животного вызывает угнетение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81% и 75% соответственно.

3. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозах 25−100 мг/кг не влияет на содержание эозинофилов, моноцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, активность каталазы и уровень вторичного продукта перекисного окисления липидов — малонового диальдегида в крови лабораторных мышей.

4. Пероральное введение дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 дозе 100 мг/кг вызывает снижение в крови лабораторных животных числа лимфоцитов на 31%. Действие дельта-эндотоксина в дозах 25 и 50 мг/кг вызывает увеличение числа этих форменных элементов и не вызывает изменений показателей лейкоцитарного индекса интоксикации.

5. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 после шестикратного перорального введения испытуемых доз до 100 мг/кг не влияет на активность ферментов ЛДГ, АсАТ и АлАТ в сыворотке крови лабораторных животных.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на: 11-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2007) — Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения» (Ульяновск, 2007) — научном семинаре «Геоэкологические проблемы Среднего Поволжья» (Ульяновск, 2008) — научно-практической конференции «Постгеномная эра в биологии и проблемы биотехнологии» (Казань, 2008) — межкафедральных семинарах экологического факультета Института медицины, экологии и физической культуры Ульяновского государственного университета (2007;2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы и экспериментальной части, включающей.

ВЫВОДЫ.

1. Показано, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro не оказывает статистически значимого влияния на активность катионных белков, миелопероксидазы, фагоцитарную активность нейтрофилов, на содержание жизнеспособных эритроцитов.

2. Установлено, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo в больших дозах (500−1000 мг/кг) вызывает снижение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81 и 75% соответственно.

3. Отмечено, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозах 25 и 50 мг/кг не оказывает влияния на количественный состав эозинофилов, моноцитов, лейкоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов крови лабораторных мышей. Отмечено увеличение сегментоядерных нейтрофилов на 20% при пероральном введении дельта-эндотоксина в дозе 100 мг/кг.

4. Выявлено, что при введении лабораторным мышам всех исследованных доз дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 не отмечено изменений активности ферментов ЛДГ, АсАТ и АлАТ в сыворотке крови животных, что подтверждает отсутствие разрушения клеток под его действии.

5. Показано, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo во всех изученных дозах не оказывает влияние на уровень вторичного продукта ПОЛ — МДА и активность антиоксидантного фермента — каталазы в крови лабораторных мышей.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В настоящее время микробные препараты считаются экологически безопасными, однако в связи с их широким распространением появилась необходимость провести детальную оценку экологического риска и рисков, связанных с продовольственной безопасностью дельта-эндотоксина В. ^иг^гепзгз яиЬяр. кигБ (аЫ 2−52 способного приносить потенциальную пользу населению.

Эндотоксины являются консервативными патогенассоциированными молекулами, которые распознаются клетками естественной иммунной системой организма (моноциты, гранулоциты). Иммунная система обладает способностью к группоспецифическому распознаванию антигенов. Так как для индукции специфически адаптивного ответа требуется длительное время (несколько дней), на начальных этапах инфицирования борьбу с патогенами осуществляет естественная иммунная система, которая регулирует и направляет иммунный ответ путём фагоцитоза, презентации антигенов клеткам адаптивной иммунной системы.

Колоссальный опыт использования вакцинных препаратов позволил установить, что микроорганизмы (в том числе и патогенные) могут являться в определенных дозах источником иммуностимуляции, оказывающими как специфическое, так и неспецифическое действие на иммунную систему организма. В связи с массовым применением препаратов на основе В. йиЬйр. киШаМ 2−52 потребовало проведения тщательных исследований по доказательству безопасности и выявления наиболее безопасных доз для млекопитающих животных.

Таким образом, для доказательства безопасности действия дельта-эндотоксина В. 1кигт^1еп518 яиЬзр. ки^аЫ Х-52 были проведены выше изложенные исследования, на основании которых можно сделать заключение о безопасности использования препаратов и трансгенных растений модифицированных геном токсинообразования. Однако, отмечаем, что действие дельта-эндотоксина В. гНигт&ет'^ зиЬхр. киШаЫ Z-52 носит явный дозозависимый характерв высоких дозах он вызывал снижение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81 и 75% соответственно, что связанно, вероятно, с неспецифической реакцией организма на чужеродный белок, способный проникать в кровоток.

Наиболее безопасными установлены дозы 25 и 50 мг/кг, дельта-эндотоксин не оказывал влияния на количественный состав эозинофилов, моноцитов, лейкоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и стимулировал рост числа лимфоцитов, что возможно связано с неспецифической реакцией на чужеродный белок и подтверждает данные литературы о бактериальных белковых эндотоксинах как стимуляторов иммунитета. Также в этих дозах происходит резкий подъем активности миелопероксидазы и лизосомально-катионных белков, что свидетельствует об активации антимикробной системы нейтрофилов мышей.

Как показывают результаты исследования, не отмечено существенных изменений активности ЛДГ в сыворотки крови животных во всех исследуемых дозах на протяжении всего эксперимента. Однако прослеживается устойчивая тенденция к снижению активности данного фермента к окончанию эксперимента с увеличением дозы дельта-эндотоксина В. БиЪзр. ки^акг Z-52. На наш взгляд, подобное статистически незначимое снижение связано с усилением аэробности условий, которое может быть вызвано действием дельта-эндотоксина. Последний факт является положительным воздействием на организм дельта-эндотоксина. Изученные процессы перекисного окисления липидов также подтверждает нормальное функционирование клеточного аппарата и отсутствия 'развитей разнообразных патологий в средних дозах дельта-эндотоксина 25−50 мг/кг.

Полученные данные позволяют говорить об отсутствии рисков связанных с продовольственной безопасностью для теплокровных животных препаратов и генетически-модифицированных растений на основе дельта-эндотоксина В. Жигт&етгй БиЪБр. кигз1аЫ Z-52.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , А. И. Микросомалыгое окисление / А. И. Арчаков. М.: Наука, 1975.-327 с.
  2. , Н. В. Руководство по содержанию и разведению новых видов мелких грызунов / Н. В. Башенина. М.: Изд-во МГУ, 1975. — 164 с.
  3. , Н. И. Механизмы защиты организма от вирусных инфекций : нейтрофильные лейкоциты / Н. И. Бахов, Ю. Ф. Майчук, А. Ф. Корнев // Успехи современной биологии. 2000. — Т. 120, № 1. — С. 23−35.
  4. , М. Н. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз / М. Н. Бережная. Киев, 1988. — 192 с.
  5. , С. С. Новый способ оценки реологических свойств эритроцитов у хирургических больных с эндогенной интоксикацией / С. С. Бессмельцев, И. М. Царапкин, 3. Б. Федорова // Вестник хирургии им. Грекова. 1997. — Т. 156, № 4. с. 32−36.
  6. , А. Ф. Диагноз и дифференцированный диагноз хронического гепатита и цирроза печени / А. Ф. Блюгер, И. Н. Новицкий // Клиническая медицина. 1985. — Т. 63, № 2. — С. 134−140.
  7. , В. Н. Антиоксиданты в клинической практике / В. Н. Бобырев, О. Н. Воскресенский // Терапевтический архив. 1989. — № 6. — С. 122 125.
  8. , А. М. Действие низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунную систему / А. М. Борисова, Н. В. Хорошилова, Г. И. Булгакова // Терапевтический архив. 1992. -№ 5.-С. 111−115.
  9. , А. В. Изменение активности лактатдегидрогеназы печени крыс при действии гепарина в условиях in vitro / А. В. Бочкарева, Ю. В. Зимин, А. Е. Хомутов // Биология. 2008. — № 5. — С. 86−88.
  10. , А. Г. Состояние коронарного резерва и концентрация продуктов перекисного окисления слюны у больных гипертоническойболезнью / А. Г. Брюховецкий, А. Б. Абаник // Клиническая медицина. -1985.-Т. 63, № 1. С. 38−41.
  11. , Е. Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении в злокачественном росте / Е. Б. Бурлакова, А. В. Алексеенко. М.: Наука, 1975.-294 с.
  12. , О. В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине / О. В. Бухарин, П. В. Васильев. Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1974. — 207 с.
  13. , В. И. Продукты на основе микробной биомассы / В. И. Вершинина, Ф. К. Алимова // Микробная биотехнология / науч. ред. И. Б. Лещинская. Казань: Унипресс: ДАС, 2000. — С. 368.
  14. , А. Г. Влияние В1:-растений на почвенную биоту и плейотропную биоту и плейоропный эффект с1-эндотоксин кодирующих генов / А. Г. Викторов // Физиология растений. 2008. — Т. 55, № 6.-С. 823−833.
  15. , Ю. А. Регуляция цепных реакций перекисного окисления липидов в мембранах / Ю. А. Владимиров // Известия АН СССР. 1972. -№ 4.- С. 489−501.
  16. , Ю. А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю. А. Владимиров, А. И. Арчаков. М.: Наука, 1972. — 252 с.
  17. , Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Владимиров // Вестник РАМН. 1998. — № 7. — С. 43−47.
  18. , О. Н. Биооксиданты облигатные факторы питания / О. Н. Воскресенский, В. Н. Бобырев // Вопросы медицинской химии. — 1992. -№ 4.-С. 21−26.
  19. , О. К. Клетки костного мозга и периферической крови / О. К. Гаврилов, Г. И. Козинец, Н. Б. Черняк. М.: Медицина, 1985. — 286 с.
  20. , С. Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий. Л.: Медицина, 1986.-280с.
  21. , Н. М. Индуцированный липополисахаридный апоптозгранулоцитов периферической крови больных, перенесших сальмонеллезную инфекцию / Н. М. Гюлазян, Т. К. Давтян, С. Г. Пак // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. — № 8. — С. 25−28.
  22. , М. М. Руководство по иммунофармакологии / М. М. Дейл, Дж. К. Формен //. -1998. С. 237−246.
  23. , И. И. Нейтрофилы и гомеостаз / И. И. Долгушин, О. В. Бухарин. Екатеринбург: УрО РАН, 2001. — 284 с.
  24. , С. Н. Руководство по гипербарической оксигенации / С. Н. Ефуни. М.: Медицина, 1986. — 416 с.
  25. , Г. Г. Свободнорадикальные процессы, гипоксия и приминение антиоксидантов в реаниматологии / Г. Г. Жданов, В. Н. Нечаев, И. Л. Недель // Анестезиология и реаниматология. 1989. — № 4. — С. 63−68.
  26. , А. А. Адаптивная система селекции растений (эколого-генетические основы): в 2-х т. / А. А. Жученко — Рос. акад. с.-х. наук. -М.: Изд-во Рос. ун-та дружбы народов: Агрорус, 2001.
  27. , М. С. Потенциальный риск возделывания трансгенных растений и потребления их урожая / М. С. Соколов, А. И. Марченко // Сельскохозяйственная биология. 2002. — № 5. — С. 3−23.
  28. , Н. А. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз / Н. А. Зенков и др. // Успехи современной биологии. 1999. — Т. 119, № 5. — С. 440−450.
  29. , Т. С. Функциональная гематология / Т. С. Истаманова, В. А. Алмазов, С. В. Канаев. Л.: Медицина, 1973. — 310 с.
  30. , Я. Биомембраны / Я. Кагава. М.: Высшая школа, 1985. — 303 с.
  31. , В. Е. Окислительные процессы при гамма-нейтронном облучении организма / В. Е. Каган, О. Н. Орлов, П. Л. Прищепко // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1986. — Т. 18. — С. 5−136.
  32. , В. Е. Механизмы структурно-функциональной модификации биомембран при перекисном окислении липидов : автореф. дис.. д-ра мед. наук / В. Е. Каган. М., 1981. — 23 с.
  33. , Н. М. Нарушения иммунитета при рецидивирующем фурункулезе / Н. М. Калинина // Цитокины и воспаление. 2003. — № 1. -С. 41−44.
  34. , Я. Я. О лейкоцитарном индексе интоксикации и его практическом значении / Я. Я. Калиф // Врачебное дело. 1941. — № 1. -С. 31−33.
  35. , Л. К. Разобщающее действие дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Интегрированная защита растений от болезней и вредителей в Сибири: сб. науч. трудов. -Новосибирск, 1986. С. 80−85.
  36. , Л. К. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis : строение, свойства и использование для защиты растений: дис.. д-ра биол. наук / Л. К. Каменёк. М., 1998. — 345 с.
  37. , Л. К. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis: строение, свойства и использование для защиты растений: автореф. дис.. д-ра биол. наук / Л. К. Каменёк. М&bdquo- 1998. — 40 с.
  38. , Л. К. Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на активный транспорт ионов у насекомых / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Известия СО АН СССР. Сер. Биологическая. 1984. — Вып. З.-С. 80−85.
  39. , JT. К. Изучение механизма действия дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на насекомых : автореф. дис.. канд. биол. наук / Л. К. Каменёк. Л., 1985. — 19 с.
  40. , Л. К. Разобщающее действие 8-эндотоксина Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Интегрированная защита растений от болезней и вредителей в Сибири. Новосибирск, 1985. — С. 148−154.
  41. , Л. К. Выделение и очистка кристаллов Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк // Бюллетень научно-технической информации. Новосибирск, 1980.-№ 2(3).-С. 1−15.
  42. , Н. В. Бактериальные средства борьбы с грызунами и вредными насекомыми / Н. В. Кандыбин. М.: Агропромиздат, 1989. -172 с.
  43. , А. И. Медицинские лабораторные технологии : справочник: в 2 т. Т. 2 / А. И. Карпищенко — под ред. А. И. Карпищенко. СПб.: Интермедика, 1999. — 653 с.
  44. , О. Я. Моделирование патологических процессов в печени /
  45. Я. Карташова // Основы гепатологии. Рига, 1975. — С. 84−86.
  46. , В. И. Генетически модифицированный картофель, устойчивый к колорадскому жуку / В. И. Киль, В. Д. Надыкта // Arpo XXI. 2002. — № 1.-С. 12−15.
  47. , В. Г. Преодолима ли резистентность вредителей к пиретроидам / В. Г. Коваленков, М. С. Соколов — Всероссийский НИИ биологической защиты растений // Arpo XXI. 1999. — № 2. — С. 18−19.
  48. , Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии / Ю. Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1985. -№ 5.-С. 2−7.
  49. , Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и паталогии / Ю. Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1985. -№ 5. — С. 160−179.
  50. , Г. И. Клетки периферической крови и экологические факторы / Г. И. Козинец, Д. Ф. Каюмова // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. -№ 1.-С. 14−20.
  51. , Ю. П. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и при патологии / Ю. П. Козлов // Биоантиокислители. М.: Наука, 1975. — С. 5−14.
  52. , А. В. Роль эндогенного свободного железа в активации перекисного окисления липидов при ишемии / А. В. Козлов, JT. И. Шинкаренко, Ю. А. Владимиров // Бюллетень экспериментальной биологии. 1985.-№ 1.-С. 38−41.
  53. , О. Е. Перекисное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах / О. Е. Колесова, А. А. Маркин, Т. Н. Федорова // Лабораторное дело. 1984. — № 7. — С. 540−546.
  54. , Н. Г. Микрометод УФ-спектрофотометрии диеновых конъюгатов / Н. Г. Колосова, Л. Б. Ким, В. Ю. Куликов // Лабораторное дело.- 1988.-№ 9.-С. 73−74.
  55. , В. И. Генетически модифицированный картофель, устойчивый к колорадскому жуку / В. И. Киль, В. Д. Надыкта // Arpo XXI. 2002. — № 1.-С. 12−15.
  56. , А. О. Возможность использования ферментов эритроцитов в качестве индикаторов, характеризующих течение болезни у больных гемобластозами / А. О. Кумерова // Т. 1996. — № 2. — С. 144−147.
  57. , Д. Н. Стимуляторы иммунитета / Д. Н. Лазарева. М.:1. Медицина, 1985.-423 с.
  58. , С. М. Практическая и лабораторная гематология / С. М. Льюис, Б. Бэйн, И. Бэйтс — пер с англ. под ред. А. Г. Румянцева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. — 670 с.
  59. , В. А. Бактериальные токсины: старые функции, новое применение / В. А. Малов, С. Г. Пак // Терапевтический архив. 1997. -Т. 66, № 11.-С. 85−89.
  60. , И. Д. Определение содержания высших жирных кислот в сыворотке крови здоровых и больных хроническим панкреатитом методом газовой хроматографии / И. Д. Мансурова, У. К. Султанова // Лабораторное дело. 1985. — № 9. — С. 524−527.
  61. , А. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А. Н. Маянский, Д. Н. Маянский. Новосибирск: Наука (Сиб. отд.), 1989. — 344 с.
  62. , А. Н. Реактивность нейтрофила / А. Н. Маянский, А. Н. Галлиулин. Казань, 1984. — 158 с.
  63. , Ф. 3. Адаптивная медицина: механизмы и защитные эффекты адаптации / Ф. 3. Меерсон. М.: Медицина, 1993. — 234 с.
  64. , В. В. Лабораторные методы исследования в клинике / В. В. Меньшиков. М., 1987. — 197 с.
  65. , В. Т. Клиническое значение гематологических исследований /
  66. B. Т. Морозова // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. — № 1.1. C. 24−30.
  67. , В. В. Перекисное окисление липидов у больных с заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки / В. В. Мурашко, А. К. Журавлев, Ч. И. Шылде // Клиническая медицина. 1984. — № 10. -С. 47−50.
  68. , Б. С. Катионный белок лейкоцитов и его значение : методические указания / Б. С. Нагоев. — Нальчик, 1982. — 67 с.
  69. , С. Д. Механизмы алкогольного повреждения печени / С. Д. Подымова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. — № 5. — С. 26−29.
  70. , В. Е. Цитохимия антибактериальных катионных белков лейкоцитов при фагоцитозе и воспалении / В. Е. Пигаревский // Архив патологии. 1975. — № 9. — С. 3−9.
  71. , В. Е. Зернистые лейкоциты и их свойства / В. Е. Пигаревский. М.: Медицина, 1978. — 128 с.
  72. , О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ БТАТШТЮА / О. Ю. Реброва. М.: Медиа Сфера, 2002. — 312 с.
  73. , Н. Ю. Миелопероксидаза : биологические функции и клиническое значение / Н. Ю. Рулева, М. А. Звягинцева, С. Ф. Дугин // Современные наукоемкие технологии. 2007. — № 8. — С. 1−4.
  74. , С. Е. Функциональная активность ферментов и пути ее регуляции : сб. ст. / С. Е. Северин, Г. А. Кочетова — под ред. С. Е. Северина, Г. А. Кочетова. М.: Изд-во МГУ, 1981.-204 с.
  75. , М. Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях / М. Б. Славин. М.: Медицина, 1989. — 304 с.
  76. , А. А. Цитоплазматическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов / А. А. Славинский // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. — № 3. — С. 39−43.
  77. , А. А. Комьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов : миелопероксидаза / А. А. Славинский, Г. В. Никитина // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. — № 1. — С. 21−24.
  78. , В. В. Антиоксиданты и адаптация / В. В. Соколовский. Л.: ЛСГМИ, 1984.-64 с.
  79. , Т. В. Штаммы В. thuringiensis, проявляющие множественную активность против широкого круга насекомых / Т. В. Степанова, 3. Ф. Барышникова, М. В. Чирков // Биотехнология. 1996. — № 12. — С. 17−22.
  80. , В. Н. Методические и диагностические аспекты исследования активности аминотрансфераз / В. Н. Титов, Н. А. Бочкова // Лабораторная диагностика. 1990. — № 8. — С. 4−12.
  81. , В. Н. Биохимические методы диагностики патологии печени / В. Н. Титов // Терапевтический архив. 1993. — Т. 65, № 2. — С. 85−89.
  82. , В. Н. Патофизиологические основы лабораторной диагностики заболевания печени / В. Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. 1996. — № 6. — С. 3−6.
  83. Уровни и тенденции изменения видового состава и внутрипопуляционной структуры, ареалы комплексов вредных и полезных организмов и прогноз опасных фитосанитарных ситуаций по зонам страны / под ред. К. В. Новожилова и В. А. Захаренко. СПб., 2000.- 100 с.
  84. , Л. А. Пестициды удар по биосфере и человеку / Л. А. Федоров, А. В. Яблоков. — М.: Наука, 1999. — 462 с.
  85. , И. С. Иммунная система и ее дефекты / И. С. Фрейдлин. -СПб.: НТФФ «Полисен», 1998. 111 с.
  86. , А. И. Функциональная диагностика заболеваний печени / А. И. Хазанов. М.: Медицина, 1988, — 304 с.
  87. , А. И. Функциональные пробы печени и сопряженные тесты / А. И. Хазанов // Руководство по гастроэнтерологии. Т. 2. Болезни печении билиарной системы / под общ. ред. Ф. И. Комарова. М.: Медицина, 1995.-С. 40−51.
  88. , А. И. Основы функциональной диагностики и наиболее важные синдромы в гепатологии / А. И. Хазанов // Диагностика и лечение внутренних болезней. В 3 т. Т. 3 / под общ. ред. Ф. И. Комарова. М.: Медицина, 1996. — С. 193−205.
  89. , А. И. Из полувекового опыта наблюдения за больными циррозом печени / А. И. Хазанов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. — № 2. — С. 5056.
  90. , К. Р. Бациллы. Генетика и биотехнология / К. Р. Харвуд. М.: Мир, 1992.-530 с.
  91. , А. М. Безопасность энтомопатогенных микроорганизмов для человека и позвоночных животных / А. М. Хеймпел // Микроорганизмы в борьбе с вредными насекомыми и клещами. М.: Колос, 1976. — С. 373−390.
  92. , Г. Г. Белки кристаллов дельта-эндотоксина В. Жиги^етгз / Г. Г. Честухина, Л. И. Костина, И. А. Залунин // Биохимия. 1977. — Т. 42, Вып. 9.-С. 1660−1667.
  93. , А. П. Влияние острого физического перегревания животных на процессы перекисного окисления липидов / А. П. Шепелев // Вопросы медицинской химии. 1976. — Т. 22, № 1. — С. 47.
  94. , А. А. Модификация полиеновых липидов фоторецепторов молекулярным кислородом и ее роль в функционировании сетчатки : автореф. дис.. канд. биол. наук / А. А. Шведова. М., 1975. -25 с.
  95. , М. В. Спектрофотометрический метод определения концентрации микроорганизмов в суспензии / М. В. Штерншис // Бюллетень научно-технической информации. Новосибирск: СибНИИЗХим, 1976. — Вып. 16. — С. 44−50.
  96. , М. Г. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии / М.
  97. Г. Шубин, Б. С. Нагоев. М.: Медицина, 1980. — 224 с.
  98. , Э. А. Состояние перекисного окисления липидов — антиоксиданстной системы молодых мужчин при переселении в дальневосточный регион / Э. А. Эндакова, Т. П. Новгородцева // Физиология человека. 1994. — Т. 20, № 2. — С. 149.
  99. , А. К. / Cellular and Molecular Immunology / А. К. Abbas, A. H. Lichtman. 5-th edition. — Philadelphia: Saunders, 2005. — 562 p.
  100. Almeda, R. P. Complementary DNA sequence of human neutrophils azurocidin, an antibiotic with extensive homology to serine proteases / R. P. Almeda, M. Melchior, D. Campanelli / Biochem. Biophys. Res. Commun. -1991.- Vol. 177.-P. 688−695.
  101. Babior, В. M. Oxidants from phagocytes agents of defense and destruction / В. M. Babior //Blood. 1984. — Vol. 5. — P. 959−966.
  102. Berliner, E. Uber die Schlaffsucht der Mehlmottenrouppe (Ephestia Kuhniella Zell.) und ihen Erreger Bacillus thuringiensis, n.sp. / E. Berliner // Z. Angew. Entomol. 1995. — Bd. 2. — S. 29−56.
  103. Berliner, E. Uber die Schlaffsucht der Mehlmottenrouppe / E. Berliner // Ges. Getreidew.- 1991. Bd. 3. — S. 63−70.
  104. Юб.Воггоп, W. F. Medical physiology / W. F. Borron, E. L. Boupaep. -Philadelphia: Saunders, 2004. 1344 p.
  105. Carrol, J. Analysis of the large agueons pores produced by a Bacillus thuringiensis protein insecticide in Manduca sexta midgud brush — border-membranes vesicles / J. Carrol, D. J. Ellar // Eur. J. Biochem. — 1997. — Vol. 245.-P. 797−804.
  106. Densen, P. Granulocytic phagocytes / P. Densen, W. R. Clark, W. M. Nauseff // Infectious Deseases. 5th ed. — 1995. — P. 78−101.
  107. Elison, R. T. Killing of gramnegative bacteria by lactoferrin and lysozime / R. T. Elison, T. G. Gich//J.Clin. Invest. 1991. — Vol. 88. — P. 1080−1084.
  108. Faust, R. M. Nature of pathogenic process of Bacillus thuringiensis // Compar. Pathol. 1984. — Vol. 7. — P. 91−141.
  109. Fedhila, S. The InhA2 Metalloprotease of Bacillus thuringiensis Strain 407 Is Required for Pathogenicity in Insects Infected via the Oral Route / S. Fedhila, P. Nel, D. Lereclus // J. Bacteriol. 2002. — Vol. 184. — P. 3296−3304.
  110. Foldes, P. S. Glutatione peroxidase activity of human erythrocyte membranes / P. S. Foldes, D. Mareteki // Acta Biol. Et Med. Germ. 1982. — Bd. 41, № 11. -S. 1003−1008.
  111. Goldstein, I. M. Evidence that the superoxide-generating system of human leukocytes is associated with the cell surface / I. M. Goldstein, M. Cerqueira, S. Lind // J. Clin. Invest. 1977. — Vol. 59, № 2. — P. 249−254.
  112. Goldberg, H. Plasma membrane rebox activitves / H. Goldberg // Biochem. Biophys. Acta. 1982. — Vol. 694, № 2. — P. 203−223.
  113. Goldsby, R. Kuby Immunology / R. Goldsby, T. Kindt, B. Osborne. 5th ed. — N.Y.: W H Freeman and Company, 2000. — 670 p.
  114. Grochulski, P., Masson L., Borisova S., Pusztai-Carey M., Schwartz J.L., Brousseau R., Cygler M. Bacillus thuringiensis CrylA (a) insecticidal toxin: crystal structure and channel formation // J. Mol. Biol. 1995. — Vol. 254. -P. 447−464.
  115. Green, C. L. Pathogenesis and prevention of diabetic neurophaty and nephropaty / C. L. Green, G. Healing, S. Simpkin // Metabolism. 1986. -Vol. 37, № 2. — P. 25−29.
  116. Hofmann C., Wolfersberger M. J., Luthu P. Visualisation of binding of Bacillus thringiensis delta-toxin, to invertebrate cells / C. Hofmann, M. J. Wolfersberger, P. Luthu // 2nd Europ. Workshop on bact. toxins. 1985. — P. 70−72.
  117. Klebanoff, S. J. Myeloperoxidess. Oscurence and biological function / S. J. Klebanoff // Deroxidases in Chemistry and Biology. Boca raton, FL. 1991. — P. 136.
  118. Pendleton, I. R. Separation of the spores and crystals or Bacillus thuringiensis /1. R. Pendleton, R. B. Morrison // Nature. 1966. — Vol. 212. — P. 228−729.
  119. Perretti, M. Annexin I is stored within gelatinize granules of human neutrophils and mobilized on the cell surface upon adhesion but notphagocytosis / M. Perretti, H. Christian, S. K. Wheller // Cell Biol. Int. 2000. -Vol. 24, № 3. — P. 163−174.
  120. Ramasarma, T. Generation H202 in biomembrane / T. Ramasarma // Biochem. Biophys. Acta. 1982. — Vol. 694, № 2. — P. 203−223
  121. Roubal, W. T. Damage to ATP by peroxidizing lipids / W. T. Roubal, A. L. Tappel //Biochim. Biophys. Acta. 1967. — Vol. 136. — P. 402−403.
  122. Selsted, M. E. Indolicidin, a novel bactericidal tridecapeptide amide from neutrophils / M. E. Selsted, M. J. Novothy, W. L. Morris // J. Biol. Chem. -1992. Vol. 267. — P. 4292−4295.
  123. Smolen, J. E. Function of neutrophils / J. E. Smolen, L. A. Boxer // Williams
  124. Storici, P. Dequence analisis of an antibiotic dodecapeptive from neutrophils / P. Storici, G. Del Sal, C. Schneider // FEBS Lett. 1992. — Vol. 314. — P. 187.
  125. Territo, M. C. Monocyte-hemotactic activity of defensins from human neutrophils // M. C. Territo, T. Ganz, M. E. Selsted // J. Clin. Invest. 1989. -Vol. 84.-P. 2017−2019.
  126. Vel, W. A. Killing capacity of human polymorphonuclear leukocytes in aerobic and anaerobic conditions / W. A. Vel, F. Namavar, A. M. Verweij // Med. Microbiol. 1984. — Vol. 18, № 2. — P. 173−180.
  127. Vladimirov, Yu. A. Free radicals / Yu. A. Vladimirov // A Practical Appraach / ed. N. A. Puchard., F. J. Kelly. Oxford, 1996. — P. 65−82.
  128. Washburn, J. H. The role of free radikal reactions in the molecular patology of bio-degradative process / J. P. Washburn // Gerantologial. 1973. — Vol. 13, № 4. — P. 436−439.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!