Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Роль мембранного холестерина в регуляции механочувствительных ионных каналов и актинового цитоскелета

Диссертация: Роль мембранного холестерина в регуляции механочувствительных ионных каналов и актинового цитоскелета
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Холестерин (холестерол) — это один из основных липидных компонентов плазматической мембраны клеток млекопитающих. Известно, что динамические параметры липидного бислоя зависят от состава и концентрации стеролов. Традиционно присутствие стеролов в клеточных мембранах связывали, прежде всего, с их механическими свойствами. Однако за последние десятилетия возникло новое понимание роли липидов… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. МЕХАНОЧУВСТВИТЕЛЬНЫЕ ИОННЫЕ КАНАЛЫ
      • 2. 1. 1. Механочувствительные ионные каналы прокариот
      • 2. 1. 2. Механочувствительные ионные каналы в клетках эукариот 13 2.1.2.1 Общая характеристика и функциональные свойства
        • 2. 1. 2. 2. Предположения о молекулярной природе каналов
        • 2. 1. 2. 3. Модели активации
        • 2. 1. 2. 4. Роль цитоскелета в функционировании каналов
        • 2. 1. 2. 5. Клетки лейкемии человека К562 как модель для исследования 34 регуляции каналов
    • 2. 2. ЛИПИДНЫЕ МИКРОДОМЕНЫ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН
      • 2. 2. 1. Понятие о латеральной гетерогенности липидного бислоя
      • 2. 2. 2. Холестерин и его роль в структуре липидных микродоменов
      • 2. 2. 3. Визуализация липидных микродоменов в клеточных мембранах
      • 2. 2. 4. Участие липидных рафтов в процессах передачи сигнала
      • 2. 2. 5. Липидные рафты и актиновый цитоскелет: структурно- 52 функциональная взаимосвязь
  • 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 3. 1. Регистрация ионных токов
    • 3. 2. Растворы
    • 3. 3. Клеточные культуры
    • 3. 4. Флуоресцентная микроскопия 59 3.5 Атомно-силовая микроскопия
  • 4. РЕЗУЛЬТАТЫ
    • 4. 1. Участие мембранного холестерина и рафтов в регуляции 61 механочувствительных каналов
      • 4. 1. 1. Механозависимая активация ионных токов: анализ действия 61 циклодекстринов
      • 4. 1. 2. Изменения жёсткости клеток после частичной экстракции 64 мембранного холестерина
      • 4. 1. 3. Нарушение целостности липидных рафтов при снижении уровня 65 холестерина
      • 4. 1. 4. Выявление Р-актина в клетках К
      • 4. 1. 5. Подавление активации механочувствительных каналов в клетках с 68 пониженным содержанием холестерина опосредовано реорганизацией Р-актина
    • 4. 2. Анализ роли мембранного холестерина в организации 72 актинового цитоскелета
      • 4. 2. 1. Визуализация липидных микродоменов в нормальных и 72 трансформированных фибробластах
      • 4. 2. 2. Перестройки цитоскелета в клетках различных типов после 73 снижения уровня холестерина
  • 5. ОБСУЖДЕНИЕ
    • 5. 1. Функциональный вклад мембранного холестерина в процессы 79 клеточной механотрансдукции
    • 5. 2. Стретч-активируемые каналы: возможная молекулярная природа и 84 роль в клетке
    • 5. 3. Реорганизация актинового цитоскелета, сопряженная с нарушением 87 целостности рафтов
  • 6. ВЫВОДЫ

Роль мембранного холестерина в регуляции механочувствительных ионных каналов и актинового цитоскелета (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность исследования.

Механозависимые процессы являются неотъемлемой составляющей жизнедеятельности клетки, как в норме, так и при различных патологиях. Изучение молекулярной природы механочувствительности занимает важное место в решении проблем современной клеточной биологии. В механотрансдукции ключевую роль играют ионные каналы плазматической мембраны, реагирующие на изменение ее механического статуса [Arnadottir, Chalfie, 2010]. Такие каналы называют механоуправляемыми (mechanogated) или механочувствительными, они чрезвычайно широко распространены в живой природе и, в то же время, остаются наименее изученными. Один из центральных вопросов регуляции механочувствительных каналов в клетках эукариот — исследование вклада липидного бислоя и актинового цитоскелета. Анализ функциональных взаимосвязей ионных каналов с липидным окружением и структурами цитоскелета необходим для выяснения физиологических путей их активации в нативных клетках.

Холестерин (холестерол) — это один из основных липидных компонентов плазматической мембраны клеток млекопитающих. Известно, что динамические параметры липидного бислоя зависят от состава и концентрации стеролов [Ивков, Берестовский, 1982; Needham, Nunn, 1990]. Традиционно присутствие стеролов в клеточных мембранах связывали, прежде всего, с их механическими свойствами. Однако за последние десятилетия возникло новое понимание роли липидов в жизнедеятельности клеток, сформировались новые концепции и гипотезы относительно организации клеточных мембран. Согласно современным представлениям, принципиальной особенностью их структурно-функциональной организации является латеральная гетерогенность бислоя, зависящая, в первую очередь, от липидного состава. Уровень мембранного холестерина имеет определяющее значение для структуры и целостности липидных микродоменов (рафтов), участков, характеризующихся более плотной упаковкой, повышенным содержанием холестерина, сфинголипидов и насыщенных жирнокислотных остатков [Brown and London, 2000; Pike, 2009; Lingwood, Simons, 2010].

Высказываются многочисленные гипотезы о роли холестерина и рафтов в передаче сигнала с поверхности мембраны к внутриклеточным структурам и, в частности, в процессах реорганизации и динамики актинового цитоскелета. Первоначально рафты рассматривались как некие «фокальные точки», обеспечивающие связь мембраны с кортикальными микрофиламентами [Harder, Simons, 1999; Brown, London, 2000; Nebl et al, 2002]. При этом предполагалось, что деструкция рафтов при частичной экстракции холестерина (cholesterol depletion) приводит к разобщению плазматической мембраны и цитоскелета и сопровождается повышением ее деформируемости. Однако, как показали дальнейшие исследования, в том числе анализ изменений механических свойств комплекса «мембрана-цитоскелет» при варьировании уровня стеролов [Kwik et al., 2003; Byfield et al., 2004; Morachevskaya et al., 2007], такая точка зрения является весьма упрощенной. Пока остаются открытыми вопросы о связи динамики липидных рафтов и примембранного актина. Нарушения структуры рафтов, по-видимому, могут инициировать различные процессы реорганизации цитоскелета, включая сборку микрофиламентов [Qi et al., 2009].

Таким образом, до недавнего времени регуляторная роль холестерина в составе клеточных мембран оставалась недооцененной и неясной. В настоящее время проблемы участия холестерина и рафтов в процессах механотрансдукции в живых клетках приобретают особую актуальность и значимость. В мировой науке эта новая область молекулярной физиологии начинает интенсивно разрабатываться, поскольку представляет интерес с точки зрения как фундаментальных проблем клеточной сигнализации, так и новых направлений клеточной медицины. Ряд данных указывает на связь клеточной механотрансдукции и опухолевой трансформации [Suresh, 2007], а также на вероятную роль Са2±проницаемых механочувствительных каналов и липидных рафтов в сигнальных процессах, связанных с адгезией и миграцией клеток [Maroto et al., 2012; Murai, 2012]. Все сказанное определило основные задачи данной работы, направленной на выявление функционального вклада мембранного холестерина в механозависимые реакции живой клетки.

Цели и задачи исследования Цель работы — выяснение роли мембранного холестерина и липидных микродоменов (рафтов) в регуляции механочувствительных ионных каналов и актинового цитоскелета.

В связи с этим были поставлены следующие экспериментальные задачи:

1. Сопоставить эффекты акцептора стеролов метил-бета-циклодекстрина и его структурного аналога альфа-циклодекстрина на характеристики механочувствительных каналов плазматической мембраны.

2. С помощью атомно-силовой микроскопии выявить влияние экстракции холестерина на механические свойства клеток.

3. Оценить изменения липидного бислоя и рафтов в плазматической мембране клеток с пониженным содержанием холестерина.

4. Выяснить, чем обусловлено подавление механозависимой активации каналов после экстракции мембранного холестерина.

5. Определить, как влияет снижение холестерина и разрушение липидных рафтов на организацию актинового цитоскелета.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Разрушение липидных микродоменов после экстракции мембранного холестерина приводит к повышению жесткости плазматической мембраны клеток лейкемии человека и ингибирует активацию механочувствительных каналов.

2. Разборка Б-актина восстанавливает высокий уровень активности механочувствительных каналов в клетках с пониженным содержанием холестерина.

3. Участие мембранного холестерина и рафтов в процессах клеточной механотрансдукции и регуляции ионных каналов опосредовано реорганизацией актинового цитоскелета.

4. Экстракция мембранного холестерина и разрушение липидных микродоменов может приводить как к сборке, так и к разборке актинового цитоскелета. Направление перестроек системы микрофиламентов определяется степенью развития актиновых структур, а именно, соотношением глобулярной и фибриллярной форм актина в клетке.

Научная новизна работы.

Впервые получены данные о роли холестерина и липидных микродоменов в регуляции механочувствительных каналов и организации цитоскелета. Установлено, что частичная экстракция мембранного холестерина и разрушение рафтов приводит к подавлению механозависимой активации ионных токов. С помощью метода атомно-силовой микроскопии исследована зависимость механических свойств живых клеток от содержания холестерина. Впервые показано, что ингибирование механочувствительных каналов и повышение жесткости клеток после снижения уровня холестерина обусловлено реорганизацией актиновой сети, инициированной разрушением липидных микродоменов. Выявлено нарушение структуры рафтов при снижении уровня холестерина в различных типах клеток. Обнаружено, что влияние холестерина и рафтов на актиновый цитоскелет зависит от исходного состояния сети микрофиламентов. Впервые показано, что холестерин-зависимые перестройки цитоскелета определяются балансом глобулярного и фибриллярного актина в клетке. Результаты демонстрируют новую роль мембранного холестерина в регуляции ионных каналов и клеточной механотрансдукции.

Личный вклад автора.

Все экспериментальные процедуры и обработка результатов выполнены автором лично. Измерения жесткости клеток были проведены на атомно-силовом микроскопе NTegra Aura в Физико-техническом институте им. А. Ф. Иоффе РАН. Материалы, вошедшие в представленную работу, обсуждались и публиковались совместно с соавторами и научным руководителем.

Теоретическое и практическое значение работы.

Полученные данные существенны для понимания роли холестерина и липидных рафтов в модуляции мембранных функций клеток. Выявление физиологических механизмов регуляции механочувствительных каналов важно для понимания феномена механотрансдукции на уровне клеток и тканей. Фундаментальное значение имеет анализ взаимосвязей мембраны и цитоскелета как ключевого звена в передаче сигнала. Исследование действия модификаторов липидного состава, в том числе циклодекстринов, представляет интерес как для разработки новых препаратов противоопухолевой терапии, так и для анализа плейотропных эффектов статинов — веществ, широко используемых для коррекции липидного профиля. Результаты демонстрируют принципиальные различия клеточных и модельных мембран и ограничения в применимости последних при исследовании регуляции каналов и роли мембранных липидов. Данные могут быть использованы в курсах лекций по физиологии, биофизике и клеточной биологии.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ (3 статьи и 7 тезисов) в отечественных и зарубежных рецензируемых изданиях. Материалы работы доложены и обсуждены на конференциях «Неделя науки СПбГПУ» (Санкт-Петербург, 2008, 2009), конференции Европейского общества молекулярной биологии (Сан-Фелю, 2010), конференции «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2011), I Всероссийской конференции «Внутриклеточная сигнализация, транспорт, цитоскелет» (Санкт-Петербург, 2011), международном симпозиуме «Нобелевские каналы» (Наймеген, 2011), III Конференции молодых ученых ИНЦ РАН (Санкт-Петербург, 2012), III съезде Общества клеточной биологии (Санкт-Петербург, 2012), на семинарах ИНЦ РАН.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ВЫВОДЫ.

1. Частичная экстракция мембранного холестерина метил-бета-циклодекстрином приводит к подавлению активности механочувствительных каналов в клетках миелоидной лейкемии человека К562. Альфа-циклодекстрин, структурный аналог, не связывающий стеролы, не влияет на параметры активации каналов.

2. Подавление механозависимой активации каналов обусловлено повышением жесткости плазматической мембраны после действия метил-бета-циклодекстрина.

3. Снижение содержания холестерина в клетках различных типов приводит к нарушению структуры липидных микродоменов (рафтов) в плазматической мембране.

4. Повышение жесткости мембраны и ингибирование механочувствительных каналов в клетках с пониженным уровнем холестерина опосредовано реорганизацией актинового цитоскелета, вызванной нарушением целостности липидных рафтов.

5. Снижение уровня мембранного холестерина и разрушение рафтов инициирует процессы реорганизации микрофиламентов. Перестройки цитоскелета, вызванные экстракцией холестерина, зависят от исходного баланса фибриллярного и глобулярного актина в клетках.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Т. Н., Чубинский-Надеждин В. И., Хайтлина С. Ю., Морачевская Е. А. 2012. Сборка актиновых филаментов в трансформированных клетках при действии мембранных модификаторов, связывающих холестерин. Цитология. 54 (6): 508−514.
  2. В. Г., Берестовский Г. Н. 1981. Динамическая структура липидного бислоя. М. Наука: 286с.
  3. И. А., Анкудинов А. В., Стовпяга А. В., Трофимова Е. Ю., Еропкин М. Ю. 2012. Диагностика живых клеток в атомно-силовом микроскопе, используя субмикронный сферический зонд калиброванного радиуса кривизны. ЖТФ 10- 109−117.
  4. А. В., Чубинский-Надеждин В. И., Негуляев Ю. А., Морачевская Е. А. 2009. Функциональные свойства натриевых каналов в клетках К562 после экстракции холестерина. Цитология. 51 (8): 676−683.
  5. А.В., Васильева И. О., Морачевская Е. А., Негуляев Ю. А. 2012. Молекулярная и функциональная идентификация натриевых каналов в клетках К562. Цитология 54(7):573−579.
  6. Н. А., Чубинский-Надеждин В. И., Иванов В. А., Морачевская Е. А. 2010. Чувствительность к действию естественных киллеров зависит от целостности липидных рафтов в мембране трансформированных клеток. Цитология. 52 (12): 983−989.
  7. Alessandri-Haber N., Joseph E., Dina O. A., Liedtke W., LevineJ. D. 2005. TRPV4 mediates pain-related behavior induced by mild hypertonic stimuli in the presence of inflammatory mediator. Pain 118:70−79.
  8. Alessandri-Haber N., YehJ. J., Boyd A. E., Parada C. A., ChenX., Reichling D. В., Levine J. D. 2003. Hypotonicity induces TRPV4-mediated nociception in rat.1. Neuron 39:497−511.
  9. D. M., Jordt S. E., Nikai T., Tsuruda P. R., Read A. J., Poblete J., Yamoah E. N., Basbaum A. I., Julius D. 2006. TRPA1 mediates the inflammatory actions of environmental irritants and proalgesic agents. Cell 124:1269−82.
  10. Bickel, P. E., Scherer P. E., Schnitzer J. E., Oh P., Lisanti M. P., Lodish H. F. 1997. Flotillin and epidermal surface antigen define a new family of caveolae-associated integral membrane proteins. J. Biol. Chem. 272: 13 793−13 802.
  11. Blin G., Margeat E., Carvalho K., Royer C. A., Roy C., Picart C. 2008.
  12. Booth I. R., Edwards M. D., Black S" Schumann U., Miller S. 2007. Mechanosensitive channels in bacteria: signs of closure? Nat. Rev. Microbiol. 5:431−40.
  13. Bourque C.W., Oliet S.H.R. 1997. Osmoreceptors in the central nervous system. Annu. Rev. Physiol. 59: 601−619.
  14. D. A. 2006. Lipid rafts, detergent-resistant membranes, and raft targeting signals. Am. J. Physiol. 21: 430−439.
  15. D. A., London E. 1998. Structure and origin of ordered lipid domains in biological membranes. J. Membr. Biol. 164: 103−114.
  16. D. A., London E. 2000. Structure and function of sphingolipid- and cholesterol-rich membrane rafts. J. Biol. Chem. 275: 17 221−17 224.
  17. G. 1999. Release of vasoactive substances from endothelial cells by shear stress and purinergic mechanosensory transduction. J. Anat. 194: 335−342.
  18. Carattino M.D., SHeng S., Kleyman T.R. 2005. Mutations in the pore region modify epithelial sodium channel gating by shear stress. J. Biol. Chem. 280:4393−401.
  19. M. 2009. Neurosensory mechanotransduction. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol.10(l):44−52.
  20. Chalfie M., Au M. 1989. Genetic control of differentiation of the Caenorhabditis elegans touch receptor neurons. Science 243:1027−33.
  21. M., Thomson J. N. 1982. Structural and functional diversity in the neuronal microtubules of Caenorhabditis elegans. J. Cell Biol. 93: 15−23.
  22. Chang G., Spencer R. H., Lee A. T., Barclay M. T. and Rees D. C 1998. Structure of the MscL homolog from Mycobacterium tuberculosis: a gated mechanosensitive ion channel. Science 282, 2220—2226.
  23. Zl.Chapleau M. W. 1992. Cardiovascular mechanoreceptors. Adv. Comp. Environ. Physiol. 10: 138−164.
  24. Lai C., Chang Y-C., Du S-Y, Wang H-J, Kuo C-H., Fang S-H, Fu H-W., Lin H-H, Chiang A-S. and Wang W-C. 2008. Cholesterol Depletion Reduces Helicobacter pylori CagA Translocation and CagA-Induced Responses in AGS Cells. Infect. Immun. 76(7): 3293−3303.
  25. G. R., Rodgers W. 2009. Cytoskeleton-membrane interactions in membrane raft structure. Cell. Mol. Life Sci. 66: 2319−2328.
  26. Cho H., Shin J., Shin C. Y., Lee S. Y., Oh U. 2002. Mechanosensitive ion channels in cultured sensory neurons of neonatal rats. J. Neurosci. 22: 1238−1247.
  27. Christensen A. P. and Corey D. P. 2007. TRP channels in mechanosensation: direct or indirect activation? Nat. Rev. Neurosci.8: 510−521.
  28. Chubinskiy-Nadezhdin V. I., Negulyaev Y. A., Morachevskaya E. A. 2011. Cholesterol depletion-induced inhibition of stretch-activated channels is mediated via actin rearrangement. Biochem. Biophys. Res. Commun. 412: 80−85.
  29. M., Liyanage K., Lisanti M. P., Lodish H. F. 1994. Signal transduction of a G protein-coupled receptor in caveolae: colocalization of endothelin and its receptor with caveolin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91: 11 728−11 732.
  30. D.P., Hudspeth A.J. 1979. Response latency of vertebrate hair cells.1. Biophys. J. 26:499−506
  31. B., Mathur J., Schmidt M., Earley T.J., Ranade S., Petrus M.J., Dubin A.E., Patapoutian A. 2010. Piezol and Piezo2 are essential components of distinct mechanically activated cation channels. Science. 330(6000):55−60.
  32. Coste B., Xiao B., Santos J.S., Syeda R., Grandl J., Spencer K.S., Kim S.E., Schmidt M., Mathur J., Dubin A.E., Montal M., Patapoutian A.2012. Piezo proteins are pore-forming subunits of mechanically activated channels. Nature. 483(7388): 17 681.
  33. Delcour A. H., Martinac B., Adler J. and Kung, C. 1989. Modified reconstitution method used in patch-clamp studies of Escherichia coli ion channels. Biophys. J. 56, 631−636.
  34. Du H., Gu G., William C. M. and Chalfie M. 1996. Extracellular proteins needed for C. elegans mechanosensation. Neuron 16, 183−194.
  35. R. L., Turner C. H. 1995. Mechanotransduction and the functional response of bone to mechanical strain. Calcif. Tissue. Int. 57: 344−358.
  36. M. 2003. The state of lipid rafts: from model membranes to cells. Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 32: 257−283.
  37. R., Szleifer I., Schick M. 2006. Phase diagram of a ternary mixture of cholesterol and saturated and unsaturated lipids calculated from a microscopic model. Phys. Rev. Lett. 96: 98−101.
  38. R. M. 2008. Proteins and cholesterol-rich domains. Biochim. Biophys Acta. 1778:1576−1582.
  39. Ermakov YA, Kamaraju K, Sengupta K, Sukharev S.2010. Gadolinium Ions Block Mechanosensitive channels by altering the packing and laterial pressure of anionicphospholipids. Biophys. J. 98(6): 1018−1027.
  40. N., Marhaba R., Zdller M. 2001. Involvement of CD44 in cytoskeleton rearrangement and raft reorganization in T cells. J Cell Sci. 114: 1169−1178.
  41. M., Clauss W. G. 2008. Mechano-sensitivity of ENaC: may the (shear) force be with you. Eur. J. Physiol. 455: 775−785.
  42. T., Miyawaki A., Mikoshiba K. 1995. Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor-like protein in plasmalemmal caveolae is linked to actin filaments. J. Cell Sci. 108: 7−15.
  43. Gamaley I., Efremova T., Kirpichnikova K, Kever L., Komissarchik Y., Polozov Y., Khaitlina S. 2006. N-Acetylcysteine-induced changes in susceptibility of transformed eukaryotic cells to bacterial invasion. Cell Biol. Int. 30: 319−325.
  44. Garcia-Anoveros J., Samad T.A., Zuvela-Jelaska L., Woolf C.J., Corey D.P. 2001. Transport and localization of the DEG/ENaC ion channel BNaCl alpha to peripheral mechanosensory terminals of dorsal root ganglia neurons. J. Neurosci. 21:2678−86.
  45. P., Folgering J., Maroto R., Raso A., Wood T.G., Kurosky A., Bowman C., Bichet D., Patel A., Sachs F., Martinac B., Hamill O.P., Honore E. 2008. Revisiting TRPC1 and TRPC6 mechanosensitivity. Pflugers Arch. 455:1097−103.
  46. Grimmer S., van Deurs B., Sandvig K. 2002. Membrane ruffling and macropinocytosis in A431 cells require cholesterol. J. Cell Sci. 115: 2953−2962.
  47. F., Sachs F. 1984. Stretch-activated single ion channel currents in tissue cultured embryonic chick skeletal muscle. J. Physiol. 352: 685−701.
  48. C.M., Furness D.M. 1995. Mechanotransduction in vertebrate hair cells: structure and function of the stereociliary bundle. Am. J. Physiol. 268: 1−13.
  49. Hamill O. P, Martinac B. 2001. Molecular basis of mechanotransduction in livingcells. Physiol. Rev. 81: 685−740. 73. Hamill O. P., McBride Jr. D. W. 1996. The pharmacology of mechanogated membrane ion channels. Pharmacol. Rev. 48: 231−252.
  50. A. Hamill O.P., McBride D.W. Jr. 1992. Rapid adaptation of single mechanosensitivechannels in Xenopus oocytes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7462−66.
  51. Hanaoka K., Qian F., BolettaA., Bhunia A.K., Piontek K., Tsiokas L., Sukhatme V. P., Guggino W B., Germino G.G. 2000. Co-assembly of polycystin-1 and -2 produces unique cation-permeable currents. Nature 408:990—94.
  52. S. W. 2007. Far-field optical nanoscopy. Science 316, 1153−1158.
  53. Rev. Neurosci. 8:251−61. S3. Hope H. R., Pike L. J. 1996. Phosphoinositides and phosphoinositide-utilizing enzymes in detergent-insoluble lipid domains. Mol. Biol. Cell. 7: 843−851.
  54. J., Bechstedt S. 2004. Hypothesis: a helix of ankyrin repeats of the NOMPC-TRP ion channel is the gating spring of mechanoreceptors. Curr. Biol. 14:224−26.
  55. J., Roberts W. M., Hudspeth A. J. 1988. Mechanoelectrical transduction by hair cells. Annu. Rev. Biophys. Chem. 17: 99−124.
  56. A.J., Jacobs R. 1979. Stereocilia mediate transduction in vertebrate hair cells (auditory system/cilium/vestibular system). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 76:1506−9.
  57. R., Sato S. B., Kobayashi T. 2005. Imaging lipid rafts. J. Biochem. 137: 249−254.
  58. P. A. 1998. The cytoskeleton and cell signaling: component localization and mechanical coupling. Physiol. Rev. 78: 763−781.
  59. Kamkin A., I. Kiseleva I., Isenberg G. 2003. Ion selectivity of stretch-activated cation currents in mouse ventricular myocytes. Pflugers Arch. 446: 220−231.
  60. Kaufmann S., Kas J., Goldmann W. H., Sackmann E., Isenberg G. 1992. Talin anchors and nucleates actin filaments at lipid membranes. A direct demonstration. FEBSLett. 314:203−205.
  61. Kim S. E., Coste B., Chadha A., Cook B., Patapoutian A. 2012. The role of Drosophila Piezo in mechanical nociception. Nature. 483(7388):209−12.
  62. T. K., Hougaard C., Hoffmann E. K., Pedersen S. F. 2006. Cholesterol modulates the volume-regulated anion current in Ehrlich-Lettre ascites cells via effects on Rho and F-actin. Am. J. Physiol. 291: 757−771.
  63. Kobayashi T, Takahashi M, Nagatsuka Y, Hirabayashi Y. 2006. Lipid rafts: new tools and a new component. Biol Pharm Bull. 29(8): 1526−31.
  64. K., Ramachandran C.R., Manoharan S. 2003. Biochemical changes in tumor tissues of oral cancer patients. Clin Biochem. 36:61−65.
  65. C. 2005. A possible unifying principle for mechanosensation. Nature 436(7051):647−54.
  66. K.Y., Allchorne A.J., Vollrath M.A., Christensen A.P., Zhang D.S., Woolf C. J., Corey D. P. 2006. TRPA1 contributes to cold, mechanical, and chemical nociception but is not essential for hair-cell transduction. Neuron 50:277−89.
  67. T., Fukami K., Thelen M., Golub T., Frey D., Caroni P. 2000. GAP43, MARCKS, and CAP23 modulate PI (4, 5) P2 at plasmalemmal rafts, and regulate cell cortex actin dynamics through a common mechanism. J. Cell Biol. 149: 14 551 472.
  68. B., Hoggl N., 2002. The involvement of lipid rafts in the regulation of integrin function. J. Cell Sci. 115: 963−972.
  69. Lekka M., Pogoda K., GostekJ., Klymenko O., Prauzner-Bechcicki S., Wiltowska
  70. J., Jaczewska J., Lekki J., Stachura Z. 2012. Cancer cell recognition-mechanical phenotype. Micron 43(12): 1259−66.
  71. Lencer W.I. and Tsai B. 2003. The intracellular voyage of cholera toxin: going retro. Trends Biochem. Sci. 28: 639−645.
  72. Lenne, P F. Wawrezinieck L., Conchonaud F, Wurtz O., Boned A., Guo X. J., Rigneault H., He H. T., Marguet D. 2006. Dynamic molecular confinement in the plasma membrane by microdomains and the cytoskeleton meshwork. EMBO J. 25, 3245−3256.
  73. Lingwood D., Simons K 2010. Lipid rafts as a membrane-organizing principle. Science 327: 46−50.
  74. Liu, P., Ying Y, Ko Y-G., Anderson R. G. W. 1996. Localization of platelet-derived growth factor-stimulated phosphorylation cascade to caveolae. J. Biol. Chem. 271: 10 299−10 303.
  75. Maingret F., Fosset M., Lesage F., Lazdunski M, Honore E. 1999. TRAAK is a mammalian neuronal mechano-gated K+ channel. J. Biol. Chem. 274: 1381−1387.
  76. R., Kurosky A., Hamill O.P. 2012. Mechanosensitive Ca (2+) permeant cation channels in human prostate tumor cells. Channels 6(4): 290−307.
  77. Wl.Maroto R., Raso A., Wood T.G., Kurosky A., Martinac B., Hamill O.P. 2005. TRPC1 forms the stretch-activatedcation channel in vertebrate cells. Nat. Cell Biol. 7:179−85.
  78. Martel V., Racaud-Sultan C., Dupe S., Marie C., Paulhe F., Galmiche A., Block M. R., Albiges-Rizo C. 2001. Conformation, localization, and integrin binding of talin depend on its interaction with phosphoinositides. J. Biol. Chem. 276: 2 121 721 227.
  79. B., Adler J., Kung C. 1990. Mechanosensitive ion channels of E. coli activated by amphipaths. Nature. 348: 261−263.
  80. Martinac B., Buechner M., Delcour A. H., Adler J. and Kung C. 1987. Pressure-sensitive ion channel in Escherichia coli. Proc. Natl Acad. Sci. USA 84, 2297−2301.
  81. Martinac B., Delcour A. H., Buechner M., Adler J. and Kung, C. Advances in Comparative and Environmental Physiology 3—18 (Springer, Heidelberg, 1992).
  82. J. L., Dorland R. B. 1984. Bacterial Toxins: Cellular Mechanisms of Action Microbiol. Rev, 48: 199−221.
  83. XTh.Mineo, C., James G. L., Smart E. J., Anderson R. G. W. 1996. Localization of epidermal growth factor-stimulated Ras/Raf-1 interaction to caveolae membrane. J. Biol. Chem. 271: 11 930−11 935.
  84. A., Matsumoto N., Imai M., Suzuki M. 2003. Impaired osmotic sensation in mice lacking TRPV4. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 285:96−101.
  85. E. A., Sudarikova A. V., Negulyaev Y. A. 2007. Mechanosensitive channel activity and F-actin organization in cholesterol-depleted human leukaemia cells. Cell Biol. Int. 31: 374−381.
  86. Mukherjee S., Zha X., Tabas /., Maxfield F.R. J998. Cholesterol distribution in living cells: fluorescence imaging using dehydroergosterol as a fluorescent cholesterol analog. Biophys J. 75(4):1915−25.
  87. T. 2012. The role of lipid rafts in cancer cell adhesion and migration. Int J Cell Biol.- 2012:763 283.
  88. , M., Peranen J., Schreiner R., Wieland F., Kurzchalia T. V., Simons K. 1995. VIP21/caveolin is a cholesterol-binding protein. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92:10 339−10 343.
  89. Nakamura T. Y, Iwata Y., Sampaolesi M., Hanada H., Saito N., Artman M., Coetzee W. A., Shigekawa M. 2001. Stretch-activated cation channels in skeletal muscle myotubes from sarcoglycan-deficient hamsters. Am. J. Physiol. 281: 690 699.
  90. Nauli S.M., Alenghat F.J., Luo Y., Williams E., Vassilev P., Li X., Elia A. E., Lu W., Brown E. M., Quinn S. J., Ingber D. E., Zhou J. 2003. Polycystins 1 and 2 mediate mechanosensation in the primary cilium of kidney cells. Nat. Genet. 33:129−37.
  91. Nauli S.M., Rossetti S., Kolb R.J., Alenghat F.J., Consugar M.B., Harris P. C, Ingber D. E, Loghman-Adham M., Zhou J. 2006. Loss of polycystin-1 in human cyst-lining epithelia leads to ciliary dysfunction. J. Am. Soc. Nephrol. 17:1015−25.
  92. Nebl T., Pestonjamasp K. N., Leszyk J. D., Crowley J. L., Oh S. W., Luna E. J. 2002. Proteomic analysis of a detergent-resistant membrane skeleton from neutrophil plasma membranes. J. Biol. Chem. 277: 43 399^13409.
  93. D., Nunn R.S. 1990. Elastic deformation and failure of lipid bilayer membranes containing cholesterol. Biophys. J. 58: 997−1009.
  94. Y.A., Khaitlina S.Y., Hinssen H., Shumilina E.V., Vedernikova E.A. 2000. Sodium channel activity in leukemia cells is directly controlled by actin polymerization. J Biol Chem. 275(52):40 933−7.
  95. N., Marunaka Y. 2001. Blocking action of cytochalasin D on protein kinase A stimulation of a stretch-activated cation channel in renal epithelial A6 cells. Biochem. Pharmacol. 61: 761−765.
  96. B., Eggermont J., Voets T., Buyse G., Manolopoulos V., Droogmans G. 1997. Properties of volume-regulated anion channels in mammalian cells. Progr.
  97. Biophys. Mol. Biol. 68: 69−119.3S.Nilius B.2009. Polycystins under pressure. Cell. 139(3):466−7.
  98. Numata T, Shimizu T, Okada Y. 2007. TRPM7 is a stretch- and swelling-activated cation channel involved in volume regulation in human epithelial cells. Am. J Physiol Cell Physiol. 292(l):C460−467.
  99. AO. Numata T., Shimizu T., Okada Y. 2007. Direct mechano-stress sensitivity of TRPM7 channel. Cell. Physiol. Biochem. 19(l-4):l-8.
  100. O’Hagan R., Chalfie M., Goodman M.B. 2005. The MEC-4 DEG/ENaC channel of Caenorhabditis elegans touch receptor neurons transduces mechanical signals. Nat. Neurosci. 8:43−50.
  101. E., Irie T., Uekama K., Fukunaga K. Pitha J. 1989. Differential effects of alpha-, beta- and gamma -cyclodextrins on human erythrocytes. Eur. J. Biochem. 186: 17−22.
  102. O ike M., Schwarz G., Sehrer J., Jost M., Gerke V., Weber K., Droogmans G., Nilius B. 1994. Cytoskeletal modulation of the response to mechanical stimulation in human vascular endothelial cells. Pflugers Arch. 428: 569−576.
  103. Y. 1997. Volume expansion-sensing outward-rectifier C12 channel: fresh start to the molecular identity and volume sensor. Am. J. Physiol. 273: 755−789.
  104. S., Paiha K., Harder T., Gerke V., Schworzler C., Schwarz H. 1999. Analysis of CD44-containing lipid rafts: Recruitment of annexin II and stabilization by the actin cytoskeleton. J. Cell Biol. 146: 843−854.
  105. P. A., Fishman P. H. 1998. Filipin-dependent inhibition of cholera toxin: evidence for toxin internalization and activation through caveolae-like domains. J Cell Biol. 141(4):905−15.
  106. XAS.Parmryd I., Adler J., Patel R., Magee A.I. 2003. Imaging metabolism of phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate in T-cell GM1 -enriched domains containing ras proteins. Exp. Cell Res. 285: 27−38.
  107. S. K. 2002. Lipid rafts and B-cell activation. Nat. Rev. Immunol. .2: 96 105.
  108. L. J. 2009. The challenge of lipid rafts. J. Lipid Res. 50: 323−3286.
  109. L. J., 2003. Lipid rafts bringing order to chaos. J. Lipid Res. 44:655−667.
  110. Pike L. J., Han X., Gross R. W. 2005. EGFR are localized to lipid rafts that contain a balance of inner and outer leaflet lipids: A shotgun lipidomics study. J. Biol. Chem. 280: 26 796−26 804.
  111. Pinaud F., Michalet X., Iyer G., Margeat E., Moore H. P., Weiss S.2009. Dynamic partitioning of a glycosyl-phosphatidylinositol-anchored protein in glycosphingolipid-rich microdomains imaged by single-quantum dot tracking. Traffic 10, 691−712.
  112. H. A., Spring K. R. 2001. Bending theMDCKcell primary cilium increases intracellular calcium. J. Membr. Biol. 184:71−79.
  113. Price M. P., Mcllwrath S. L., Xie J., Cheng C., Qiao J., Tarr D. E., Sluka K. A., Brennan T. J., Lewin G. R., Welsh M. J. 2001. The DRASIC cation channel contributesto the detection of cutaneous touch and acid stimuli in mice. Neuron 32:1071−83.
  114. Qi M., Liu Y., Freeman M.R., Solomon K.R. 2009. Cholesterol-regulated stress fiber formation. J Cell Biochem. 106(6): 1031−40.
  115. C., Puel J.L., Kress M., Baron A., Diochot S., Lazdunski M., Waldmann R. 2004. Knockout of the ASIC2 channel in mice does not impair cutaneous mechanosensation, visceral mechanonociception and hearing. J. Physiol. 558:65 969.
  116. Rust M. J., Bates M. and Zhuang, X. 2006. Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (STORM). Nature Meth. 3, 793−795.
  117. F., Morris C. E. 1998. Mechanosensitive ion channels in nonspecialized cells. Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. 132: 1−77.
  118. Saeki K, Miura Y., Aki D., Kurosaki T., Yoshimura A. 2003. The B cell specific major raft protein, Raftlin, is necessary for the integrity of lipid raft and BCR signal transduction. EMBO J. 2: 3015−3026.
  119. U., Prohaska R. 2001. Stomatin, flotillin-1, and flotillin-2 are major integral proteins of erythrocyte lipid rafts. Blood. 97: 1141−1143.
  120. , M., Sudol M., Tang Z., Lisanti M. P. 1993. Signal transducing molecules and glycosyl-phosphatidylinositollinked proteins form a caveolin-rich insoluble complex in MDCK cells. J. Cell Biol. 122: 789−807.
  121. Scheiffele P., Roth M. G., and Simons K. 1997. Interaction of influenza virus haemagglutinin with sphingolipid-cholesterol membrane domains via its transmembrane domain. EMBO J. 16: 5501−5508.
  122. Schermelleh L., Heintzmann R. and Leonhardt H. 2010. A guide to superresolution fluorescence microscopy. J. Cell Biol. 190, 165−175.
  123. Shroff H., Galbraith C. G., Galbraith J. A. and Betzig E. 2008. Live-cell photoactivated localization microscopy of nanoscale adhesion dynamics. Nature Meth. 5,417−423.
  124. E.V., Negulyaev Y.A., Morachevskaya E.A., Hinssen H., Khaitlina S.Y. 2003. Regulation of sodium channel activity by capping of actin filaments. Mol. Biol. Cell. 14(4):1709−16.
  125. K., Gerl M. 2010. | Revitalizing membrane rafts: new tools and insights. Nature Reviews Molecular Cell Biology 11,688−699.
  126. K., Toomre D. 2000. Lipid rafts and signal transduction. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 1: 31−39.
  127. Simpson-Holley M., Ellis D., Fisher D., Elton D., McCauley J., Digard P. 2002. A functional link between the actin cytoskeleton and lipid rafts during budding of filamentous influenza virions. Virology. 301: 212−225.
  128. S. J., Nicolson G. L. 1972. The fluid mosaic model of the structure of cell membranes. Science. 175: 720−731.
  129. D. L., Morris C. E. 1994. Delayed activation of single mechanosensitive channels in Lymnaea neurons. Am. J. Physiol. 267: 598−606.
  130. Co-purification and direct interaction of Ras with caveolin, an integral membrane protein of caveolae microdomains. J. Biol. Chem. 271: 9690−9697.
  131. S., Mauri L., Chigorno V., Prinetti A. 2006. Gangliosides as components of lipid membrane domains. Glycobiology. 17: 1−13.
  132. A. V., Negulyaev Y. A., Morachevskaya E. A. 2005. Actin cytoskeleton disassembly affects conductive properties of stretch-activated cation channels in leukaemia cells. Biochim Biophys Acta. 1669:53−60.
  133. A. V., Sudarikova A. V., Negulyaev Y. A., Morachevskaya E. A., 2006. Magnesium permeation through mechanosensitive channels: single-current measurements. Cell Res. 16:723−30.
  134. Sukharev S. I., Blount P., Martinac B., Blattner F. R. and Kung C. 1994. A large conductance mechanosensitive channel in E. coli encoded by mscL alone. Nature 368, 265−268. '
  135. Sukharev S. I., Blount P., Martinac B., Kung C.1997. Mechanosensitive channels of Escherichia coli: the MscL gene, protein, and activities. Annu. Rev. Physiol. 59: 633−657.
  136. Sukharev S. I., Martinac B., Arshavsky V. Y. and Kung C. 1993. Two types of mechanosensitive channels in the Escherichia coli cell envelope: solubilization andfunctional reconstitution. Biophys. J. 65, 177−183
  137. Sukharev S., Betanzos M., Chiang C. S. and Guy, H. R. 2001. The gating mechanism of the large mechanosensitive channel MscL. Nature 409, 720−724.
  138. Sun M., Northup N. Marga F., Huber T., Byjield F.J., Levitan I., Forgacs G. 2007. The effect of cellular cholesterol on membrane-cytoskeleton adhesion. J Cell Sci. 120(Pt 13):2223−31.
  139. S. 2007. Biomechanics and biophysics of cancer cells. Acta Biomater. 3(4):413−38.
  140. M., Mizuno A., Kodaira K., Imai M. 2003. Impaired pressure sensation in mice lacking TRPV4. J. Biol. Chem. 278:22 664−68.
  141. M., Watanabe Y., Oyama Y., Mizuno A., Kusano E., Hirao A., Ookawara S. 2003. Localization of mechanosensitive channel TRPV4 in mouse skin. Neurosci. Lett. 353:189−92.
  142. K., Suzuki M., Mizuno A., Hara A. 2005. Hearing impairment in TRPV4 knockout mice. Neurosci. Lett. 382:304−8.
  143. Tskvitaria-Fuller I., Rozelle A. L., Yin H. L., and Wulfing C. 2003. Regulation of sustained actin dynamics by the TCR and costimulation as a mechanism of receptor localization. J. Immunol. 171: 2287−2295.
  144. A., Everson W. V., Matveev S. V., Smart E. J. 2002. Cholesteryl ester is transported from caveolae to internal membranes as part of a caveolin-annexin II lipid-protein complex. J. Biol. Chem. 277: 4925−4931.
  145. S., Paccani S. R., Ulivieri C., Mercati D., Pacini S., Patrussi L. 2002. F-actin dynamics control segregation of the TCR signaling cascade to clustered lipid rafts. Eur. J. Immunol. 32: 435−446.
  146. Van Deurs B., Nilausen K., Faergeman O., Meinertz H. 1982. Coated pits and pinocytosis of cationized ferritin in human skin fibroblasts. Eur. J. Cell Biol. 27:270.278.
  147. Van Haller P. D., Donohoe S., Goodlett D. R., Aebersold R., Watts J. D. 2001. Mass spectrometric characterization of proteins extracted from Jurkat T cell detergent-resistant membrane domains. Proteomics. 1: 1010−1021.
  148. Van Rheenen J., Achame E. M., Janssen H., Calafat J., Jalink K. 2005. PIP2 signaling in lipid domains: a critical re-evaluation. EMBO J. 24: 1664−1673.
  149. K., Montell C. 2007. TRP channels. Annu. Rev. Biochem. 76:387−417.
  150. Vieira F. S., Correa G., Einicker-Lamas M., Coutinho-Silva R. 2010. Host-cell lipid rafts: a safe door for micro-organisms? Biol Cell. 102(7):391−407.
  151. R. G., Willingham A. T., Zuker C. S. 2000. Drosophila mechanosensory transduction channel. Science 287:2229−34.
  152. U., Bodding M., Freichel M., Flockerzi V. 2000. Trpl2, a novel Trp related protein from kidney. FEBS Lett. 485:127−34.
  153. Wu L.J., Sweet T.B., Clapham D.E. 2010. Current progress in the mammalian TRP ion channel family. Pharmacol Rev.-62(3):381−404.
  154. HA.Xiao R. and Xu X.Z. 2010. Mechanosensitive Channels: In Touch with Piezo. Curr. Biol. 20: 2191.
  155. Xu X., London E. 2000. The effect of sterol structure on membrane lipid domains reveals how cholesterol can induce lipid domain formation. Biochemistry. 39: 843 849.
  156. R., Schulz VP., Houston B.L., Maksimova Y., Houston D.S., Smith B., Rinehart J., Gallagher P.G. 2012. Mutations in the mechanotransduction protein PIEZOl are associated with hereditary xerocytosis. Blood 120:1908−1915.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!