Безопасность и противоопухолевая активность кандидатного терапевтического препарата «Канцеролизин», созданного на основе делеционного аденовируса человека 5-го типа

ВЫВОДЫ.

1 Культура клеток 293 не является туморогепной, обладает высокой чувствительностью к мутантному штамму Adel2 аденовируса 5-го серотипа, позволяет нарабатывать вирусную биомассу штамма до высоких концентраций при низкой множественности заражения и разрешена для производства лечебного противоопухолевого вирусного живого культурального очищенного концентрированного жидкого препарата «Канцеролизин» на основе данного штамма аденовируса.

2 В соответствии с проектом ЭПР получены три экспериментально-производственные серии препарата «Канцеролизин».

3 Показано, что штамм Adel2 аденовируса, входящий в состав противоопухолевого препарата «Канцеролизин» при многократном пассировании (18 пассажей) на культуре клеток 293, характеризуется высокой степенью генетической стабильности и сохраняет способность селективно инфицировать и лизиро-вать культуры р53-дефектных опухолевых клеток человека.

4 Препарат «Канцеролизин» не обладает пирогенностью, токсичностью (острой и хронической), не влияет на центральную нервную систему, не проявляет аллергизирующего действия, не вызывает аутоиммунных реакций и является иммунологически безопасным. Показана его избирательная инфекционная активность в отношении р53-дефектных опухолевых клеток человека in vitro. На модели иммунодефицитных мышей с привитыми опухолями эпидермо-идной аденокарциномы человека (А431) показана его способность достоверно ингибировать прогрессию опухолей при интратуморальном введении.

5 При моделировании условий хранения и транспортировки препарата «Канцеролизин» показано, что он сохраняет свою специфическую активность при хранении в течение двух лет при температуре минус 70 °C, в то же время транспортировка препарата с сохранением его специфической активности в течение 5 суток возможна при температуре минус 10−13 °С.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Онкологические заболевания встречаются повсеместно на всех континентах земного шара и являются одними из самых распространенных видов болезней. По данным Всемирной Организации Здравоохранения, ежегодно в мире от рака умирает более 7 млн. человек [СМИ ВОЗ, 2012]. По уровню заболеваемости злокачественными новообразованиями среди других стран мира Россия занимает 16-е место у мужчин и 28-е — у женщин [Трапезников Н. Н., Аксель Е. М., 1996; Бармина Н. М., Трапезников Н. Н., 1997; СМИ ВОЗ, 2009].

Более 50% всех опухолей человека состоят из клеток, несущих дефект в р53-гене, включая клетки легкого (60%), ободочной кишки (50%), грудной клетки (40%), головы и шеи (60%) и яичек (60%) [Hollstein М. et al., 1991; Lubin R. et al., 1995; Chang F. et al., 1995]. Как правило, потеря р53-функции у клеток часто ассоциируется с их резистентностью к химиотерапевтическим препаратам и облучению. Таким образом, чрезвычайно важной, актуальной и значимой задачей современной медицины является создание новых высокоэффективных препаратов для лечения опухолей, вызванных мутациями в гене р53 у клеток.

Путем проведения сайт-направленного мутагенеза аденовируса 5-го сероги-па в ГНЦ ВБ «Вектор» был получен мутантный штамм Adel2, который несет де-лецию фрагмента 2309 — 3427 п.о. гена Е1В55К и избирательно размножается в р53-дефицитных опухолевых клетках, вызывая их разрушение. Именно благодаря наличию селективной инфекционной активности в отношении опухолевых клеток, штамм Adel2 был нами использован при создании противоопухолевого препарата «Канцеролизин».

Целью настоящих исследований явилась разработка и доклиническое изучение кандидатного противоопухолевого аденовирусного препарата «Канцеролизин».

Первоначально при создании препарата был наработан сток производственного штамма Adel2, благодаря использованию перевиваемой культуры клеток 293. В свою очередь, данная культура клеток 293 была нами исследована по ряду характеристик, позволяющих использовать ее в качестве биосистемы для производства противоопухолевого лечебного препарата «Канцеролизин». Посевной и рабочий банки культуры клеток 293 были исследованы в отношении безопасности и эффективности их использования при производстве препарата. В результате установили, что заложенные на хранение банки культуры клеток, предназначенные в дальнейшем для производства препарата, имеют типичную для данной линии морфологию, кариогип и энзимограмму, характерную для клеток человека. Культура клеток банков не контамипирована бактериями, грибами, мико-плазмами, вирусами, в том числе и онкогенными, обладает высокими вируспро-дукгивными свойствами, сохраняет стабильность всех биологических свойств в течение длительного культивирования. По итогам исследований банки перевиваемой линии клеток 293 были аттестованы в ГИСК им. Л. А. Тарасевича для производства противоопухолевого препарата «Канцеролизин».

Согласно ранее разработанным инструкциям по приготовлению и контролю препарата — экспериментально — производственному регламенту (ЭПР) и фармакологической статьи предприятия (ФСП), используя посевной штамм Ас1е12, были приготовлены три серии препарата «Канцеролизин». Полученные серии были оценены по ряду показателей (внешний вид, герметичность, механические включения, рН, стерильность, плотность, состав, подлинность, специфическая активность), характеризующих их качество. Определили, что все три приготовленные экспериментально-производственные серии препарата «Канцеролизин» соответствуют требованиям, изложенным в нормативно-технической документации (НТД) и могут быть использованы для дальнейшего лабораторно-экспериментального (доклинического) изучения. По итогам исследований серии препарата «Канцеролизин» были аттестованы в ГИСК им. Л. А. Тарасевича.

При производстве вируссодержащих препаратов, особенно на основе генно-модифицированных штаммов, необходимо иметь информацию о стабильности свойств вируса, входящего в состав препарата, в процессе его многократного пассирования (до 10 пассажей) на биосистеме, которая применяется для наработки препарата. Нами была проведена оценка генетической стабильности му-тантного штамма аденовируса Ас1е12 после проведения 5, 10 и 18-го пассажа на культуре клеток 293, моделируя тем самым процесс производства противоопухолевого препарата «Канцеролизин». При определении нуклеотидной последовательности El региона генома делеционного варианта аденовируса Adel2 в образцах культуральных жидкостей, полученных после 5, 10 и 18-го пассажей на культуре клеток 293 было подтверждено наличие внесенных мутаций. С помощью ПЦР анализа ДНК выделенных из отдельных клонов штамма Adel2 после 18-ти последовательных пассажей в геномной ДНК всех исследованных вирусных клонов показано наличие делеции ожидаемой длины в гене Е1В55К и отсутствие амплификации фрагмента ДНК соответствующего родительскому аденовирусу, что свидетельствует об отсутствии реверсии к дикому типу аденовируса при многократном пассировании. Кроме того, было показано, что штамм Adel2 после 5, 10 и 18-го последовательных пассажей на культуре комплементарных клеток 293 сохранил способность селективно инфицировать и лизиро-вать культуры р53-дефектных опухолевых клеток человека. Таким образом, показан высокий уровень генетической стабильности и стабильности инфекционных свойств штамма аденовируса Adel2, входящего в состав препарата «Канцеролизин».

При проведении доклинических исследований противоопухолевого препарата «Канцеролизин» крайне важно оценить безопасность его применения. В связи с этим в серии экспериментов была изучена реактогенность препарата, как одна из характеристик безопасности. В первую очередь оценивалась его пиро-гепиая активность в опытах на кроликах, которым внутривенно вводили препарат в дозе 109'5 ТЦД50/животное. Проведенные исследования показали, что внутривенное введение препарата не вызывает подъема температуры тела кроликов более, чем на 0,6 °С, данный факт свидетельствует об отсутствии пирогенности изучаемых серий препарата.

Изучение токсичности препарата, также является важнейшим критерием оценки его безопасности или ареактогенности. При изучении острой токсичности препаратов в тестах на мышах и крысах, которым внутрибрюшинно вводили образцы серий препарата в дозе 109″ 0 ТЦД50 для мышей и в дозе 109−5 ТЦД50 Для крыс было показано, что ни одно из животных не теряло в весе на всем сроке наблюдения (7 суток) и не проявляло видимых клинических признаков интоксикации. Полученные данные подтверждают отсутствие «острой» токсической реакции у животных на введение препарата. В тестах по определению «хронической» токсичности на мышах, инъецированных подкожно сериями препарата, в течение всего срока наблюдения (12 суток) за экспериментальными животными не было отмечено каких-либо внешних клинических симптомов интоксикации и достоверных различий по массе в опытной и контрольной группах животных при подневном сравнении их показателей. Проведенное гистологическое исследование изменений в органах и тканях животных через 1 и 7 суток после многократного введения препарата не выявило значительных отличий в контрольных и опытных образцах. Отмеченные отличия в структуре тимуса, селезенки и лимфатических узлов характеризовали реакцию лимфоидных органов на длительное антигенное воздействие, были закономерными, не носили специфического характера и не содержали признаков патологического повреждения органов и тканей.

При оценке влияния препарата «Канцеролизин» на функциональные процессы в головном мозге (торможение и возбуждение) был использован тест — ко-разоловая проба. В результате оценки времени начала судорог, выраженности судорог и времени наступления гибели в опытных и контрольных группах животных достоверных отличий установлено не было, что свидетельствует об отсутствии у препарата патологического влияния на функцию ЦНС.

В серии экспериментов была изучена иммунологическая безопасность препарата. На первом этапе оценили гематологические показатели и морфологические характеристики иммунной системы у мышей, которым подкожно вводили препарат в дозе 10У ТЦД50 однократно и пятикратно с интервалом в 1 сутки. Результаты микроскопического исследования образцов крови животных, взятой через 1, 7 и 14 суток после введения препарата, свидетельствовали об отсутствии достоверных отличий между гематологическими показателями в соответствующих экспериментальных и контрольных группах животных. Результаты морфологического исследования органов иммунной системы животных (селезенка, тимус, костный мозг, толстая кишка, бронхиальные и мезентериальные лимфатические узлы), взятых через 1, 7 и 14 суток после введения препарата подтвердили отсутствие патологических изменений. Отмеченные отличия морфологии органов иммунной системы у животных опытной и контрольной групп характеризовали реакцию лимфоидных органов на антигенное воздействие. Данные структурные изменения не носили специфического характера и не содержали признаков патологического повреждения органов и тканей.

В следующей серии экспериментов исследовали иммунокомпетентные клетки после воздействия препарата. На первом этапе оценивали фагоцитарную активность макрофагов перитонеального эксудата мышей линии BALB/c по отношению к инактивированным клеткам пекарских дрожжей. Животным вводили внутрибрюшинио препарат в дозе 109,0ТЦД5о однократно и двукратно с интервалом в сутки. Определение фагоцитарной активности макрофагов проводили на 3, 5 и 7-е сутки после инфицирования. Показатели фагоцитарной активности (процент фагоцитирующих клеток и фагоцитарное число) макрофагов животных, инфицированных препаратом, достоверно не отличались от показателей контрольной группы животных. Таким образом, введение лабораторным животным препарата «Канцеролизин» не приводит к негативным изменениям фагоцитарной активности макрофагальной системы.

Определение количества ЯСК, Ти Влимфоцитов проводили в селезенке мышей линии BALB/c, инъецированных внутрибрюшинио (однои двукратно с интервалом в сутки) сериями препарата в дозе 109()ТЦД5о. Результаты определения абсолютного количества ЯСК, Ти В-клеток в селезенке животных опытных и контрольных групп, взятых на исследование через 3, 5 и 7 суток после введения препарата, свидетельствовали об отсутствии супрессирующего эффекта исследуемого препарата на клетки селезенки.

Исследование функциональной активности регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов (в гесте in vitro) с определением спонтанно формирующихся АОК проводили на мышах линии BALB/c, которым подкожно вводили серии препарата в дозе 109″ ° ТЦД50. Количество АОК в селезенке животных (клетки, продуцирующие антитела к эритроцитам барана) определяли через 1, 3, 5, 7, 9, 11 и 13 суток после инфицирования. На протяжении всего времени наблюдения после введения препарата у животных не выявляли статистически достоверного влияния препарата на активность регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов. Можно говорить лишь о возможной тенденции к повышению супрессирующей активности регуляторных Т-лимфоцитов па 3−5 сутки после введения препарата.

Исследование иммунореактивности на неродственные антигены проводили на мышах линии ВАЬВ/с, которым подкожно вводили серии препарата в дозе 10<�ло Тцд. о и ЧСрез 7 СуТ0К внутривенно вводили эритроциты барана. Установили, что через 4 суток после введения эритроцитов количество АОК на селезенку достоверно не отличалось для кош рольной и опытной групп животных, что свидетельствовало об отсутствии угнетающего действия препарата на иммунный ответ на гетерологичный антиген.

В серии экспериментов было изучено аллергизирующее действие и аутоиммунные реакции организма при введении препарата. При изучении возможных анафилактических реакций морских свинок инфицировали трехкратно с интервалом в одни сутки препаратом в дозе 109″ 5 ТЦД5(). Спустя 21 сутки после последней инъекции проводили разрешение животных исследуемым препаратом в дозе используемой для сенсибилизации. Препарат «Канцеролизин» не вызывал анафилактической реакции сравнимой с группой животных положительного контроля. Результаты этих исследований свидетельствовали о том, что инфицирование препаратом не приводит к сенсибилизации организма животных, проявление которой при повторной встрече с антигеном выражается в реакции ГНТ.

Возможность аллергизирующего влияния препарата на организм оценивали также по продукции реагиноподобных антител (^ Е) у двукратно подкожно инъецированных с интервалом 21 сутки мышей линии ВАЬВ/с. Титры реагиноподобных антител оценивали через 5, 12, 19, 26, 33 суток. Полученные данные показали, что у животных, инфицированных препаратом, титр реагиноподобных антител не превышает показатели контрольной группы на протяжении всего срока наблюдения, что говорит об отсутствии формирования аллергического состояния у животных, обработанных препаратом.

Для исследования косвенного сенсибилизирующего эффекта препарата использовали мышей линии ВАЬВ/с, которых иммунизировали овальбумином и через 11 суток вводили серии препарата в дозе Ю9,0 ТЦД50. На 7, 12, 17 и 22-е сутки после инфицирования у животных отбирали кровь и определяли в полученных образцах сыворотки титры антител к овальбумину методом ИФА. Установили, что у животных опытной группы не наблюдалось снижения титра антител к овальбумину после введения препарата (по сравнению с группой животных положительного контроля), что свидетельствовало об отсутствии ингибирующе-го действия препарата на гуморальный иммунный ответ при предварительной иммунизации модельным антигеном.

Оценку развития ГЗТ проводили по методике основанной на изменении массы конечности животных. С этой целыо мышам линии Ва1Ь/с подкожно вводили серии препарата в дозе Ю9,0 ТЦД50 и спустя 5 суток в подушечку лапки вводили 2хЮ8,0 ТЦД50 препарата. Умеренный отек конечности развивался только у тех животных, которые были предварительно сенсибилизированы препаратом, что свидетельствует о том, что физиологический уровень ГЗТ обусловлен аденовирусным антигеном.

Немаловажным при проведении доклинических испытаний является оценка специфической активности и эффективности разрабатываемого препарата. В связи с этим были проведены сравнительные эксперименты по определению ре-пликативной активности мутантного штамма Ас1е12, входящего в состав препарата «Канцеролизин» на опухолевых р53-дефекгных и нормальных р53-позитивных культурах клеток человека. Аденовирусный препарат обладает инфекционной активностью дикого типа аденовируса 5-го серотипа для комплементарных клеток 293 и р53-дефектных опухолевых клеток (А431, 8?480, Нер2, СЗЗА) и в тоже время имеет существенные ограничения по репликации в нормальных фибробластах кожи человека. Таким образом, аденовирусный препарат.

Канцеролизин" обладает селективной инфекционной активностью в отношении р53-дефектных опухолевых клеток человека.

В экспериментах на бестимусных nude мышах, при интратуморальном введении препарата «Канцеролизин» было показано выраженное ингибирование роста привитых р53-дефектных опухолей А431 (эпидермоидная карцинома человека).

Эффективное использование препарата «Канцеролизин» в медицинской практике связано с правильными условиями его хранения и транспортировки. В связи с этим необходимо было выбрать оптимальные условия для хранения и транспортирования препарата, позволяющие удерживать его специфическую активность в неизменном виде.

Как показали наши исследования, хранение препарата при температуре минус 20 °C приводит к значимому тысячекратному снижению специфической активности препарата уже через полгода хранения. При температуре хранения препарата минус 40 °C в течение года и минус 70 °C в течение двух лет не происходит снижения его специфической активности. Таким образом, препарат следует хранить при температуре минус 70 °C два года или при температуре минус 40 °C не более года.

В экспериментах, имитирующих транспортировку замороженного при минус 70 °C препарата «Канцеролизин» (3 ампулы с исходной активностью 9,5±0,51g ТЦДзо/мл) в термоконтейнере в условиях тающего льда термоэлементов в течение 8 часов, а также в морозильной камере при температуре минус 10 -13 ()С в течение 5 суток было показано, что транспортировка препарата без достоверного снижения его активности может быть осуществлена при температуре минус 10—13 °С в течение 5 суток. В тоже время нахождение препарата в условиях тающего льда термоэлементов сопровождалось значимым снижением его специфической активности в среднем на 1,2 lg за 8 часов.

1. Ашмарин И. П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л., 1962. 173 с.

2. Белицкий Г. А. Химический канцерогенез // Проблемы клинической медицины. 2006. № 1 (5). С. 10−15.

3. Борхсениус С. П., Чернова O.A. Микоплазмы: молекулярная и клеточная биология, патогенность, диагностика. Л.:Наука, 1989. 156 с.

4. Вардосанидзе К. В., Блинов В. М., Белявская В. А. и др. Соматические мутации в гене р53 у больных раком желудка // Вопросы онкологии. 2010. № 2. С. 156 161.

5. Вдовиченко Г. В., Петрищенко В. А, Сергеев A.A. и др. Доклинические исследования противоракового лечебного препарата «Канцеролизин» // Вопросы вирусологии. 2006. № 6. С.39−42.

6. Вдовиченко Г. В., Радаева И. Ф., Сергеев A.A. и др. Создание банков перевиваемой культуры клеток 293 для производства антиракового вирусного лечебного препарата «Канцеролизин» // Биотехнология. 2006. № 1. С.62−67.

7. Вирусология. Методы /Под ред. Б.Мейхи. М: «Мир», 1988. 384 с.

8. Вредные химические соединения. Неорганические соединения элементов IV групп. Справочник /Под ред. В. А. Филова. Л.: «Химия», 1988. 512 с.

9. Государственная фармакопея. XI издание. -М.: Медицина, 1990.

10. Государственные испытания и регистрация новых медицинских иммунобиологических препаратов: Санитарные правила.- М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1998.-127 с.

11. Доклинические испытания новых медицинских иммунологических препаратов. Основные положения. РД 42−28−8-89. М., 1989.

12. Злокачественные новообразования в России в 2009 году (заболеваемость и смертность) /Под ред. В. И. Чиссова, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. М.: ФГУ «МНИОИ им. П. А. Герцена Минздравсоцразвигия России», 2011. 260 с.

13. Ильина Т. В., Семенова Е. А., Проняева Т. Р. и др. Ингибирование обратной транскриптазы ВИЧ-1 арилзамещеными нафтои антрахинонами //Доклады Академии Наук. 2002. Т. 382, № 6. С. 829−832.

14. Имянитов E.H., Хансон К. П. Фундаментальная онкология: наиболее примечательные события 2004 года // Практическая онкология. 2005. Т.6, № 1. С. 1.

15. Качко A.B., Святченко В. А., Терновой В. А. и др. Варианты аденовируса типа 5 с делециями в ранних генах: способность к селективной репликации в р53-дефектных опухолевых клетках человека // Молекулярная биология клетки. 2003. Т.37, № 5. С.868−875.

16. Киселев C. J1. Современная генная терапия: что это такое и каковы ее перспективы? // Практическая онкология. 2003. Т.4, № 3. С. 167−174.

17. Колокольцова Т. Д. Создание аттестованных коллекций и банков культур клеток для научных исследований, производства препаратов, диагностики и лечения: дис. д-ра биол. наук: 03.00.23 / Колокольцова Т. Д. Щёлково, 2008.296 с.

18. Копнин Б. П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза // Биохимия. 2002. Т.65. С.5−33.

19. Копнин Б. П. Основные свойства неопластической клетки и базовые механизмы их возникновения // Российский онкологический сервер. 2001. URL: http://www.rosoncoweb.ru/libraiy/pub/01/index.htm (дата обращения 23.07.2009).

20. Кочнева Г. В., Сиволобова Г. Ф., Юдина К. В. и др. Онколитические поксви-русы // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2012. № 1. С.8−15.

21. Методические указания. Аттестации перевиваемых клеточных линий-субстратов производства и контроля медицинских иммунобиологических препаратов. ГИСК им. J1.A. Тарасевича РД -42−28−10−89, 1989. 33 с.

22. Методические указания. Аттестации перевиваемых клеточных линий-субстратов производства и контроля медицинских иммунобиологических препаратов. Москва. ФГБУ ГИСК им. Л. А. Тарасевича. МЗиСР РД -42−28−10−89, 2011.-33 с.

23. Методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов, вводимых людям: Методические указания 4.¼.2.588−96. М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1998. — 128 с.

24. Минздрав РФ. Госдоклад о состоянии здоровья населения в 1999 году.

25. Раджабли С. И., Крюкова Е. П. Сравнительный анализ дифференциальной окраски хромосом двух видов хомячков даурского и китайского // Цитология. 1973. Т. 15. №. 9. С. 1527−1531.

26. Рак // СМИ ВОЗ: Информационный бюллетень № 297. 2009. URL: http://www.who.int7mediacentre/factsheets/fs297/ru/index.html (дата обращения 29.09.10).

27. Рак // СМИ ВОЗ: Информационный бюллетень № 297. 2012. URL: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs297/ru/ (дата обращения 17.10.12).

28. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Хабриева Р. У. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. 832с.

29. Святченко В. А., Тарасова М. В., Нетесов С. В. и др. Онколитические аденовирусы в терапии злокачественных новообразований: современное состояние и перспективы // Молекулярная биология. 2012. Т. 46, № 4. С. 556−569.

30. Порядок контроля иммунологической безопасности вакцин. Общие методические принципы. РД 42−28−10−90. М., 1989.

31. Трапезников II. Н., Аксель Е. М. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ в 1996 г. М.: ОНЦ РАМН. 1997.

32. Тюляндин С. А. Основные причины злокачественных опухолей: перспективы ближайшего будущего // Российский онкологический сервер. 1999. URL: http://www.rosoncoweb.ru/congress/eu/ecco/01.htm (дата обращения: 24.07.2009).

33. Тюляндин С. А. Мишени лекарственной терапии будущего // Российский онкологический сервер. URL: http://www.rosoncoweb.ru/congress/ru/03/14.htm (дата обращения 03.06.2010.).

34. Хансон К. П., Имянитов Е. Н. Современные представления о канцерогенезе рака шейки матки //Практическая онкология. 2002. Т. З, № 3. С.145−155.

35. Чумаков П. М. Белок р53 и его универсальные функции в многоклеточном организме // Успехи биологической химии. 2007. Т.47. С.3−52.

36. Якубовская Р. И. Современные подходы к биотерапии рака // Российский биотерапевтический журнал. 2002. Т.1, № 3. С.5−14.

37. Abonour R., Williams D.A., Einhorn L. et al. Efficient retrovirus-mediated transfer of the multidrug resistance 1 gene into autologous human long-term repopulating hematopoietic stem cells // Nat. Med. 2000. V.6. P.652−658.

38. Agapova L.S., Ivanov A.V., Sablina A.A. et al. p53-dependent effects of RAS oncogene on chromosome stability and cell cycle checkpoints // Oncogene. 1999. V. 18. P. 3135−3142.

39. Agarwal M.L., Taylor W.R., Chernov M.V. et al. The p53 network // J.Biol.Chem. 1998. V. 273. P. 1−4.

40. Agarwal M.L., Agarwal A., Taylor W.R. et al. A p53-dependent S-phase checkpoint helps to protect cells from DNA damage in response to starvation for pyrimidine nucleotides // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. V. 95. P. 14 775−14 780.

41. Alemany R. Cancer selective adenoviruses // Mol. Aspects Med. 2007. V. 28. P. 42−58.

42. Altaner C. Prodrug cancer gene therapy // Cancer Letters. 2008. V. 270 (2). P. 191 -201.

43. American Type Culture Collection, Catalogue of cell lines and hybridomas, 6th edition, Washington, 1988. Cell repository lines CRL, ATCC CRL 1573.

44. Amundson S.A., Myers T.G. and Fornace A.J.Jr. Roles for p53 in growth arrest and apoptosis: putting on the brakes after genotoxic stress // Oncogene. 1998. V.17. P. 3287−3299.

45. Angioli R., Estape R., Mason M. et al. Hereditary and sporadic ovarian cancer: genetic testing and clinical implications//Int. J. Oncol. 1998. V. 12. P. 1029−1034.

46. Au T., Thorne S., Korn W.M. et al. Minimal hepatic toxicity of Onyx-O15: spatial restriction of coxsackie-adenoviral receptor in normal liver // Cancer Gene Ther. 2007. V. 14. P. 139−150.

47. Bateman A., Bullough F., Murphy S. et al. Fusogenicmembrane glycoproteins as a novel class of genes for the local andimmune-mediated control of tumor growth // Cancer Research. 2000. V. 60. P. 1492−1497.

48. Bauzon M., Castro D., Karr M. et al. Multigene expression from a replicating adenovirus using native viral promoters // Mol. Ther. 2003. V. 7. P.526−534.

49. Benedict C.A., Norris P. S., Prigozy T.I. et al. Three adenovirus E3 proteins cooperate to evade apoptosis by tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor-1 and -2 // J Biol. Chem. 2001. V.276. P.3270−3278.

50. Berk A.J. Adenoviridae. In: Fields Virologyeds. Knipe D.M. & Howley P.M. Philadelphia: Lippincott Williams&Wilkins, 2007. P. 2355−2394.

51. Bertwistle D. and Ashworth A. Functions of the BRCA1 and BRCA2 genes // Curr. Opin. Genet. Dev. 1998. V. 8. P. 14−20.

52. Bhat M.K., Yu C., Yap N. et al. The tumor suppressor p53 is a negative regulator in thyroidhormone receptor signaling pathways // J Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 28 989−28 993.

53. Bischoff J.R., Kirn D.H., Williams A. et al. An adenovirus mutant that replicates selectively in p53 deficient human tumor cells // Science. 1996. V. 274. P. 373−376.

54. Blackwood M.A. and Weber B.L. BRCA1 and BRCA2: from molecular genetics to clinical medicine//J. Clin. Oncol. 1998. V. 16. P. 1969;1977.

55. Bol S.A., van Steeg H., Jansen J.G. et al. Elevated frequencies of benzo (a)pyrene-induced Hprt mutations in internal tissue of XPA-deficient mice // Cancer Res. 1998. V. 58(13). P. 2850−2856.

56. Brunori M., Malerba M., Kashiwazaki H. et al. Replicating adenoviruses that target tumors with constitutive activation of the wnt signaling pathway // Journal of Virology. 2001. V. 75. P. 2857−2865.

57. Cahill D.P., Lengauer C., Yu J. et al. Mutations of mitotic checkpoint genes in human cancers // Nature. 1998. V. 392. P. 300−303.

58. Campbell R.B., Ying B., Kuesters G.M., Hemphill R. Fighting cancer: from the bench to bedside using second generation cationic liposomal therapeutics // J Phann Sci. 2009. V. 98(2). P.411−29.

59. Cassel W.A., Murray D.R. & Phillips M.S. A phase II study on the postsurgical management of stage II malignant melanoma with a Newcastle disease virus oncoly-sate // Cancer. 1983. V.52. P. 856−860.

60. Cerullo V., Pesonen S., Diaconu I. et al. Oncolytic Adenovirus Coding for Granulocyte Macrophage Colony-Stimulating Factor Induces Antitumoral Immunity in Cancer Patients // Cancer Res. 2010. V. 70. P. 4297−4309.

61. Chang F., Syrjanen S., Syrjanen K. Implications of p53 tumor suppressor gene in clinical oncology//J. Clin. Oncol. 1995. V. 13. P. 1009−1012.

62. Chase M., Chung R.Y. & Chiocca E.A. An oncolytic viral mutant that delivers the CYP2B1 transgene and augments cyclophosphamide chemotherapy // Nature Biotechnology. 1998 V.16. P. 444−448.

63. Chen L., Yu L.J. & Waxman D.J. Potentiation of cytochrome P450 cyclophosphamide-based cancer gene therapy by co-expression of the P450 reductase gene // Cancer Research. 1997. V. 57. P. 4830−4837.

64. Chou J., Kern E. R., Whitely R. et al. Mapping of herpes simplex virus neurovirulence to gamma 34.5, a gene nonessential for growth in culture // Science. 1990. V.250. P. 1262−1266.

65. Clarke L. & Waxman D.J. Oxidative metabolism of cyclophosphamide: identification of the hepatic monooxygenase catalysts of drug activation // Cancer Research. 1989. V. 49. P. 2344−2350.

66. Cleaver J.E. Defective repair replication of DNA in xeroderma pigmentosum // Nature. 1968. V.218. P.652−656.

67. Colombo M.P., Ferrari G., Stoppacciaro A. et al. Granulocyte colony-stimulating factor gene transfer supresses tumorigenicity of a murine adenocarcinoma in vivo // J. Exp. Med. 1991. V. 173(4). P. 889−897.

68. Crystal R.G., Mcelvaney N.G., Rosenfeld M.A. et al. Administration of an adenovirus containing the human CFTR cDNA to the respiratory tract of individuals with cystic fibrosis // Nat. Genet. 1994. V. 8. P. 42−51.

69. Crompton A.M., Kirn D.II. From ONYX-O15 to armed vaccinia viruses: the education and evolution of oncolytic virus development // Curr. Cancer Drug’Targets. 2007. V. 7. P.133−139.

70. Di Leonardo A., Linke S.P., Clarkin K. et al. DNA damage triggers a prolonged p53-dependent G1 arrest and long-term induction of Cipl in normal human fibroblasts // Genes Dev. 1994. V. 8. P. 2540−2551.

71. Doronin K., Kuppuswamy M., Toth K. et al. Tissue-specific, tumor-selective, replication-competent adenovirus vector for cancer gene therapy // Journal of Virology. 2001. V. 75. P. 3314−3324.

72. Elledge S.J. Cell cycle checkpoints: preventing an identity crisis // Science. 1996. V. 274. P. 1664−1672.

73. Freytag S.O., Strieker H., Peabody J. et al. Five-year follow-up of trial of replication-competent adenovirus-mediated suicide gene therapy for treatment of prostate cancer//Mol. Ther. 2007. V. 15. P. 636−642.

74. Freytag S.O., Khil M., Strieker H. et al. Phase I study of replication-competent adenovirus-mediated double suicide gene therapy for the treatment of locally recurrent prostate cancer // Cancer Res. 2002. V. 62. P. 4968−4976.

75. Forni G., Parmiani G., Guarini A. et al. Gene transfer in tumor therapy // Ann. Oncol. 1994. V. 5. P. 789−794.

76. Fujiwara T., Grimm E.A., Mukhopadhyay T. et al. Induction of chemosensitivi-ty in human lung cancer cells in vivo by adenovirus-mediated transfer of the wild-type p53 gene // Cancer.Res. 1994. V. 54. P.2287−2291.

77. Fukasawa K., Choi T., Kuriyama R. et al. Abnormal centrosome amplification in the absence ofp53 // Science. 1996. V. 271. P. 1744−1747.

78. Fukasawa K., Wiener F., Woud G.F.V. et al. Genomic instability and apoptosis are frequent in p53 deficient young mice // Oncogene. 1997. V. 15. P. 1295−1302.

79. Garber K. China approves world’s first oncolytic virus therapy for cancer treatment // J. Natl. Cancer Inst. 2006. V. 98. P. 298−300.

80. Galanis E., Bateman A., Johnson K. et al. Use of viral fusogenic membrane gly-coproteinsas novel therapeutic transgenes in gliomas // Human Gene Therapy. 2001. V. 12. P. 811−821.

81. Galanis E., Abbruzzese J., Sze D. et al. Hepatic arterial infusion of a replication-selective oncolytic adenovirus (dl 1520): phase II viral, immunologic, and clinical endpoints // Cancer Res. 2002. V. 62. P. 6070−6079.

82. Gallardo D., Drazan K.E., McBride W.H. Adenovirus-based transfer of wildtype p53 gene increases ovarian tumor radiosensitivity // Cancer Res. 1996. V. 56. P.4891−4893.

83. Graham F.L., Smiley J., Russell W.C. at al. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5 // J. Gen. Virol. 1977. V.36. P. 59−72.

84. Graham F.L., Harrison T., Williams J. et al. Defective transforming capacity of adenovirus type 5 host-range mutants // Virology. 1978. V. 86. P. 10−21.

85. Giaccia A.J. and Kastan M.B. The complexity of p53 modulation: Emerging patterns from divergent signals // Genes Dev. 1998. V.12. P. 2973−2983.

86. Gooding L.R. Regulation of TNF-mediated cell death and inflammation by human adenoviruses // Infect. Agents Dis. 1994. V. 3. P.106−115.

87. Golumbek P.T., Lazenby A.J., Levitsky H.I. et al. Treatment of established renal cancer by tumor cells engineered to secrete interleukin-4 // Science. 1991. V. 254 (5032). P. 713−716.

88. Gromeier M., Lachmann S., Rosenfield M.R. et al. Intergenic poliovirus recombinants for the treatment ofmalignant glioma // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 2000. V. 97. P.6803−6808.

89. Grote D., Russell S.J., Corni T.I. et al. Live attenuated measles virus induces regression of human lymphoma xenografts in immunodeficient mice // Blood. 2001. V.97. P. 3746−3754.

90. Hackett N.R., Crystal R.G. Adenovirus vectors for gene therapy. In: Templeton NS, Lasic DD, eds. Gene Therapy. New York: Marcel Dekker, 2000. P. 17−39.

91. Hallenbeck P.L., Chang Y.-N., Hay C. et al. A novel tumor-specific replication restricted adenoviral vector for gene therapy of hepatocellular carcinoma // Human Gene Therapy. 1999. V. 10. P. 1721−1733.

92. Harrach B., Benko M., Both G.W. et al. Adenoviridae. In: Virus taxonomy: classification and nomenclature of viruseseds. King A.M.Q., Adams M.J., Carstens E.B. & Lefkowitz E.J. San Diego: Elsevier Academic Press, 2011.

93. Harris C.C. Structure and function of the p53 tumor supressor gene: clues for rational cancer therapeutic strategies // Cancer. Inst. 1996. V. 88. P. 1442−1455.

94. Harvey M., Sands A.T., Weiss R.S. et al. In vitro growth characteristics of embryo fibroblasts isolated from p53-deficient mice // Oncogene. 1993. V.8. P. 24 572 467.

95. Heise C., Ganly I., Kim Y.T. et al. Efficacy of a replication-selective adenovirus against ovarian carcinomatosis is dependent on tumor burden, viral replication and p53 status//Gene Ther. 2000. V.7. P. 1925;1929.

96. Hermiston T.W., Kuhn I. Armed therapeutic viruses: strategies and challenges to arming oncolytic viruses with therapeutic genes // Cancer Gene Ther. 2002. V.9. P.1022−1035.

97. Hollstein M., Sidransky D., Vogelstein B. et al. p53 mutations in human cancers // Science. 1991. V.253. P. 49−53.

98. Jiang G., Xin Y., Zheng J.-N. et al. Combining conditionally replicating adenovirus-mediated genetherapy with chemotherapy: a novel antitumor approach // Int.J.Cancer. 2011. V. 129. P. 263−274.

99. Jia II., Kling J. China offers alternative gateway for experimental drugs // Nat. Biotechnol. 2006. V. 24. P. 117−118.

100. Jia W.W., McDermott M., Goldie J. et al. Selective destruction of gliomas in immunocompetent rats by thymidine kinase-defective herpes simplex virus type I // Journal of the National Cancer Institute. 1994. V. 86. P. 1209−1215.

101. Katayose D., Gudas J., Nguyen I. IL et al. Cytotoxic effects of adenovirus-mediated wild-type p53 protein expression in normal and tumor mammary epithelial cells//Clin. Cancer Res. 1995. V. 1. P. 889−897.

102. Kelly E. and Russell S.J. History of oncolitic viruses: genesis to genetic engineering // Molecular Therapy. 2007. V. 15 (4). P. 651−659.

103. Khan S.H. and Wahl G.M. p53 and pRb Prevent Rereplication in Response to Microtubule Inhibitors by Mediating a Reversible G1 Arrest // Cancer Res. 1998. V. 58. P. 396−401.

104. Kirn D., Thorne S. Targeted and armed oncolytic poxviruses: a novel multi-mechanistic therapeutic class for cancer // Nature reviews. Cancer. 2009. V. 9(1). P. 64−71.

105. Ko L.J. and Prives C. p53: puzzle and paradigm // Genes Dev. 1996. V. 10. P. 1054−1072.

106. Kolodner R. Biochemistry and genetics of eukaryotic mismatch repair // Genes Dev. 1996. V. 10. P. 1433−1442.

107. Kurihara T., Brough D.E., Kovesdi I. et al. Selectivity of a replication-competent adenovirus for human breast carcinoma cells expressing the MUC1 antigen // Journal of Clinical Investigation. 2000. V. 106. P. 763−771.

108. Lanni J.S. and Jacks T. Characterization of the p53 dependent postmitotic checkpoint following spindle disruption // Mol. Cell. Biol. 1998. V. 18. P. 10 551 064.

109. Lee J.M., Abrahamson L.A., Kandel R. et al. Susceptibility to radiation-carcinogenesis and accumulation of chromosomal breakage in p53 deficient mice // Oncogene. 1994. V. 9. P. 3731−3736.

110. Lengauer C., Kinzler K.W. and Vogelstein B. Genetic instabilities in human cancers // Nature. 1998. V. 396. P. 643−649.

111. Levine A.J. p53, the cellular gatekeeper for growth and division // Cell. 1997. V. 88. P. 323−331.

112. Linke S.P., Clarkin K., Di Leonardo A. et al. A reversible, p53-dependent G0/G1 cell cycle arrest induced by ribonucleotide depletion in the absence of detectable DNA damage // Genes Dev. 1996. V. 10. P. 934−947.

113. Linke S.P., Harris M.P., Neugebauer S. et al. p53-mediated accumulation of hypophosphorylated pRb after the G1 restriction point fails to halt cell cycle progression // Oncogene. 1997. V.15. P. 337−345.

114. Livingstone L.R., White A., Sprouse J. et al. Altered cell cycle arrest and gene amplification potential accompany loss of wild-type p53 // Cell. 1992. V. 70. P. 923 935.

115. Lowe S.W., Bodis S., McClatchey A. et al. p53 status and the efficacy of cancer therapy in vivo // Science. 1994. V. 266. P. 807−810.

116. Lu W., Zheng S., Li X.F. et al. Intra-tumor injection of H101, a recombinant adenovirus, in combination with chemotherapy in patients with advanced cancers: a pilot phase II clinical trial // World J. Gastroenterol. 2004. V. 10. P. 3634−3638.

117. Lynch H.T., Fusaro R.M. and Lynch J.F. Cancer genetics in the new era of molecular biology // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1997. V. 833. P. 1 -28.

118. Lubin R., Zalcman G., Bouchet L. et al. Serum p53 antibodies as early markers of lung cancer // Nat. Med. 1995. V. 1. P. 701 -702.

119. Marmorstein L.Y., Ouchi T. and Aaronson S.A. The BRCA2 gene product functionally interacts with p53 and RAD51 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. V.95. P. 13 869−13 874.

120. Martinez-Salas E., Ramos R., Lafuente E. et al. Functional interactions in internal translation initiation directed by viral and cellular IRES elements // Journal of General Virology. 2001. V. 82. P.973−984.

121. Martuza R., Malick A. & Markert J.M. Experimental therapy of human gliomas by means of a genetically-engineered virus mutant // Science. 1991. V. 252. P. 854 855.

122. Marbert J. M., Malick A., Coen D. M. et al. Reduction and elimination of encephalitis in an experimental glioma therapy model with attenuated herpes simplex mutants that retain susceptibility to acyclovir // Neurosurgery. 1993. V.35. P. 597−603.

123. Mineta T., Rabkin S. D. & Martuza R. L. Treatment of malignant gliomas using ganciclovir hypersensitive ribonucleotide reductase deficient herpes simplex virus mutant // Cancer Research. 1994. V. 54. P. 3963−3966.

124. Miyatake S.-I., Tani S., Feigenbaum F., et al. Hepatoma-specifc anti-tumor activity of an albumin enhancer promoter regulated herpes simplex virus in vivo // Gene Therapy. 1999. V.6. P. 564−572.

125. Mullen J.T., Tanabe K.K. Viral oncolysis // Oncologist. 2002. V.7. P.106−119.

126. Murakami H. and Okayama H. Cell cycle checkpoint control // Exp. Mol. Med. 1997. V. 29. P. 1−11.

127. Murray A.W. The genetics of cell cycle checkpoints // Curr. Opin. Genet. Dev. 1995. V.5. P. 5−11.

128. Nemunaitis J., Khuri F., Ganly I. et al. Phase II trial of intratumoral administration of ONYX-O15, a replication-selective adenovirus, in patients with refractory head and neck cancer// J Clin. Oncol. 2001. V.19. P.289−298.

129. Nemunaitis J., Swisher S.G., Timmons T. et al. Adenovirus-mediated p53 gene transfer in sequence with cisplatin to tumors of patients with non-small-cell lung cancer//J. Clin. Oncol. 2000. V.18. P. 609−622.

130. Nokisalmi P., Pesonen S., Escutenaire S. ct al. Clinical data from cancer patients treated with triple modified oncolytic adenovirus Ad5/3-Cox2L-D24 // Human Gene Ther. 2008. V. 19. P. 1076.

131. Nokisalmi P., Pesonen S., Escutenaire S. et al. Oncolytic Adenovirus ICOV1R-7 in Patients with Advanced and Refractory Solid Tumors // Clin. Cancer. Res. 2010. V. 16. P. 3035−3043.

132. Orr-Weaver T.L. and Weinberg R.A. A checkpoint on the road to cancer // Nature. 1998. V. 392. P. 223−224.

133. Ouchi T., Monteiro A.N.A., August A. et al. BRCA1 regulates p53-dependent gene expression // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. V. 95. P. 2302−2306.

134. Paulovich A.G., Toczyski D.P. and Hartwell L.H. When checkpoints fail // Cell. 1997. V. 88. P. 315−322.

135. Pawlik T.M., Nakamura H., Yoon S.S. et al. Oncolysis of diffuse hepatocellular carcinoma by intravascular administration of a replication competent, genetically engineered herpesvirus // Cancer Research. 2000. V. 60. P.2790−2795.

136. Peng Z. Current status of gendicine in China: recombinant human Ad-p53 agent for treatment of cancers // Hum. Gene Ther. 2005. V.16. P. 1016−1027.

137. Pesonen S., Helin H., Nokisalmi P. et al. Oncolytic adenovirus treatment of a patient with refractory neuroblastoma // Acta Oncol. 2010. V. 49. P. 120−122.

138. Pesonen S., Nokisalmi P., Escutenaire S. et al. Prolonged systemic circulation of chimeric oncolytic adenovirus Ad5/3-Cox2LD24 in patients with metastatic and refractory solid tumors // Gene Ther. 2010. V. 17. P. 892−904.

139. Pirollo K.F., Hao Z., Rait A. et al. p53 mediated sensitization of squamous cell carcinoma of the head and neck to radiotherapy // Oncogene. 1997. V. 14. P. 17 351 746.

140. Prives C. Signalling to p53: breaking the p53: Mdm2 circuit // Cell. 1998. V.95. P. 5−8.

141. Prives C. How loops, P sheets, and a2 helices help us to understand p53 // Cell. 1994. V.78. P. 543−546.

142. Pruckler J.M., Pruckler J.M., Ades E.W. Detection by polymerase chain reaction of all common mycoplasma in a cell culture facility // Pathobiology. 1995. V.63. P. 9−11.

143. Ponder B.A.J. Cancer genetics // Nature. 2001. V.411. P.336−34.

144. Rheinwald J., Green I I. Serial cultivation of strains of human epidermal kerati-nocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells // Cell. 1975. V. 6. P.331−343.

145. Ring C.J.A. Cytolytic viruses as potential anti-cancer agents // Journal of General Virology. 2002. V.83. P. 491−502.

146. Rodriguez R., Schuur E.R., Yeong Lim H. et al. Prostate attenuated replication competent adenovirus (ARCA) CN706: a selective cytotoxic for prostate-specific antigen-positive prostate cancer cells. Cancer Research. 1997. V.57. P.2559−2563.

147. Rosenberg S.A., Yanneli J.R., Yang J.C. et al. Treatment of patients with metastatic melanoma with autologous tumor-infiltrating lymphocytes and interleukin 2 //J. Natl. Cancer. Inst. 1994. V. 86. P. 1159−1166.

148. Russell W.C. Update on adenovirus and its vectors // J. Gen.Virol. 2000. V. 81. P. 2573−2604.

149. Sablina A., Ilyinskaya G., Rubtsova S. et al. Activation of p53-mediated cell cycle checkpoint in response to micronuclei formation. // J. Cell Science. 1998. V. 111. P. 977−984.

150. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, 1989. V. 1 3.

151. Seino K.I., Kayagaki N., Okumura K. et al. Antitumor effect of locally produced CD95 ligand//Nature Med. 1997. V. 3. P. 165−170.

152. Seth P. Vectors for cancer gene therapy In: Gene therapy in the treatment of cancer: Past accomplishments and future prospectseds. Huber B.E. and Magrath I. Cambridge: Cambridge University Press, 1998. P.41−77.

153. Seth P., Katayose D., Li Z. et al. A recombinant adenovirus expressing wild type p53 induces apoptosis in drug-resistant human breast cancer cells: A gene therapy approach for drug-resistant cancers // Cancer Gene Ther. 1997. V. 4. P.383−390.

154. Sherr C.J. Cancer cell cycles // Science. 1996. V. 274. P. 1672−1677.

155. Shinoura N., Yoshida Y., Tsunoda R. et al. Highly attenuated cytopathic effect of a fiber-mutant EIB-defective adenovirus for gene therapy of gliomas // Cancer Research. 1999. V. 59. P. 3411−3416.

156. Shirakawa T. The current status of adenovirus-based cancer gene therapy // Mol. Cells. 2008. V. 25. P. 462−466.

157. Springer C.J., Niculescu-Duvaz I. Prodrug-activating systems in suicide gene therapy//J Clin. Invest. 2000. V.105.P. 1161−1167.

158. Stojdl D.F., Lichty B., Knowles S. et al. Exploiting tumor-specific defects in the interferon pathway with a previously unknown oncolytic virus // Nature Medicine. 2000. V. 6. P. 821−825.

159. Strong J.E., Coffey M.C., Tang D. et al. The molecular basis of viral oncolysis: usurpation of the Ras signaling pathway by reovirus // EMBO Journal. 1998. V.12. P. 3351−3362.

160. Stubdal I I., Perin N., Lemmon M. et al. A prodrug strategy using ONYX-O15-based replicating adenoviruses to deliver rabbit carboxylesterase to tumor cells for conversion of CPT-11 to SN-38 // Cancer Res. 2003. V.63. P. 6900−6908.

161. Sze D.Y., Freeman S.M., Slonim S.M. et al. Young Investigator Award: intraarterial adenovirus for metastatic gastrointestinal cancer: activity, radiographic response, and survival // J. Vase. Interv. Radiol. 2003. V. 14. P. 279−290.

162. Taylor W.R., Agarwal M., Agarwal A. et al. P53 inhibits entry into mitosis when DNA synthesis is blocked // Oncogene. 1999. V. 18. P. 283−295.

163. Teng M.N., Park B.N., Koeppen K.W. et al. Long-term inhibition of tumor growth by tumor necrosis factor in the absence of cachexia or T-cell immunity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. V. 88. P. 3535−3539.

164. Tepper R.I., Pattengale P.K., Leder P. Murine interleukin-4 displays potent antitumor activity in vivo // Cell. 1989. V.57. P. 503−512.

165. Todo T., Rabkin S.D., Sundaresan P. et al. Systemic antitumor immunity in experimental brain tumor therapy using a multimutated, replication-competent herpes simplex virus // Hum Gene Ther. 1999. V.10. P. 2741−2755.

166. Toth K. and Wold William S.M. Increasing the Efficacy of Oncolytic Adenovirus Vectors // Viruses. 2010. V.2. P. 1844−1866.

167. Tollefson A., Scaria A., Hermiston T.W. et al. The adenovirus death protein (E3−11±6K) is required at late stages of infection for efficient lysis and release of adenovirus from infected cells // Journal of Virology. 1996. V. 70. P. 2296−2306.

168. Tollefson A.E., Ryerse J.S., Scaria A. et al. The E3−11.6-kDa adenovirus death protein (ADP) is required for efficient cell death: characterization of cells infected with adp mutants // Virology. 1996. V. 220. P. 152−162.

169. Triozzi P.L., Allen K.O., Carlisle R.R. et al. Phase I Study of the Intratumoral Administration of Recombinant Canarypox Viruses Expressing B7.1 and Interleukin 12 in Patients with Metastatic Melanoma // Clin. Cancer Res. 2005. V. 11. P.4168.

170. Qing He, Yang Liu, Qing Zou et al. Transarterial injection of H101 in combination with chemoembolization overcomes recurrent hepatocellular carcinoma // World J. Gastroenterol. 2011. V. 17(18). P. 2353−2355.

171. Qin Z. and Blankenstein T. Tumor growth inhibition mediated by lymphotoxin: evidence of B lymphocyte involvementin the antitumor response // Cancer Res. 1995. V. 55. P. 4747−4751.

172. Reid T., Galanis E., Abbruzzese J. et al. Intra-arterial administration of a replication-selective adenovirus (dl 1520) in patients with colorectal carcinoma metastatic to the liver: a phase I trial // Gene Ther. 2001. V. 8. P. 1618−1626.

173. Reid T.R., Freeman S., Post L. et al. Effects of Onyx-O15 among metastatic colorectal cancer patients that have failed prior treatment with 5-FU/leucovorin // Cancer Gene Ther. 2005. V. 12. P. 673−681.

174. Requirements for the use of animal cells as in vitro substrates for the production of biologicals (Requirements for Biological Substances №.50). World Health Organization Technical Report Series, № 878, 1998. 57 p.

175. Ring C.J.A. Adenovirus vectors In Gene Therapy: Oxford: Bios Scientific Publisherseds. N. R. Lemoine & D. N. Cooper: 1996. P. 61−76.

176. Rommelaere J. & Tattershall P. Oncosuppression by parvoviruses: In Handbook of Parvoviruseseds. P. Tijssen. Boca Raton, FL: CRC Press, 1990. P. 41−57.

177. Rudner A.D. and Murray A.W. The spindle assembly checkpoint // Curr. Opin. Cell Biol. 1996. V.8. P. 773−80.

178. Vaillancourt M.T., Atencio I., Quijano E. et al. Inefficient killing of quiescent human epithelial cells by replicating adenoviruses: potential implications for their use as oncolytic agents // Cancer Gene Ther. 2005. V.12. P. 691−698.

179. Vattemi E. and Claudio P.P. Adenoviral gene therapy in head and neck cancer // Drug News Perspect. 2006. V.19. P. 329−337.

180. Vogelstein B., Kinzler W.K. X-rayes strike p53 again // Nature. 1994. V.370. P. 174−175.

181. Volpert OV, Stellmach V, Bouck N. The modulation of thrombospondin and other naturally occurring inhibitors of angiogenesis during tumor progression // Breast Cancer Res. Treat. 1995. V. 36. P. l 19−126.

182. Vorburger S.A. & Hunt K.K. Adenoviral gene therapy // The Oncologist. 2002. V.7. P. 46−59.

183. Wang H., Prasad G., Buolamwini J.K. et al. Antisense anticancer oligonucleotide therapeutics // Curr Cancer Drug Targets. 2001. V. l (3). P. 177−196.

184. Wang Q., Zhang H., Kajino K. et al. BRCA1 binds c-Myc and inhibits its transcriptional and transforming activity in cells // Oncogene. 1998. V. 17. P. 19 391 948.

185. Waterman J.L., Shenk J.L., Halazonetis T.D. The dihedral symmetry of the p53 tetramerization domain mandates a conformational switch upon DNA binding // EMBOJ. 1995. V.14. P. 512−519.

186. Weber J.S., Jeffery G., Marty V. et al. A phase I trial of GPlOO/tyrosinase peptide-pulsed dendritic cells for metastatic melanoma Abstract 1664. American Society of Clinical Oncology 35th Annual Meeting, Atlanta, 1999.

187. Wei M.X., Tamiya T., Chase M. et al. Experimental tumor therapy in mice with the cyclophosphamideactivating cytochrome P450 2B1 // Human Gene Therapy. 1994. V. 5. P. 969−978.

188. Wildner O. & Morris J.C. The role of E1B 55 kDa gene product in oncolytic adenoviral vectors expressing herpes simplex virus tk: assessment of antitumor efficacy and toxicity // Cancer Research. 2000. V. 60. P.4167−4174.

189. Wildner O. & Morris J.C. Therapy of peritoneal carcinomatosis from colon cancer with oncolytic adenoviruses // Journal of Gene Medicine. 2000. V. 2. P.353−360.

190. Yin Y., Tainsky M.A., Bishoff F.Z. Wild-type p53 restores cell cycle control and inhibits gene amplification in cells with mutant p53 alleles // Cell. 1992. V.70 (6). P. 937−948.

191. Yu D.-C., Chen Y., Seng M. et al. The addition of adenovirus type 5 region E3 enables calydon virus 787 to eliminate distant prostate tumor xenografts // Cancer Research. 1999. V. 59. P.4200−4203.

192. Yu W., Fang H. Clinical trials with oncolytic adenovirus in China // Current Cancer Drug Targets. 2007. V. 7. P. 141−148.

193. Zabng J.Y. Apoptosis-bsed anticancer drugs // Nat.Rev.Drag.Discov. 2002. V. 1(2). P. 101−102.

194. Zauberman A., Lubp A., Oren M. Identification of p53 target genes through immune selection of genomic DNA: The cyclin G gene contains two distinct p52 binding sites // Oncogene. 1995. V. 10. P. 2361 -2366.

195. Zhang H., Tombline G. and Weber B.L. BRCA1, BRCA2, and DNA Damage Response: Collision or Collusion? // Cell. 1998. V. 92. P. 433−436.

196. Zhang H., Somasundaram K., Peng Y. et al. BRCA1 physically associates with p53 and stimulates its transcriptional activity // Oncogene. 1998. V. 16. P. 1713−1721.

197. Zhang L., Kashnachi F., Zhan Q. et al. Regulation of insulin like growth factor II P3 promoter activity by p53: A potential mechanism for tumorigenesis // Cancer Res. 1996. V.56. P. 1367−1373.

198. Zhang L., Zhan Q., Zhan S. et al. Regulation of human insulin-like growth factor-II P4 promoter by p53 //DNA Cell Biol. 1998. V. 17. P. 125−131.