Дипломы, курсовые, рефераты, контрольные...
Срочная помощь в учёбе

Иммунологические и цитологические показатели вакцинированных подсвинков, трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека

Диссертация: Иммунологические и цитологические показатели вакцинированных подсвинков, трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Титр антител к бактериальным антигенам у трансгенных животных во все периоды эксперимента были выше по сравнению с контролем. До иммунизации разница между группами по титру антител к Proteus составила 30%- к Salmonella -35,4% (р>0,01) — к Klebsiella — 46,3% (р>0,05) — к E. Coli — 21,2%- через 14 дней после иммунизации разница соответственно составила: 57,2% (р>0,01) — 45,5% (р>0,05) — 50,6… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Перспективы биотехнологии
    • 1. 2. Общая характеристика трансгенных по рилизинг-фактору 9 СТГ человека свиней 4 поколения
    • 1. 3. Нейро — гормональная регуляция иммунитета
    • 1. 4. Воздействие стресса на показатели иммунитета
    • 1. 5. Иммунная реактивность свиней. 17 1.5.1 Некоторые особенности иммунной реактивности
      • 1. 5. 2. Взаимосвязь иммунной реактивности с развитием 18 кроветворно — лимфоидной системы
      • 1. 5. 3. Взаимодействие клеток в иммунном ответе
      • 1. 5. 4. Особенности противобактериального и противовирусного 22 иммунитета
    • 1. 6. Гистологическая картина иммунного ответа в 25 лимфоидных органах
    • 1. 7. Ядрышковый организатор (ЯОР) и его значение
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 32 2.1. Молекулярно-генетический анализ животных на трансгенность и наличие точкозой мутации в гене РУР
    • 2. 1. 1. Отбор проб и экстракция ДНК из ткани
    • 2. 1. 2. Параметры ПЦР-анализа для определения присутствия 34 рекомбинантной генной конструкции в геноме тМТ1-ЬСКР и наличие точковой мутации в гене
    • 2. 2. Определение уровня Экспрессии гена гормона роста 35 свиней иммуноферментным анализом
    • 2. 3. Приготовление сыворотки для исследований 35 2.4. Определение неспецифических и специфических факторов защиты организма
    • 2. 4. 1. Исследование уровня им^укоглобулинов О и М
    • 2. 4. 2. Определение уровней лнзоцимной и бактерицидной 36 активности
    • 2. 4. 3. Определение уровня антител к возбудителям бактериальных и виру болезней
    • 2. 4. 4. Приготовление мазков и подсчет лейкограммы
    • 2. 5. Цитологический анализ подопытных групп
    • 2. 5. 1. Отбор проб для постановки культур клеток 37 периферической крови и тканей
    • 2. 5. 2. Постановка клеточной культуры для получения 38 цитологических препаратов хромосом
    • 2. 5. 3. Приготовление цитологических препаратов
    • 2. 5. 4. Окрашивание и методика подсчета уровня ЯОР
    • 2. 5. 5. Методика морфометрии ядрышек
    • 2. 6. Анализ клеточных культур из тканей
    • 2. 6. 1. Приготовление и окрашивание препаратов клеточных 40 культур
    • 2. 6. 2. Методика описания ,.нр Оологии культур клеток
    • 2. 7. Гистологический анализ лимфоидных органов
    • 2. 7. 1. Взятие проб, фиксация и приготовление гистологических 40 препаратов
    • 2. 7. 2. Гистохимическое окрашивание
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 3. 1. Трансгенностьи стрессустойчивость в группах
    • 3. 2. Концентрация гормона роста свиней в подопытных 44 группах
    • 3. 3. Показатели естественной резистентности при вирусной и 46 бактериальной вакцинации
      • 3. 3. 1. Уровни иммуноглобулинов С и М, бактерицидной и лизоцимной активности
      • 3. 3. 2. Титры антител к возбудителям
      • 3. 3. 3. Лейкограммы подог.. .-кивотных
    • 3. 4. Характеристика клеточных культур трансгенного и 53 контрольного подсвинков
    • 3. 5. Характеристика активности ядрышковых организаторов
    • 3. 6. Гистологическая картина иммунной реактивности 62 лимфоидных органа^ .^гюгенного и контрольного подсвинков после иммунизации

Иммунологические и цитологические показатели вакцинированных подсвинков, трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Развитие биотехнологии и успешные работы по получению трансгенных животных выдвинули на первый план вопрос о взаимодействии экзогенных конструкций с геномом реципиентов, в том числе с наследственными системами, контролирующими иммунитет.

Изучение данной проблемы представляет несомненный интерес, так как с помощью генной инженерии е.: ловится возможным создание линий трансгенных сельскохозяйственных животных, генетически устойчивых к различного рода заболеваниям (67.117,126,127,136). Ведутся интенсивные работы по получению животных, органы и ткани которых можно будет использовать для ксенотрасплантации человеку (?3). Одновременно, широко развивается использование трансформированы/, культур клеток в биотехнологии (26,48,59).

Генетические исследования ряда лабораторий мира показали дестабилизирующее действие чужеродных генов на состояние хромосомного аппарата и появление, связанных с этим, генных мутаций (38,119). Возможно, что экзогенная конструкция в резу: — т^ синтеза чужеродного продукта и мутагенным взаимодействием прямо или опосредованно влияет на состояние иммунной системы трансгенных животных.

Совместными усилиями российских и немецких ученых в ВИЖе были получены свиньи, трансгенные по конструкции тМТ1- ГЮ!^. Рекомбинантная генная конструкция ппМТ1-!1С[ЧР содержит структурную часть рилизинг фактора гена гормона роста человека (ИСКР) и металлотионеиновый промотор 1 мыши (тМТ1). В ряде предыдущих исследований по проблеме «Генноинженерные животные «было начато изучение хозяйственно-полезных, физиолого-биохимических параметров и иммунного статуса этих транс, 1 озиней. Дальнейшее изучение этих животных выдвинуло на первый план необходимость определения у них особенностей гуморального иммунитета и состояния генома в норме и при повышенной иммунной нагрузке.

Наиболее важными показателями, характеризующими естественную резистентность являются бактерицидная, лизоцимная активность сыворотки крови, титр нормальных и поствакцинальных антител, морфологический состав крови, уровень иммуноглобулинов 1д М и ¡-д е (54).

Цели и задачи исследований Цель исследований — изучить особенности иммунного статуса и некоторые цито — и гистологические характеристик, нсгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека (mMT1-hGRF) подсвинков до и после вакцинации бактериальными и вирусными вакцинами. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Протестировать все группы подсвинков на трансгенность по mMT1-hGRF и стрессчувствительность (MHS — тест);

2. Изучить активность иммунной системы у трансгенных и контрольных подсвинков до и после вакцинации;

3. Изучить динамику концентрации эндогенного соматотропина (СТГ) и зависимость титров антител от уровня с", ^ группах животных (до и после иммунизации вакциной ОКЗ);

4. Изучить активность ядрышковых организаторов (ЯОР) свиней в норме и при повышенной иммунной нагрузке (после иммунизации вакциной с вирусными антигенами);

5. Сравнить морфологию культур клеток внутренних органов и активность ядрышковых организаторов (ЯОР) в этих культурах и крови, полученных от иммунизированных трансгенного и контрольного животных;

6. Провести гистологическое сравнение картины иммунологической реактивности в лимфоидных органах от живо, двух групп и от невакцинированного животного.

Научна, новизна работы Впервые изучены особенности иммунного статуса, показатели ядрышковых организаторов культур клею, ленных свиней, с интегрированной в геном конструкцией рилизинг — фактора гормона роста человека (hGRF) до и после иммунизации поливалентными бактериальной и вирусной вакцинами, показавшие определенные различия в иммунных и цитологических (ЯОР) характеристиках трансгенных животных от нэтрансгенных до и после иммунизации, а также различие показателей ядрышковых орга.,.,.: торов в различных тканях исследуемых животных.

Практическая значимость работы В результате проведенных • чентов у трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека подсвинков были определены показатели естественного иммунитета, активность ядрышковых организаторов до и после иммунизации бактериальными и вирусными поливакцинами, дано культурально морфологическое сравнение, п клеток внутренних органов от трансгенного и контрольного животных и активности ядрышковых организаторов в этих культурах, описаны иммунологические изменения в лимфоидных органах после иммунизации животных.

Пологэния, выносимые на защиту Иммунологические особенности и сравнение концентраций эндогенного гормона роста у подсвинков, трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека до и после иммунизаций вакцинами против бактериальных и вирусных болезней. Уровень активности ядрышковых организаторов (ЯОР) в группах до и после иммунизаци.- вакцине эржащей вирусные антигены. Особенности активности ядрышковых организаторов в клетках внутренних органов трансгенного и контрольного животных после иммунизации вакциной, содержащей вирусные антигены. Гистологическая картина иммунного ответа в лимфоидных органах трансгенного и контрольного ¦ ь: х после иммунизации вакциной, содержащей вирусные антигены.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на заседании отдела биотехнологии ВИЖа и научной конференции ВИЖз «Достижения молодых ученых в области животноводства» (. онь 2000 г. —.. лериалам диссертации опубликовано 2 статьи.

Структура л объем работы Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, обсуждения .-•.ных результатов, выводов, практических.

ВЫВОДЫ.

1. Установлено, что иммунная реактивность и цитологические показатели трансгенных животных на бактериальные и вирусные антигены отличаются от аналогичных показателей контрольных.

2.Титр антител к бактериальным антигенам у трансгенных животных во все периоды эксперимента были выше по сравнению с контролем. До иммунизации разница между группами по титру антител к Proteus составила 30%- к Salmonella -35,4% (р>0,01) — к Klebsiella — 46,3% (р>0,05) — к E. Coli — 21,2%- через 14 дней после иммунизации разница соответственно составила: 57,2% (р>0,01) — 45,5% (р>0,05) — 50,6% (р>0,05) — 49,4% (р>0,05). К концу эксперимента титр антител у трансгенных. животных, также как в контроле снизился, но все еще превосходил первоначальный уровень: разница между группами оставалась на уровне 49,4% (р>0,05) — 43,7%- 41,6% (р>0,01) — 49% (р>0,01), соответственно.

3. Исследования по иммунизации групп подсвинков поливалентной бактериальной вакциной показали, что бактерицидная активность сыворотки крови, а также уровни иммуноглобулинов G и М у трансгенных по рилизинг — фактору гормона роста человека и контрольных животных несколько снизились к концу эксперимента, тогда как лизоцимная активность заметно возрастала на 14 день после иммунизации, особенно у трансгенных подсвинков (разница между группами составила 15,6%), к 30 дню после иммунизации, как и другие показатели, снизилась практически до первоначального уровня.

4.Исследования по иммунизации вакциной, содержащей вирусные антигены показали, что бактерицидная активность сыворотки крови трансгенных животных через 30 дней после иммунизации снизилась в 3,2 раза при 1,5 — кратном снижении в контроле, титр антител ко всем антигенам вакцины в этот период возрос в обеих группах. При этом отмечена определенная специфика: у трансгенных он был вышек вирусу болезни Тешена и возбудителю лептоспироза, соответственно на 11,1 и 33,3%, а у контрольных выше — к вирусу болезни Ауески и парвовирусу, соответственно на 29,3 и 20,6%. б. Трансгенные подсвинки имели более высокий уровень эндогенного гормона роста (СТГ) по сравнению с контролем: до иммунизации разница между группами составила 26,2%- через 14 дней после иммунизации — 45,3% (р>0,01) — в конце опыта -49,6% (р>0,01).

6. Анализ зависимости между уровнем СТГ и титром антител показал, что в группе трансгенных животных выявлена определенная связь между изучаемыми признаками по всем антигенам вакцины: отрицательная — до вакцинации и в конце экспериментаположительная — на 14 день после иммунизации, тогда как в контроле такой закономерности не наблюдалось.

7. Активность ядрышковых организаторов (ЯОР) в культурах лимфоцитов трансгенных подсвинков после иммунизации вакциной, содержащей вирусные антигены оставалась стабильной в течение всего периода эксперимента, тогда как в контроле наблюдалось снижение активности ЯОР.

8. В отдельных клетках подопытных животных были обнаружены активные ЯОР на 16 хромосоме. При этом частота встречаемости ЯОР — 16 у трансгенных подсвинков до иммунизации была выше, чем в контроле на 71,8%. После иммунизации их количество в клетках у трансгенных подсвинков увеличилось в 2,77 раза, у контрольных — в 4 раза, вместе с тем этот показатель оставался более высоким у трансгенных на 59,4%.

9. Исследование ассоциаций хромосом, несущих ЯОР, в группах показало, что у трансгенных подсвинков они встречались как до, так и после иммунизации, причем их число к концу эксперимента увеличилось незначительно, тогда как в контрольной группе ассоциации появились только после иммунизации, их частота составила -5,92% и была значительно выше, чем у трансгенных: разница между группами была на уровне 78%.

10. Наиболее высокая активность ядрышковых организаторов наблюдалась в культурах клеток внутренних органов (особенно в клетках почки) как в опыте, так и в контроле. В культуре клеток почки трансгенного животного было обнаруженс наибольшее количество ЯОР (8 на клетку).

Показать весь текст

Список литературы

  1. ., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. /Молекулярная биология клетки. В 3-х т.т.// Москва «Мир», 1994.
  2. И.А. /Биология периода новорожденности у млекопитающих. В кн.: Биологические основы периода новорожденности.//Москва, Наука, 1968, с.7−16.
  3. Анализ генома. Методы.Пер. с англ. Под редакцией К.Дейвиса.// М.: Мир, 1990.
  4. .М., Жаков А. Д. /Методические указания по исследованию крови животных.// Воронеж, 1988.б.Бакай A.B. /Кариотипическая изменчивость у крупного рогатого скота и ее использование в селекции.//Автореф. дисс.докт. с.-х.наук.
  5. В.М. /Возрастная реактивность в инфекционных процессах. В кн.: Вопросы возрастной реактивности в инфекционных и иммунологических процессах.// Л., Медицина, 1955, с.5−12.
  6. Ф. /Клеточная иммунология.// М. «Мир», 1971
  7. Э.Бермант М. В., Гаркави Л. В., Захарова Н. Г. /Регуляция иммунного гомеостаза.// Л., 1983.
  8. З.И. /Развитие костного мозга у позвоночных животных и человека.// Тр. Всес. съезда анатомов, гистологов и эмбриологов, 1958, т.1, с.404−409.
  9. .Д. /Иммунологическое распознавание и реакции клеточного иммунитета.//Успехи современной биологии, 1972, т.73, вып.1, с.42−58.
  10. B.C. /Общая резистентность животных при стрессе и ее регуляция адаптогенами.//Доклады РАСХН, 1996, № 1, с.36−38.
  11. С.С., Всеволодов Э. Б. /Индивидуальная изменчивость и наследование числа и размеров ядрышкообразующих районов хромосом у домашних свиней.// Генетика, 1986, т.22, № 4.
  12. Геллер J1.И. /Физиология и патология селезенки.// М.: Медицина, 1964.
  13. У.Д. /Ветеринарная иммунология.//М.: Колос, 1974.
  14. A.C., Раджабли С.И./ Хромосомы сельскохозяйственных и лабораторных млекопитающих.//Атлас «Наука», Новосибирск, 1988, с. 15−16.
  15. И.Л., Кадулин С. Г., Букаров Н. Г., Гнучев Н. В. /Ксенотрансплантация свинья человек.// Биотехнология, 1998, № 2, с.3−17.
  16. Г. А., Шумакова Г. В. /L'action immunologique des organs lymphoides et les principes generaux de l’immanogenese.// Rev. Immunol., 1960, v.24,№ 4.
  17. Д.И., Сорокин A.B., Курышев В. Ю., Перевозчиков А. П. и др. /Трансгенные кролики как модель некоторых форм атеросклероза.// Тез. Докл. Всесоюзн. Конф.: «Новые направления биотехнологии», Пущино, 1990.
  18. Доклад научной группы ВОЗ № 448. Факторы, регулирующие иммунный ответ.// Женева, 1971.
  19. А.П., Северова Е. Л., Нониашвили Е.М./ Цитологическое исследование аргентофильных ядрышкообразующих районов метафазных хромосом у партеногенетических зародышей мышей.//Онтогенез, 1991, т. 22, № 5.
  20. А.П., Городецкий С. И. /Трансгенные млекопитающие: изучение фенотипических эффектов гена гормона роста человека, интродуцированного животным.//Биотехнология, 1987, т. З, с.352−357.
  21. Л.П., Поздняков A.A./ Исследования по совершенствованию методов культивирования клеток из тканей животного происхождения.//Труды ВИЭВ, 1978.
  22. Л.П., Глухов В. Ф., Поздняков A.A. и др./ Культура клеток и тканей животных.// Учебно-методическое пособие, 1980.
  23. Л.П. /Гибридные и генетически трансформированные культуры клеток в биотехнологии и ветеринарной медицине.// Сельскохозяйственная биология, 1994, № 4.
  24. П.А. /Методические указания по тестированию факторов естественной резистентности.//Москва, 1980.
  25. М.С., Карпуть И. М., Вель Л. П. /Особенности иммуноморфологических реакций при вирусных и бактериальных заболеваниях свиней.// Тр. 5 Всес. конфер. по патанотомии с.х. жив-х., 1973, с.265−266.
  26. А.Ф., Бенюш В. А., Кулешов Н. П. /Хромосомы человека. Атлас.// М.: Медицина, 1982.
  27. ЗО.Здродовский П. Ф. /Современное состояние экспериментальной иммунологии и ее ближайшие задачи.// Москва, 1956.31.3дродовский П.Ф., Гурвич Г. А. /Физиологические основы иммуногенеза и его регуляция.//Москва: Медицина, 1972.
  28. H.A., Попов А. Н., Эрнст J1.К. и др. /Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве.// Дубровицы, 1998.
  29. Иммунология. В 3-х т.т.Пер. с англ. Под редакцией У. Пола// М: Мир, 1987−88.
  30. И.М. /Возрастная реактивность кроветворно лимфоидных органов у вакцинированных и больных паратифом поросят и влияние на нее антибиотиков.// Тр. 5 Всесоюз. Конф. по патологической анатомии с/хжив., 1973, с.268−271.
  31. И.М. /Динамика Т и В — лимфоцитов у свиней в онтогенезе.// Ветеринария, 1977, № 4.
  32. И.М. /Кроветворение и иммунологическая реактивность у свиней.// Ветеринария, 1975, № 2.
  33. Ю.П., Федорченко Н. Г., Кривцов И. Л. /Стресс сельскохозяйственной птицы.//Москва, 1977.
  34. П.М. /Влияние генетических и средовых факторов на кариотип и распространенность хромосомных аномалий у сельскохозяйственных животных.// Автореф.дисс.докт.биолог.наук, 1997.
  35. ЗЭ.Кленовицкий П. М., Завада А. Н., Живалев И. К., Некрасов A.A./ Ядрышкообразующие районы у трансгенных свиней (mT1-hGRF)// В кн.: Генноинженерные сельскохозяйственные животные. /Сборник научных трудов (Выпуск 1). Москва, 1995.
  36. П.М., Завада А. Н., Живалев И. К. и др. /Полиморфизм ядрышкообразующих районов (ЯОР) у свиней.// Молекулярно генетические маркеры животных, Киев, 1996, с.83−84.
  37. П.М., Моисейкина Л. Г., Живалев И. К. /Лабораторный практикум по цитогенетике животных.// Элиста, 1997.
  38. Я.Е. /Иммунитет животных.// Москва «Колос», 1975.
  39. И.П., Курилов Н. В., Малахов А. Г. и др. /Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. Справочное издание.//Агропромиздат, 1985.
  40. Дж. /Районы ядрышкового организатора и фибриллярные центры.// Молекулярная клиническая диагностика. Методы. Москва «Мир», 1999.
  41. Т.А. /Активность ядрышкообразующих районов хромосом человека в зависимости от возраста.// 1982.
  42. Д., Дукор П. /Биология тимуса.// М.: Мир, 1967.
  43. М.И. /Культура клеток трансгенных животных и тестирование физиологически активных веществ (соматотропин, интерферон) иммуноферментным анализом.//Кандидатская диссертация, 1992.
  44. М.И., Макаревич A.B., Эрнст Л. К., Гольдман И. Л., Дьяконов Л. П., Стрельченко Н. С., Смирнов O.K., Матвеев В. А. /Культура клеток из ткани легкого трансгенного кролика продуцент гормона роста крупного рогатого скота.// Доклады ВАСХНИЛ, 1991, № 1.
  45. Г. /Антитела и иммунитет.// М.: Медицина, 1973.
  46. Основы цитогенетики человека. Под общей редакцией Прокофьевой Бельговской A.A.// М.: Медицина, 1969.
  47. Р.В. /Иммунология и иммуногенетика.// М.: Медицина, 1976.
  48. Р.В. /Иммунология.// М.: Медицина, 1978.
  49. С.И., Сидоров В. Т. /Воздействие стрессовых факторов на здоровье и продуктивность сельскохозяйственных животных.// Минск, 1981.
  50. С.И., Сидоров В. Т. /Естественная резистентность организма животных.//Л.: Колос, Ленинградское отделение, 1979.
  51. Прокофьева Бельговская A.A. /Природа ассоциации акроцентрических хромосом человека.// Цитология, 1966, т.8, № 2.
  52. В.П., Бутров Е. В., Матвеев В. А. /Определение гормонов в крови молодняка крупного рогатого скота и его гормональный статус: Методические указания.//Боровск, 1980.
  53. Г. И. /Микроскопическая техника.// Москва, 1946.
  54. И.П. /Создание модельных систем культур клеток млекопитающих для решения проблем биологии и биотехнологии.// 1997.
  55. М.Р., Юрина Н. Ф., Этингер Л. Е. /Лимфатический узел.// М.: Медицина, 1978.61 .Симонян Г. А., Хисамутдинов Ф. Ф. / Ветеринарная гематология.// Москва, Колос, 1995.
  56. H.H. /Реактивность и резистентность организма. Многотомное руководство по патологической физиологии.// Москва, Медицина, 1966, т.1.
  57. O.K., Гольдман И. Л., Живалев И. К. и др. /методические рекомендации по цитогенетическому исследованию сельскохозяйственных животных.// Дубровицы, 1986.
  58. A.A., Лузьянина Т. Я., Смородинцев A.A. /Основы противовирусного иммунитета.//М.: Медицина, 1975.
  59. В.Н. /Изучение районов ядрышковых организаторов в лимфоцитах свиней.// Бюлл. ВНИИРГЖ В.51. — Л. -1981, с.3−7.
  60. В.Н. /Количественная характеристика ядрышкообразующих районов хромосом свиней.// Бюлл. ВНИИРГЖ. В.67. — Л. — 1983, с.6−10.
  61. Н.М. /Получение трансгенных кроликов с встроенными генами соматотропина и антисмысловой РНК против аденовируса.// 1989.
  62. В.Н., Белоусова Р. В., Фомина Н. В. /Справочник. Диагностика вирусных болезней животных.// Москва, ВО Агропромиздат, 1991.
  63. Ю.Т. /Гистология сердечно сосудистой системы и кроветворных органов домашних животных.// Тарту, 1970.
  64. Д.А. / Стресс факторы в промышленном животноводстве.// Москва, Россельхозиздат, 1976.
  65. И.Я. /Макрофаги в иммунитете.// М.: Медицина, 1978.
  66. И.Я., Хасман Э. Л. /Влияние веществ катаболического и анаболического действия на образование антител. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунологии.//Москва, 1968, № 4.
  67. И.Я., Хасман Э. Л. /Интенсивность синтеза специфических и неспецифических белков в организме на различных этапах иммуногенеза. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунологии.//Москва, 1965, № 3.
  68. Ю.Н., Крымский Л. Д., Нестойко Г. В. /Поверхностная структура макрофагов и лимфоцитов при их взаимодействиях.// Архив патологии, 1975, № 8, с.33−39.
  69. А.И., Жаков М. С., Карпуть И. М. /Особенности иммуноморфологических реакций при некоторых инфекционных болезнях животных.//Сб. работ Ленингр. вет. Института, 1973, т.34, с. 153−160.
  70. H.A., Суханов Ю. С., А.Мобархан А.Х., Артемьев М.И. /Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Методическое пособие для начинающих.//1996.
  71. Р. /Вопросы стресса и адаптации у животных: Новости фармации и медицины.// Варшава: Агполь, 1976, т. 10, с.42−52.
  72. В.А. /Кроветворная функция лимфатических узлов в онтогенезе и эволюции позвоночных.//Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1966, № 9, с.48−60.
  73. Л.Н. /Иммунологическая реактивность лимфоидных органов иклеток.//M.: Медицина, 1967.
  74. А.Я., Чертков И. Л. /Клеточные основы иммунитета.// М.: Медицина, 1969.
  75. Н.Г. /Современные экспериментальные данные о происхождении клеток соединительной ткани.//Архив патологии, 1973, № 4, с.7−14.
  76. Хэм А., Кормак Д. /Гистология В 5-ти т.т.// М: Мир, 1983.
  77. И.Л., Фриденштейн А. Я. /Клеточные основы кроветворения.// М.: Медицина, 1977.
  78. C.B. /Роль гормонально цитокиновых взаимодействий в формировании гуморального иммунного ответа.// Проблемы эндокринологии, 1995, т.41.
  79. Л.К. /Современные проблемы генной инженерии и перспективы селекции сельскохозяйственных животных.//Сельскохозяйственная биология, 1994, № 4.
  80. Л.К., Гольдман И. Л., Семенова В. А. и др./ Фенотипический эффект трансгенности по гену гормона роста крупного рогатого скота у кролика.// Доклады ВАСХНИЛ, 1990, № 6.
  81. Л.К., Кузин Б. А., Ениколопов Г. Н. и др. /Перенос гена поверхностного антигена вируса гепатита В человека в зиготу свиньи и исследование тканеспецифичности его экспрессии.//Доклады ВАСХНИЛ, 1990, № 9.
  82. A.C. /Ineraction of Т and В — lymphocytes and macrophages in recovery from virus infections.// Proc.Roy.Soc.Med., 1973, v.66, № 12, p.1151−1154.
  83. Archibald A.L., McClenaghan M., Hornsey V., Simons J.P., Clark A.J. /High level expression of biologically activ human .- antitripsin in the milk of transgenic mice.// Proc. Natl. Acad. Sei., 1990, v.87, p.5178−5182.
  84. Arrenbrechts, Sorkin/ Growth hormone induced T — cell differentiation.// Eur.J.Immunology, 1973, v.3,№ 9, p.601−604.
  85. R.M. /Cellular immunology in the pig.// Proc. Roy. Soc. Med., 1963, v.66, № 12, p.1155−1160.
  86. W. /Nuclear differentiation and functional morphology of chromosomes.// Gold Spring Harbor Symp. guant biol., 1956.
  87. Bosma A.A., de Haan N.A., Mellink C.H. /Ribosomal RNA genes located on chromosom 16 of the domestic pig.// Cytogenetic and Cell Genetic., 1991, v.58, № 3−4, p.2124.
  88. G. /Transgenic animals.// Biotechnology, 1993, v.2, p.745−832.
  89. Th.A., Bruyere Th., Went D.F., Stranzinger G., Burki K. /Rabbit B casein promoter directs secretion of human interleukin — 2 to the milk of transgenic rabbit.//, Biotechnology, 1990, v.8, p.140−143.
  90. H., Smetana K. /The nucleolus.// New York, Academic Press, 1970.
  91. P. /Protein metabolism and acquired immunity.// J. Am. Diet., 1944, v.20.
  92. H., Simpson E. /Regulation of the immune response by subclasses T -lymphocytes.//Europ.J. Immunol., 1975, v.5, № 4, p.330−336.
  93. J.F. /The effect of acdysone on gene activity pattern in giant chromosomes. In: Mechanisms of hormone action.// Stuttgart, 1965.
  94. J., Hirashima A., Inokuchi Y., Green P.J., Inoye M. /A novel immune system against bacteriophage infection using complementary RNA (mic RNA).// Nature, 1985, v. 315, p. 601−603.
  95. Cooper M.D., Peterson R.D.A., Good R.A. /Delineation of the thymus and bursal lymphoid systems in the chicken.// Nuture, 1965, v.205, p. 143.
  96. Costantini F., Radoce G., Lee G. /Insertional mutations in transgenic mice.// Progr.Nucl.Acid Res. and Mol.Biol. San Diego, 1989, v.36, p.159−169.
  97. R., Mariani T., Good R. /Effect of hypophysectomy on immunological recovery after sublethal irradiation of adult rats.// Proc. Soc. Exp. Biol., 1969, v. 131, № 4, p. 1176.
  98. Gahmberg N., Pajunen L., De La Chapelle A. /NOR activity in two families with balanced D-D translocations and numerous consecutive miscarriages.// Hereditas, 1980, v.92, p.217−221.
  99. Good R.A. et al. /The role of the thimus in development of immunologic capacity in rabbits and mice.//Exp. Med., 1962, v.116, № 5, p.773−781.
  100. Grumet F.C., McDevitt H.O./Nature of the represponding organism.// Contemp. Topics Immunobiol., 1973, v.2, p.63−76.
  101. R.E., Brinster R.L., Rosenfeld M.G., Evans R.M., Mayo K.E. /Expression of human growth releasing factor in transgenic mice.// Nature, 1985, v.315.
  102. R.E., Pursel V.G., Rexroad C.E., Wall R.J., Bolt D., Ebert K.M., Palmiter R.D., Brinster R. /Production of transgenic rabbits, sheep and pigs by microinjection.// Nature, 1985, v.315.
  103. Hammerling G.J., McDevitt H.O. /Antigen binding T and B — lymphocytes.// Immunol., 1974, v.112, № 5, p.1726−1733.
  104. Jaroskova L et al. /Immunoglobulin determinants on lymphocytes in germfree piglets.// Eur. J. Immunol., 1973, v.3,№ 12, p.818−824.
  105. J., Evans M., Irvine W. /The effect of hypophysectomy on the immune response.// Immunology, 1970, v.18, № 5.
  106. P. /Mechanisms of hormone action.// Stuttgart, N.Y., 1965.
  107. E.S. /Sample preparation from blood, cell and other fluids.// In: Innis M.A., Gelfand D.H., Sninsky J.J., White T.J. PCR protocols, a guide to methods and applications. Academic press. — San Diego, N.-Y., 1990, h. 146−152.
  108. J. /Inheritance of resistance to influenza virus in mice.// Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1964, v.116, p.506−509.
  109. J., Chada K., Costantini F. /Developmental regulation of a cloned adult B -globin gene in transgenic mice.// Nature, 1985, v.315.
  110. Mahon K.A., Overbeek P.A., Westphal H./ Prenatal letality in a transgenic mouse line is the result of achrosomal translocation.// Proc. Nat. Acad. Sci USA, 1988, v.85, p.1165−1168.
  111. Mac Manus J.P., Whitfield J.F./Mediation of the mitogenic action of growth hormone by adenosine 3"5″ mono phosphate (cyclic AMP).// Proc. Soc.Exp.Biol.Med., 1969, v.132, № 3, p.409−412.
  112. G. /Immunochemical quantitation of antigens by single redial immunodiffusion.// Immunochemistry, 1965, v.2, p.235−254.
  113. Mc Millan R. et al. /Immunoglobulin synthesis by human lymphoid tissues.// Immunolog., 1972, v.109, № 6, p.1386−1394.
  114. Mellink C.H.M., Bosma A.A., de Haan N.A. et al. /Distribution of rRNA genes in breeds of domestic pig studied by non radioactive in sity hybridization and selective silver-staining.//Genet. Select. Evol., 1991, v.23, № 1, p.168−172.
  115. J.F. /Immunological function of the thymus.//Lanset, 1961, № 11, p.748−749.
  116. M. /Molekulargenetische Charakterisierung der porcinen Mx und IGF — I -Gene und functionelle Undersuchung transgener Mx — Schweine.// Diss.med.vet., 1989, Munchen.
  117. Muller M., Brem G./Disease resistance of farm animals.// Experiential 991, v.47,p.923−934.
  118. H.G., Wachtier F. /Nucleolus organizer regions and nucleoli: citological findings.// Chromosomes today, 1987, v.9, p.252−260.
  119. H. /General adaptation syndrome.// Montreal, 1950.
  120. Staeheli N C., Haller O., Boll W., Lindemann J., Weissmann C. /Mx protein: Constitutive expression on 3T3 cells transformed with cloned Mx cDNA confers selective resistance to influenza virus.//Cell, 1986, v.44, p.147−158.
  121. M.J. /T cell factor which can replace T cells in vivo.// Nature, 1974, v.248, № 5445, p.234−236.
  122. T.I. /Antisensing polinycleotids and possibility their use for resistance against viruses.// Molecular Biology (Russia), 1989, v.23 (3), p.629−638.
  123. Watchtler F., Schwarzacher /Nucleolus organizer regions and nucleoli: cytological findings.//Chromosomes today, 1987, v.9, p.252−260.
  124. U.H., Lenz H., Drem G. /Genes encoding a mouse monoclonal antibody are expressed in transgenic mice, rabbit and pigs.// Gene, 1991, v.98, p. 185−191.
  125. A. /Nature and biological activities of thymus hormones.// Ann.N.Y.Acad.Sei., 1975, v.249, p.523−530.
Заполнить форму текущей работой

Заказал и сдал!