ТСХ-скрининг лекарственных соединений: схема анализа веществ кислотного характера

При ТСХ-скрининг поэтапное исследование токсикологических соединений: на первом этапе скрининг в общих системах растворителей (принадлежность к классу соединений), при положительном результате — исследование элюатов в частной системе растворителей. Метод имеет отрицательное судебно-химическое значение.

В общих с-мах.

Подвижная фаза — ацетон: хлороформ (1:9).

Неподвижная — силикагель.

Пластину делим на 4 вертикальн. зоны (А, Б, В, Г). А — ра-ры метчиков (амидопирин, барабмил); Б — 1/25 кислотного извлечения (для качественного анализа); В — стандарт (циклобарбитал) для расчета Rf; Г — 1/10 кислотного извлечения (потом идет в частные с-мы). По значению Rf (путь, который прошло вещ-во на пластинке) делят на 3 горизонт. зоны:

— Rf = 0−0,25 (амидопирин, кофеин);

— Rf = 0,31−0,41 (фенобарбитал, барбитал, нитразепам, этаминалнатрий);

— Rf = 0,41−0,64 (диазепам).

Обнаружение — путем последоват. обработки слоя сорбента зон А, Б, В (при закрытом Г) реактивами: 1) 0,1% ра-р дифенилкарбазола в CHCl3 и 5% ра-р HgSO4 (произв. барбитуровой к-ты; красно-фиолетовые пятна); 2) 10% FeCl3 (антипирин — красно-оранжевое окрашивание; амидопирин — сине-фиолетовое); 3) реактив Драгендорфа по Мунье и 10% H2SO4 (антипирин, амидопирин — оранжевое; кофеин — оранжево-коричневое; нитрозепам, диазепам — оранжево-желтое). Слой сорбента из Г (распложен параллельно пятну в зоне Б) снимают и экстрагируют метанолом (зона) или ацетоном (зона ,). Экстракты хроматографируют в частных с-мах растворителей).

В частных с-мах. Пластину на 3 вертик. зоны: зоны А, Б — метчики (вещества, входящие в исследуемую зону) Один метчик — циклобарбитал. Зона В — элюат из зоны Г в общих с-мах. Соединения I зоны: подвижная фаза — ацетон: циклогексан (5:1), сорбентокись алюминия, реагенты — 10% ра-р FeCl3 на антипирин и амидопирин, ра-р I2 и 25% ра-р НСl на кофеин (красно-коричневая окраска).Соединения II зоны: подвижная фаза — хлороформ: н-бутанол: 25% NН4ОН (70:40:5), сорбент — силикагель; реагенты — 0,1% ра-р дифенилкарбазола и 5% ра-р HgSO4 — на барбитураты. Сединения III зоны: подвижная фаза — этилацетат: бензол: этанол: ра-р NН4ОН (95:15:5:2,5), сорбент — силикагель; реагент — реактив Драгендорфа. Рассчитывают Rf.